雷公藤甲素叶酸靶向纳米胶束的制备及其体外抗炎作用研究

目的 制备雷公藤甲素叶酸靶向纳米胶束（TP@PCL-PEG-FA）,并研究其体外抗炎效果。方法 采用薄膜水化法制备TP@PCL-PEG-FA胶束,对粒径和电位进行表征,观察其形态特征,采用超滤法测定包封率和载药量,同时考察药物的体外释放。观察胶束的摄取效率,考察体外抗炎作用。结果 TP@PCL-PEG-FA胶束的平均粒径为（34.1±5.1）nm,Zeta电位为（-10.1±2.2）m V,呈类球形,粒径分布均一。包封率为（85.7±5.8）%,载药量为（1.8±0.5）%。TP@PCL-PEGFA胶束均能够相对缓慢释放药物,具有缓释效果。与普通非靶向PCL-PEG胶束相比,PCL-PEG-FA胶束在脂多糖刺激的RAW 264.7细胞中的摄取效率明显提高,TP@PCL-PEG-FA胶束有更强的体外抗炎效率。结论 制备了雷公藤甲素的叶酸靶向的TP@PCL-PEG-FA胶束,具有更好的体外靶向抗炎作用,为雷公藤甲素的纳米递药系统提供了一种新策略和新思路。     

色胺酮纳米胶束的制备及其性质研究

目的制备色胺酮纳米胶束,改善色胺酮的水溶性,并进行体外性质考察。方法以二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-PEG2000)为载体,用溶剂挥发法制备色胺酮纳米胶束,通过正交实验筛选制备胶束的最佳条件,核磁共振氢谱(1 HNMR)验证色胺酮包载于纳米胶束,用芘荧光探针法测定其临界胶束浓度(CMC),用紫外分光光度计测定其包封率和载药率,动态光散射法测定胶束的粒径,以粒径、外观形态和包封率为指标考察胶束的稳定性。结果色胺酮纳米胶束的CMC为8.93×10-6mol·L~(-1),色胺酮与聚合物投药比为0.442 9∶1(mol∶mol),真空干燥1h,水化5min时,胶束的包封率为32.24%±1.37%,载药率为5.468%±0.39%。色胺酮纳米胶束平均粒径为112.5nm,平均分散系数为0.208,4℃条件下胶束可稳定15d以上。结论制备色胺酮纳米胶束,将色胺酮的溶解度提高至1.625mmol·L~(-1),为改善色胺酮生物利用度的研究奠定了基础。     

叶酸修饰多柔比星聚合物胶束的制备及体外抗肿瘤活性评价

合成了叶酸-聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(Folate-PEG-DSPE),并用其作为靶向肿瘤的功能性材料,以甲氧基聚乙二醇-二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(MPEG-DSPE)作为骨架材料,采用成膜水化法制备载多柔比星(1)胶束。所得胶束呈球状结构,粒径为(20±5)nm,叶酸修饰和非叶酸修饰胶束的包封率和载药量分别为(78.8±1.52)%、(79.2±147)%和(1 3.6±1.26)%、(1 3.9±1.19)%。流式细胞结果显示,分别给予游离罗丹明B(Rh B)、叶酸修饰和非叶酸修饰的载RhB胶束,摄取荧光的巨噬细胞分别占细胞总数的36.6%、1.5%和4.4%,说明聚合物胶束可显著减弱巨噬细胞的吞噬作用。体外抗KB人口腔上皮癌细胞活性的试验结果显示,1、叶酸修饰和非叶酸修饰胶束的IC_(50)分别为29 7、0.61和4.12μmol/L,表明叶酸修饰的聚合物胶束能显著提高1的抗肿瘤活性。     

载多西紫杉醇的F3多肽靶向单分子胶束的制备和体外评价

目的：制备载多西紫杉醇的F3多肽靶向单分子胶束（DTX/PAMAM-PLA-PEG-F3）,并对其进行体外评价。方法：所制备的单分子胶束采用动态光散射仪和透射电镜测定其粒径分布和形态;采用高效液相色谱法测定单分子胶束的载药量和评估其体外释药特性;采用MTT法考察单分子胶束的抗肿瘤活性;采用流式细胞仪和共聚焦显微镜探究细胞摄取胶束机制。结果：制备的单分子胶束呈球形,平均粒径（32.0±5.8） nm,载药量（12.4±1.3）wt.%;体外释药研究表明制备的单分子胶束具有pH响应性;与非靶向胶束组相比,靶向胶束组的对乳腺癌MDA-MB-231细胞的细胞毒性更高,细胞摄取效率加强,靶向配体F3多肽可介导肿瘤细胞特异性摄取靶向单分子胶束。结论：DTX/PAMAM-PLA-PEG-F3作为纳米药物载体在提高抗肿瘤疗效方面具有广阔的应用前景。     

