急性缺氧对血管内皮细胞活力和凋亡的影响

这种适应性反应将有助于细胞对抗缺氧造成的损伤.     

三氧化二砷诱导血管内皮细胞凋亡和抑制血管生成的实验研究

 目的研究三氧化三砷(As2O3)抑制人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)生长、诱导凋亡和抑制血管生成的作用.方法As2O3与HUVECs共同孵育一定时间后,观察细胞形态学变化,并用MTT方法测定细胞生长抑制率、TUNEL方法检测细胞凋亡;观测As2O3对鸡胚血管生成的影响.结果在0.75～6 μmol/L浓度范围内随药物浓度增加或作用时间延长,细胞生长抑制和细胞凋亡效果越显著;As2O3作用鸡胚绒毛尿囊膜后血管生成减少.结论As2O3抑制HUVECs生长、诱导细胞凋亡,对血管生成有抑制作用.     

急性缺氧对血管内皮细胞活力和凋亡的影响

这种适应性反应将有助于细胞对抗缺氧造成的损伤.     

放射损伤对内皮细胞增殖与凋亡的影响

放射损伤在平战时均可发生，合并放射损伤时组织修复常常延缓，创伤愈合延迟，即出现创伤难愈现象，但其机理尚未完全阐明。创伤局部的组织修复细胞，如血管内皮细胞和成纤维细胞等在创伤愈合过程中具有重要作用。合并全身放射损伤时创伤局部内皮细胞生物学特性异常可能是创伤难愈的重要原因。因此，本实验探讨不同照射剂量对内皮细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响，并观察bFGF对内皮细胞放射损伤的拮抗作用，为创面修复提供新思路。     

阿魏酸钠对ox-LDL诱导血管内皮细胞凋亡的影响

目的观察阿魏酸钠(SF)对氧化修饰的低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导血管内皮细胞凋亡的保护作用。方法将体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分为5组,分别为对照组,ox-LDL(50mg/L)组,SF低浓度(5μmol/L)组,SF中浓度(10μmol/L)组及SF高浓度(20μmol/L)组。SF低、中、高浓度组在加入含相应浓度的SF培养1h后,加入终浓度为50mg/L的ox-LDL。采用MTT比色法确定SF的作用浓度。分别采用Hochest 33258细胞核荧光染色法(定性)和流式细胞仪(定量)检测SF对ox-LDL致内皮细胞凋亡的影响。结果一定浓度的SF能够抑制ox-LDL引起的HUVEC存活率降低,对HUVEC损伤具有拮抗作用,40μmol/L以下是SF拮抗细胞损伤的最佳浓度范围。Hochest33258染色后ox-LDL组细胞核显示较强蓝色荧光,可见核固缩、凋亡小体等典型的凋亡形态学特征;加入20μmol/L SF后,细胞核基本恢复其正常形态。流式细胞术结果显示,加入低、中、高浓度的SF后,其细胞凋亡率分别为25.21%±4.07%、12.45%±2.65%、10.85%±1.23%,与ox-LDL组(31.14%±4.29%)比较均明显降低(P<0.05),且存在量效关系。结论 SF具有拮抗ox-LDL诱导的HUVEC损伤,减少血管内皮细胞凋亡的作用。     

三氧化二砷诱导血管内皮细胞凋亡和抑制血管生成的研究

目的：研究三氧化二砷(As2O3)抑制血管内皮细胞(HUVECs)生长、诱导凋亡和抑制血管生成的作用。方法：As2O3与HUVECs共同孵育一定时间后，观察细胞形态学变化，并用MTT方法测定细胞生长曲线图、TUNEL方法检测细胞凋亡；观测As2O3对鸡胚血管生成的影响。结果：在0．75μmol／L～6μmol／L浓度范围内随药物浓度增加或作用时间延长，细胞生长抑制和细胞凋亡效果越显著；As2O3作用鸡胚绒毛尿囊膜后血管生成减少。结论：As2O3抑制HUVECs生长、诱导细胞凋亡，对血管生成有抑制作用。     

放创复合伤大鼠伤口液对血管内皮细胞迁移和增殖活性的影响

伤口难愈是临床上常见的一种顽症。电离辐射、局部营养障碍、局部感染以及全身性疾病如糖尿病等 ,均可导致伤口难以愈合。其中 ,电离辐射引起伤口难愈 ,至今尚缺乏系统深入的研究报告。我们前期的研究表明 ,大鼠受 6Ｇｙ全身照射后 ,伤口的肉芽组织内毛细血管数量于伤后 3ｄ即明显低于单纯创伤组 ,说明放创复合伤的伤口修复起始过程就有障碍[1 ] 。本研究仍采用大鼠 6Ｇｙ全身照射复合背部切割伤的模型 ,从伤口液刺激血管内皮细胞活性的变化方面来探讨放创复合伤的伤口修复启动受抑的机理。一、材料和方法1 动物分组 :Ｗｉｓｔａｒ健康成年…     

bFGF对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡的作用

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡的作用。方法：以^60Coγ射线照射法建立猪主动脉内皮细胞株PAE(porcine aortic endothelial cells)和原代培养的人脐带静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)调亡模型。以流式细胞术[膜联蛋白(annexin)-V-FTTC PI标记]评价细胞凋亡率，观察不同浓度的bFGF对细胞凋亡的影响。结果和结论：bFGF对辐射诱导的血管内皮细胞凋亡有明显的抑制作用。     

