细胞因子IL-1β和TNF-α在恶性脑瘤中 mRNA表达的变化及意义

目的:了解IL-1β和TNF-αmRNA在恶性脑瘤表达的变化及意义.方法:应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测36例脑胶质瘤及瘤旁组织、36例脑膜瘤及癌旁组织、20例术中切除标本的距瘤3cm组织中IL-1β和TNF-αmRNA表达.结果:脑胶质瘤、脑膜瘤组织中IL-1β和TNF-αmRNA表达均显著高于瘤旁组织(P＜0.01).距瘤3 cm以远组织中IL-1β和TNF-α mRNA表达显著低于脑胶质瘤、脑膜瘤组织;而脑胶质瘤、脑膜瘤瘤旁组织IL-1β和rNF-α mRNA表达与距癌3 cm以外组织相比差别无显著性意义(P＞0.05).结论:细胞因子IL-1β和TNF-α的变化可作为观察恶性脑瘤病情及监测反应的-种手段.     

脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β基因突变检测

目的:研究人脑胶质瘤组织中DNA聚合酶β基因(polβ)的突变情况。方法:应用RT-PCR及SSCP检测22例脑胶质瘤、4例脑膜瘤、3例垂体瘤及1例肺部转移性鳞癌标本中polβ的表达,利用DNASIS、OMIGA软件及Chou&Fasman算法对扩增产物进行序列分析及蛋白质二、三级结构分析。结果:脑胶质瘤组织中DNApolβ突变率为6/22,共8个突变位点,2例发生504位A→G(131位Lys→Glu)、748位A→G(212位His→Arg)突变,2者蛋白质二级结构亦明显改变;598位T→C(162位Val→Ala)突变2例,但2者蛋白质二级结构无明显改变;2例Ⅲ级星形细胞瘤分别有2个和3个突变位点,但其各有1个相应的氨基酸未发生变异。Ⅱ级以下脑胶质瘤及脑膜瘤、垂体瘤等良性脑肿瘤组织均未发现DNApolβ基因突变。1例肺癌脑部转移性鳞状细胞癌DNApolβ基因出现5个突变位点,737位A→C(208位Pro未变异)、744位T→G(211位Lue→Val)、830位C→G(239位Cys→Trp)、866位A→C(251位Pro未变异)、870位A→C(253位Arg未变异),但蛋白质二级结构未改变。蛋白质三维结构图显示脑胶质瘤组织中6个氨基酸变异位点中,5个位于掌部,1个位于拇指部。结论:脑胶质瘤细胞中存在DNApolβ基因突变,且这些突变位点均为DNApolβ基因(尤其是掌部)活化结构域。提示脑胶质瘤的发生和发展可能与DNApolβ基因突变有关。     

人脑胶质瘤中Apaf-1基因启动子区甲基化的研究

目的 探讨凋亡蛋白酶活化因子1(Aped-1)基因启动子区甲基化在脑胶质瘤中的表达及发生中的作用.方法 应用半定量RT-PCR和甲基化特异性PCR分析方法分析37例脑胶质瘤及9例瘤旁非肿瘤脑组织中Apaf-1基因表达及启动子区甲基化情况.结果 37例胶质瘤中23例Apaf-1 mRNA表达下调,而瘤旁脑组织未发现Apaf-1 mRNA表达明显下调或者上调;在Apaf-1基因表达明显下调的23例胶质瘤中15例出现甲基化,表达水平无明显下调的14例胶质瘤中仅4例出现甲基化,而瘤旁非肿瘤的9例脑组织中未检测到Apaf-1基因启动子甲基化.结论 Apaf-1基因与脑胶质瘤的发生、发展相关,启动子区甲基化是该基因失活的重要机制.     

MDM2、p53、SPIN1mRNA在口腔癌组织中的表达及其相关性研究

目的:研究口腔癌组织中MDM2、p53、SPIN1mRNA的表达,探讨其相关性及在肿瘤发生发展中的作用。方法:应用实时定量PCR(RT-PCR)对28例口腔癌及癌旁组织标本的MDM2、p53、SPIN1mRNA水平进行检测。结果:28例口腔癌及癌旁正常组织的MDM2、p53mRNA的表达水平差异显著,前者在口腔癌组织中表达较高(P<0.01),后者在口腔癌中的表达较低(P<0.05)。SPIN1mRNA在两种组织中的表达无明显差异。MDM2mRNA在口腔癌中的表达,随病理分化的提高的而增高(P<0.01,P<0.05)。p53、SPIN1mRNA的表达和肿瘤分化无关(P>0.05)。口腔癌组织中MDM2、p53、SPIN1mRNA表达无显著相关性(P>0.05)。结论:MDM2、p53基因在口腔癌发生发展中可能发挥重要作用。SPIN1基因在口腔癌的发生发展过程中可能不发挥主要作用。     

