创伤性脑损伤后大鼠海马区糖皮质激素受体mRNA的表达

目的研究创伤性脑损伤(TBI)后大鼠海马区糖皮质激素受体(GR)mRNA表达的变化及其对大鼠认知功能的影响。方法建立大鼠头颅侧向旋转加速脑创伤模型,应用逆转录酶-聚合酶链式反应(RT-PCR)和Morris水迷宫检测伤后大鼠海马区GR mRNA的表达与学习记忆功能的关系。结果伤后4～7 d大鼠海马区GR持续低表达;Morris水迷宫检测伤后大鼠出现认知功能障碍。结论 TBI大鼠海马区GR mRNA的降低影响大鼠认知功能。     

去卵巢及穹窿海马伞切断复合模型大鼠不同脑区雌激素α受体mRNA的表达及倍美力的干预作用

目的观察倍美力对去卵巢及穹窿海马伞切断后大鼠脑皮质、基底前脑及海马CA_1区雌激素α受体(estrogen receptor alpha,ERa)mRNA表达的干预作用,探讨其脑保护作用的机制。方法健康雌性Wister大鼠30只,随机分成对照组、模型组、倍美力组;制备去卵巢及穹窿海马伞切断复合模型大鼠,采用Morris水迷宫观察其学习、记忆能力,利用RT-PCR及Western blotting法观察每组大鼠不问脑区雌激素α受体mRNA及蛋白的表达。结果模型组大鼠脑皮质、基底前脑、海马CA_1区雌激素α受体mRNA及蛋白的表达明显降低,学习、记忆能力下降,与对照组、倍美力组比较有显著差异(P<0.01);对照组与倍美力组比较无明显差异(P>0.05)。结论倍美力可上调大鼠脑皮质、基底前脑及海马CA_1区雌激素α受体mRNA及蛋白的表达,可能参与了学习、记忆能力的改善。     

L-NIL在大鼠创伤性脑损伤中的应用研究

目的探讨选择性诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂L-N6-亚氨乙基-赖氨酸(L-NIL)在大鼠创伤性脑损伤(TBI)模型中对大鼠伤后学习记忆功能、海马神经元的影响.方法 24只SD大鼠随机分为假创伤性脑损伤组、创伤性脑损伤组、非选择性一氧化氮合酶(NOS)抑制剂N-硝基-L-精氨酸(L-NNA)组、选择性诱导型一氧化氮合酶抑制剂L-NIL组.其中L-NNA组、L-NIL组分别于伤后即刻、24 h、48 h经腹腔注射L-NNA或L-NIL.进行避暗回避试验以评价伤后各组大鼠的学习记忆功能恢复情况.伤后第7 d处死大鼠取脑,采用Nissl染色及神经元抗核抗体(NeuN)免疫组化染色观察测量伤侧海马CA2区锥体细胞层面积.结果①L-NIL组避暗回避试验结果显著好于创伤性脑损伤组(P<0.05).②L-NIL组海马CA2区锥体细胞层面积与创伤性脑损伤组比较显著增加(P<0.05).③L-NIL组避暗回避试验结果及海马CA2区锥体细胞层面积值均优于L-NNA组.结论适当地应用选择性iNOS抑制剂L-NIL可促进大鼠脑损伤后学习记忆功能的恢复,保护海马神经元,其效果优于非选择性NOS抑制剂.     

天智颗粒对血管性痴呆大鼠行为学及脑内AchE、ChAT活性的影响

目的观察天智颗粒对血管性痴呆大鼠行为学习记忆能力和乙酰胆碱代谢酶活性的影响,从而探讨天智颗粒改善记忆的机制.方法采用双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆模型,治疗组用天智颗粒(5 g/kg)灌胃,模型组和假手术组用同体积的蒸馏水代替灌胃,1次/天,对照组未做任何处理.30 d后,采用三等分Y型电迷宫和比色法分别测定皮质、海马区乙酰胆碱脂酶(AchE)活性和基底前脑区胆碱乙酰转移酶(ChaT)活性.观察、比较各组大鼠行为学和乙酰胆碱代谢酶的变化规律和差异.结果治疗30d后,治疗组与模型组相比,学习记忆能力和基底前脑ChaT活性明显提高(P＜0.05),但皮质和海马区AchE活性变化无统计学意义.结论天智颗粒能明显促进血管性痴呆大鼠学习记忆能力和基底前脑区ChaT活性,其药理机制可能和改变乙酰胆碱代谢酶活性有关.     

