组织工程种子细胞的研究进展

组织工程学近年来研究进展很快 ,目前采用组织工程技术建造的部分组织或器官已经开始进入或即将进入临床应用 ,如组织工程化皮肤已经实现商品化 ,软骨组织工程产品也已经进入临床前期实验阶段 ,在近年内即可进入临床应用[1～ 3 ,12 ] 。组织工程研究成功与否主要取决于以下三个关键性制约因素 :种子细胞、支架材料以及有助于细胞生长、分化的外在环境。其中获得足够数量、不引起免疫排斥反应且具有再生活力的种子细胞是开展组织工程研究的前提和基础。尽管目前种子细胞的研究仍面临众多挑战 ,但令人欣喜的是 ,随着干细胞体外分离、培养和扩…     

组织工程化血管种子细胞研究现状

种子细胞制取、培养、种植的研究是组织工程化血管研究的关键性环节。目前常用于作为组织工程化血管种子细胞的是白体血管壁细胞，如内皮细胞。造血系统来源的干细胞及间充质干细胞由于取材方便，可体外大量培养增殖，无免疫原性的优点，有望成为组织工程化血管的种子细胞主要来源，随着对胚胎干细胞的进一步研究，胚胎干细胞也可作为种子细胞。考虑到流体切应力对种子细胞的影响，动态培养种子细胞可促进种植后细胞的粘附性、细胞生长及功能的发挥，使组织工程血管更符合生理需要。     

组织工程种子细胞标记示踪技术研究进展

组织工程技术的发展为器官的修复和疾病的治疗提供了新的途径,其种子细胞的研究包括细胞选择、培养、移植和示踪等方面.种子细胞的示踪技术涉及分子生物学、分子免疫学和分子影像学等多学科,为种子细胞标记物的选择带来了困难.就目前常用的种子细胞示踪技术及其研究进展作一综述.     

组织工程种子细胞标记示踪技术研究进展

组织工程技术的发展为器官的修复和疾病的治疗提供了新的途径,其种子细胞的研究包括细胞选择、培养、移植和示踪等方面.种子细胞的示踪技术涉及分子生物学、分子免疫学和分子影像学等多学科,为种子细胞标记物的选择带来了困难.就目前常用的种子细胞示踪技术及其研究进展作一综述.     

肝组织工程种子细胞来源的研究进展

肝脏组织工程是组织工程领域中重要的学科之一，其研究主要采用2条基本途径治疗各种终末期肝病：一是通过细胞体内移植的方法，将种子细胞植入体内修复替代肝组织缺损；二是将种子细胞接种到支架材料上，在体外构建”肝脏组织”，替代肝脏功能。理想的种子细胞是其关键组成部分，包括人或动物的成体肝细胞、各种肝干细胞、永生化肝细胞系等。但目前尚未确定一种理想的细胞来源，临床广泛应用还存在许多问题。就肝组织工程种子细胞来源的研究进展综述如下。     

小口径组织工程血管的研究进展

以动脉粥样硬化性心脏病为代表的动脉缺血性疾病,是引起人类死亡的主要原因之一,其治疗方法主要是进行动脉移植手术.随着心、脑和肾血管病等血管外科疾病手术治疗技术的发展,不同长度和口径的动脉移植材料的研究就成为当前世界关注的热点之一.     

组织工程心瓣膜种子细胞的研究进展

种子细胞是近年来组织工程研究的热点。寻找适宜的种子细胞是构建组织工程心瓣膜（tissue engineering heart valves,TEHV）必须解决的一个关键问题。现有种子细胞虽各有优点,但也存在诸多不足。本文就近年来种子细胞研究的现状及存在的问题做一综述,以利于TEHV种子细胞的深入研究。     

软骨组织工程种子细胞及预防其老化的研究进展

软骨组织的修复和再生能力较弱，加之软骨种子细胞易于老化，这些因素限制着软骨组织工程在临床的应用。本就近年来有关软骨组织工程种子细胞的建立及延缓和预防软骨种子细胞老化的研究进展和前景作一综述。     

组织工程血管研究的新进展

血管组织工程近年来发展的相当快，目前的研究主要着眼于支架材料的设计诸如机械性能和生物活性的改变，种子细胞的选择及体外动态培养系统的应用。进一步改进支架材料的生物特性，深入研究细胞间的相互作用及细胞信号的传导尤其是基因工程，干细胞研究的进展将会促进组织工程血管在临床应用。     

软骨组织工程种子细胞的基础和应用研究进展

软骨种子细胞的老化和缺乏是限制软骨组织工程在临床应用的瓶颈问题。本文概述了目前对软骨种子细胞研究的两个方面 :扩大种子细胞的来源及预防和延缓种子细胞功能老化 ,并展望软骨组织工程在监床的应用前景。     

