c—myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 研究c-myc反义寡核苷酸对白血病细胞凋亡的影响。方法 用针对c-myc mRNA 5'端非翻译区的一个18bp的反义寡核苷酸与HL60细胞、分离的急性粒细胞白血病病人白细胞共培养10h,用凋亡细胞计数、DNA凝胶电泳、ELISA、流式细胞仪等方法测白血病细胞的调亡。结果 c-myc反义寡核苷酸能够诱导HL60细胞凋亡,且此作用随着作用浓度的提高而增加;此反义核酸只诱导白血病患者的白血病细胞凋亡,对正常白细胞的凋亡无影响。结论 c-myc反义核酸可以通过诱导白血病细胞凋亡来治疗急性粒细胞白血症,且该作用的特异性好。     

广西南丹县旋毛虫COX1基因和5S rRNA基因分析

目的分析广西壮族自治区南丹县旋毛虫（Trichinella spiralis）COX1和5SrRNA基因特点,阐述该分离株的系统发生关系及基因变异规律。方法PCR扩增南丹旋毛虫分离株COX1和5SrRNA基因片段并对扩增产物进行测序;应用Blast和ClustalX软件计算其碱基组成,分析该分离株与GenBank中相应序列的同源性及遗传距离,同时应用UPGMA方法分析聚类关系。结果扩增后COX1基因片段长419bp,5SrRNA基因片段长695bp。南丹旋毛虫分离株与Trichinella spiralis（T.spiralis）的同源性最高,分别为99.0%和99.1%,遗传距离最小,分别为0.005和0.014。采用UPGMA法构建的2个系统发生树,南丹分离株和T.spiralis具有高度同源性,位于同一分枝,与无囊包旋毛虫（T.papuae和T.zimbabwensis）分枝较远,后者独成一枝,与T.spiralis相比,2个基因均存在变异,且变异位点均为4个,分别占相应基因序列的1.19%和0.57%。2个基因均富含A和T碱基,A＋T含量分别占相应基因的61.8%和66.4%。COX1变异存在转换和颠换,但均发生在密码子第三位点。5SrRNA基因变异位点分散,但变异均为转换,无颠换。结论南丹旋毛虫分离株与T.spiralis具有高度的亲缘关系,其COX1和5SrRNA基因的碱基组成、变异位点及变异类型均具有偏好现象。     

染色体平衡易位携带者的SCE、Ag—NOR和Ag—AA分析

本文将3例染色体平衡易位携带者的SCE、Ag—NOR和Ag—AA与正常对照进行对比分析,提示平衡易位携带者的染色体稳定性较差,罗伯逊易位携带者丢失的rRNA基因可由其他近端着丝粒染色体上的rRNA基因活性来补偿,近端着丝粒染色体联合频率的增高可能与染色体不分离和易位的形成有关。     

两种甾体激素避孕药对用药妇女rRNA基因功能的影响

应用人类核仁形成区(NOR)选择性银染技术,对分别注射复方己酸孕酮注射剂和复方甲地孕酮微囊注射剂,以及正常对照妇女进行外周血淋巴细胞NOR的研究。结果注射组、自身对照组及正常对照组银染核仁形成区(Ag-NOR)的分布,在丹佛体制分组水平上呈随机分布。注射组与对照组的 Ag-NOR频率,以及自身对照组注射前后的Ag-NOR频率,均无显著差异,表明这两种药物对用药妇女外周血淋巴细胞有活性的rRNA基因数目没有影响。注射组和自身对照组注射后银染的近端着丝粒染色体联合(Ag-AA)频率,均比对照组和自身对照组注射前显著增高,表明这两种药物有增加用药妇女外周血淋巴细胞rRNA基因活性的作用。     

