抗人AFP单克隆抗体丝裂霉素联结物对肝癌细胞的定位研究

将抗人甲胎蛋白单克隆抗体(AFP McAb)与丝裂霉素(MMC)交联制成免疫联结物,与产AFP的人肝癌细胞株Q_3及不产AFP的K_(562)细胞株作用,然后用羊抗鼠IgG荧光抗体进行定位染色,结果显示:Q_3细胞染色呈强阳性,且定位于细胞浆区域,而K_(562)细胞染色为阴性,这表明以抗体作为抗癌药的载体具有选择定位作用,为抗体导向化疗提供了细胞学上的证据。     

白细胞介素—2增强肿瘤坏死因子对人肝癌细胞的细胞毒作用

为了观察白细胞介素－２（ＩＬ－２）增强肿瘤坏死因子（γＴＮＦ）对人肝癌细胞的细胞毒作用，采用四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）光比色法测定ＩＬ－２，γＴＮＦ单用及ＩＬ－２与γＴＮＦ合用原发性肝癌细胞系Ｈ７４０２的细胞毒作用，结果表明：γＴＮＦ对Ｈ７４０２有直接抑制作用，最大抑制率为３５．２％，ＩＬ－２对Ｈ７４０２无直接细胞毒作用，但能明显增强γＴＮＦ对Ｈ７４０２的抑制作用，二者合用的最大抑制率达５１．６％，     

211At—抗胃癌单克隆抗体对人胃癌细胞DNA...

By means of nuclide precursor incorporation, the effects of 211At labelled monoclonal antibody against gastric cancer (211At-3H11McAb) on DNA, RNA and protein synthesis in gastric cancer cell were studied. The results show that 211At-3H11McAb and Na211At-3 inhibit 3H-TdR, 3H-UR and 3H-Leu incorporation, especially 3H-UR incorporation, into gastric cancer cell at 3.7 x 10(4)Bq and 1.85 x 10(5)Bq; the inhibiting rates depend on concentration. The DNA biosynthesis in gastric cancer cell gradually recover after the drug is removed, suggesting that the drug should exert an inhibiting action on DNA biosynthesis in tumor cell through interference of DNA metabolism.     

槲皮素对人肝癌细胞生长、迁移能力的影响及机制研究

目的探讨槲皮素对人肝癌细胞(HepG2)生长增殖及迁移能力的影响及机制。方法培养对数生长的HepG2细胞,MTT试验分析槲皮素对HepG2生长的影响,划痕实验观察加入槲皮素前、后HepG2迁徙能力的变化。Western blot检测其中细胞迁移黏附因子(IQGAP1)表达的变化。结果加入槲皮素后,HepG2细胞逐渐变圆、脱落,增殖变慢;MTT实验显示HepG2细胞的生长抑制效应与槲皮素有浓度、时间依存关系;Western blot显示加入槲皮素后HepG2细胞中IQGAP1表达明显降低。结论槲皮素能明显抑制HepG2细胞生长增殖,减弱其迁移能力,从而达到抑制恶性细胞增殖转移的作用,这种能力可能是通过抑制IQGAP1表达实现的。     

东北菱提取物对肝癌细胞的体内外抑制作用

目的：探索东北菱提取物对肝癌细胞体内外抑制作用。方法：采用³H-TdR掺入法分别测定东北菱醇提取物和水提取物对肝癌细胞的体外敏感性;对荷瘤小鼠进行体内实验,观察该提取物对肝癌细胞生长的抑制率。结果：体外实验当剂量达225.00 g•L^-1时,抑制率为75.49%;体内实验抑瘤率为60%以上。结论：东北菱不同溶剂提取物均具有抑制肝癌细胞的作用。     

