不同来源山茱萸中莫诺苷的含量测定

目的检测不同来源山茱萸中莫诺苷的含量。方法采用反相高效液相色谱法,流动相:0.05%磷酸-乙腈(91∶9);柱温:25℃;流速:1.0 mL.min-1;检测波长:240 nm。结果各药材莫诺苷含量在16.94~18.66 mg.g-1,其中以河南宛西山茱萸中莫诺苷含量最高。在0.25~2.0 mg莫诺苷回归方程为:Y=0.556 6X-0.228 7(r=0.999 1)。结论不同来源山茱萸中莫诺苷的含量不同。     

莫诺苷及其代谢物在大鼠体内的尿排泄动力学

考察莫诺苷及其代谢物在大鼠体内的尿排泄动力学规律.大鼠按20mg/kg灌胃给予莫诺苷水溶液后于不同时间采集尿样,用HPLC法分析尿中莫诺苷及其代谢物的经时变化.尿液排泄药动学试验表明,莫诺苷的尿排泄t_(1/2)为1.69 h,24 h内莫诺苷及其代谢物经尿排泄完全,莫诺苷的排泄量主要集中在0～3 h,约占总排泄量的68.5%,代谢物的排泄量在6～9 h达高峰,约占总排泄量的66.5%.莫诺苷经尿液排泄的总量不足给药量的1.4%.     

UPLC法测定山茱萸中的莫诺苷和马钱子苷

目的建立一种同时测定山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的UPLC法。方法采用超高效液相色谱仪。色谱柱为Waters Acquity UPLC BEH C18(50mm×2.5mm,1.7μm);检测波长:240nm;流动相:乙腈(A)-1mL·L-1甲酸水溶液(B);采用梯度洗脱;流速:0.3mL·min-1;柱温:30℃。结果该色谱条件下,山茱萸中各组分的分离满足分析要求,莫诺苷和马钱子苷的线性回归方程分别为y=241.65x+27.59,r=0.999 66和y=192.39x-31.96,r=0.999 89;莫诺苷和马钱子苷在0.112 5~1.80和0.087 5~1.40μg范围内峰面积与进样量线性关系良好;测得陕西佛坪山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的含量分别为16.53±0.89和6.81±0.32mg·g-1。结论该方法高效、快速,适合山茱萸中莫诺苷和马钱子苷的含量分析;陕西山茱萸中有效成分的含量远高于《中国药典》规定,品质优异。     

补肾健骨胶囊中莫诺苷与马钱苷含量测定

目的:建立一种同时检测补肾健骨胶囊中莫诺苷和马钱苷含量的方法.方法:采用Tnature C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,以乙腈-0.8％磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量1.0 ml?min-1,检测波长240 nm.结果:莫诺苷在82.0108～1640.2160 ng、马钱苷在63...     

HPLC法同时测定大鼠血清中马钱苷和莫诺苷的含量

目的建立HPLC法对六味地黄方在大鼠体内吸收入血的有效成分(莫诺苷和马钱苷)的血药浓度测定方法。方法采用HPLCDAD法对给药前、后大鼠血清中的药物有效成分进行检测。结果空白血清不会对莫诺苷和马钱苷的血药浓度分析产生干扰,均能达到基线分离;莫诺苷和马钱苷的峰面积比值与血清浓度呈良好的线性关系;六味地黄血清中莫诺苷和马钱苷高、中、低3种浓度5次测定的平均回收率为84.9%~109.8%和89.4%~102.7%;六味地黄血清中莫诺苷高、中、低3种浓度5次测定的平均提取回收率为73.9%~82.7%。结论该方法血清中内源性物质不干扰样品的测定,且分离度好,可满足药代动力学研究中血药浓度测定的要求。     

畲药安唐胶囊中莫诺苷和马钱苷的含量测定

目的 建立畲药安唐胶囊中莫诺苷和马钱苷的含量测定方法.方法HT6K 采用高效液相色谱法测定安唐胶囊中莫诺苷和马钱苷的含量,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.3%磷酸溶液为流动相,按规定进行梯度洗脱;检测波长为240nm.结果 莫诺苷浓度在5μg·mL-1~40μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程y=1324418x+8714,r=0.9998;平均回收率80.54%;R SD=0.88%;马钱苷浓度在5μg·mL-1~40μg·mL-1范围内与峰面积呈良好的线性关系,回归方程y=139022x+14726,r=0.9993;平均回收率80.46%;RSD=0.99%.H T5"H结论 本方法简便、准确、可靠,适用于安唐胶囊中莫诺苷和马钱苷的含量测定.     