α-2a-干扰素抑制血管瘤血管内皮细胞增殖的体外实验

 为探讨α-2 a-干扰素治疗血管瘤的作用机制,采用新鲜皮肤血管瘤组织进行血管内皮细胞组织块培养并传代,通过加入α-2 a-干扰素,观察其对血管内皮细胞增殖的影响.结果:当α-2 a-干扰素应用剂量为5×105u/L和1×106u/L时,对血管内皮细胞的增殖有明显抑制作用.应用5×105u/L,培养第12 d后,血管内皮细胞数量和3H-TdR掺入量明显低于对照组.结论:α-2 a-干扰素可能是通过抑制血管瘤血管内皮细胞的增殖,促进血管瘤的退化而发挥治疗作用.     

热应激对血管内皮细胞增殖的影响及其机制初探

目的　探讨热应激条件下对血管内皮细胞增殖的影响 ,进一步从DNA损伤后P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变角度探讨增殖调控的机理。方法　以建立的血管内皮细胞热应激 (4 3℃ ,2小时 )为实验模型 ,应用流式细胞仪观察热应激后血管内皮细胞株ECV30 4的细胞周期变化 ,单细胞凝胶电泳方法观察热应激对血管内皮细胞DNA的损伤 ,RT PCR检测P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变情况。结果　热应激可使血管内皮细胞DNA产生显著损伤 (P <0 .0 5 ) ,继而P5 3mRNA表达增高 ,并促进P2 1mRNA的上调表达 ,最终使细胞产生G1期阻滞。结论　热应激可损伤血管内皮细胞DNA ,并通过P5 3、P2 1通路抑制细胞增殖     

MEBO对烧伤病人血管内皮细胞保护作用的体外实验研究

目的探讨MEBO对烧伤病人血管内皮细胞的保护作用及其机理。方法将烧伤血清加入M199培养液配成20％烧伤血清培养液(BSM),加入培养融合的人脐静脉内皮细胞中,设立1、3、6、12h4个时间点,光镜下观察各时相点人脐静脉内皮细胞的形态学变化,MTT法测定细胞活力。结论MEBO能明显改善烧伤血清所致的血管内皮细胞形态学变化,维持血管内皮细胞的完整性和连续性,并能明显降低烧伤血清对血管内皮细胞活力的影响。     

血管内皮细胞生长因子-海藻酸钙缓/控释微球的制备及其对人脐静脉血管内皮细胞增殖的影响

目的研制血管内皮细胞生长因子(VEGF)-海藻酸钙微球缓/控释系统并观察其对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,为VEGF缓/控释促进组织工程骨血管化提供理论依据。方法应用锐孔挤出-离子交联法制备微球,检测其理化及体外释药性质；培养HUVEC,依据培养基添加物不同,设空白对照组、空白微球组、单用VEGF组及VEGF-海藻酸钙微球组,通过细胞计数法、四甲基偶氮唑盐比色法、流式细胞仪测细胞周期考察细胞增殖情况。结果微球球形圆整,粒径(560±50)μm,载药量0．72ng/mg,包封率54%,体外释药平稳,达10d以上。细胞培养初期,VEGF组的促分裂增殖作用最强,中后期,VEGF微球组的促分裂增殖作用最强,差异有统计学意义(P＜0．05),空白微球组与空白对照组间在细胞计数、细胞活性、细胞周期的各时相点差异均无统计学意义。结论海藻酸钙微球可以保存VEGF活性并持续释放VEGF 10d以上,在较长时期内促进HUVEC的增殖。     

NGF对体外培养人血管内皮细胞细胞周期和PCNA表达的影响

 目的研究神经生长因子(Nerve growthfactor,NGF)对人血管内皮细胞的细胞周期和对增殖细胞核抗原(Prolifer-ating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响.方法将NGF作用于体外培养的HUEVC 304细胞,利用流式细胞仪检测其细胞周期、DNA相对含量的变化,利用免疫组织化学的方法检测对PCNA表达的改变.结果NGF作用组出现C0～G1期细胞数量明显减少,S期细胞、G2～M期细胞明显增加,DNA相对含量无明显变化,PCNA表达明显增加(P＜0.05).结论NGF能明显促进HEVC增殖.     

