冠心病患者外周血晚期内皮祖细胞集落数量与功能的变化

目的探讨冠心病患者外周血晚期内皮祖细胞集落数量和功能的变化。方法入选研究对象54例,分成冠心病组(n=27)和对照组(n=27)。密度梯度离心法从外周血中获得单个核细胞,体外培养扩增21天后鉴定内皮祖细胞,计数晚期集落数量,分别用MTT比色法、改良的Boyden小室法和HFN培养板测定晚期内皮祖细胞的增殖、迁移和黏附功能。结果冠心病组内皮祖细胞晚期集落数量(2.5±1.2)与对照组(3.8±1.6)相比,明显减少(P<0.05);增殖、迁移和黏附能力与对照组比较(分别为0.324±0.024比0.433±0.064,9.9±2.5比13.9±4.1,21.3±5.1比31.0±7.1)显著降低(P<0.05)。结论冠心病患者晚期内皮祖细胞的数量减少,功能受损。     

冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和活性

目的研究冠心病患者外周血中内皮祖细胞的数量、形态和活性。方法选择冠心病患者57例和正常对照者30例,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞,将其接种在人纤维连接蛋白包被的培养板,用加入血管内皮生长因子165和碱性成纤维细胞生长因子的1640培养基培养细胞,并分析细胞形态和形成集落的数量,7d后贴壁细胞进行细胞分析和计数。用激光共聚焦显微镜鉴定FITC标记的荆豆凝集素和Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白,双染色阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞;用流式细胞仪检测细胞表面抗原CD34和KDR;采用MTT比色法检测细胞的生长状态。结果冠心病患者外周血内皮祖细胞数量较对照组明显减少(23.1±1.8个/200倍比56.7±2.4个/200倍,P<0.05),形成细胞集落数(14.7±2.5个/40倍比24.2±1.7个/40倍,P<0.05)、细胞增殖能力和生长曲线也明显降低。结论冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和活性明显降低。     

冠心病患者内皮祖细胞变化与冠状动脉病变的相关性

目的观察冠心病患者外周血中提取的内皮祖细胞的细胞形态、数量、集落数与正常对照组的区别。并研究冠心病患者冠状动脉狭窄的不同范围和程度与内皮祖细胞数量变化的相关性。方法选择冠心病患者57例和对照组30例,从外周血获取单个核细胞,体外培养后进行细胞分析和计数。并分析冠状动脉狭窄的不同范围和程度,患者内皮祖细胞数量和成集落数量的区别,并进行相关分析。结果 (1)冠心病患者外周血内皮祖细胞数量(23.1±1.8比56.7±2.4)和细胞集落数(14.7±2.5比24.2±1.7)较对照组明显减少;(2)随着冠状动脉狭窄范围的扩大和狭窄程度的加重,内皮祖细胞的数量和活性明显下降。结论冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量和成集落的数量明显降低;冠心病患者外周血内皮祖细胞的数量与冠状动脉病变的范围和狭窄程度呈负相关。     

急性心肌梗死患者外周血内皮祖细胞早晚期集落数目和功能的变化

目的:探讨急性心肌梗死(AMI)患者外周血内皮祖细胞早晚期集落数目及功能的变化。方法:我院心内科住院患者74例,分成3组:AMI组28例、稳定性心绞痛组(心绞痛组)26例、非冠心病组(对照组)20例。密度梯度离心法获得外周血单个核细胞(MNCs),EGM-2MV培养液培养扩增。第7天和21天后通过形态学、双荧光染色及细胞表面分子标志鉴定内皮祖细胞,分别计数早期、晚期内皮祖细胞集落数目,酶联免疫吸附法测定上清液中基质细胞衍生因子-1(SDF-1)浓度。采用二苯基四氮唑嗅盐(MTT)比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定观察内皮祖细胞的增殖、迁移和黏附能力。结果:AMI组早期内皮祖细胞集落数目显著高于心绞痛组和对照组(P0.01),但SDF-1水平显著低于心绞痛组(P0.05)和对照组(P0.01);心绞痛组早期内皮祖细胞集落数目和SDF-1水平显著低于对照组(P0.05或0.01)。AMI组晚期内皮祖细胞集落数目,增殖、迁移细胞和贴壁细胞显著低于心绞痛组(P0.05)和对照组(P0.01),心绞痛组显著低于对照组(P0.01)。结论:AMI患者急性期早期内皮祖细胞集落数目增加,但其分泌功能严重受损,晚期内皮祖细胞集落数目减少,增殖、迁移和黏附功能下降。     