六味地黄丸入血成分莫诺苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响

目的:测定大鼠口服六味地黄丸后血清中莫诺苷浓度,并探讨莫诺苷对大鼠前脂肪细胞增殖与分化的影响。方法:反相高效液相色谱法检测大鼠口服六味地黄丸后血清中莫诺苷浓度;原代培养大鼠前脂肪细胞;以四甲基偶氮唑盐(MTT)方法检测莫诺苷对大鼠前脂肪细胞增殖的影响;以油红O染色方法检测其对大鼠前脂肪细胞分化过程中的细胞内脂肪积聚的影响。结果:莫诺苷与血清中其它成分较好分离。在250～2000ng范围内线性关系良好(r=0.9991),平均回收率为95.27%,莫诺苷在大鼠血中的平均血药浓度为(16.92±3.63)μg/mL;8.5～68.0μg/mL的莫诺苷促进大鼠前脂肪细胞的增殖,抑制其分化过程中的脂肪积聚。结论:莫诺苷可能为六味地黄丸的体内直接作用物质之一;有效成分分离测定与药效学研究相结合的方法将有助于阐明六味地黄丸的有效成分及作用机理。     

HPLC法测定山茱萸生品中5-羟甲基糠醛、莫诺苷和马钱苷含量

目的采用高效液相二极管阵列检测法(HPLC-DAD)同时测定山茱萸生品中3个成分的含量:5-羟甲基糠醛(5-HMF)、莫诺苷和马钱苷。方法采用Venusil ABS C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇和水为流动相,梯度洗脱,流速1 ml.min-1,柱温30℃,检测波长284、240、238 nm。结果 5-HMF、莫诺苷和马钱苷的峰面积与浓度的线性关系均良好(r≥0.999 6);加样回收率分别为100%、100.62%、100.53%。结论该方法快速、准确、重现性好,可用于同时测定山茱萸生品中5-羟甲基糠醛、莫诺苷和马钱苷的含量。     

莫诺苷抑制过氧化氢诱导的神经细胞损伤作用

目的研究从中药山茱萸提取的有效成分莫诺苷抑制过氧化氢(H2O2)诱导的神经细胞氧化损伤作用。方法培养的人神经母细胞瘤细胞系SH-SY5Y细胞加入莫诺苷1、10、100μmol/L预孵育24h,加入H2O2300μmol/L作用18h诱导产生氧化损伤,测定细胞内细胞色素C及脑源性神经生长因子(BDNF)的含量。结果莫诺苷1、10、100μmol/L使细胞色素C的释放显著降低18%(P<0.05)、28%(P<0.05)、35%(P<0.01);BDNF(10、100mol/L)的释放增加(P<0.01)。结论莫诺苷的神经保护作用是通过抑制细胞色素C的释放,抑制神经细胞凋亡,并能促进神经细胞增加神经营养因子的释放,进而促进神经细胞的再生,抑制神经细胞氧化损伤。     

HPLC法测定杞菊地黄丸中莫诺苷、马钱苷和丹皮酚的含量

目的:建立一种快速、准确和实用的HPLC方法,用于同时测定杞菊地黄丸中莫诺苷、马钱苷和丹皮酚的含量。方法:采用Phenomenex Gemini C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以乙腈-0.3%磷酸水溶液为流动相梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温40℃,检测波长为240 nm(莫诺苷、马钱苷)和274 nm(丹皮酚)。结果:莫诺苷、马钱苷、丹皮酚质量浓度分别在2.242~44.84μg·m L-1(r=0.999 9)、2.130~42.60μg·m L-1(r=1.000)、5.068~101.4μg·m L-1(r=1.000)范围内,与峰面积线性关系良好;平均回收率分别为96.2%(RSD=0.44%)、96.0%(RSD=0.21%)、103.0%(RSD=0.65%)。结论:本方法可作为杞菊地黄丸中莫诺苷、马钱苷和丹皮酚含量同时测定的方法,适用于杞菊地黄丸的质量控制。     

莫诺苷对大鼠脑缺血再灌注大鼠皮层IL-1β的影响

目的研究山茱萸有效成分莫诺苷对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质IL-1β的影响。方法用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,缺血30 min,再灌注72 h。以秋水仙碱为阳性对照药,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠脑皮层炎症因子IL-1β的变化。结果莫诺苷能显著增强大鼠抗炎能力。结论莫诺苷能通过增强大鼠皮层抗炎能力发挥神经保护作用。     

