苦参素对肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

目的:研究苦参素对肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,阐明其抗肝纤维化的作用机制.方法:采用袁桃霞[1]等的肝星状细胞的分离方法和MTT法(甲基噻唑基四唑,metyl thiazolyl tetronzolium)及ABC免疫酶染色方法分别检测肝星状细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响.结果:苦参素能明显抑制肝星状细胞的增殖及Ⅰ型胶原的合成,并呈剂量依赖性.     

金雀异黄素和槲皮素对大鼠肝星状细胞增殖、胶原合成及I型原胶原mRNA水平的影响

目的：研究金雀异黄素和槲皮素对HSC－T6大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成及I型原胶原mRNA表达的影响。方法：细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和[^3H]-脯氨酸掺入法。原胶原mRNA水平用RT－PCR法测定。结果：金雀异黄素（25－70μmol/L）和槲皮素（6．25－50μmol/L）浓度依赖抑制HSC－T6细胞增殖和胶原合成,对I型原胶原mRNA表达也有抑制作用。结论：金誉异黄素和槲皮素抑制肝星状细胞增殖和胶原合成可能对肝纤维化有保护作用。     

维生素E对大鼠肝星状细胞增殖及胶原合成的影响

目的探讨维生素E抗肝纤维化作用的机理。方法采用胶原酶、链蛋白酶E消化及密度梯度离心的方法,分离、培养大鼠肝星状细胞,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法及。H-脯氨酸掺入法,观察维生素E对星状细胞增殖及胶原合成的影响。结果低剂量维生素E对肝星状细胞及胶原合成的抑制作用不明显,随着维生素E的浓度增加,对其抑制作用增强,呈明显的药物浓度依赖关系。结论维生素E抑制肝星状细胞增殖及胶原合成是其抗肝纤维化作用机理之一。     

复方中药对肝星状细胞胶原合成与降解的影响

目的观察中药复方丹参对肝星状细胞胶原合成与降解的影响.方法选择肝星状细胞系作为体外研究对象,MTT法观察药物对细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液Ⅰ、Ⅲ、V型胶原含量,RNA-cDNA分子杂交检测细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平.逆转录多聚酶链反应检测间质胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平.结果中药复方丹参明显抑制肝星状细胞增殖且呈剂量依赖趋势,与对照组比较,中药组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量明显降低,细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平明显降低,间质胶原酶基因表达水平明显增强,金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显受到抑制(P＜0.01).结论中药复方丹参可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制胶原的异常合成,促进异常沉积胶原的降解,从而起到抗肝纤维化的作用.     

苦参素对肝星状细胞胶原合成能力的影响

近年来关于苦参素的实验研究很多,大多是在抗病毒方面[1,2].大量临床实践证实,苦参素可以阻止甚至逆转肝脏纤维化,但其作用机制及调节途径尚不明确.肝纤维化以肝脏细胞外基质(ECM)大量增生沉积为特征,是各种慢性肝病所共有的病理特点,肝星状细胞(HSC)是胶原合成和降解的关键细胞,苦参素可能是通过抑制HSC总胶原及Ⅰ型胶原的合成,从而产生抗肝脏纤维化作用的.     

复方861对大鼠肝星状细胞增殖及胶原合成的影响

目的观察中药复方861对体外培养肝星状细胞增殖及胶原合成的影响。方法分离培养大鼠肝星状细胞 ,传一代后加入不同浓度的复方861作用48小时 ,以MTT比色法检测对细胞增殖的作用。传一代细胞以10mg/ml复方861作用48小时后 ,以ELISA法、斑点杂交法检测胶原蛋白分泌及相应mRNA水平的变化。结果1.56～100mg/ml复方861(经0.45μm滤膜过滤)可使MTT转化率下降 ,细胞增殖受抑 ,呈明显的剂量依赖性 ;10mg/ml复方861可使I、III、IV型胶原及转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平及相应蛋白分泌量下降。结论复方861抗纤维化的部分机理在于抑制活化肝星状细胞的增殖及胶原蛋白的合成 ,从而减少胶原纤维在肝脏内的沉积。     