脑创伤后bcl—2蛋白的神经保护作用

目的 探讨液压脑损伤后凋亡抑制基因bcl—2的变化规律及bcl—2基因在创伤性脑损伤后细胞凋亡中的作用。方法 应用免疫组化观察大鼠中型液压脑损伤伤前及伤后6h、12h、1d、3d、7dbcl—2蛋白表达情况,应用TUNEIL和电镜观察伤后细胞死亡的形态。结果 免疫反应阳性细胞主要位于伤侧大脑半球皮质、皮层下白质、海马CAl、CA3及齿状回的神经元和神经胶质细胞,以海马CA3区最为显。在高倍镜下,表达Bcl—2蛋白的神经细胞胞核形态正常,很少见到凋亡或坏死的形态特征。伤后早期(6h),打击侧海马CA3区Bcl—2蛋白表达显下降;Bcl—2早期改变出现在伤后6h,比细胞凋亡提前表现;伤后l—3h,Bcl—2的表达下降相对缓慢。结论 bcl—2蛋白在抑制脑创伤后细胞凋亡中起重要作用,bcl—2可能是一种可诱导的神经保护因子。     

额叶皮质损伤对大鼠基底前脑胆碱能神经元的影响

本实验探讨了前额叶皮质局限性损伤对大鼠学习、记忆功能及基底前脑胆碱能神经元的影响。用外科手术造成大鼠一侧前额叶皮质局限性损伤后不同时间、用Ｙ型迷宫检测学习、记忆功能、用组织化学技术检测基底前脑含乙酰胆碱酸酶（ＡChE)活性神经元。实验观察到前额叶皮质损伤后１周,动物学习,记忆功能有所障碍,损伤同侧的基底前脑胆碱能神经元有所减少,但均无统计学意义,损伤后２,３,４周,动物学习、记忆障碍明显,损伤同侧基底前脑胆碱能神经元明显减少（Ｐ＜0.05),且两者变化相平行。结果表明单侧前额叶皮质局限性损伤不仅可引起动物学习、记忆功能障碍,且可引起同侧基底前脑胆碱能神经元丢失,且两者发展相平行,提示基底前脑胆碱能神经元逆行性变性在动物额叶皮质损伤引起的学习、记忆障碍中起作用。     

酸性肽对AD大鼠学习记忆功能及NGF和NMDAR1表达的影响

目的 研究酸性肽对AD大鼠脑中NGF、NMDAR1表达的影响.方法 采用大鼠脑组织立体定位微量注射技术,建立AD动物摸型,用不同剂量的AP对AD大鼠进行治疗.通过测定与学习记忆有关的行为学指标及脑内与AD相关的NGF、AB水平的变化,并与正常组、模型组、生理盐水组结果 比较,对数据进行统计处理.结果 模型组与正常组比较,学习记忆成绩明显下降(P＜0.01);各治疗组与模型组比较,学习记忆成绩明显提高(P＜0.01);模型组与空白组比较,大鼠基底前脑中NGF水平显著降低,皮质中NMDAR1含量显著增加,各治疗组分别与模型组比较,大鼠基底前脑中NGF水平显著降低,皮质中NMDAR1含量显著增加(P＜0.01).结论 AP可能通过上调AD基底前脑中NGF的水平并降低NMDAR1水平来发挥对AD的治疗作用.     