专题三、脑缺血、神经损伤及其药物治疗——山茱萸有效成分莫诺苷神经保护作用及机制研究

目的：研究从山茱萸提取分离得到的化合物莫诺苷体外神经保护作用和机制。方法：大孔树脂分离、硅胶柱层析得到莫诺苷，用H2O2损伤神经SY5Y细胞培养模型研究莫诺苷神经保护作用和机制。结果：1、莫诺苷确定结构实验：MS、13^C-NMR、1^H-NMR确定莫诺苷的结构，HPLC确定莫诺苷的含量大于90％。2、莫诺苷神经保护作用及机制实验：①对正常神经SY5Y细胞的作用：     

山茱萸环烯醚萜苷类成分对AGEs诱导HUVEC损伤的保护作用

目的探讨山茱萸环烯醚萜苷类特征成分马钱苷、莫诺苷对糖基化终末产物(AGEs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤的保护作用。方法体外培养HUVEC,用马钱苷、莫诺苷(终浓度分别为100、10、1μmol·L-1)预孵1 h后,再加入AGEs(200 mg·L-1)刺激,并设氨基胍为阳性对照,孵育24 h后,采用MTT法检测马钱苷、莫诺苷对HUVEC增殖率的影响;采用试剂盒检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和血管细胞黏附分子-1(VCAM-1);采用Western blot法检测HUVEC中糖基化终末产物受体(RAGE)、核转录因子(NF-κB)的蛋白表达。结果山茱萸环烯醚萜苷类特征成分马钱苷、莫诺苷能抑制AGEs导致的HUVEC损伤,与空白对照组比较,模型组细胞RAGE、NF-κB蛋白表达上调(P<0.01),ET-1、MCP-1、VCAM-1分泌增加(P<0.01),NO水平降低(P<0.01)。马钱苷、莫诺苷给药组能不同程度地下调RAGE、NF-κB蛋白表达,减少ET-1、MCP-1、VCAM-1分泌,升高NO水平,与模型组比较差异具有显著性(P<0.05~0.01)。结论山茱萸环烯醚萜苷类特征成分马钱苷、莫诺苷对AGEs导致的HUVEC损伤具有明显的保护作用,其作用机制为下调RAGE蛋白表达,抑制RAGE受体相关NF-κB信号通路发挥抗炎作用,从而改善内皮细胞功能。     

一测多评法测定左归丸中3种环烯醚萜苷类成分的含量

目的：建立以马钱苷为内参物,同时测定左归丸中莫诺苷、马钱苷和山茱萸新苷含量的一测多评法（QAMS）。方法：采用高效液相色谱法,Phenomenex C18（250 mm×4.6 mm,5 μm）硅胶色谱柱;流动相：乙腈（A）-0.3%磷酸水溶液（B）梯度洗脱;柱温35℃;检测波长（0~65 min,240 nm,检测莫诺苷和马钱苷;66~80 min,218 nm,检测山茱萸新苷）。以马钱苷为内参物,建立其与莫诺苷、山茱萸新苷的相对校正因子（RCFS）,并进行含量计算,实现一测多评;同时采用外标法（ESM）测定左归丸中3种有效成分的含量,比较一测多评法计算值与外标法实测值的差异。结果：在一定线性范围内,马钱苷与莫诺苷、山茱萸新苷的相对校正因子分别为1.048、1.390。建立的相对校正因子重现性良好,7批左归丸中3种成分的计算值与实测值间无显著差异。结论：采用本研究建立的“一测多评”法控制左归丸的质量是可行的。     

山茱萸环烯醚帖苷的研究进展

山茱萸是山茱萸科植物山茱萸的干燥成熟果肉,目前已从中分离鉴定了10个环烯醚萜类化合物,包括马钱素、莫诺苷、獐牙菜苷、7-O-甲基莫诺苷、山茱萸裂苷、山茱萸新苷(双环烯醚萜苷)、7-脱氢马钱素、脱水莫诺苷元、7-O-乙基莫诺苷和7-O-丁基莫诺苷。山茱萸环烯醚帖苷具有广泛的生物学活性,能够抗炎、抗肿瘤等,并对神经系统和心血管系统有保护作用。其中莫诺苷能抑制过氧化氢诱导的神经细胞损伤,并对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有一定的神经保护作用。本文就山茱萸环烯醚帖苷莫诺苷对神经系统尤其缺血性脑损伤的药理学作用做一综述,为这种新型化学物质的药理学作用的深入研究提供思路。     

β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺研究

目的:研究用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法:采用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,以转化率为指标,通过单因素试验考察温度、pH值、酶与底物质量比、底物浓度和反应时间对转化率的影响。结果:酶解反应的优化条件为温度50℃、pH=5.0的枸橼酸-枸橼酸三钠缓冲液、酶与底物质量比1:2、底物浓度1mg·mL-1、反应时间90min。结论:β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿苷制备宝藿苷Ⅰ,转化率高,工艺简单、可靠,反应条件温和。     