金雀异黄素和槲皮素对大鼠肝星状细胞增殖、胶原合成及Ⅰ型原胶原nRNA水平的影响(英文)

目的:研究金雀异黄素和槲皮素对HSC-T6大鼠肝星状细胞增殖和胶原合成及Ⅰ型原胶原mRNA表达的影响。方法:细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和[~3H]-脯氨酸掺入法。原胶原mRNA水平用RT-PCR法测定。结果:金雀异黄素(25-70μmol/L)和槲皮素(6.25-50μmol/L)浓度依赖抑制HSC-T6细胞增殖和胶原合成,对Ⅰ型原胶原mRNA表达也有抑制作用。结论:金雀异黄素和槲皮素抑制肝星状细胞增殖和胶原合成可能对肝纤维化有保护作用。     

苦参素对大鼠肝星状细胞形态的影响

目的：观察苦参素对大鼠肝星状细胞形态的影响。方法：采用袁桃霞^[1]等的肝星状细胞的分离方法和免疫酶染色法。结果：苦参素能明显抑制肝星状细胞的增殖。结论：苦参素可通过抑制肝星状细胞的增殖而起到抗肝纤维化。     

染料木素和槲皮素体外抗肝纤维化作用

目的 研究染料木素和槲皮素对体外肝纤维化的保护作用。方法 细胞增殖和胶原合成分别用结晶紫染色法和3H-脯氨酸参入法。原胶原mRNA水平用RT-PCR法测定。结果 染料木素(25 ~ 70 mmolL-1)和槲皮素(6.25 ~ 50 mmolL-1)浓度依赖抑制PDGF促HSC-T6细胞增殖和TGFb1刺激的胶原合成及I型原胶原mRNA的表达。结论 染料木素和槲皮素抑制PDGF和TGFb1对星状细胞的作用可能对肝纤维化有保护作用。     

黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响

目的观察黄芪总苷对血吸虫卵抗原活化的肝星状细胞增殖与胶原合成的影响。方法小鼠腹腔注射日本血吸虫可溶性虫卵抗原(Solub le egg antigen,SEA),制备SEA活化的腹腔巨噬细胞条件培养基(Solub le egg antigen inducedm acrophage cond itioned m ed ium,SEA-MCM)。采用肝星状细胞株HSC-T6细胞,以细胞增殖抑制率为指标,用噻唑蓝(MTT)测定黄芪总苷对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞增殖的影响;通过3H-脯氨酸参入法测定黄芪总苷对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞胶原合成的影响。结果SEA-MCM能明显促进HSC-T6细胞的增殖和胶原合成。黄芪总苷(32.5、65和130 mg.L-1)对SEA-MCM诱导的HSC-T6细胞增殖及胶原合成有明显的抑制作用,且呈药物浓度依赖性关系。结论黄芪总苷对SEA-MCM诱导的肝星状细胞增殖及胶原合成有明显的抑制作用。     

复方861对习肝星状细胞增殖及胶原合成的影响

目的 观察中药复方861对体外培养肝星状细胞增殖及胶原合成的影响。方法 分离培养大鼠肝星状细胞，传一代后加入不同浓度的复方861作用48小时，以MTT比色法检测对细胞增殖的作用，传一代细胞以10mg/ml复方861作用48小时后，以ELISA法、斑点杂交法检测胶原蛋白分泌及相应mRNA水平的变化。结果 1.56-100mg/ml复方861（经0.45μm滤膜过滤）可使MTT转化率下降，细胞增殖受抑，呈明显的剂量依赖性；10mg/ml复方861可使Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及转化生长因子β1(TGFβ1）mRNA水平及相应蛋白分泌量下降。结论 复方861抗纤维化的部分机理在于抑制活化肝星状细胞的增殖及胶原蛋白的合成，从而减少胶原纤维在肝脏内的沉积。     

