异黄酮Genistein对T细胞体外活化CD69表达的影响

目的 :研究异黄酮Genistein对T淋巴细胞活化的影响 ,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性。方法 :应用荧光标记的单克隆抗体和流式细胞技术 ,在全血培养体系中于 2h和 6h时间点检测分别经 10 ,5 0或 10 0 μmol L浓度Genistein预培养的 ,PHA或PDB诱导活化的T细胞的CD6 9表达百分率。结果 :培养 2h后 ,Genistein对PHA活化组的抑制作用要强于PDB活化组 ,P <0 0 5 ;培养 6h后 ,Genistein对PHA活化组的抑制作用同样强于PDB活化组 ,P <0 0 5 ,但较之 2h时间点均有所降低 ;无论PHA活化组或PDB活化组 ,Genistein对T细胞CD6 9表达率的抑制效应均随作用浓度的升高而增强。结论 :Genistein对PHA和PDB诱导活化的T细胞的CD6 9表达率均有明显的抑制作用 ,这种抑制作用存在浓度依赖关系。Genistein有潜力发展成一种免疫干预药物。     

SEB活化的人外周血T细胞CD25,CD69的表达

本文用超抗原葡萄球菌肠毒素B(SEB)诱导外周血淋巴细胞增殖。结果显示出微量超抗原能诱导外周血淋巴细胞的增殖,大量的增殖反应发生在SEB刺激后的第5天,增殖的细胞是CD4~+T细胞,它们由刺激前的27％增加到42％。外周血活化的T细胞不依赖外源性IL-2:大量内源性IL-2的存在抑制T细胞的增殖反应。伴随CD4~+T细胞的增殖,CD25和CD69分子表达明显增加。提示SEB能改变外周血T细胞表面的分子表达。     

Mtb-Ag活化γδT细胞的扩增及对γδT细胞CD69分子表达的影响

目的 用结核杆菌低分子多肽抗原(Mtb-Ag)激活和扩增γδT细胞,观察γδT细胞表面CD69分子表达的情况.方法 分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用Mtb-Ag刺激PBMC,所得细胞用磁珠阳性分选,通过荧光单抗TCR γδPE染色及流式细胞仪检测γδT细胞所占比例.用γδPE/CD69FITC细胞双染检测初次刺激和再次刺激γδT细胞CD69分子的表达情况.结果 新鲜分离的PBMC中γδT细胞的比例仅为(4.9±1.85)％,Mtb-Ag刺激培养10d后升为(69.2±6.57)％,免疫磁珠阳性分选后达(99.3±8.92)％.Mtb-Ag初次刺激γδT细胞,CD69分子的表达24 h达高峰,为75.2％;Mtb-Ag再次刺激γδT细胞,CD69分子的表达6h达高峰,为72％.结论 Mtb-Ag能特异地刺激PBMC中的γδT细胞增殖,Mtb-Ag初次和再次刺激均可特异性活化γδT细胞.     

CD45在T细胞活化中的调节作用

CD45是表达于所有造血干细胞来源的有核细胞表面的一个同源二聚体分子。它具有蛋白酪氨酸磷酸水解酶活性,可通过调节一系列底物蛋白的磷酸化程度来参与T细胞活化。另外,它还直接与T细胞表面其它分子发生关系,作用于T细胞。关于CD45分子的作用机制虽然已有了初步了解,但仍然有许多问题尚待解决。     

再生障碍性贫血患者T细胞CD69的表达

CD69又称活化诱导分子（AIM）、早期活化抗原1（EA-1），是淋巴细胞活化最早表达的膜表面分子。CD69由两个相同的单体经不同的糖基化后构成，属植物血凝素C超家族Ⅱ型膜贯通型糖蛋白，细胞外区C型凝集素（钙离子依赖性）有一个N结合型糖链附着部位。静止状态的T细胞不表达CD69，     

孕酮对人T淋巴细胞体外活化CD69表达的作用

目的：探讨孕酮（Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ,Ｐｒｏｇ）及地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ,Ｄｅｘ）对人外周血Ｔ淋巴细胞体外活化ＣＤ６９表达的作用。方法：以女性健康志愿者（１０名）为研究对象,以蛋白激酶Ｃ的刺激剂佛波醇酯（Ｐｈｏｒｂｏｌ ｅｓｔｅｒ,ＰＤＢ）为Ｔ淋巴细胞的活化剂,采用双荧光染色流式细胞技术。检测ＣＤ３＾＋的Ｔ淋巴细胞表达早期活化表面分子ＣＤ６９的百分率,以观察Ｐｒｏｇ、Ｄｅｘ及Ｐｒｏ０ｇ加上Ｄｅｘ对外周血Ｔ淋巴细胞体外活化的作用。结果：在体外培养条件下,无论单独使用Ｐｒｏｇ还是Ｄｅｘ均地强低剂量ＰＤＢ刺激ＣＤ６９的表达。然而,与单独使用Ｐｒｏｇ或Ｄｅｘ的作用相比。Ｐｒｏｇ加上Ｄｅｘ明显减弱低剂量ＰＤＢ的活化ＣＤ６９的表达。结论：同时使用Ｐｒｏｇ与Ｄｅｘ可明显抑制Ｔ淋巴细胞的体外活化,提示在临床上     