急性一氧化碳中毒大鼠脑红蛋白表达变化的研究

目的:研究急性一氧化碳中毒大鼠迟发性脑病模型中脑红蛋白(NGB)在额叶皮质和海马区的表达变化情况。方法:腹腔注射纯CO制备急性一氧化碳中毒与一氧化碳中毒迟发性脑病的大鼠模型。检测大鼠大脑皮质及海马区细胞的脑红蛋白的表达情况。结果:急性一氧化碳中毒后大鼠额叶皮质的NGB蛋白表达于损伤后第1天上调,以后逐渐降低至染毒后21d;而海马区NGB表达降低并呈持续减少的趋势,至染毒后21d最低;与对照组相比差异均有统计学意义(p<0.01)。病理学检测显示海马区神经细胞损伤程度较额叶皮质严重。结论:(1)脑不同部位对一氧化碳中毒的耐受性差异可能与NGB的表达有关。(2)NGB的表达下调可能与一氧化碳中毒迟发性脑病的发生与发展有关。     

缺氧预处理对创伤性脑损伤大鼠 Claudin5 表达及血脑屏障通透性的影响

目的探讨缺氧预处理对创伤性脑损伤大鼠脑组织紧密连接蛋白Claudin-5的表达及血-脑屏障通透性的影响。方法204只大鼠随机分为创伤性脑损伤组（T组）96例,缺氧预处理后脑损伤组（H组）96例及对照组12例。T组行自由落体撞击法建立大鼠创伤性脑损伤模型,H组给予3d缺氧预处理后,同法致脑损伤,两组大鼠于伤后1h、4h、8h、12h、24h、3d、7d、14d断头处死。采用干湿重法测脑组织含水量：Real—timePCR和Westernblot检测各组大鼠挫伤区周围脑组织Claudin-5mRNA及蛋白表达变化;IgG法检测血一脑屏障通透性变化。结果T组和H组伤后1hClaudin-5mRNA及蛋白表达开始降低,8～12h降至最低点,1d开始上升,直至伤后14d渐趋于对照组水平;其中H组各时间点Claudin-5mRNA及蛋白表达均高于T组。T组各时间点血一脑屏障通透性及脑组织含水量均明显高于H组（P〈0．05）,且两组均高于对照组（P〈0．05）。结论缺氧预处理可在创伤性脑损伤早期上调紧密连接蛋白Claudin-5的表达,维持血-脑屏障完整性,减轻脑水肿。     

NGF预防大鼠额叶皮质损伤后基底前脑胆碱能神经元变性

目的：为了观察神经生长因子（NGF）对大鼠额叶皮质损伤后基底前脑胆碱能神经元变性的预防效果。方法：24只SD大鼠,随机平均分为3组：（1）实验组（NGF）,（2）对照组（等容量的生理盐水）,（3）正常组（假手术）,用外科手术造成双侧额叶皮质局限性损伤,动物的学习,记忆机能及基底前脑含乙酰胆碱酯酶（AChE)活性神经元则分别用Y型迷宫和组织化学方法进行检测。结果：额叶皮质损伤4周后,动物的学习,记忆机能明显下降（P＜0．01）,基底前脑含AChE活性神经元明显减少（P＜0．01）,NGI治疗可有效地防止额叶皮质损伤大鼠学习,记忆障碍的发生及基底前脑含AChE活性神经元的减少（P＜0．05）。结论：NGF对双侧额叶皮质损伤大鼠的学习,记忆机能障碍及基底前脑胆碱能神经元变性有预防效果。     