应用消减免疫法制备抗肝癌单克隆抗体

1　材料和方法1.1　材料　 1实验动物 :BAL B/c雌性小鼠 8wk龄 ,体质量18～ 2 0 g,购自本校实验动物中心 ;2组织细胞 :正常成人新鲜肝组织 ,肝癌组织取自本校外科手术标本 ,部分组织以中性福尔马林固定 ,低温石蜡包埋切片 ,4℃保存备用 .Sp2 /0细胞 ,肝癌细胞株 SMMC- 772 1,HHCC,He PG2由本室保存 ;3主要试剂 :HT,HAT选择培养基 RPMI16 40培养基购自Sigma公司 ,环磷酰胺注射液系连云港德瑞制药有限公司产品 ,Envision购自美国 DAKO公司 .1.2　方法　 1正常成人肝组织于 2 0 0目镍网中研磨后 ,无菌生理盐水悬浮制成肝细胞悬液 …     

绿芦笋对体外人肝癌细胞生长的影响

在体外培养人肝癌细胞（ＢＥＬ－７４０２）过程中，加入自制的绿芦笋原汁和绿芦笋乙醇提取液，同时选用５－氟脲嘧啶和三尖杉酯碱作为阳性药物，观察对细胞生长的抑制作用。每天每组取３瓶细胞进行活细胞计数，连续１０ｄ并绘制生长曲线，结果表明，低浓度的绿芦笋原汁和绿芦笋乙醇提取液（２０ｍｇ／ｍｌ）能显著抑制肝癌细胞的生长。     

蝎毒与丝裂霉素联合应用对人肝癌细胞生长的影响

目的:研究蝎毒(BMK)与丝裂霉素(MMC)联合应用对人肝癌细胞体外生长的抑制作用。方法:应用MTT法检测先予BMK后加MMC和先予MMC后加BMK作用后对人肝癌细胞株BEL7404的生长抑制作用。结果:在细胞培养体系中,在给予MMC之前或以后加入一定剂量的BMK,可加强MMC的抑制作用,和BMK、MMC单纯作用相比,其对癌细胞的毒性作用更加显著(P<0.05)。结论:BMK与抗癌药MMC有协同抑制效应,有可能成为肿癌治疗的辅助药物。     

双特异单克隆抗体介导的人单核—巨噬细胞对肝癌细胞的杀伤作用

证实双特异性单克隆抗体在肝癌导向治疗，尤其是细胞免疫治疗方面的作用。方法：用化学交联剂ＳＰＤＰ将抗肝癌单克隆抗体ＨＡｂ１８与抗单核－巨噬细胞单克隆抗体ＭＡｂ７联结成双特异抗体ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７，用流式细胞仪证实其双特异性；软琼脂培养法证明其对肝癌细胞的导向杀伤作用。结果ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７具有特异性地结合肝癌细胞及单核－巨噬细胞的双重特性。软琼脂培养结果表明：ＨＡｂ１８－ＭＡｂ７实验组较对照组克     

单克隆抗体（HI30）—丝裂霉素免疫偶合物的研究

用Dextran T-40的氧化产物葡聚糖多聚醛(polyaldehyde,PAD)作为中间载体,将鼠抗人T淋巴细胞表面分化抗原的单克隆抗体HI_(30)与抗癌药丝裂霉素(mitomgcin C,MMC)形成共价连接,制备HI_(30)-PAD-MMC免疫偶合物。偶合物的特异性毒性依赖于单克隆抗体(单抗)和靶细胞表面抗原位点的结合。偶合物基本上保持原有的抗体结合活性及药物细胞毒,并具有良好的稳定性。     

抗人肝癌细胞单克隆抗体的研制及鉴定

利用杂交瘤技术,以人肝癌细胞株HC_(108)免疫Balb/c小鼠,4周后取其脾与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0融合,经细胞抗原ELISA和间接酶桥法筛选,获得一株能稳定分泌抗人肝癌单克隆抗体的杂交瘤株,其染色体众数为96～110个,DNA指数为3.0。此单抗为IgM型,轻链为k链。免疫组化证实此单抗与2例胚胎肝脏组织、胚胎结肠组织呈现较弱的阳性反应;除与3例宫颈癌细胞有很弱的着色反应外,与5例肝癌组织和肝癌细胞株均呈明确的阳性反应,而与其他肿瘤细胞,胚胎组织,正常成人肝脏、心脏、肾脏、肺脏、结肠、胰腺等均未见反应。琼脂糖免疫双扩散和单抗吸收试验证实此肿瘤抗原与甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、铁蛋白(Ferritin)、癌糖蛋白(CA_(19-9))无免疫相关性。免疫酶电镜染色显示此肝癌相关抗原定位于细胞膜,Western Blot显示其分子量为38kD。是一株特异性良好,阳性反应率较高的抗人肝癌单克隆抗体。     