γδT细胞对系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞活化和凋亡的影响

目的：探讨γδT细胞在系统性红斑狼疮疾病中的免疫保护作用。方法：检测17例正常人群和44例系统性红斑狼疮患者外周血γδT细胞及亚群的表达情况。以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得17例活动期系统性红斑狼疮患者和10例正常人群外周血TCRγδ细胞系。测定γδT细胞毒活性。用正常人群γδT细胞系与异体活动期SLE患者外周血单核细胞（PMBC）以1：5、1：10比例共同培养48小时，活动期SLE患者PMBC作对照孔，观察γδT细胞系对活动期SLE患者PMBC活化和凋亡、细胞因子分泌的影响。结果：SLE患者的γδT细胞及亚群数量明显减少（P〈0．05）。IL-2可显著增强γδT细胞的细胞毒作用。正常人γδT细胞系与异体SLE活动期患者PMBC细胞共同培养，共同培养二组SLE患者PMBC的CD69表达和凋亡率均较对照组明显下降（P〈0．01）。共同培养二组培养上清IL-10水平较对照组明显升高，具有明显差异（P〈0．05）。结论：SLE患者γδT细胞数及亚群较正常人群明显下降，γδT细胞对SLE外周血淋巴细胞的凋亡和活化具有抑制性作用，并使IL-10分泌水平升高，表明γδT细胞在SLE发病中具有保护性的免疫调节作用。     

CD69分子在人外周血佛波醇酯+离子霉素活化的γδT细胞表面表达的实验研究

目的 观察CD69分子在人外周血佛波醇酯(PMA)+离子霉素(IM)活化的γδT细胞表面的表达情况.方法 分离获取健康人外周血单个核细胞(PBMC),用PMA+ IM刺激,采用流式细胞术检测CD3+细胞和γδT细胞0、6、12、24、48和72 h CD69分子的动态表达情况.结果 PMA+ IM刺激PBMC 0、6、12、24、48和72 h,CD3+细胞CD69分子的表达分别为1.0％、99.5％、99.1％、98.0％、93.3％、92.1％;γδT细胞CD69分子的表达分别为0.91％、99.3％、98.6％、93.6％、88.7％、87.0％.结论 PMA+ IM的刺激后CD3+细胞和γδT细胞迅速活化,CD69的表达几乎为100％,6h达高峰,随后缓慢下降,两种细胞活化表达CD69基本一致.     

T细胞活化中的CD28通路

Ｔ细胞活化过程的研究是现代免疫学研究的一个重要领域，随着Ｔ细胞活化过程认认识的逐步深入，发现越来越多Ｔ细胞表面分子参与这一过程。ＣＤ２８分子就是近几年来所发现的一参与Ｔ细胞活化的辅助分子，本文就其分布，结构特征，天然配体，信号传导通路和效应功能等方面的研究进展作一综述。     

rIL-2对T细胞CD69、CD137和CD28表达的影响

T细胞的活化是体内特异性免疫应答的重要环节,且T细胞的活化需双信号刺激。起始信号可使T淋巴细胞初步活化,共刺激信号的存在使初步活化的T淋巴细胞进入完全活化状态,发挥免疫效应,本研究用流式细胞仪检测健康人PBMC经rIL 2刺激后对T细胞及其亚群活化和共刺激信号分子表达的影响。1　材料与方法1 1　主要试剂、仪器　CD4CD6 9CD3、CD8CD6 9CD3、γ1FITC/γ1PE/CD3PerCP单克隆抗体(BD公司)。CD3、CD8单克隆抗体(ExcellenceeBioscience公司)。CD1 37单克隆抗体(Ancell公司)。CD2 8单克隆抗体(ExalphaBiologicals公司)。…     

