局部用雷帕霉素聚乳酸乙醇酸共聚物缓释微球的制备及释药研究

目的：介绍雷帕霉素（RAPA）聚乳酸乙醇酸共聚物（PLGA）缓释微球的制备方法,建立高效液相色谱法（HPLC）测定体系以检测微球中雷帕霉素含量,检测微球性状并进行体外释药实验。方法：以聚乳酸乙醇酸共聚物为载体,采用W/O/W乳剂-扩散溶剂挥发法制备雷帕霉素缓释微球,扫描电镜检测微球外观及微球粒径,HPLC检测微球载药量、包封率及体外释药量。结果：所制微球光滑圆整,大小均一,平均粒径：（121.18±27.83）μm,载药率：（14.39±1.32）%,包封率：（72.92±4.29）%,体外释放实验显示1～4天有突释,随后平稳释药至第10天累积释药率达80%。结论：采用制备工艺稳定,所制微球载药量及包封率均较高,形态完整,大小均一,体外释药较为平稳并且具有明显的缓释作用。     

rhBMP-2/壳聚糖/硫酸葡聚糖复合微球制备及生物安全性研究

目的：制备重组人骨形态发生蛋白/壳聚糖/硫酸葡聚糖（CS/DS/rhBMP-2）复合微球,评估其体外生物相容性。方法采用离子交联法制备CS/DS/rhBMP-2复合微球及CS/DS空白微球,电镜观察CS/DS/rhBMP-2复合微球的形态。采用MTT法检测CS/DS/rhBMP-2微球组、CS/DS空白微球组、rhBMP-2组、对照组各组对L929小鼠成纤维细胞的细胞毒性。结果成功制备CS/DS/rhBMP-2复合微球,电镜检查结果示微球成球满意,分散度好。体外实验结果提示复合微球与L929细胞共培养1、3、5、7 d,其光密度（OD）值与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;CS/DS/rhBMP-2微球组、CS/DS空白微球组、rhBMP-2组、对照组浸提液对L929细胞作用2 d后的细胞相对增殖率（RGR）分别为102.41%、102.85%、99.34%、100%,毒性分级分别为0、0、1、0级。结论成功制备的CS/DS/rhBMP-2复合微球体外生物相容性好,无细胞毒性,在骨组织工程领域具有潜在的应用价值。     

复合三联抗结核药聚乳酸-羟基乙酸缓释微球的制备及体外释药特性

目的 :制备复合异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)的聚乳酸-羟基乙酸(HRZ/PLGA)缓释微球,观察其理化性质和体外缓释特性。方法:以PLGA(450mg)为载体,避光条件下称取H(40mg)、R(60mg)、Z(125mg),采用复乳-溶剂挥发法制备HRZ/PLGA缓释微球,应用扫描电镜观察微球的形态特征;应用高效液相色谱法(HPLC)测定其载药量、包封率;采用溶出法、HPLC于3h、6h、12h、1d、2d、3d、6d、9d、12d、15d、20d、25d、30d、40d、50d测定H、R、Z三种药物的浓度,观察其是否均大于10倍最低抑菌浓度(MIC),计算其日均释药率、累计释药率。结果:HRZ/PLGA微球在电镜下观察呈圆球形,平均粒径为10.3±4.7μm;H、R、Z三种药物的载药量分别为(18.02±0.36)%、(22.46±0.24)%、(21.68±0.37)%,包封率分别为(54.79±1.13)%、(72.35±0.39)%、(67.21±0.68)%;体外缓释试验显示微球缓释前12d左右,三种药物的累计缓释度均超过了50%,日均释药率分别为5.05%、4.89%、6.86%;第12天后三药的缓释基本趋于稳定,日均释药率分别为0.17%、0.26%、0.16%;三种药物缓释到50d时均大于10倍MIC。结论:HRZ/PLGA微球具有优良的载药及药物缓释效果,是一种理想的复合抗结核药物缓释系统。     

聚乳酸聚乙醇酸／RNAⅢ抑制肽缓释微球的制备及评价

目的探讨聚乳酸聚乙醇酸（PLGA）／RNAⅢ抑制肽（RIP）缓释微球的合理制备方法,测定其载药率和体外释药特征。方法采用改良复乳－溶剂挥发法制备PLGA／RIP缓释微球,观察其表征,测定缓释微球的载药率和包封率。采用高效液相色谱法测定不同时点PLGA／RIP的释放速度,观察PLGA／RIP微球的体外释药特点。结果采用改良复乳－溶剂挥发法制备的PLGA／RIP缓释微球粒径均匀、表面光滑,包封率约为（68．22±6．20）％,载药率为（15．35±3．26）％。PLGA／RIP释药动力学方程为y=31．016x＋59．611,符合Huguchi方程。结论采用改良复乳-溶剂挥发法制备的PLGA／RIP缓释微球粒径均匀、表面光滑,包封率和载药率较高,体外释放动力学符合Huguchi方程,是理想的缓释载药体系。     