局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑、肝中IGF-1的动态表达及其意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)在局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠脑、肝中的表达变化及其意义.方法 采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用免疫组化染色方法检测大鼠脑缺血再灌注后2h、1d、3d、7d时脑、肝标本中IGF-1蛋白的含量.结果 正常脑组织有低水平的IGF-1表达,脑缺血再灌注后2h后表达即有明显升高,1d时持续升高,至3d时达高峰,7d时又有所回落,其表达主要位于大脑皮质区.经方差分析,脑组织中IGF-1蛋白含量脑缺血再灌注组与对应各时间点假手术组比较差异均有统计学意义(P<0.05);假手术组各时间点比较差异无统计学意义(P>0.05);脑缺血再灌注组1d和7d间比较差异无统计学意义(P>0.05),其余脑缺血再灌注组各时间点间比较差异均有统计学意义(P<0.05).正常肝组织中有极低水平IGF-1表达,脑缺血再灌注2h、1d、3d后肝组织中IGF-1蛋白含量与假手术组各对应时间点比较差异无统计学意义(p>0.05),脑缺血再灌注7d时与脑缺血再灌注组其余各时间点及假手术组对应时间点比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 脑缺血再灌注损伤后大鼠脑、肝中内源性IGF-1水平有明显变化,提示IGF-1的变化与脑缺血再灌注损伤有关联.     

Correlation of brain-derived neurotrophic factor to cognitive impairment following traumatic brain injury in rats

BACKGROUND: In vitro and in vivo studies have confirmed that brain-derived neurotrophic factor (BDNF) can promote survival and differentiation of cholinergic, dopaminergic and motor neurons, and axonal regeneration. BDNF has neuroprotective effects on the nervous system. OBJECTIVE: To explore changes in BDNF expression and cognitive function in rats after brain injury DESIGN, TIME AND SETTING: The neuropathology experiment was performed at the Second Research Room, Department of Neurosurgery, Fujian Medical University (China) from July 2007 to July 2008. MATERIALS: A total of 72 healthy, male, Sprague Dawley, rats were selected for this study. METHODS: Rat models of mild and moderate traumatic brain injury were created by percussion, according to Feeney's method (n = 24, each group). A bone window was made in rats from the sham operation group (n = 24), but no attack was conducted. MAIN OUTCOME MEASURES: At days 1,2, 4 and 7 following injury, BDNF expression in the rat frontal lobe cortex, hippocampus and basal forebrain was examined by immunohistochemistry (streptavidin-biotin-peroxidase complex method). Changes in rat cognitive function were assessed by the walking test, balance-beam test and memory function detection. RESULTS: Cognitive impairment was aggravated at day 2, and recovered to normal at days 3 and 7 in rats from the mild and moderate traumatic brain injury groups. BDNF expression in the rat frontal lobe cortex, hippocampus and basal forebrain was increased at 1 day, decreased at day 2, and then gradually increased in the mild and moderate traumatic brain injury groups. BDNF expression was greater in rats from the moderate traumatic brain injury group than in the sham operation and mild traumatic brain injury groups (P < 0.05). CONCLUSION: BDNF expression in the rat frontal lobe cortex, hippocampus and basal forebrain is correlated to cognitive impairment after traumatic brain injury. BDNF has a protective effect on cognitive function in rats following injury     

硫氧还蛋白还原酶 TrxR2在颅脑损伤大鼠皮质的表达变化

目的：探究硫氧还蛋白还原酶2（TrxR2）在颅脑损伤大鼠皮质的动态表达变化。方法54只雄性 SD 大鼠,随机分为正常对照组（n =6）和颅脑损伤组（n =48）。颅脑损伤组采用改良的 Freeny＆#39;s 自由落体装置制作颅脑损伤大鼠模型,正常对照组不做处理。伤后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d,采用实时荧光定量 PCR （quantitative real-time PCR,qRT-PCR）和Western blot 检测挫伤区周围皮质 TrxR2 mRNA 和蛋白的表达变化情况。结果 qRT-PCR 结果显示：皮质中 TrxR2 mRNA 颅脑损伤后1 h 表达增加,24 h 达到高峰,7 d 恢复正常;颅脑损伤组伤后1 h~3 d 各时间点 TrxR2 mRNA 表达明显高于正常对照组（均 P ＜0.05）。Western blot 检测显示：TrxR2蛋白在颅脑损伤后1 h 表达增加,24 h 达到高峰,14 d 恢复正常;颅脑损伤组1 h~7 d 各时间点 TrxR2蛋白表达高于正常对照组（均 P ＜0.05）。结论颅脑损伤后 TrxR2表达增多,提示 TrxR2作为一种急性应激反应蛋白参与颅脑损伤早期抗氧化应激反应。     