IL-10抑制转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞Ⅰ型胶原合成作用观察

目的探讨IL-10抗纤维化的可能机制.方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99,分别用不同浓度的IL-10、TGF β1干预和两者共同干预,用ELISA法检测肝星状细胞(HSC)的Ⅰ型胶原合成的影响.结果TGF β1显著增强HSC的Ⅰ型胶原的合成.IL-10单独干预对HSC的I型胶原的合成无明显影响,但IL-10可显著抑制TGF β1促进HSC的Ⅰ型胶原的合成.结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成,IL-10对TGF β1的促HSC Ⅰ型胶原合成有抑制作用,这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一.     

染料木素和槲皮素体外抗肝纤维化作用

目的　研究染料木素和槲皮素对体外肝维化的保护作用。方法　细胞增殖和胶原合成分别用结晶紫染色法和3H 脯氨酸参入法。原胶原mRNA水平用RT PCR法测定。结果　染料木素 (2 5 - 70 μmol·L- 1 )和槲皮素 (6 2 5- 5 0 μmol·L- 1 )浓度依赖抑制PDGF促HSC T6细胞增殖和TGFβ1 刺激的胶原合成及I型原胶原mRNA的表达。结论　染料木素和槲皮素抑制PDGF和TGFβ1 对星状细胞的作用可能对肝纤维化有保护作用     

IL-0抑制转化生长因子β1诱导的大鼠肝星状细胞工型胶原合成作用观察

的探讨IL-10抗纤维化的可能机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞系rHSC-99，分别用不同浓度的IL-10、TGFβ1干预和两者共同干预，用ELISA法检测肝星状细胞（HSC）的Ⅰ型胶原合成的影响。结果TGFp1显著增强HSC的Ⅰ型胶原的合成。IL-10单独干预对HSC的Ⅰ型胶原的合成无明显影响，但IL-10可显著抑制TGFβ1促进HSC的Ⅰ型胶原的合成。结论TGFβ1显著促进HSC的Ⅰ型胶原的合成，IL-10对TGFβ1的促HSC Ⅰ型胶原合成有抑制作用，这可能是IL-10发挥抗肝纤维化作用的途径之一。     

黄芪总提物对大鼠肝星状细胞增殖及产生胶原的影响

目的　研究黄芪总提物　（　TEA　）　对体外肝星状细胞增殖和产生胶原的影响　。方法　采用IV型胶原酶灌流分离大鼠肝星状细胞进行原代培养,　用CCl4急性损伤的大鼠肝枯否细胞条件培养基　（　KCCM　）　刺激肝星状细胞,　用3H-TdR和3H-Proline的掺入法分别检测肝星状细胞的增殖和胶原的产生　。结果　TEA(5～40　mg     

鸢尾黄素对肝星状细胞外基质表达的影响

目的:研究鸢尾黄素对肝星状细胞的活化以及细胞外基质合成和降解的影响。方法:体外培养大鼠肝星状细胞株HSC-T6,通过荧光定量PCR法检测鸢尾黄素对肝星状细胞的Ⅰ型胶原、α-肌动球蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)以及基质金属蛋白酶-1抑制剂(TIMP-1)mRNA的表达的影响。结果:鸢尾黄素能显著抑制肝星状细胞中Ⅰ型胶原及活化标志α-SMA mRNA的表达,增强肝星状细胞中MMP-13 mRNA的表达,降低TIMP-1 mRNA的表达。结论:鸢尾黄素既可以有效地抑制肝星状细胞的活化,同时又能减少肝星状细胞胞外基质的合成以及增加胞外基质的降解,因而具有潜在的抗肝纤维化的作用。     