人外周血、脐血、脂肪组织来源的内皮祖细胞部分生物学特性比较

目的研究人外周血、脐血和脂肪组织三种不同来源内皮祖细胞部分生物学特性异同,探讨其可能不同的适应范围和方式及方法,进而为提高内皮祖细胞的应用效率提供依据。方法采用密度梯度离心法分离人外周血、脐血单个核细胞,胰蛋白酶消化提取脂肪组织干细胞。所采集细胞诱导分化,观察细胞形态,对培养第7天的细胞进行鉴定。采用MTT法检测细胞增殖,Boyden小室检测细胞迁移能力,贴壁法检测细胞黏附功能以及血管生成试剂盒检测细胞体外成血管能力。结果诱导分化细胞均证实为内皮祖细胞。脐血源性内皮祖细胞增殖、迁移、黏附、成血管能力最强(P<0.05)。脂肪组织来源内皮祖细胞增殖与成血管能力方面较外周血来源内皮祖细胞强(P<0.05)。结论人脐血内皮祖细胞可能更适用于同种异体干细胞移植,脂肪组织来源内皮祖细胞可能在自体干细胞移植治疗缺血性疾病方面有潜在应用前景。     

AMD3100促进载脂蛋白E~(-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成

目的探讨AMD3100对载脂蛋白E-/-小鼠主动脉动脉粥样硬化斑块形成的影响及其可能机制。方法12只8周龄雄性载脂蛋白E-/-小鼠随机分为AMD3100组(2.5mg/kg,隔天注射)和对照组(PBS 0.1mL,隔天注射),高脂高胆固醇饲料喂养12周后,获取组织标本和骨髓细胞,石蜡切片HE染色检测小鼠主动脉根部动脉粥样硬化病变;通过计数典型内皮祖细胞克隆形成单位和观察次级集落单位的大小与细胞密度检测内皮祖细胞的克隆形成能力;逆转录聚合酶链反应和Western blotting检测内皮祖细胞CXCR4 mRNA和蛋白的表达。结果AMD3100组小鼠主动脉窦横切面粥样斑块面积与管腔面积之比与对照组比较增加了38.8%(37.2%±3.6%比26.8%±2.5%,P<0.05);AMD3100组小鼠骨髓源内皮祖细胞的克隆形成能力显著低于对照组(初级内皮祖细胞集落单位个数为9.67±2.16比21.83±2.64,次级内皮祖细胞集落单位个数为1.67±0.31比4.11±0.65,P<0.01);AMD3100组CXCR4 mRNA和蛋白的表达均显著低于对照组(P<0.01)。结论AMD3100促进载脂蛋白E-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成,可能与抑制骨髓源内皮祖细胞的克隆形成并下调CXCR4表达相关。     

冠心病患者内皮祖细胞tPA和PAI表达的变化

目的探讨冠心病患者外周血中内皮祖细胞(EPC)的变化及其组织型纤溶酶原激活物(tPA)和纤溶酶原激活剂抑制剂(PAI)的表达。方法选择冠心病患者57例和对照组30例,提取内皮祖细胞进行数量和细胞集落的比较。利用ELISA法和底物发光法检测EPC分泌tPA和PAI的浓度和活性;用RT-PCR法检测EPC的tPA和PAI mRNA表达。结果冠心病患者EPC数量较对照组明显减少(23.1±1.8比56.7±2.4,P<0.05),形成细胞集落数(14.7±2.5比24.2±1.7,P<0.05)、细胞增殖能力也明显降低,冠心病患者EPC的tPA表达较对照组下降,PAI表达增强。结论冠心病患者外周血EPC数量减少和功能障碍可能在疾病的发生发展中起作用。     