人脑胶质瘤中增殖细胞核抗原、p53、p21ras及EGFR蛋白的表达

目的:探讨人脑胶质瘤中多种基因蛋白的异常表达及意义。方法:应用免疫组化技术检测102例手术切除人脑胶质瘤组织标本中增殖细胞核抗原(PCNA)及p53,p21ras及EGFR蛋白的表达。胶质瘤组织PCNA标记指数(PCNALI)为556±155,p53,p21ras及EGFR蛋白的表达率分别为586%,523%,42%,均显著高于正常脑组织。PCNALI及EGFR蛋白表达与胶质瘤恶性程度相关(P<001),p53,p21ras及EGFR蛋白的表达与胶质瘤恶性程度无关(P>005)。胶质瘤中PCNALI与EGFR蛋白表达无明显相关(P>005),而与p53和p21ras表达相关(P<005)。结论:p53,p21ras和EGFR异常表达与胶质瘤的发生发展相关,PCNALI是评估增殖活性的良好指标。     

p33~（ING1b）和p53在胶质瘤中的表达及相关性研究

目的检测p33ING1b及p53基因蛋白在脑胶质瘤中的表达及相互关系。方法选取行脑胶质瘤手术切除的新鲜胶质瘤标本40例,应用S-P免疫组织化学方法检测p33ING1b和p53基因蛋白在瘤组织及10例正常组织中的表达,选用秩相关对结果进行分析。结果 40例胶质瘤标本中p33ING1b阳性表达率为77.5%（31/40）,正常组织中全部表达阳性（100%）;随着肿瘤级别的增高,p33ING1b表达水平下降。p53蛋白的阳性表达率为37.5%（15/40）,随着肿瘤级别的增高,p53表达水平也越高。p33ING1b与p53在胶质瘤中的蛋白表达水平呈负相关（r=-0.716,P〈0.01）。结论 p33ING1b与p53的表达存在相关性,可能是影响脑胶质瘤发生发展的重要因素。     

p33ING1b和p53在胶质瘤中的表达及相关性研究

目的检测p33ING1b及p53基因蛋白在脑胶质瘤中的表达及相互关系。方法选取行脑胶质瘤手术切除的新鲜胶质瘤标本40例,应用S-P免疫组织化学方法检测p33ING1b和p53基因蛋白在瘤组织及10例正常组织中的表达,选用秩相关对结果进行分析。结果 40例胶质瘤标本中p33ING1b阳性表达率为77.5%(31/40),正常组织中全部表达阳性(100%);随着肿瘤级别的增高,p33ING1b表达水平下降。p53蛋白的阳性表达率为37.5%(15/40),随着肿瘤级别的增高,p53表达水平也越高。p33ING1b与p53在胶质瘤中的蛋白表达水平呈负相关(r=-0.716,P<0.01)。结论 p33ING1b与p53的表达存在相关性,可能是影响脑胶质瘤发生发展的重要因素。     

PTEN基因在脑胶质瘤中的表达

目的探讨抑癌基因PTEN在脑胶质瘤组织中的表达情况及其临床意义。方法应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测45例胶质瘤组织与23例正常脑组织PTEN基因外显子1-9、5-8 mRNA表达情况。结果在45例脑胶质瘤组织中,外显子1-9 PTEN mRNA相对表达量为0.40±0.19,外显子5-8 PTEN mRNA相对表达量为0.38±0.16。在正常脑组织中,外显子1-9 PTEN mRNA相对表达量为0.58±0.21,外显子5-8 PTENmRNA相对表达量为0.64±0.17。脑胶质瘤组织和正常脑组织中PTEN mRNA表达水平有显著性差异(t=3.61、6.21,P<0.01)。PTEN mRNA的表达水平与病人性别、年龄无关(t或t′=0.18~0.70,P>0.05)。但随着临床分期的增高其表达水平明显降低(t或t′=4.16、4.69,P<0.01)。结论PTEN mRNA表达水平的异常在脑胶质瘤的发生和发展过程中起着重要作用。     