PEG-I-dC16 酸敏释药胶束的制备与体外评价

目的构建聚乙二醇-亚胺键-棕榈酸酯(PEG-I-d C16)酸敏释药纳米胶束,并考察载阿霉素胶束在体外的抗肿瘤活性及药物被细胞摄取的情况。方法通过透析法制备载阿霉素胶束,采用紫外法测定胶束的载药量和包封率,并用粒度仪测定其粒径和Zeta电位。进一步采用MTT法测定其体外抗肿瘤活性,用流式细胞仪测定其细胞摄取量,并用激光共聚焦观察细胞核内的药物蓄积量。结果分子量为2000的PEG胶束的载药量和包封率分别为(12.7±1.1)%和(49.8±2.2)%,平均粒径为(72.3±2.5)nm。酸敏释药胶束的细胞药物摄取量与细胞毒性均高于非酸敏释药胶束,且在细胞核的药物蓄积量也比非酸敏胶束高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 PEG-I-d C16酸敏释药胶束可增加细胞或细胞核对阿霉素的摄取量,提高其体外抗肿瘤效果,为开发肿瘤靶向给药系统提供了研究基础。     

脑靶向多柔比星胶束的制备及体外性质研究

目的:制备脑靶向多柔比星胶束,并评价其体外理化性质。方法:合成葡萄糖修饰的泊洛沙姆P105衍生物(葡萄糖-泊洛沙姆P105),考察其氢核磁共振(1H-NMR)图谱,计算葡萄糖的偶联率。用透析法以葡萄糖-泊洛沙姆P105制备脑靶向多柔比星胶束,用单因素法考察处方中多柔比星的投药量、二甲基亚砜(DMSO)与水相的比例对胶束包封率和载药量的影响;考察所制胶束的粒径、Zeta电位、形貌、体外释药情况;以星型胶质细胞和小鼠脑微血管内皮(BMVECs)细胞模拟体外血脑屏障(BBB),比较多柔比星水溶液、多柔比星普通胶束、多柔比星胶束透过BBB的转运率。结果:合成的葡萄糖-泊洛沙姆P105的葡萄糖偶联率为88.7%。随着多柔比星投药量和DMSO有机相比例的增加,包封率和载药量均呈先升高后降低的趋势,其中多柔比星为7 mg、DMSO与水相的体积比为0.10∶1时包封率和载药量最好;所制胶束的平均粒径为(26.7±5.4)nm,Zeta电位为(-6.48±0.64)m V,透射电镜照片显示呈球状;体外释药动力学符合Weibull方程;多柔比星胶束的BBB转运率明显高于多柔比星普通胶束。结论:成功制得具有脑靶向功能的多柔比星胶束。     

阿霉素共聚物胶束的制备及体外性质研究

目的制备阿霉素共聚物胶束并研究其体外性质。方法采用开环聚合法合成聚乙二醇单甲醚-聚乳酸羟基乙酸（mPEG—PLGA）嵌段共聚物;用透析法、溶剂蒸发法制备空白及载阿霉素胶束;动态光散射仪（DLS）测定其粒径分布;采用紫外分光光度法测定胶束的包封率和载药量。通过体外释药实验研究了载阿霉素胶束的释药特性。结果采用透析法制备载阿霉素胶束大小均匀,平均粒径为（91．1±15．8）nm;药物胶束的包封率为85．2％,载药量为10．4％;与市售阿霉素注射剂相比,载阿霉素胶束具有良好的缓释性能。结论共聚物胶束可作为疏水性药物阿霉素的载体。     