菝葜体外抗肝癌细胞活性物质筛选

〔目的〕筛选菝葜抗肝癌细胞的活性物质,为临床应用菝葜辅助治疗肝癌提供实验依据。〔方法〕采用不同工艺制备菝葜提取物,将菝葜提取分离为乙醇粗提物、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位,利用MTT法检测4种物质部位对肝癌细胞H22、Hep G-2、BEL-7402的体外生长抑制。〔结果〕从菝葜分离提取的4种物质部位均有不同程度抗肝癌细胞活性,其中乙酸乙酯部位抗肝癌细胞增殖活性最强,并在浓度范围内呈现良好的量效关系。〔结论〕乙酸乙酯部位为菝葜主要抗肝癌细胞活性物质。     

苯乙酸对肝癌细胞的抑制作用及其机制

目的：阐明苯乙酸(PA)对肝癌细胞系SSMC-7721细胞增殖的抑制作用及部分作用机制,探讨PA用于肝癌治疗的可行性。方法：以0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol·L^-1浓度的PA作用于对数生长期的肝癌细胞系SSMC-7721细胞,检测上述各浓度时PA在24、48和72 h对SSMC-7721细胞的抑制率。应用噻唑蓝(MTT)比色法,以0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol·L^-1的PA作用于SSMC-7721细胞,分别于24、48、72 h 对细胞增殖抑制率进行检测;流式细胞术检测2.00 mmol·L^-1PA作用36 h后的SSMC-7721细胞周期各时相的变化;使用透射电镜观察经2.00 mmol·L-1PA作用36 h后的SSMC-7721细胞超微结构的改变;用Caspase-3活性检测试剂盒检测经过和不经过PA作用的SSMC-7721细胞中Caspase-3活性的差异。结果：0.25、0.50、1.00、2.00和4.00 mmol·L^-1的PA均可以抑制SSMC-7721细胞生长,随着浓度递增24 h 细胞增殖抑制率为7.2%～73.1%,48 h 为9.1%～87.5%,72 h 为15.8%～91.9%,随PA浓度增加和作用时间延长,抑制率逐渐增加,2.00 mmol·L-1 PA 为最佳实验浓度;PA可使SSMC-7721细胞的G0/G1期和G2/M期细胞比例增加;PA可通过Caspase-3途径诱发SSMC-7721细胞凋亡,电镜下可观察到凋亡的特征性变化。结论：PA可有效抑制肝癌SSMC-7721 细胞的增殖,诱发细胞凋亡,Caspase-3活化是参与机制之一。     

三氧化二砷对肝癌细胞株的体外抑制作用

目的研究三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞株HepG2,BEL-7402的抑制作用。方法用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测用As2O3对肝癌细胞株HepG2,BEL-7402生长及抑制率的影响;凋亡电泳检测电泳条带,流式细胞仪(FCM)分析细胞周期和凋亡率变化。结果在0.1~50.0μmol/L的浓度范围内As2O3对BEL-7402、HepG2细胞的生长均有明显的抑制作用,且有时间和浓度的依赖性;凋亡电泳显示5μmol/L As2O3对肝癌细胞株HepG2,BEL-7402凋亡率分别是46.7%和53.1%;流式细胞仪DNA组方图上可见细胞G1前期出现亚二倍峰。结论As2O3可抑制肝癌细胞株HepG2,BEL-7402的生长,且在一定的范围内,抑制率具有一定的浓度和时间依赖性;As2O3对BEL-7402细胞株的生长抑制作用大于HepG2;As2O3抑制肝癌细胞株HepG2,BEL-7402生长的作用与细胞凋亡有关。