Aurora-B在胶质瘤中的表达及其意义

目的 探讨丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员Aurora-B在脑胶质细胞瘤中的表达及其意义.方法 常规提取41例胶质瘤及11例正常脑组织中总RNA.在总RNA被逆转录成cDNA后,利用实时荧光定量PCR比较Aurora-B基因mRNA在胶质瘤组织与正常脑组织中表达差异;随后利用免疫组化的方法验证Aurora-B蛋白在胶质瘤组织与正常脑组织之间的表达差异.结果 实时荧光定量PCR检测发现,在mRNA水平,Aurora-B基因的表达在胶质瘤组织中明显高于正常脑组织.免疫组化检测后发现,Aurora-B蛋白在胶质瘤组织细胞核内呈高表达,这与mRNA表达特征相一致.结论 Aurora-B基因mRNA和蛋白在胶质瘤组织中明显高表达,其可能是胶质瘤发病过程中的恶性标志物之一.     

p14ARF、p53蛋白与脑胶质瘤发生发展的相关性研究

目的探讨脑胶质瘤中p14ARF、p53蛋白表达与不同病理级别脑胶质瘤的相关性。方法应用免疫组织化学技术检测39例不同病理分级脑胶质瘤中p14ARF、p53蛋白表达,另8例正常脑组织作为正常对照。结果p14ARF、p53蛋白表达阳性率在低级别(Ⅰ级、Ⅱ级)分别为84.6%、61.5%,在高级别(Ⅲ级、Ⅳ级)脑胶质瘤中分别为38.5%、88.5%。p14ARF蛋白表达水平与脑胶质瘤病理分级之间呈显著负相关性(r=-0.512,P<0.01),p53蛋白表达水平与病理分级关系呈正相关性(r=0.447,P<0.01),p53与p14ARF的表达存在负相关性(P<0.05)。结论p14ARF、p53蛋白表达异常可导致细胞周期调控失常和细胞异常增殖,加速脑胶质瘤恶化,联合检测两者的协同表达可作为脑胶质瘤辅助诊断的参考指标。     

胶质瘤中NDRG2,PKC-α mRNA表达及相关性研究

目的:研究胶质瘤中蛋白激酶PKC-α mRNA表达与NDRG2 mRNA表达的相关性,寻找可能与NDRG2相互作用的上下游分子.方法:用实时定量PCR技术检测26例脑胶质瘤及相应瘤旁组织中NDRG2和PKC-α mRNA表达量.结果:26例脑胶质瘤NDRG2 mRNA表达低于瘤旁组织(0.95±0.16 vs1.54±0.18,P<0.05),PKC-α mRNA表达高于瘤旁组织(1.23±0.11 vs 0.97±0.18,P<0.05),且随胶质瘤恶性程度增高,NDRG2表达逐渐减少(P<0.05),PKC-α表达有逐渐增加的趋势.NDRG2与PKC-α表达无相关(P>0.05).结论:NDRG2,PKC-α可能与胶质瘤的发生发展及恶性演变有关,在mRNA表达水平,还不能认为NDRG2与PKC-α之间有相关性.     

Survivin mRNA和p53蛋白在肺癌组织中的表达

目的探讨survivin mRNA和p53蛋白在肺癌组织中的表达及二者的相关性。方法选取2012年1月至2013年1月黄冈市中心医院收治的肺癌患者90例,另选取同期良性肺疾病患者30例,采用聚合酶链式反应检测肺癌组织、癌旁组织及良性肺疾病组织中survivin mRNA的表达水平,采用免疫组织化学方法检测p53蛋白的表达,并分析其与患者临床病理特征及预后的关系,应用Pearson相关性分析分析survivin mRNA和p53表达的相关性。结果肺癌组织、癌旁组织和良性肺疾病组织中survivin mRNA阳性表达率分别为71.1%(64/90)、15.5%(14/90)、16.7%(5/30),肺癌组织中survivin mRNA阳性表达率显著高于癌旁组织和良性肺疾病组织(χ2=13.241、12.893,P<0.05),癌旁组织和良性肺疾病组织中survivin mRNA阳性表达率比较差异无统计学意义(χ2=1.141,P>0.05)。肺癌组织、癌旁组织和良性肺疾病组织中p53蛋白阳性表达率分别为58.9%(53/90)、7.8%(7/90)、6.7%(2/30),肺癌组织中p53蛋白阳性表达率显著高于癌旁组织和良性肺疾病组织(χ2=16.317、16.078,P<0.05),癌旁组织和良性肺疾病组织中p53蛋白阳性表达率比较差异无统计学意义(χ2=0.984,P>0.05)。肺癌组织中survivin mRNA和p53表达与患者的生存期、临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05),但与患者的性别、病理分型、年龄无关(P>0.05)。Pearson相关性分析显示,survivin mRNA与p53蛋白表达呈正相关(r=0.942,P<0.05)。结论肺癌组织中survivin mRNA和p53蛋白表达升高,survivin mRNA与患者预后有关,survivin mRNA与p53蛋白表达呈正相关。Survivin mRNA和p53可能参与了肺癌的发生和发展。     