阿霉素温度/pH双敏型自组装嵌段共聚物胶束的制备

本文用透析法制备了新型温度/pH双敏自组装嵌段共聚物聚组氨酸-聚乳酸羟基乙酸-聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸-聚组氨酸 (OLH-b-PLGA-b-PEG-b-PLGA-b-OLH) 胶束, 采用荧光探针技术测定其不同温度下临界胶束浓度 (CMC); 用透析法测定共聚物胶束的包封率和载药量; 对胶束的粒径、形态和表面电位进行考察, 并对阿霉素胶束的体外释药和pH敏感性进行了研究。CMC介于0.022 4～0.001 7 μg·mL⁻¹, 胶束包封率为92.8%, 载药量为15.7%; 载药胶束粒径为 (61.7 ± 13.4) nm, zeta电位为−9.88 mV; 阿霉素的体外释药速率随pH降低 (pH 7.4～5.0) 而增加。结果表明, 胶束的CMC随温度升高而降低, 体外释药具有明显的pH敏感性, 该载体材料作为抗肿瘤药物的靶向传递系统具有较好的应用前景。     

姜黄素聚合物胶束的制备及抗肿瘤活性评价

目的:制备姜黄素的维生素E聚乙二醇琥珀酸酯(TPGS)聚合物胶束,从而改善姜黄素的水溶性和抗肿瘤活性。方法:以TPGS为载体材料,采用薄膜水化法制备姜黄素胶束;以包封率和粒径为指标,考察水化温度、水化时间、药载比和水化体积的影响;以包封率、粒径、载药量为指标,经四因素三水平正交试验,确定姜黄素/TPGS胶束的最佳制备工艺;考察姜黄素/TPGS胶束的体外释放度;利用MTT法测试姜黄素/TPGS的体外抗肿瘤活性。结果:姜黄素/TPGS胶束的最佳药载比为1∶40,水化温度为60℃,水化时间为30 min,水化体积为6 mL;所得胶束平均粒径为11.02 nm, Zeta电位为-11.31,载药量为2.65%,包封率为96.20%;姜黄素/TPGS 48 h体外累积释放率为78%,具有一定的缓释性;MTT法表明,姜黄素/TPGS具有良好的抗肿瘤活性。结论:该文采用薄膜水化法制备了一种稳定的姜黄素/TPGS胶束,改善了姜黄素的水溶性,明显提高了其抗肿瘤效果。     

阿霉素-五味子乙素pH敏感聚合物胶束的制备与制剂学性质

目的以p H敏感聚合物聚乙二醇-聚乳酸-聚组氨酸[poly(ethyleneglyco1)-poly(D,L-lactide)-poly(L-histidine),m PEG-PLA-PHis]胶束为载体,联合包载抗肿瘤药物阿霉素与多药耐药逆转剂五味子乙素制备聚合物胶束,并对其制剂学性质进行研究。方法采用薄膜分散法制备阿霉素-五味子乙素p H敏感聚合物胶束,以包封率、载药量和稳定性(载药胶束24 h的包封率和载药量变化)为评价指标,采用单因素试验及Box-Behnken效应面法筛选最优处方;应用透射电子显微镜观察载药胶束的外观形态,动态光散射法测定载药胶束的粒径及zeta电位;透析法考察载药胶束在不同p H条件下的释药行为。结果制备的阿霉素-五味子乙素p H敏感聚合物胶束平均粒径为64.73 nm,zeta电位为-8.7 m V。最优处方中阿霉素包封率为95.3%,载药量为8.7%,五味子乙素包封率为76.1%,载药量为3.4%,载药胶束稳定性较好。体外释放结果表明,所制备的阿霉素-五味子乙素p H敏感聚合物胶束在弱酸性条件下,药物释放速率明显加快。结论采用星点设计-效应面法优化处方与制备工艺,所制备的阿霉素-五味子乙素p H敏感聚合物胶束粒径分布均匀,包封率和载药量良好,具有明显的p H响应行为。     

姜黄素醇质体的制备及其质量评价

目的:制备姜黄素醇质体,并考察其理化性质.方法:采用乙醇注入法制备姜黄素醇质体,以包封率为考察指标,采用正交试验法优选处方,并用透射电镜观察其形态,激光粒度仪测定粒径和Zeta电位,以超速离心法分离含药醇质体与游离药物,用HPLC法测定姜黄素醇质体的包封率.结果:优选处方为:姜黄素10 mg、蛋黄卵磷脂350 mg、胆固醇50 mg、乙醇百分浓度25%.实验所制醇质体纳米粒子为类球形囊泡结构,粒径为(210.8±2.0)nm,Zeta电位为(-3.49±0.27)mV,粒径分布均匀,多分散指数(PDI)为(0.144±0.006),以优选后处方制备醇质体,其包封率为(85.55±2.12)%.结论:乙醇注入法适用于姜黄素醇质体的制备,所制醇质体纳米粒子各项物理指标稳定,可用于经皮渗透给药的研究.     

