免疫组织化学在弓形虫和弓形虫病研究中的应用

弓形虫（Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａｇｏｎｄｉｉ）是一种细胞内寄生原虫。成人感染多呈无症状带虫状态,但先天感染的幼儿及免疫力低下人群的感染后常常是严重的,甚至是致死性的。Ｃｏｏｌ等［２］１９４２年创立的免疫组织化学技术,其基本原理是标记物或显色物标记的抗体或抗原,通过抗原抗体反应来检测组织或细胞内的抗原成份,用于疾病的诊断或研究。该技术的优点在于将结构与功能及代谢结合起来,从微观原位确定组织和细胞结构的化学成份,并可做到定性、定位及定量,在生物学和医学各个领域得到了广泛应用［３,４］。这一技术在近２０多…     

PCR在弓形虫及弓形虫病研究中的应用

本文综述了PCR在检测弓形虫DNA、诊断弓形虫病以及在基因克隆与表达等方面的研究中的应用。     

孕早期急性感染弓形虫致先天性弓形虫病胎鼠模型的建立

目的建立孕鼠早期急性感染弓形虫RH强毒株致先天性弓形虫病胎鼠模型,观察孕早期母体弓形虫感染对胎鼠脑发育的影响。方法 SD孕鼠42只于胚胎第3天(E3)随机分为对照组、实验组、地塞米松组各14只。对照组注射灭菌PBS,实验组与地塞米松组以腹腔注射弓形虫RH株,后者同时给予地塞米松饮水。分别于胚胎第14、16天(E14、E16)处死孕鼠剖腹取胎鼠,进行胚胎形态学观察;胎盘压片镜下观察弓形虫体;PCR检测各组羊水、胎肝中的弓形虫B1基因;免疫荧光染色检测对照组、实验组及地塞米松组胎鼠不同发育时期脑组织中的Caspase-3、神经元迁移蛋白(DCX)。结果 3组孕鼠均无死亡。实验组、地塞米松组E14、E16胚胎均有出血、坏死和吸收发生,胎鼠无明显肉眼可见畸形,对照组无死胎、吸收胎出现,3组平均活胎率分别为100%、61%、18%,3组平均活胎率相比,P均<0.05。仅地塞米松组在E14一窝别观察到2个胎盘压片有弓形虫体,羊水中检测到B1基因表达。实验组及地塞米松组胎肝中均检测到B1基因表达。E14、E16实验组胎鼠脑组织中Caspase-3表达较对照组明显增强,但较地塞米松组减低(P均<0.05);实验组DCX表达较对照组减弱,较地塞米松组增强(P均<0.05)。结论建立了稳定垂直传播的先天性弓形虫病胎鼠模型,弓形虫对胚胎脑发育具有毒性作用。     

弓形虫感染致实验动物体温异常的实验观察

目的观察急性弓形虫感染对实验动物体温的影响，探讨弓形虫感染后，机体可能出现的新发病体征方法将实验小鼠随机分为3组：1组为空白对照组，另2组分别感染弓形虫RH株和AH株。以恒定的条件测量小鼠体温，同时观察发病情况。结果感染前的小鼠基础体温为37．5～38℃，小鼠感染弓形虫RH株速殖子后第3d发病，体温即开始下降，每天下降2～3℃，最低降至28℃，动物死亡。AH株感染小鼠第8d发病，体温开始下降，每天下降1～3℃，最低降至32℃以下，动物死亡，体温下降不低于32℃的动物可渡过低体温期，即急性发病期，得以存活。对照组小鼠体温未发生明显变化。结论体温下降可能是小鼠弓形虫急性感染发病的一个重要体征。     

弓形虫病实验诊断研究的进展

人体弓形虫感染多数呈无症状带虫状态,但妊娠期的感染常可导致流产、死胎、胎儿畸形。弓形虫感染也是艾滋病(AIDS)患者死亡的主要原因之一。弓形虫病无特定临床表现,其诊断主要根据实验室的检查结果。目前所用的病原学和免疫学检查方法均存在某些缺点。近年来,DNA技术发展迅速,尤其是聚合酶链反应(PCR)用于弓形虫病的实验诊断很有前途,但尚有一些有待解决的问题。本文就近年来弓形虫病实验诊断的研究进展作一综述。     

聚合酶链反应检测弓形虫的实验研究

目的建立敏感、特异、稳定的聚合酶链反应（ＰＣＲ）法,以检测弓形虫感染。方法建立ＰＣＲ法,确定最佳扩增条件;用ＰＣＲ法检测实验感染家兔血液中ＤＮＡ的动态变化,并与ＥＬＩＳＡ法检测ＣＡｇ进行比较。结果兔感染弓形虫后第２ｄ,ＰＣＲ开始出现阳性,阳性率为７６．９％（１０／１３）,总检出率达１００％。与ＥＬＩＳＡ法查ＣＡｇ进行平行检测,前者出现阳性时间早,且阳性率明显高于后者。该法敏感性高,可检测到１０ｆｇＤＮＡ含量;特异性强,对其它９种寄生虫和微生物ＤＮＡ均无交叉现象;稳定性好,对阳、阴性同一样品重复５次,结果一致。结论提示本法可用于临床诊断,在一定范围内替代病原学和免疫学检测。     