脑胶质瘤瘤体及瘤周MRS、ADC值与p53的相关性研究

目的 探讨脑胶质瘤瘤体与瘤周水肿区的相关代谢物磁共振表观弥散系数(ADC)值及氢质子磁共振波谱(1H-MRS)物比值与p53基因突变表达的相关性及其应用价值。方法 2011年9月至2015年12月收集脑胶质瘤病人30例,术前均行常规MR扫描、1H-MRS及DWI扫描,术后对瘤体及瘤周组织进行p53基因突变表达的检测;对比分析瘤体及瘤周感兴趣区主要代谢产物N-乙酰天门冬氨酸(NAA)、胆碱(Cho)、肌酸(Cr)比值及ADC值与相应肿瘤组织p53基因突变表达的相关性。结果(1)胶质瘤瘤体及瘤周Cho/NAA比值与p53基因突变表达呈正相关(r=0.621,P=0.012;r=0.421,P=0.022);胶质瘤瘤体Cho/Cr比值与p53基因突变表达呈正相关(r=0.901,P=0.019);(2)胶质瘤瘤周水肿区Cho/Cr比值与p53基因突变表达不相关(P=0.431);瘤体及瘤周NAA/Cr比值与p53基因突变表达均不相关(P=0.912,P=0.742)。(3)胶质瘤瘤体ADC值与p53基因突变表达呈负相关(r=-0.792,P=0.014);瘤周ADC值与p53基因突变表达表达不相关(P=0.291)。结论 DWI检查及氢质子磁共振波谱(1H-MRS)检查均可以准确反应脑胶质瘤p53基因突变表达的情况,其中Cho/NAA比值的诊断价值最高,应用这些指标可以准确的评价胶质瘤恶性基因突变表达的生物学行为。     

脂肪细胞增强子结合蛋白1在胶质瘤中高表达及与患者预后的关系

目的:探讨脂肪细胞增强子结合蛋白1(AEBP1)在胶质瘤组织中的表达情况及其与胶质瘤患者预后的关系。方法:通过挖掘肿瘤基因组图谱数据库(TCGA)和中国脑胶质瘤基因谱数据库(CGGA)数据,分析AEBP1在胶质瘤组织及正常脑组织中的表达情况以及其表达差异与胶质瘤分级、IDH突变、1 p/19 q联合缺失的关系。通过实时定量PCR及Western blot分别检测临床胶质瘤标本及正常脑组织中AEBP1 mRNA及蛋白表达水平。利用GEPIA网站对TCGA生成的生存期数据进行分析,绘制无病生存曲线及总生存期曲线。结果:TCGA及CGGA数据库数据分析均显示AEBP1在胶质瘤组织中相对于正常脑组织高表达,且随着胶质瘤分级的增高表达也逐级增高。AEBP1在IDH野生型、非1 p/19 q联合缺失型中表达分别高于IDH突变型及1 p/19 q联合缺失型。临床标本同样证实AEBP1 mRNA及蛋白在胶质瘤中高表达。生存期分析显示AEBP1高表达患者无病生存期及总生存期均较短,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:AEBP1在胶质瘤组织中高表达并预示患者预后不良。     

RNA斑点印迹法检测人食管癌DNA聚合酶β的基因表达

目的 :探讨人食管癌组织DNA聚合酶 β(polβ)RNA水平的表达。 方法 :提取 5 1例食管癌患者的手术标本组织 ,包括 :17例癌灶组织 ,17例癌旁组织 ,17例“正常”组织细胞总RNA ,以生物素标记的polβcDNA探针进行RNA斑点印迹。结果 :DNApolβRNA水平的表达癌组织高于癌旁组织 (P <0 .0 5 ) ,癌旁组织高于“正常”组织 (P <0 .0 5 ) ,癌组织高于“正常”组织 (P <0 .0 1)。结论 :人食管癌组织及癌旁组织的DNApolβ基因RNA水平表达显著高于“正常”组织 ,提示DNApolβ的过表达可能在食管癌的发生、发展中起 作用。     