慢性胃溃疡癌变的初步探讨——附54例良、恶性胃溃疡临床病理分析

作者对54例良、恶性胃溃疡手术切除标本进行病理组织学比较观察。发现其中3例恶性胃溃疡与溃疡型胃癌有明显不同,而在溃疡组织结构上与慢性胃溃疡很相似,且癌多以早期的形式存在于溃疡边缘,溃疡底部存在一个无癌浸润、无肌残留的疤痕区。这类溃疡的存在从组织学上支持了慢性胃溃疡癌变的事实,但本组资料的癌变率较低,约为0.52％左右,提示慢性胃溃疡癌变在胃癌发病学上意义不大。     

经会阴前列腺穿刺组织的细菌16S rRNA基因检测

目的 探讨Ⅲ型前列腺炎(CPPS)的细菌学病因及16s rRNA基因检测对抗生素疗效的预测价值.方法 对112例CPPS患者(年龄20～48岁),经会阴前列腺穿刺取得皮下组织及前列腺组织,用聚合酶链反应法(PCR)检测细菌16S rRNA基因.加替沙星片治疗4周后随访,根据治疗前后慢性前列腺炎症状评分(NIH-cPsI)评定疗效.结果 18例病人因皮下组织中检测到细菌信号疑为污染而排除,94例完成研究.16S rRNA基因总阳性率63.8%(60/94),Ⅲ a型信号阳性率为68.3%(28/41),Ⅲb型60.3%(32/53).抗生素治疗后16S rRNA基因阳性组总有效率优于阴性组(55.0%比14.7%,P<0.001),在分组研究中,Ⅲa型和Ⅲb型阳性组有效率均优于阴性组(75%比23.1%,P<0.001;37.5%比9.5%,P<0.05).结论 部分CPPS与细菌感染有关,前列腺组织16SrRNA基因检测对抗生索治疗有指导意义.     

河南猪株旋毛虫分子鉴定

目的：通过分析河南猪株旋毛虫18SrRNA基因同源性序列,对旋毛虫进行分子鉴定及分类。方法：收集旋毛虫成虫,提取总RNA,反转录合成cDNA,经特异引物扩增获得18SrRNA基因片段,将此目的基因与pMD18-T载体进行连接,转化大肠杆菌感受态细胞。阳性克隆经酶切鉴定后进行序列测定及分析。结果：河南猪株旋毛虫与亲缘关系较近虫株Trichinellanativa（AY487254.1）的同源性达99%。结论：河南猪株旋毛虫归属于T.nativa。     

耐药大肠埃希菌氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分析

目的：了解耐药大肠埃希菌（drug-resistant Escherichia coli,DR-ECO）氨基糖苷类修饰酶和16S rRNA甲基化酶基因的分布,探讨该菌对氨基糖苷类药物耐药的分子机制。方法：采用PCR法检测20株DR-ECO中15种氨基糖苷类修饰酶基因和7种16S rRNA甲基化酶基因,并用PCR直接全自动荧光法对阳性产物进行测序。结果：20株DR-ECO中,18株检出氨基糖苷类修饰酶基因;其中,aac（3）-Ⅱ、aac（6＇）-Ⅰb、ant（3″）-Ⅰ、aadA4/5和aph（3＇）-Ⅰ的阳性检出率分别为25%、25%、5%、65%和55%;只有1株检出rmtB型16S rRNA甲基化酶基因,阳性率为5%,其余基因型均未测出。结论：本组DR-ECO对氨基糖苷类药物的耐药主要与aadA4/5和aph（3＇）-Ⅰ等氨基糖苷类修饰酶基因相关,而与16S rRNA甲基化酶基因无明显关系。     

TAXONOMIC STATUS OF CAR BACILLUS BASED ON THE SMALL SUBUNIT RIBOSOMAL RNA SEQUENCES

In an attempt to identify the taxonomic relationship between CAR bacillus and other bacteria, the SSU rRNA gene sequences of two CAR bacillus strains, CBM and CBR isolated from mice and rats respectively were used in the present studies. The SSU rRNA gene sequences, approximately 1.5 kb in size amplified from genomic DNAs from both strains, were determined and 96. 8% homologies were found to exist be-tween them. Those sequences were aligned to most euhacteria with a computer search showing high homol-ogy with those of Flavobacter/Flexibacter species especially closed to Fx. sanai and Ft. ferrugineum. Phylogenetic analysts indicated that CAR bacillus belongs to a species close to Fx. sancti and Ft. ferrug-imum subdivision.     