血管组织工程的研究与进展

背景：血管组织工程是指利用血管壁的正常细胞和生物可降解材料来制备、重建和再生血管替代材料的科学。近年来,组织工程学技术的发展推动了组织工程化血管的研究,已成为今后血管替代物的重要方向。 目的：综述血管组织工程的相关临床及基础研究进展。 方法：检索SCI数据库2001/2010有关血管组织工程的文献,检索词为“组织工程血管(tissue-engineered vascular);组织工程(tissue engineering);血管(vascular);支架材料(scaffold materials);支架(scaffolds);种子细胞(seed cell);细胞外基质(extracellular matrix, ECM);血管支架(vascular scaffold);高分子材料(polymer materials);复合材料(composite materials);纳米(nanometer);生物材料(biological materials)”,对血管组织工程的临床及基础文献进行分析。 结果与结论：血管组织工程研究的内容主要有种子细胞、细胞外基质替代物以及组织工程血管三维培养。血管组织工程所应用的种子细胞包括自体血管壁细胞、胚胎干细胞和骨髓间充质干细胞,还包括内皮细胞,平滑肌细胞及成纤维细胞等众多组织细胞。在组织工程血管构建中血管组织微环境是活细胞在体外生长所需的支持物,是种子细胞生长增殖的三维空间,便于细胞黏着、生长、进行新陈代谢。因此,组织工程血管需要具有良好的生物相容性,可塑性强,来源广泛,有一定的抗张强度和无免疫原性的支架材料。根据来源和性能,目前研究应用的材料分为天然生物生材料和合成材料两种。     

犬小口径组织工程化血管移植

目的 研究利用小口径组织工程化血管进行血管移植的可能性。方法 来源于骨髓间充质干细胞分化的血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分层种植于胶原包埋的PGA复合支架上;将复合体种植于动物皮下构建初级组织工程化血管,然后移植组织工程化血管与股动脉,行相关检查,了解移植后血管的特点及细胞来源。结果 组织工程化血管移植物通畅,管壁无瘤样扩张,血管搏动佳,内膜光滑,无血栓形成。HE染色见血管壁和正常生理性血管壁的结构相似,分内膜、中膜和外膜三层,;免疫荧光观察证实血管壁细胞来源于所种植的种子细胞。结论 组织工程血管可以移植于动物体内,该复合体具有与天然血管相似的结构和功能。     

组织工程化血管移植实验研究

目的 通过体外构建、体内培养的方法 构建组织工程化血管,并将其植入动物的股动脉,探讨利用小口径组织工程化血管进行血管移植的可能性.方法 首先用Brdu标记所有种子细胞,将血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分层种植于胶原包埋PGA的复合支架表面;然后将细胞和支架的复合体种植于动物皮下构建组织工程化血管,并移植到股动脉;最后行HE染色及免疫荧光等相关检查,了解移植后血管的特点及细胞来源.同时以移植物为单纯支架在皮下培养所形成的管状结构作为对照组.结果 移植后组织工程化血管通畅无血栓形成.HE染色见血管壁和正常生理性血管壁的结构相似.可分内膜、中膜和外膜三层.种植2周后Brdu标记细胞的免疫荧光观察证实血管壁细胞来源于所种植的种子细胞.结论 利用骨髓间充质干细胞分化而来的种子细胞和胶原包埋的PGA支架可以构建组织工程化小口径血管,而且可以移植入动物体内.     

端粒酶与组织工程种子细胞衰老的研究

种子细胞是组织工程基本要素之一,目前种子细胞主要来源是自体的同源细胞,存在容易衰老,不易大量扩增的缺陷。端粒及端粒酶在细胞的衰老过程中扮演着重要角色。通过回顾有关研究,探讨端粒酶在延缓组织工程种子细胞衰老中的作用。     

应用脱细胞血管基质构建组织工程血管的初步研究

目的： 采用脱细胞处理的猪胸主动脉血管基质作为支架材料，接种人脐带血管内皮细胞，构建组织工程血管。方法: 以新鲜猪胸主动脉为原材料， 1% Triton X-100为脱细胞试剂，制备脱细胞血管基质；采用冷冻干燥和热交联法对脱细胞血管基质进行改性，并进行组织学观察及力学性能测定。用人脐带内皮细胞经培养和扩增后，再与所制备的脱细胞血管基质进行复合培养，光学显微镜及扫描电镜观察内皮细胞生长状况。结果: 1% Triton X-100处理84h的猪胸主动脉，既能完全脱除血管中细胞，同时又完整保留血管基质的三维结构；对脱细胞血管基质冷冻干燥24 h，120 ℃下热交联12 h，能有效提高材料的机械强度，断裂强度可达到1.70 MPa。扫描电镜下可见，脱细胞血管基质与内皮细胞复合培养7 d，已形成典型血管内膜样结构。结论: 经改性后的脱细胞血管基质与内皮细胞具有良好的相容性，用其作为支架材料与内皮细胞复合培养，有望应用于构建组织工程化血管。     