高胆固醇对内皮祖细胞数量和功能的影响

目的　观察高胆固醇血症患者外周血内皮祖细胞 (EPC)数量和功能的变化。方法选择高胆固醇血症患者和非高胆固醇血症患者各 2 0例 ,用密度梯度离心法从外周血获取单个核细胞 ,将其接种在人纤维连接蛋白包被培养板 ,培养 7d后贴壁细胞进行细胞化学分析。激光共聚焦显微镜鉴定FITC UEA Ⅰ和DiI acLDL双染色阳性细胞为正在分化的EPC。采用MTT比色法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察EPC的增殖、迁移和黏附能力。结果　高胆固醇血症患者外周血EPC数量明显减少 [(41 8± 8 7比 6 4 5± 16 6 )EPCs/× 2 0 0视野 ,P <0 0 5 ],且EPC数量与血总胆固醇水平 (r =- 0 6 5 9,P <0 0 0 1)和低密度脂蛋白胆固醇水平 (r =- 0 6 11,P <0 0 0 1)呈反向线性关系。高胆固醇血症患者EPC的增殖、迁移和黏附能力也明显受损。结论　高胆固醇患者外周血内皮祖细胞数量减少、功能减退。     

结肠癌患者外周血内皮祖细胞数量及其功能的变化

目的 观察结肠癌患者外周血内皮祖细胞(EPC)数量及其功能的变化.方法 选择结肠癌患者32例和对照组34例,密度梯度法分离人外周血中单个核细胞,分化培养14 d后,采用RT-PCR法检测内皮细胞特异性成分内皮源型一氧化氮合酶(ecNOS),胎肝激酶-1(Flk-1/KDR)的表达,采用Dil标记的乙酰化低密度脂蛋白(acLDL-Dil)和FITC-UEA-1对细胞染色分别鉴定贴壁细胞为EPC.采用集落形成试验、改良的Boyden小室及黏附能力测定EPCs的迁移和黏附能力.结果 结肠癌患者外周血EPC数量明显增多,黏附能力,迁移能力异常增高.结论 结肠癌患者EPC数量及活力均异常增高.     

脂蛋白（a）损伤小鼠骨髓源性内皮祖细胞的生物学功能

目的探讨脂蛋白(a)[Lp(a)]对小鼠骨髓源性内皮祖细胞的损伤作用。方法实验分为6组:对照组加等量含200μmol/L EDTA的全培养液,其余各组分别加1、10、100、300及600 mg/L的Lp(a)处理。贴壁法分离与培养内皮祖细胞,摄取ac-LDL和结合UEA-1鉴定内皮祖细胞,MTT法检测细胞存活,Transwell测定细胞迁移,明胶黏附法测定内皮祖细胞的黏附,Photshop 7.0计算血管长度。结果 Lp(a)呈剂量依赖性影响内皮祖细胞存活,100 mg/L时开始产生损伤效用,300 mg/L Lp(a)对内皮祖细胞的损伤作用最为显著。1 mg/L Lp(a)即能显著抑制内皮祖细胞的迁移,300 mg/L时其迁移细胞数约为对照组的1/14。1 mg/L Lp(a)可明显减少内皮祖细胞黏附细胞数目(145.2±8.4个/视野比115.2±12.6个/视野,P0.05,n=5),当Lp(a)的浓度达到300 mg/L时,内皮祖细胞黏附数目下降最显著,为对照组的约1/16。10 mg/L Lp(a)使血管形成能力明显受到抑制,当Lp(a)的浓度达到300 mg/L时,差不多已经见不到完整的血管样结构。经100 mg/L Lp(a)处理后,不但克隆数目明显减少(10.2±1.3比3.1±0.4,P0.01,n=5),而且克隆生长明显受到抑制。结论 Lp(a)呈浓度依赖性地损伤内皮祖细胞存活、迁移、黏附、血管形成能力和克隆形成能力。     

Changes in the liver weight in the elderly

To elucidate the effect of aging on liver weight in the elderly, 582 elderly cases (male 291, female 291), were selected from 2000 elderly autopsied cases on the basis of being free from pathological findings affecting liver weight. Both liver weight and its ratio to body weight decreased with age, and influenced by obesity; the former increased and the latter decreased in obese cases. Analysis according to the degree of obesity also showed decrease of liver weight and is ratio to body weight with age. Comparison between males and females of the same decade revealed the tendency that in females the liver weight was low, while liver weight.body weight ratio was high. The same results were obtained by analysis based on the degree of obesity.