原位杂交方法检测人脑胶质瘤VEGF mRNA的表达

目的 :检测血管内皮细胞生长因子 ( VEGF)在胶质瘤及瘤周组织的基因表达 ,探讨其促进肿瘤血管生成及瘤周组织水肿的作用机制。方法 :采用原位杂交方法检测 2 3例人脑胶质瘤及瘤周组织和 7例正常脑组织中 VEGF的基因表达。结果 :VEGF在胶质瘤组织主要表达于毛细血管、血管内皮细胞及肿瘤细胞 ,瘤周组织表达于变异的星形胶质细胞 ,而正常脑组织几乎无表达。胶质瘤及瘤周组织的阳性细胞表达率显著高于正常脑组织 ( P<0 .0 0 1 ) ;胶质瘤组织中血管内皮细胞VEGF的阳性表达率高于瘤周组织 ( P<0 .0 1 ) ,而瘤周组织星形胶质细胞的阳性表达率高于肿瘤组织 ( P<0 .0 1 )。结论 :VEGF在脑胶质瘤及瘤周组织中的高表达与肿瘤血管生成及瘤周组织水肿的发生密切相关。     

脑胶质瘤中磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B以及同源磷酸酶-张力蛋白表达水平

目的 探讨PI3K、AKT、PTEN 在脑胶质瘤中的表达。方法 选择2017 年1~12 月在我院及华山医院手术治疗的脑胶质瘤患者66 例的病理标本进行分析,另选择50 例患者的正常脑组织病理标本为参照。应用免疫组化方法检测磷脂酰肌醇3-激酶、蛋白激酶B 及同源磷酸酶-张力蛋白表达,比较脑胶质瘤组织中以及正常脑组织中三者的表达水平,分析脑胶质瘤组织中三者阳性表达的相关性。结果 PI3K 及AKT 在正常脑组织的阳性表达率显著低于低级别脑胶质瘤及高级别脑胶质瘤,差异有统计学意义（P<0.05）;低级别脑胶质瘤显著低于高级别脑胶质瘤,差异有统计学意义（P<0.05）。正常脑组织PTEN 蛋白阳性率100.0%,显著高于低级别脑胶质瘤与高级别脑胶质瘤,差异有统计学意义（P<0.05）;低级别脑胶质瘤显著高于高级别脑胶质瘤,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 PI3K、AKT 在脑胶质瘤中呈高表达,PTEN 呈低表达,且与恶性程度有关。     

沙培林对U251胶质瘤细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的研究沙培林对脑胶质瘤细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法20只BALB／C裸小鼠皮下接种U251脑胶质瘤成功后随机分成4组,分别瘤周注射生理盐水0．2ml,沙培林0．2KE、0．4KE、0．8KE,共8次,解瘤实验。用免疫组化法检测Bcl-2、p53（突变型）、Bax、Fas及Bcl—xs基因的表达。结果由对照组至治疗组,且随用药剂量增加,Bcl-2及p53（突变型）表达的阳性率逐渐下降,而Bax、Fas及Bcl—xs表达的阳性率则逐渐增加。结论沙培林局部应用治疗脑胶质瘤,通过对多种基因的调控,促进瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤的生长。     

Twist、p53和E-cadherin联合检测在乳腺癌中的意义

目的观察乳腺癌中Twist、p53和E-cadherin mRNA的表达及其相互关系。方法选取2010年3月-2012年8月在医院初次就诊的乳腺癌30例均行改良根治乳腺癌标本,癌旁组织和10例同期乳腺良性病变的正常乳腺组织,分别运用RT-PCR的方法检测Twist、p53和E-cadherin mRNA的表达,与临床病理因素关系及其相互关系。结果乳腺癌的Twist mRNA表达与分化程度,淋巴管浸润和TNM分期呈明显的相关性(P<0.05),而与年龄、肿瘤直径、外膜浸润、雌激素受体和孕激素受体无明显的相关性(P>0.05)。乳腺癌组织中的Twist和p53的mRNA的表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显提高(P<0.01),而E-cadherin mRNA的表达较癌旁组织和正常乳腺组织明显降低(P<0.01),癌旁组织和正常乳腺组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。乳腺癌中的Twist mRNA表达与p53 mRNA呈正相关(r=0.526,P=0.004),而与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.500,P=0.000)。结论 Twist和p53在乳腺癌组织中呈高表达,而E-cadherin呈低表达。Twist可能通过上调p53的表达,同时下调E-cadherin的表达,从而促进乳腺癌的浸润、转移,并在其中起重要作用。