牛磺酸抑制新生大鼠心肌重塑的体外研究

目的 通过牛磺酸对新生大鼠心肌成纤维细胞增殖和胶原合成及对I／Ⅲ型胶原比值的影响，从细胞水平探讨其在体外抑制心肌重塑的作用。方法 在培养的心肌成纤维细胞中加入不同浓度的牛磺酸，用羟脯氨酸法测定胶原量，MTT比色法检测细胞增殖情况，SDS-PAGE电泳测胶原I／Ⅲ型比值。结果 100mmol／L、200mmol／L牛磺酸用药24h和48h及50mmol／L用药72h后能明显抑制心肌成纤维细胞的增殖及胶原的合成，I／Ⅲ型胶原比值明显下降。结论 牛磺酸能通过抑制心肌成纤维细胞增殖和胶原合成，降低I／Ⅲ型胶原比值起到抗心肌重塑的作用。     

黄芪总苷对肝星状细胞增殖和合成胶原的抑制作用

目的　探讨黄芪总苷 (AST)对肝星状细胞增殖和合成胶原的影响。方法　采用枯细胞条件培养基 (KCCM )及含新生牛血清 (NBS)和健康大鼠血清 (RS)的混合血清刺激大鼠肝星状细胞 (HSC)系HSC T6 ,用 3H TdR和3H 脯氨酸参入法检测HSC增殖活性和胶原合成状况。结果　AST(1 6、32、64、1 2 8和 2 56mg·L- 1 )对KCCM 1∶4刺激HSC T6细胞增殖和胶原合成均有明显的抑制作用 ;在含 1 0 %NBS- 3 %RS混合血清刺激的HSC T6细胞 ,AST(32、64、1 2 8和 2 56mg·L- 1 )作用 48h对HSC T6细胞增殖 ,及AST(1 6、32、64、1 2 8和 2 56mg·L- 1 )作用 72h对HSC T6细胞胶原合成均有明显的抑制作用 ,呈浓度依赖型趋势。结论　AST对体外激活肝星状细胞的增殖和产生胶原有明显抑制作用 ,该作用可能是AST抗肝纤维化的机制之一     

肝星状细胞HSC-T6体外肝纤维化模型的建立

目的:研究以肝星状细胞HSC-T6为靶细胞,建立体外肝纤维化模型.方法:小鼠腹腔巨噬细胞先后用卡西霉素和脂多糖刺激培养24h制备巨噬细胞条件培养基.肝星状细胞增殖和胶原合成分别采用结晶紫染色法和3H-脯氨酸掺入法测定.结果:血清和巨噬细胞条件培养基可显著促进HSC-T6细胞增殖与胶原合成.IL-1、TNF、EGF、FGF和PDGF均可促进HSC-T6细胞增殖,其中PDGF的促增殖能力最强.TGFβ1可剂量依赖地促进HSC-T6细胞胶原的合成.结论:用血清、巨噬细胞条件培养基、PDGF或TGFβ刺激HSC-T6细胞增殖和胶原合成作为体外肝纤维化模型是可行的.     

丹酚酸A对培养的大鼠肝星状细胞增殖与胶原生成的作用(英文)

目的:研究丹酚酸A对培养的大鼠肝星状细胞增殖与胶原生成的影响。方法:用链酶蛋白酶与胶原酶对肝脏进行原位灌流消化,Nycodenz密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,传一代培养。MTT法与[~3H]TdR掺入法测定细胞增殖。丽春红染色、图象分析法半定量细胞胶原沉积量,ELISA法测定细胞培养上清中Ⅰ型胶原分泌量,检测细胞层总蛋白量校正细胞数。RT-PCR法分析前胶原α_2(Ⅰ)基因的表达。结果:丹酚酸A 100μmol/L引起部分细胞脱壁与死亡,有一定毒性反应。丹酚酸A 0.1-10μmol/L对细胞形态无明显影响。丹酚酸A1-100μmol/L浓度依赖性抑制细胞增殖,降低胶原沉积量与Ⅰ型胶原分泌量。丹酚酸A1-10μmol/L对前胶原α_2(Ⅰ)mRNA表达均有明显抑制作用。结论:丹酚酸A抑制肝星状细胞增殖与胶原表达,是丹参抗肝纤维化的主要有效成分之一,抑制肝星状细胞活化是其抗肝纤维化的主要作用机制。