子宫颈蓝痣的病理学和免疫组织化学观察

目的 探讨宫颈蓝痣的临床病理特点及发生起源。方法 因子宫平滑肌瘤行子宫全切,其中9例宫颈管内有直径3～5mm黑褐色斑者,进行光学显微镜观察及免疫组织化学染色。结果 光镜下见宫颈管基质中分布有胞质,内含有褐色色素的细胞;Masson-Fontana法染色呈黑色,S-100蛋白和人类黑色素瘤相关抗原呈阳性表达。结论 宫颈蓝痣是一种发生在皮肤以外的少见色素性病变,推测痣细胞是由于神经嵴细胞迁移过程中的滞留并增生所致。     

青海部分牧区牦牛传统乳制品中优势乳酸菌的鉴定

目的本文旨在从青海牧区传统乳制品中分离牦牛乳优势乳酸菌,获得青海地区传统乳制品乳酸菌物种资源,构建青海地区乳酸菌种群系统发育树,鉴定其优势菌种属。方法从青海省玉树州、果洛州、黄南州等牧区采集传统乳制品,富聚培养、筛选分离乳酸菌,通过形态学特征和生理生化实验,并结合16S rRNA基因序列测定,进行系统进化分析。结果从12份样品中分离到乳酸菌纯菌种9株,发现来源于三种不同属菌株：嗜热乳酸链球菌属（5株）、粪肠球菌属（3株）、侧孢短芽孢杆菌属（1株）。结论玉树州、果洛州、黄南州等地区牦牛传统乳制品中嗜热乳酸链球菌（55.6%）为优势菌种,粪肠球菌属（33.3%）以及侧孢短芽孢杆菌属（11.1%）为次级菌种。     

DNA芯片快速检测淋球菌16SrRNA基因突变

目的探讨新研制的DNA芯片应用于快速检测淋球菌16S rRNA基因突变的临床应用价值。方法根据淋球菌16SrRNA基因的序列信息设计探针并制作DNA芯片,PCR扩增并荧光标记包含16S rRNA基因突变的目的 DNA片段,与芯片杂交,同时以测序法为对照。结果 87份泌尿生殖道拭子均可被DNA芯片检测,同时检测发现有1株淋球菌16S rRNA基因突变(2709 C→T),与测序结果一致。结论DNA芯片检测淋球菌16SrRNA基因突变具有快速、高特异性和高灵敏度,可以应用于对大观霉素的耐药性临床检测。     

尿源产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌中16S rRNA甲基化酶基因及菌株克隆测定

目的 了解16S rRNA甲基化酶基因在尿源产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs)肠杆菌科细菌中的分布及菌株序列型别,为临床用药提供依据。 方法 采用琼脂稀释法及PCR法对引起尿路感染的74株产ESBLs肠杆菌科细菌进行体外药敏、16S rRNA 甲基化酶基因检测与分型,MLST法进行溯源性序列分型研究。 结果 74株产ESBLs肠杆菌科细菌中93.4%耐庆大霉素、18.4%耐奈替米星、13.2%耐妥布霉素、仅5.3%耐阿米卡星与异帕米星。74株菌中22株（29.7%）检出16S rRNA甲基化酶基因,其中7株检出rmtB基因, 18株检出armA基因,3株同时检出rmtB和armA基因。22株16S rRNA甲基化酶基因阳性菌株对庆大霉素、奈替米星耐药率为100%,对妥布霉素者为59.1%,对阿米卡星及异帕米星者仅为18.2%。多位点序列分型显示19株甲基化酶基因阳性大肠埃希菌序列型为:12株为ST117,2株为ST2003,ST3843、ST915、ST844、ST2581、ST2922各1株;3株甲基化酶阳性肺炎克雷伯菌分为ST1184、ST490、ST337。 结论 大部分尿源性大肠埃希菌可能源于同一克隆。16S rRNA甲基化酶基因在尿源产ESBLs肠杆菌科细菌中分布广泛,与氨基糖苷类药物耐药有明显相关性。     