HPLC测定益肾骨康颗粒中莫诺苷、马钱苷、野黄芩苷、柚皮苷的含量

目的 通过HPLC对益肾骨康颗粒中莫诺苷、马钱苷、野黄芩苷、柚皮苷的含量进行定量分析。方法 色谱柱为Kinetex EVO C₁₈（150 mm×4.6 mm,5 μm）,进样量为10 μL,流动相采用乙腈（A）和0.5%磷酸水溶液（B）进行梯度洗脱。检测波长设为240 nm （莫诺苷、马钱苷）、283 nm （柚皮苷）、335 nm （野黄芩苷）进行检测。结果 莫诺苷、马钱苷、野黄芩苷、柚皮苷标准曲线分别为Y=1.897 8×10⁶X-22 664.29（r=0.999 9）,Y=1.792 0×10⁶X+3 040.43（r=0.999 9）,Y=3.745 9×10⁶X+3 287（r=0.999 9）,Y=1.854 0×10⁶X+654.57（r=0.999 8）;线性范围分别为0.363 5~2.544 5,0.238 2~1.667 6,0.087 1~0.609 4,0.078 3~0.548 2 μg,平均加样回收率分别为98.25%,96.35%,95.74%,95.76%,RSD分别为0.85%,0.92%,1.06%,0.67%。结论 该法操作简单,结果具有较好的仪器精密度、稳定性和重复性,可作为益肾骨康颗粒质量控制的有效方法,而不同批次益肾骨康颗粒有效成分含量存在不同程度差异。     

HPLC波长切换技术同时测定知柏地黄丸(浓缩丸)中莫诺苷、芒果苷、马钱苷和丹皮酚的含量

目的:建立HPLC法同时测定知柏地黄丸(浓缩丸)中莫诺苷、芒果苷、马钱苷、丹皮酚的含量。方法:采用Phenomenex C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.3%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0~5 min,5%A→7%A;5~26min,7%A;26~45 min,7%A→20%A;45~55 min,20%A→60%A;55~65 min,60%A),流速1 m L·min-1,柱温40℃,波长切换(0~45 min,在240 nm波长下检测莫诺苷、芒果苷和马钱苷;46~65 min,在274 nm波长下检测丹皮酚)。结果:莫诺苷、芒果苷、马钱苷和丹皮酚的线性范围分别为0.055 5~1.11μg(r=0.999 9)、0.040 2~0.804μg(r=0.999 9)、0.076 4~1.528μg(r=0.999 9)、0.098 2~1.964μg(r=0.999 9);平均回收率(n=6)分别为103.9%、102.0%、101.5%、102.2%,RSD分别为1.3%、1.3%、1.6%、0.82%。含量测定结果分别为1.117~1.501、0.375~0.447、1.083~1.562、2.306~2.857 mg·g-1。结论:该方法操作稳定准确,重复性好,可用于知柏地黄丸(浓缩丸)的质量控制。     

野菊花中蒙花苷的热稳定性研究

目的考察影响野菊花提取液和浸膏中蒙花苷热稳定性的因素。方法采用HPLC方法测定蒙花苷含量,考察pH值、添加剂对野菊花水提液中蒙花苷含量的影响,探讨干燥温度和干燥方法对浸膏中蒙花苷含量的影响。结果提取液中蒙花苷,在pH4～6的条件下受热相对稳定,而在酸性及碱性较强体系中受热后含量下降显著;不同添加剂对野菊花水提液中蒙花苷受热稳定性影响较小;野菊花浸膏中蒙花苷含量随烘干温度升高和时间延长而损失增大,而采用喷雾干燥能较好地保留蒙花苷成分。结论为提高野菊花各类制剂中蒙花苷的含量的稳定性提供实验依据。     

酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ

目的:研究酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ的工艺。方法:采用β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ,以宝藿苷Ⅰ得率为指标,通过单因素考察pH值、温度、反应时间及酶与底物质量比对宝藿苷Ⅰ得率的影响。结果:酶解反应的最适条件为温度50℃、pH5.0～5.5、反应时间7 h、酶与底物质量比为1∶20;以淫羊藿总黄酮计,宝藿苷Ⅰ收率为9.25%。结论:β-葡萄糖苷酶酶解淫羊藿总黄酮制备宝藿苷Ⅰ,得率高、工艺简便可靠、反应条件温和,适合工业化生产。