脑震荡患者血清S100B蛋白的变化与认知功能障碍的相关性

目的 分析脑震荡患者血清S100B含量变化与认知功能损害的相关性,探讨血清S100B水平在脑震荡认知障碍预后判断中的意义. 方法 采用酶联免疫法分别测定126例脑震荡患者急诊入院后6h、12h和第3天的血清S100B浓度,并和同期轻型单纯脑外伤患者比较.脑震荡患者常规治疗后,于入院后第1天、第14天及3个月后进行简易智能精神状态检查量表(MMSE)评估,将S100B浓度与MMSE评分进行相关性分析. 结果入院6 h、12 h后脑震荡组患者血清S100B浓度均明显高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).入院6 h血清S100B浓度与各时段MMSE评分均具有相关性(P均＜0.05);入院12 h、第3天血清S100B浓度与各时段MMSE评分均无相关性(P均＞0.05). 结论 脑震荡患者早期(6 h)血清S100B含量异常升高,并与认知功能损害有明显相关性,可作为认知功能损害预后判断的重要指标.     

中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白在大鼠脑出血后继发性脑损伤中的作用研究

目的探讨中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)在脑出血(ICH)后继发性脑损伤中的作用。方法采用Ⅶ胶原酶制作ICH模型,将90只雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(10只)、假手术组(40只)和ICH模型组(40只)。分别在ICH后6 h、24 h、72 h和7 d四个时间点对大鼠进行神经功能缺损评分;用免疫组化及RT-q PCR来观察不同时间点脑组织NGAL及MMP-9表达情况。结果免疫组化及RT-q PCR结果显示ICH后模型组各时间点均可见大量NGAL、MMP-9阳性细胞及NGAL mRNA表达,且明显高于正常组及假手术组(P0.05)。ICH模型组NGAL与MMP-9蛋白表达呈正相关(P0.01)。ICH模型组NGAL、MMP-9蛋白表达均与大鼠神经功能缺损评分呈正相关(P0.05)。结论 ICH后NGAL表达明显增加,提示NGAL可能参与了脑出血后继发性脑损伤,并可能通过调节MMP-9的活性从而发挥作用,但NGAL是否为MMP-9的上游调控因子尚有待进一步研究。     

刺五加皂甙对脑缺血大鼠皮质少突胶质细胞变化的影响

目的观察刺五加皂甙对全脑缺血大鼠皮质少突胶质谱系细胞的影响作用,探讨其对缺血性脑损伤的防护作用机制。方法 70只SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血组、刺五加皂甙组。采用四血管结扎的全脑缺血模型,制模成功后随机分为脑缺血组、刺五加皂甙组。刺五加皂甙组大鼠按剂量3.0mg/kg腹腔注射;用免疫组织化学法检测皮质少突胶质细胞标记物[2型星形胶质祖细胞标记物B5(A2B5)、少突胶质细胞标记物4(O4)、2’,3’-环核苷酸磷酸水解酶(CNPase)]及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的变化。结果与假手术组比较,脑缺血大鼠皮质A2B5表达1d时即已增多、1w时显著增多、并持续至1个月;O4、MBP表达于脑缺血1d时显著减少、1w时回升、1个月时恢复至假手术组水平;CNPase阳性表达在脑缺血后1d即显著下降、1w时减少到最低点、1个月时恢复至假手术组水平。与脑缺血组比较,刺五加皂甙组大鼠皮质A2B5表达有不同程度减少,O4、CNPase、MBP表达有不同程度增加。结论刺五加皂甙对少突胶质谱系细胞缺血性反应有保护作用。     