初级组织工程小口径血管的制备

目的 探讨利用组织工程技术构建小口径组织工程化血管的可行性.方法 将犬骨髓细胞诱导为平滑肌细胞和内皮细胞后,用Brdu标记平滑肌细胞,DAPI标记内皮样细胞,观察细胞标记的成功率;血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分层种植于胶原包埋PGA的复合支架表面:将细胞和支架的复合体种植于犬皮下,并设立对照组,分别于植入后的第4、6、8周取出植入皮下的组织工程化血管,进行相关检查分析.结果 免疫荧光提示Brdu、DAPI标记种子细胞效果良好;核呈蓝色荧光的内皮样细胞均匀排列在支架表面:组织工程化血管材料植入动物皮下取出后观察,实验组管壁结构比较清晰,细胞数量也已减少、胶原成分增多,管壁分层明显,可见内膜、中膜和外膜结构,对照组无此特点;免疫荧光观察,8周实验组组织工程血管壁内有Brdu标记的种子细胞存在.结论 以动物的皮下为生物反应器,采用静态培养的方式可强化组织工程血管壁,该组织的结构与天然血管相似,种子细胞同时参与初级组织工程小口径血管的构建.     

骨髓间充质干细胞构建组织工程化小口径血管

目的采用在动物体外构建初级组织工程化血管、体内强化的方法,探讨构建小口径组织工程化血管的可能性.方法体外培养骨髓间充质干细胞(BMSC),用含全反式维甲酸(AT-RA)、双丁酰环磷酸腺苷(db-cAMP)的DMEM-LG培养液和含血管内皮细胞生长因子(VEGF)的培养液诱导BMSC分别向血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞分化.免疫荧光观察平滑肌样细胞β肌动蛋白的表达和内皮样细胞vWF的表达.电镜观察超微结构的改变.诱导的血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞,分层种植于胶原包埋聚乙醇酸(PGA)的复合支架表面,将细胞和支架复合体种植于动物皮下,于植入后第4、8周再次麻醉动物,取出植入皮下的组织工程化血管,行组织学检查、压力实验及免疫荧光检查.结果诱导14 d后,BMSC能够分化为血管平滑肌样细胞和血管内皮样细胞:β肌动蛋白和vWF呈阳性表达,电镜证实细胞出现了相应的形态学改变.人工血管组织学观察见管壁结构清晰.单纯支架组可承受100～150 mm Hg(1mm Hg=0.133 kPa)的血管腔内压力,实验组则均可承受200mm Hg的血管腔内压力不破裂.实验组皮下培养8周Brdu标记细胞的免疫荧光结果显示部分细胞核呈现明亮的黄绿色荧光.结论以动物皮下为生物反应器可构建出组织工程化血管,其大体结构和天然血管相似.     

Novel biphasic elastomeric scaffold for small-diameter blood vessel tissue engineering

Compliance mismatch, thrombosis, and long culture times in vitro remain important challenges to the clinical implementation of a tissue-engineered small-diameter blood vessel (SDBV). To address these issues, we are developing an implantable elastomeric and biodegradable biphasic tubular scaffold. The scaffold design uses connected nonporous and porous phases as a basis to mimic, respectively, the intimal and medial layers of a blood vessel. Biphasic scaffolds were fabricated from poly(diol citrate), a novel class of biodegradable polyester elastomer. Scaffolds were characterized for tensile and compressive properties, burst pressure, compliance, foreign body reaction (via subcutaneous implantation in rats), and cell distribution and differentiation (via histology, scanning electron microscopy, and immunohistochemistry). Tensile tests, burst pressure, and compliance measurements confirm that the incorporation of a nonporous phase to create a "skin" connected to the porous phase of a scaffold can provide bulk mechanical properties that are similar to those of a native vessel. Compression tests confirm that the scaffolds are soft and recover from deformation. Subcutaneously implanted poly(diol citrate) porous scaffolds produce a thin fibrous capsule and allow for tissue ingrowth. In vitro culture of tubular biphasic scaffolds seeded with human aortic smooth muscle cells (HASMCs) and endothelial cells (HAECs) demonstrates the ability of this design to support cell compartmentalization, coculture, and cell differentiation. The newly formed HAEC monolayer stained positive for von Willebrand factor whereas collagen- and calponin-positive HASMCs were present in the porous phase.     

骨组织工程种子细胞来源的研究进展

骨组织工程是组织工程学中最具有临床应用可行性的研究领域之一。种子细胞是组织工程骨构建及应用研究中的首要环节和基本要素。近年来,种子细胞的研究不断深入,然而各种来源各有其优缺点。对骨组织工程学种子细胞来源的研究现状进行回顾,并对其研究的前景作一展望。