Transferrin receptor-targeted vitamin E TPGS micelles for brain cancer therapy: preparation,characterization and brain distribution in rats

Abstract

The effective treatment of brain cancer is hindered by the poor transport across the blood–brain barrier (BBB) and the low penetration across the blood–tumor barrier (BTB). The objective of this work was to formulate transferrin-conjugated docetaxel (DTX)-loaded d-alpha-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate (vitamin E TPGS or TPGS) micelles for targeted brain cancer therapy. The micelles with and without transferrin conjugation were prepared by the solvent casting method and characterized for their particle size, polydispersity, drug encapsulation efficiency, drug loading, in vitro release study and brain distribution study. Particle sizes of prepared micelles were determined at 25?°C by dynamic light scattering technique. The external surface morphology was determined by transmission electron microscopy analysis and atomic force microscopy. The encapsulation efficiency was determined by spectrophotometery. In vitro release studies of micelles and control formulations were carried out by dialysis bag diffusion method. The particle sizes of the non-targeted and targeted micelles were <20?nm. About 85% of drug encapsulation efficiency was achieved with micelles. The drug release from transferrin-conjugated micelles was sustained for >24?h with 50% of drug release. The in vivo results indicated that transferrin-targeted TPGS micelles could be a promising carrier for brain targeting due to nano-sized drug delivery, solubility enhancement and permeability which provided an improved and prolonged brain targeting of DTX in comparison to the non-targeted micelles and marketed formulation.     

环孢素A混合胶束的制备与理化性质考察

目的制备环孢素A混合胶束并对其理化性质进行研究。方法通过正交设计筛选环孢素A混合胶束的最佳处方,并考察其形态、粒径、Zeta电位、载药量、包封率和体外释放情况。结果最佳处方为环孢素A与磷脂的质量比为1∶7、胆固醇硫酸酯钠与磷脂的质量比为1∶4、水合介质为双蒸水,由此制备出的胶束呈球形,平均粒径为(139.2±2.3)nm,Zeta电位为(-25.3±0.56)mV,胶束的载药量达(6.04±0.04)g/L,包封率为(94.5±0.46)%,24 h内体外累积释放(33.1±2.7)%。结论用优化处方制备的环孢素A混合胶束,其稳定性和分散性良好,具有一定缓释作用。     

甘草次酸长循环固体脂质纳米粒的制备与体外性能研究

目的:制备甘草次酸长循环固体脂质纳米粒(GA-LSLN),并对其体外性能进行考察。方法:采用乳化溶剂挥发-高压匀质法制备GA-LSLN,测定其粒径、Zeta电位、包封率和载药量,并对其体外释药进行研究;同时以地塞米松(DEXA)、游离甘草次酸(GA)和GA-LSLN作用于肝癌细胞SK-Hep-1和急性髓细胞白血病细胞MV4-11,采用MTT法考察细胞毒性。结果:GA-LSLN的平均粒径为130.1nm,Zeta电位为-36.2mV,包封率为94.6%,载药量为11.3%,其体外释放规律符合一级速率过程。DEXA、GA和GA-LSLN对SK-Hep-1细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为(199±10)、(32±7)、(141±5)μmol.L-1,对MV4-11的IC50分别为(25±3)、(20±5)、(63±4)μmol.L-1。结论:制备的GA-LSLN粒径、包封率和载药量均较理想,药物能达到缓释的作用,GA和GA-LSLN对肝癌细胞和白血病细胞均有较强的细胞毒性。     

大黄素传递体的制备和质量评价研究

目的 制备大黄素传递体,并建立其有关质量评价标准.方法 采用薄膜超声法制备大黄素传递体,以包封率为考察指标,通过单因素考察和正交实验设计优选最佳处方和工艺;采用Zetasizer电位及纳米粒度分析仪测定其Zeta电位并分析其大小,用紫外分光光度法测定药物的包封率等.结果 大黄素传递体最佳制备配方为去氧胆酸钠与磷脂比为1∶8,胆固醇与磷脂比为1∶3,维生素E与磷脂比为1∶20,大黄素与磷脂比为1∶6.所得大黄素传递体Zeta电位-15.11 mV,平均粒径为292.2 nm,球形圆整,大小均匀.在检测波长为435 nm处的吸光度(A)与药物浓度[C,(g/L)]的标准曲线方程为A=50.485C -0.0913(R2=0.9991),测得平均包封率为(69.35 ±0.25)％.结论 该传递体制备处方精确合理、工艺简单可行,所得传递体带负电,粒径较小且分布均匀,包封率高且稳定性好.     