超短波治疗对急性闭合性颅脑损伤大鼠脑NMDAR1及GAP-43表达的影响

目的探讨超短波治疗对急性闭合性颅脑损伤后神经保护及神经可塑性的影响。方法将54只成年大鼠随机分为超短波治疗组、对照组和正常组,治疗组和对照组又分为伤后1、3、7和14d组,每组6只动物。采用自由落体撞击法制作大鼠急性闭合性颅脑损伤模型。以无热量超短波照射大鼠脑部,用免疫组化方法测定各组大鼠脑N-甲基-D-天冬氨酸受体1(NMDAR1)和生长相关蛋白(GAP-43)的表达。结果与对照组比较,超短波治疗组NMDAR1免疫阳性细胞数在伤后1d时明显降低(P0.05),伤后3、7、14d时则明显升高(P0.05);GAP-43免疫阳性细胞数在伤后1d时与对照组无明显差异(P0.05),在伤后3、7、14d时则明显升高(P0.05)。结论本研究提示,颅脑损伤后适时的超短波治疗对损伤的脑组织有保护作用,这种保护可能是通过其调节MMDAR1和GAP-43的表达来实现的。     

缺血后处理对脑缺血大鼠学习记忆能力的影响

目的研究缺血后处理(IP)对大鼠脑缺血再灌注损伤后的学习和记忆能力的影响,探讨各组大鼠脑缺血再灌注后海马CA1区β淀粉样蛋白前体(APP)表达。方法将48只雄性SD大鼠随机分为3组:假手术组、对照组和缺血后处理组(IP组),每组16只大鼠。术后用Morris水迷宫方法测定大鼠认知记忆能力变化。3组大鼠脑组织切片行HE染色和APP染色,并行统计学分析。结果 Morris水迷宫试验显示,对照组大鼠训练第1~4天逃避潜伏期长于IP组(P 0. 01);跨越原平台次数IP组明显多于对照组(P 0. 05)。HE染色结果显示,对照组大鼠海马CA1区神经元细胞脱失明显,而IP可减轻这种形态学改变。免疫组化结果显示,在脑缺血再灌注144 h后对照组中APP表达明显高于假手术组(P 0. 01); IP组海马CA1区APP表达较对照组减少(P 0. 05)。结论缺血后处理可通过抑制APP的表达改善缺血再灌注后大鼠的记忆减退。     

Effects of ischemia-reperfusion on NMDA receptor subunits 2a and 2b level in rat hippocampus

The authors investigated the effects of ischemia and reperfusion on the N-methyl-D-aspartate receptor (NMDAR) subunits 2A and 2B concentration in rat hippocampus. At the protein level, significant increase in the amounts of NMDAR 2A and NMIDAR 2B in the rat hippocampus was observed at 1 h after reperfusion compared with control group. These results suggested that the alteration in hippocampal NMDAR2 subunit concentrations after ischemia-reperfusion might be invovlved in cognitive dysfunction and excitotoxicity.     

大鼠二次脑损伤后脑内c-fos基因表达和血浆β-内啡肽的变化及意义

目的 探讨脑内c-fos基因表达及血浆β-内啡肽的变化在二次脑损伤（SBI）中的作用。方法 125只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组、脑缺血组、颅脑损伤组和SBI组。分别采用免疫组化及放免分析测定大鼠脑内c-fos蛋白与血浆β-EP的含量，并对脑组织进行病理学观察。结果 SBI组c-fos基因表达分别于伤后3h、24h出现两个高峰．伤后3～48hc-fos基因表达均明显高于颅脑损伤组及脑缺血组（P〈0．05）。SBI组大鼠血浆β-EP水平在伤后1h达高峰，至伤后48h仍未恢复正常（P〈0．05），伤后各时间点均明显高于颅脑损伤组和脑缺血组（P〈0．05）。在伤后12hSBI组脑含水量达高峰；伤后3～48h明显高于颅脑损伤组及脑缺血组（P〈0．05）。伤后648hSBI组神经元损伤数目明显高于颅脑损伤组及脑缺血组（P〈0．05）。结论 伤后大鼠脑内c-fos基因表达增加、血浆β-EP水平明显升高参与了SBI后病理生理过程，提示两者同SBI发展密切相关。