结核杆菌低分子多肽抗原再次刺激其活化的T细胞对诱导γδT细胞CD69分子再次表达的影响

目的 观察结核杆菌低分子多肽抗原（Mtb-Ag）再刺激Mtb-Ag活化的T细胞（Mtb-AT细胞）诱导γδT细胞CD69分子的再表达的情况.方法 分离获取健康人外周血单个核细胞（PBMC）,用Mtb-Ag刺激PBMC,采用直接免疫荧光染色法通过CD3PE/CD69FITC、γδPE/CD69FITC细胞双染检测γδT细胞0、6、12、24、48和72 h CD69分子的表达情况.PBMC经Mtb-Ag刺激活化扩增培养至10 d后再次加入Mtb-Ag,经培养0、6、12、24、48和72 h后收集细胞,再次检测CD69分子的表达情况.结果 培养0、6、12、24、48和72 h后,Mtb-Ag初次刺激γδT细胞后CD69分子的表达分别为0.91％、15.1％、35.2％、75.2％、59.4％和50％.再次刺激培养0、6、12、24、48和72 h后,γδT细胞CD69分子的表达分别为1.7％、72.3％、73.5％、50.3％、45.6％、41.7％.结论Mtb-Ag初次刺激γδT细胞表达CD69分子约在24 h达高峰,随后快速下降;Mtb-Ag再次刺激Mtb-AT细胞诱导γδT细胞CD69分子的再表达,6h时CD69分子达高峰,可维持到12 h.这为寻求γδT细胞迅速活化、CD69分子的迅速表达奠定了方法学基础.     

APC辅助超抗原活化T细胞的机制

超抗原是ＭＨＣ非限制性及ＴＣＲＶβ特异性方式激活Ｔ细胞的一种新的蛋白质抗原分子。现已发现它所激活的Ｔ细胞可引发人体的多种急、慢性疾病。ＡＰＣ以与辅助普通抗原不同的方式辅助超抗原是超抗原活化Ｔ细胞的关键，了解ＡＰＣ辅助超抗原活化Ｔ细胞的机制有助于理解超抗原激活Ｔ细胞的机理及预防超抗原所引发的疾病。     

超抗原SEA对外周血T细胞的活化作用

目的 研究超抗原SEA对外周血T淋巴细胞的活化作用。方法 用SEA刺激人外周血T淋巴细胞,观察细胞的DNA合成、形态、IL-2的产生、细胞表型以及凋亡情况。结果 SEA对T淋巴细胞的促增殖作用的浓度为100mg/mL最强,在第2、3d达高峰;首次或多次刺激不改变T淋巴细胞的CD4^ CD8^ 的表型;首次刺激24h内未见明显凋亡;但再次刺激24h内即有明显凋亡;加入rhIL-22d凋亡现象消失。结论 超抗原SEA对T淋巴细胞的促增殖作用与其浓度、作用时间有关,并且SEA首次或多次刺激对CD4^ T淋巴细胞和CD8^ T淋巴细胞起同等的活化作用。     

ConA激活的小鼠T细胞CD69表达动力学的体内外研究

目的 为明确ＣＤ６９体内外表达动力学并进一步探讨其作用。方法 ＣｏｎＡ体内外刺激小鼠Ｔ细胞后,选取不同时间点,流式细胞仪观察Ｔ细胞ＣＥ６９表达率。结果ＣｏｎＡ刺激后２ｈＣＤ６９即有明显表达,６～８ｈ达到峰值,ＣＤ８＾＝与ＣＤ８＾＋Ｔ细胞相比无明显差异。体外条件对ＣＤ６９的表达有显著的影响。结论 结果提示ＣＤ８＾－和ＣＤ８＾＋Ｔ细胞的活化均需要ＣＤ６９的参与,Ｔ细胞可能在活化早期一过性高表达ＣＤ６９     

T细胞体外活化模型的建立

目的：比较并建立T细胞体外活化的条件,为后续功能及机制相关实验奠定基础。方法以Jur-kat细胞为模型,选择T细胞早期活化的指标CD69分子作为评价指标,通过比较不同刺激条件下CD69分子的表达量的差别,来判定合适的体外刺激条件,并通过增殖实验、抑制性信号表达量以及PBMC细胞进行验证。结果多克隆刺激剂PMA和ionomycin在剂量分别为20和500ng/ml时,Jurkat细胞活化效率较高;单克隆刺激剂anti-CD3包被和anti-CD28游离,且剂量在5μg/ml和1．5μg/ml时Jurkat细胞活化效率较高;作用48h检测多克隆刺激剂活化效率略高于单克隆刺激剂,细胞发生了增殖、抑制性分子CTLA-4的表达增加。结论建立了Jurkat及PBMC细胞的稳定的体外刺激条件,为后续研究T细胞的功能等奠定了实验基础。