载吉西他滨介孔二氧化硅纳米粒的制备及其抗肿瘤活性评价

目的：制备载吉西他滨(gemcitabine,GemC)的介孔二氧化硅纳米粒(MSN),并对其体内外抗肿瘤活性进行评价。方法：采用聚合法制备了GemC-MSN,采用激光粒度仪测定了纳米粒的粒度分布和电位,并通过透射电镜对纳米粒的形态进行了表征。应用紫外可见分光光度法评价了纳米粒的载药量、包封率及体外释放特性。采用MTT染色法,考察了GemC-MSN对A549细胞的体外细胞毒性。建立了体内肿瘤动物模型,评价纳米粒的体内抗肿瘤活性。结果：纳米粒分布均一,平均粒径为107.29 nm,PDI为0. 167,Zeta电位为0.107mV;药物的载药量和包封率分别为(37.31±1.25)%和(87.37±2.12)%;体外释放结果显示,纳米粒具有一定的缓释作用,96h时释放达到平衡;体内外抗肿瘤试验结果表明,GemC-MSN较游离GemC具有更强的抗肿瘤活性。结论：MSN作为药物的新型载体,具有良好的生物相容性,并能显著提高GemC的载药量,控制药物的缓慢释放,能显著提高GemC的体内外抗肿瘤活性,将为GemC新型给药系统的深入研究提供参考。     

Enhancement of the stability of BCNU using self-emulsifying drug delivery systems (SEDDS) and in vitro antitumor activity of self-emulsified BCNU-loaded PLGA wafer

The main purpose of this study was to develop self-emulsifying drug delivery systems (SEDDS) for the improvement of the stability of 1,3-bis(2-chloroethyl)-1-nitrosourea (BCNU) after released from poly (D,L-lactide-co-glycolide) (PLGA) wafer and to evaluate its in vitro antitumor activity against 9L gliosarcoma cells. The in vitro stability test of BCNU was characterized by the BCNU amount in phosphate buffered saline (PBS, pH 7.4) at 37 degrees C. SEDDS increased in vitro half-life of BCNU up to 130 min compared to 45 min of intact BCNU. Self-emulsified (SE) BCNU was fabricated into wafers with flat and smooth surface by compression molding. In vitro release of BCNU from SE BCNU-loaded PLGA wafer was prolonged up to 7 days followed first order release kinetics. Beside, the cytotoxicity of SE BCNU-loaded PLGA wafer against 9L gliosarcoma cells was higher than intact BCNU-loaded PLGA wafer which is more susceptible to hydrolysis. SE BCNU degraded much more slowly than the intact BCNU in PLGA matrix at 25 degrees C. These results strongly suggest that the self-emulsion system increased the stability of BCNU after released from PLGA wafer. From these results, it could be expected that the penetration depth of BCNU could be improved in brain tissue using self-emulsion system.     

去氢骆驼蓬碱聚合物胶束的制备工艺优化及体外释放的研究

目的：研究星点设计-响应面法优化去氢骆驼蓬碱N-癸酰-N-三甲基壳聚糖胶束（harmine loaded N-Decanoate-N-trimethyl chitosan micelles,HM-De-TMC-MIC）的处方优化,并考察在不同介质中HM-De-TMC-MIC的体外释放。方法：以薄膜分散法制备HM-De-TMC-MIC;以粒径、多分散系数、包封率和载药量为指标,通过单因素考察和星点设计-响应面法综合考察药物与载体质量比和复水体积对HM-De-TMC-MIC的影响,并遴选其最优处方。在不同pH的释放介质中,分别考察HM-De-TMC-MIC和HM的体外释放。结果：筛优处方药物与载体质量比为3.6∶10,复溶水体积为6 mL;以最优处方制备的HM-De-TMC-MIC粒径为（148.2±5.0）nm,多分散系数为0.198±0.045,包封率（89.80±0.19）%,载药量（22.79±0.05）%,形态圆整。体外释放试验结果表明,HM-De-TMC-MIC的释放曲线遵循Higuchi方程,与HM溶液相比其释放较为缓慢,并呈现pH敏感释药行为。结论：以星点设计-响应面法优化的HM-De-TMC-MIC具有较好包封率和载药量,粒径分布均匀,具有明显的缓释性。