青蒿琥酯抗弓形虫病的疗效观察

弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,由其引发的弓形虫病在全世界范围内广泛流行,给人类健康和畜牧业造成了不可估量的损失。目前,弓形虫病治疗仍以传统的乙胺嘧啶和磺胺嘧啶联合用药为主,但由于它们在长期使用中表现出的毒副作用使其应用受到限制。另外,已发现的其它抗弓形虫药的疗效都低于上述两种药。因此,寻找新的、高效低毒的     

弓形虫感染致实验动物体温异常的实验观察

目的观察急性弓形虫感染对实验动物体温的影响,探讨弓形虫感染后,机体可能出现的新发病体征方法将实验小鼠随机分为3组:1组为空白对照组,另2组分别感染弓形虫RH株和AH株。以恒定的条件测量小鼠体温,同时观察发病情况。结果感染前的小鼠基础体温为37.5~38℃,小鼠感染弓形虫RH株速殖子后第3 d发病,体温即开始下降,每天下降2~3℃,最低降至28℃,动物死亡。AH株感染小鼠第8 d发病,体温开始下降,每天下降1~3℃,最低降至32℃以下,动物死亡,体温下降不低于32℃的动物可渡过低体温期,即急性发病期,得以存活。对照组小鼠体温未发生明显变化。结论体温下降可能是小鼠弓形虫急性感染发病的一个重要体征。     

蒿甲醚早期治疗实验小鼠弓形虫病的初步观察

弓形虫病是近年来广泛关注的一种人兽共患寄生虫病 ,可引起孕妇流产、胎儿畸形或死胎 ,也是艾滋病等免疫缺陷病患者常见的并发症和致死原因。目前治疗弓形虫病主要采用磺胺类与乙胺嘧啶的联合疗法 ,但该复方的不良反应大、复发率高 ,因此研究寻找高效低毒的新药有重要意义。文献报道 ,青蒿素类对弓形虫有一定的抑制作用[1 3 ] ,本文初步观察了蒿甲醚早期治疗小鼠弓形虫病的效果。1　材料与方法1 .1　虫株　刚地弓形虫RH株 (强毒株 )引自上海市寄生虫病防治研究所 ,小鼠腹腔接种常规传代。1 .2　药物与试剂　蒿甲醚由昆明制药股份有限公司赠…     

弓形虫病研究九十年

弓形虫的发现至今已九十年,经过各国学者的研究,特别是在第二次世界大战期间,经过美国一些学者的深入研究,弓形虫病(Toxoplasmosis)作为医学上的一个疾病,逐步被人们所认识和接受。五十年代中期我国开始研究此病,五十年来取得了很大成绩。九十年前在地球的两半球几乎同时发现了弓形虫,1908年法国学者突尼斯巴斯特研究所所长Nicolle及其同事Manceaux在北非研究野生动物利什曼时,在刚地梳趾鼠(Ctenodactylusgondii)的肝、脾单核细胞中发现了一种形态类似利什曼的寄生物,经过仔细研究,1909年命名为刚地弓形体(Toxoplasmagondii),几乎同时,190…     

应用斑点酶联免疫结合试验检测弓形体血清抗体

以弓形体可溶性抗原进行斑点免疫结合试验(Dot-Immunobinding Assay,DIA),检测16份弓形体病人血清,结果全部阳性。检查山东省精神病院精神病人血清417份,阳性率为4.32％。此法与囊虫病、旋毛虫病、血吸虫病等均无交叉反应,表明对弓形体有较高的特异性。在同一批血样中,此法检出的阳性结果比常规ELISA和IHA均高,初步证实了DIA优于常规ELISA和IHA,具有简、快、敏、特等优点。     

Review of experimental animal models of biliary acute pancreatitis and recent advances in basic research

Acute pancreatitis (AP) is a formidable disease, which, in severe forms, causes significant mortality. Biliary AP, or gallstone obstruction-associated AP, accounts for 30-50% of all clinical cases of AP. In biliary AP, pancreatic acinar cell (PAC) death (the initiating event in the disease) is believed to occur as acinar cells make contact with bile salts when bile refluxes into the pancreatic duct. Recent advances have unveiled an important receptor responsible for the major function of bile acids on acinar cells, namely, the cell surface G-protein-coupled bile acid receptor-1 (Gpbar1), located in the apical pole of the PAC. High concentrations of bile acids induce cytosolic Ca(2+) overload and inhibit mitochondrial adenosine triphosphate (ATP) production, resulting in cell injury to both PACs and pancreatic ductal epithelial cells. Various bile salts are employed to induce experimental AP, most commonly sodium taurocholate. Recent characterization of taurolithocholic acid 3-sulphate on PACs has led researchers to focus on this bile salt because of its potency in causing acinar cell injury at relatively low, sub-detergent concentrations, which strongly implicates action via the receptor Gpbar1. Improved surgical techniques have enabled the infusion of bile salts into the pancreatic duct to induce experimental biliary AP in mice, which allows the use of these transgenic animals as powerful tools. This review summarizes recent findings using transgenic mice in experimental biliary AP.     

Toxoplasmosis in pregnancy

Pregnant women who acquire infection from Toxoplasma gondii usually remain asymptomatic, although they can still transmit the infection to their fetuses with severe consequences. Given the asymptomatic nature of most Toxoplasma infections, primary prevention in pregnant women may lower the risk of congenital toxoplasmosis. Both consumption of undercooked meat and unprotected contact with soil are independent risk factors for T. gondii seroconversion during pregnancy, while contact with cat litter may pose a risk in certain situations. However, many pregnant women lack knowledge of these risk factors. This article reviews toxoplasmosis infection in pregnancy, with an emphasis on risk factors and appropriate counseling of pregnant women.