抗溴氰菊酯淡色库蚊RNA电泳图谱初步分析

采用酸性异硫氰胍－酚－氯仿－步法提取了抗溴氰菊酯淡色库蚊成虫ＲＮＡ。经琼脂糖凝胶电泳，该ＲＮＡ呈现５Ｓ、１８Ｓ和２５Ｓ三条主带。对２５ＳｒＲＮＡ进行了讨论。     

猫儿眼提取物对小鼠移植性肿瘤Hep、S180的作用及其病理学研究

目的观察猫儿眼提取物对小鼠移植瘤细胞Hep、S180的抑制作用及对小鼠免疫功能的影响。方法在模型组、5-Fu组、猫儿眼提取物组(E)和5-Fu E组小鼠右前肢腋皮下接种瘤中,分别注射Tween80溶液、5-Fu、猫儿眼提取物和猫儿眼提取物 5-Fu。结果用Hep、S180攻击后,治疗组小鼠血清溶血素生成值、小鼠碳粒廓清指数和抑瘤率与模型组有显著性差异(P<0.05)。病理学研究发现:三组均有坏死。治疗组的坏死面积均高于模型组(P<0.05)。结论中药猫儿眼对小鼠移植瘤Hep、S180有明显抑制作用。     

16SrRNA基因序列分析法鉴定病原细菌

目的：运用16SrRNA基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法：提取细菌DNA,采用通用引物PcR扩增16SrRNA基因片段并测序。将测序结果用Blastn在线软件在Nucleotide数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果：12种细菌可以鉴定到“种”,2种细菌可以鉴定到“属”。结论：16SrRNA基因序列分析是一种有效的病原细菌鉴定方法。     

高压实验室中空气间隙放电影响人类rRNA基因转录活性的研究

用银染方法探讨高压实验室中空气间隙放电对暴露人群的rRNA基因的转录活性的影响。结果发现,Ag-AA频率在两组人群中无显著差异(P>0.20);暴露人群的Ag-NOR频率高于非暴露人群(P<0.05),说明高压实验室中空气间隙放电可能是影响rRNA基因转录活性的因素。同时,发现Ag-AA频率与Ag-NOR频率之间无相关关系(r=0)。     

杜氏盐藻叶绿体16S rRNA基因的克隆

目的：克隆和鉴定杜氏盐藻叶绿体16Sr RNA基因。方法：根据衣藻、小球藻等绿藻叶绿体16Sr RNA基因序列,利用软件分析找出其高度保守区,据此设计引物,PCR扩增杜氏盐藻叶绿体16Sr RNA序列,并与莱茵衣藻、普通小球藻、绿肾藻和原始绿藻Mesostigma Vivide进行同源性比较。结果：序列分析表明所克隆的序列1110bp与莱茵衣藻、普通小球藻、绿肾藻和原始绿藻Mesostigma Vivjde 4种绿藻的序列同源性分别为85．0％、79.9％、81．3％和81．6％。结论：本实验中所克隆的序列为杜氏盐藻的叶绿体16S rRNA基因。     

16S rRNA基因序列分析法鉴定病原细菌

目的: 运用16S rRNA 基因序列分析法鉴定14种细菌,为该方法的临床应用奠定基础。方法: 提取细菌DNA,采用通用引物PCR扩增16S rRNA 基因片段并测序。将测序结果用Blastn 在线软件在Nucleotide 数据库中进行序列同源性比对,根据序列同源性鉴定病原细菌。结果: 12种细菌可以鉴定到“种”,2种细菌可以鉴定到“属”。 结论: 16S rRNA 基因序列分析是一种有效的病原细菌鉴定方法。