电离辐射对血管内皮细胞影响的研究

利用放射性核素血管内照射治疗血管再狭窄逐渐受重视,但其作用机制末完全清楚,血管再狭窄是动脉损伤后的愈合反应,内皮细胞参与愈合过程。血管内皮损伤作为血管再狭窄的始动因素,内皮的增殖与凋亡影响和干预再狭窄的过程,电离辐射影响血管内皮细胞的存活,凋亡、增殖、表型、功能等,通过电离辐射对血内皮细胞影响的研究将有助于再 狭窄的防治。     

Caspase-3在血管内皮细胞凋亡中的作用研究进展

半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)家族在细胞凋亡中起着核心的控制作用,家族中的Cas-pase-3是凋亡过程中的关键执行子,它在整个凋亡过程中可被多次激活,并激活下游的细胞死亡蛋白酶。在目前所有能够检测的细胞凋亡过程中的染色质凝结和DNA裂解方面,Caspase-3是必不可少的;在某些细胞凋亡末期的细胞裂解及凋亡小体形成过程中,Caspase-3也是不可或缺的,而且有可能在凋亡早期细胞活力开始降低时,Caspase-3就起到激活作用。研究发现,血管内皮细胞凋亡的主要信号传导通路为线粒体通路和死亡受体通路,两条通路均需激活Caspase-3才能引起凋亡,均表现为经典的染色质凝结和DNA裂解。在血管瘤的增生与消退病理周期转变中,Caspase-3也发挥着重要作用。本文对Caspase-3在血管内皮细胞凋亡中的作用研究进展做一综述。     

腺病毒介导的VEGF-B基因促血管内皮细胞增殖作用的研究

为观察腺癌毒素介导的血管内皮细胞生长因子B（VEGF－B）基因体外转染对血管内皮细胞的促增殖作用,构建编码人VEGF－B基因的复制缺陷的重组腺病毒载体,体外转染鼠主动脉血管内皮细胞（RAECs）,应用RT－PCR和Western blot检测外源VEGF－B的表达,应用四唑盐（MTT）观察转染后RAECs的增殖。结果发现,RAECs可有效地被重组腺病毒载体感染,并能成功转录和表达VEGF－B基因和蛋白,在转染后细胞培养上清中检测到VEGF－B蛋白的表达,对RAECs有显著促增殖作用。提示重组腺病毒载体介导的人VEGF－B基因有血管新生作用,可用于缺血性心脏病的治疗。     

电离辐射对血管内皮细胞纤维肌动蛋白的影响

目的 观察电离辐射对血管内皮细胞纤维肌动蛋白的影响,探讨血管内皮细胞电离辐射损伤的机制。方法 用0、2、4、6、8、10和12 Gy 60Coγ射线对血管内皮细胞进行照射,于照射后6 h用激光共聚焦显微镜观察其细胞膜骨架蛋白,于照射后12和24h收集细胞,用流式细胞仪测定F-actin的含量。结果 细胞膜骨架随着辐射剂量的增加而破坏,这种变化呈剂量依赖性。F-actin的含量在照射后12 h明显减少,24 h后有所回升。结论 电离辐射能使血管内皮细胞骨架破坏和F-actin解聚,导致细胞损伤。     

烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性的影响

加深入阐明严重烧伤早期全身血管通透性增加继而引直民早期损害的发生机制，本实验应用培养于微孔滤膜上的小牛瞌 及皮细胞单层所构成的选择性通透屏障模型，观察了３０％Ⅲ度烧伤大鼠血清对其影响，结果发现，烧伤早期烧伤血清刺激后ＥＣ单层对Ｈａｎｋｓ液或白蛋白液滤过流量、滤过系数均明显增加。     

血管内放射治疗对平滑肌细胞增殖与凋亡的影响

目的：观察血管内放射治疗（简称放疗）对受损动脉平滑肌细胞（SMC）增殖与凋亡的影响。方法：用^192Ir后装源对猪受损髂动脉进行不同剂量血管内放疗，通过免疫组织化学增殖细胞核抗原（PCNA）与三磷酸脱氧尿嘧啶缺口末端标记法（TUNEL）检测不同时间点血管SMC增殖与凋亡情况。结果：放疗组第3天起中膜SMC增殖明显受抑及凋亡增加（P均＜0．05）；第10天时内膜SMC增殖明显减弱，20Gy组内膜SMC凋亡率显著增加；第28天时内膜SMC增殖明显受抑，凋亡率增加（P均＜0．05），20Gy组较10Gy组明显（P＜0．05）。结论：血管内放疗可抑制动脉损伤后SMC增殖、促进SMC凋亡。     

影响内皮细胞凋亡的因素及其机制探讨

目的：观察亚砷酸钠（Ars),内毒素（LPS）、肿瘤坏死因子（TNF）、烧伤血清、创伤血清对内皮细胞凋亡的影响及其机制。方法：体外培养内皮细胞ECV－304,与上述物质孵育24小时后检测凋亡水平及ICAM－1.bcl-2,p53表达的变化,结果：Ars可使内皮细胞发生剂量依赖的凋亡增加（与对照相比,P＜O．01）,但是LPS、TNF烧伤血清和创伤血清对内皮细胞的作用有限,细胞凋亡率在15％以下。除10％烧伤血清外,所有处理因素都内皮细胞ICAM－1表达降低。体外诱导内皮细胞凋亡与bcl-2表达降低、p53表达增多有关,结论：Ars,LPS,TNF烧伤血清和创伤血清通过下调bcl-2表达,上调p53表达来影响内皮细胞凋亡,并且抑制内皮细胞功能。