复合三联抗结核药人工缓释材料体外抗结核性能

目的：评价复合三联抗结核药硫酸钙／聚氨基酸人工缓释材料的体外抗结核性能。方法将制作的载药人工缓释材料及非载药缓释材料浸泡于模拟体液中,分别于第4周、第8周、第12周取得二者的浸提液,采用高效液相色谱法检测浸提液浓度。实验分为3组：实验组（ A组）为复合三联抗结核药人工缓释材料第4、8、12周的浸提液组,分为A4W、A8W、A12W 3个亚组;实验对照组（B组）为未载药人工缓释材料第4、8、12周的浸提液组,分为B4W、B8W、B12W 3个亚组;空白对照组（ C组）为蒸馏水,分为C4W、C8W、C12W 3个亚组,每个亚组均为20个样本。将进行增殖后的标准结核分枝杆菌H37Rv与3组各样本加入BacT／ALERT 3D培养系统中共同培养。观察阳性率并统计分析培养结果。结果复合三联抗结核药硫酸钙／聚氨基酸人工缓释材料浸提液浓度检测结果（μg／mL）：第4、8、12周时异烟肼的浓度分别为：142．65±2．23,47．83±2．91,0．68±0．17;利福平在第4、8周时的浓度分别为：70．69±7．16,39．95±3．98,第12周时其浓度已测不到;吡嗪酰胺在第4、8、12周时的浓度分别为：893．56±7．09;229．87±9．56,6．36±0．57。经BacT／ALERT 3D系统培养后,A、B、C各亚组结核杆菌阳性率分别为：A4W组15％、A8W组25％、A12W组55％;B4W组80％、B8W组85％、B12W组80％;C4W组90％、C8W组95％、C12W组90％。 A组各样本与B组对应样本比较差异有统计学意义（P＜0．05）。 B组各样本与C组之间比较差异无统计学意义（P＞0．05）。结论本研究表明复合三联抗结核药硫酸钙／聚氨基酸人工缓释材料在体外具有抗结核作用,其作用至第84天仍然存在。     

局部麻醉药经聚乳酸-羟基乙酸共聚物缓释给药的研究

背景 临床常用局部麻醉药物的体内生物半衰期短,且局部组织的高药物浓度极易产生中枢神经和心血管毒性反应. 目的 综述局部麻醉药聚乳酸羟基乙酸共聚物[poly (lactic-co-glycolic acid),PLGA]缓释给药系统的研究进展. 内容 阐述PLGA相关研究,局部麻醉药PLGA微粒的类型与制备工艺,PLGA在不同动物实验模型的研究结果,临床研究进展及存在的缺陷和改进等四方面的相关内容. 趋向 局部麻醉药缓释系统的研究能够为临床提供更好的镇痛药物和麻醉方式,但是在载药量、生产工艺等方面还有待改进.     

交联可调式抗结核药物缓释型纳米人工骨复合体的生物安全性研究

目的研究交联可调式抗结核药物缓释型纳米人工骨复合体的生物安全性。方法对交联可调式抗结核药物缓解型纳米人工骨复合体进行MTT细胞毒性实验、急性全身毒性实验、皮内刺激实验及致敏实验,并与对照组比较。结果该交联可调式抗结核药物缓解型纳米人工骨复合体MTT细胞毒性实验显示人工骨材料细胞存活率〉90%,细胞毒性1级。人工骨复合材料浸取液未引起豚鼠过敏。小鼠尾静脉注射后未出现明显全身毒性反应。结论交联可调式抗结核药物缓释型纳米人工骨复合材料无MTT细胞毒性,细胞相容性良好,并能够降低利福平直接给药的生物毒性,不引起全身毒性反应、皮肤/内刺激反应和急性过敏反应,具有良好的生物安全性。     

单唾液酸四己糖神经节苷脂乳酸/羟基乙酸共聚物微球对大鼠脊髓损伤后神经功能的影响

目的：探讨经蛛网膜下腔注入单唾液酸四己糖神经节苷脂（monosialotetrahexosylgangliosides,GM-1）乳酸/羟基乙酸共聚物（poly lactic-co-glycolic acid,PLGA）微球对大鼠脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）后神经功能的影响。方法：94只成年SD大鼠随机分为4组：微球治疗组（A组）、普通GM-1制剂治疗组（B组）和损伤对照组（C组）各30只,正常对照组（D组）4只。A、B、C组大鼠采用Nystrom法制备T10脊髓压迫损伤模型,伤后即刻开始给药,A组大鼠经蛛网膜下腔一次性注入20μlGM-1PLGA微球悬液（含GM-150μg）,B组大鼠伤后至处死前每24h一次经尾静脉注入GM-1普通制剂30mg/kg,C组大鼠经蛛网膜下腔一次性注入20μl生理盐水,D组大鼠不手术、不给药。A、B、C组大鼠于术后1、3、7、14d进行脊髓运动功能（BBB）评分,术后1、7、14d检测运动诱发电位,术后8h、1d、3d、7d、14d检测大鼠脑脊液中GM-1含量;术后8h、1d、3d、7d、14d处死动物（n=6）,取T10节段脊髓并切片,用HE染色观察脊髓组织学变化,用免疫组化染色方法检测SCI后14d时损伤脊髓组织中NF200表达情况。D组上述各指标的检测不分时间点,只进行1次。结果：各时间点A、B、C组大鼠BBB评分均显著低于D组（P〈0.01）,术后3d、7d、14d时A、B组显著高于C组（P〈0.01）,各时间点A组与B组无显著性差异（P〉0.05）。各时间点A、B、C组大鼠运动诱发电位N1波潜伏期较D组明显延长、波幅明显降低（均P〈0.01）,但术后1d和7d时A、B组N1波潜伏期明显较C组短（P〈0.01）,术后7d和14d时A、B组N1波波幅明显较C组高（P〈0.01）,各时间点A组与B组比较无显著性差异（P〉0.05）。各时间点A、B组大鼠脑脊液内GM-1含量均显著高于C组和D组（均P〈0.01）,术后8h、1d、3d时A组明显高于B组（P〈0.01或0.05）,术后7、14d时A组与B组比较无显著性差异,C组和D组比较无显著性差异（P〉0.05）。HE染色,D组正常,术后各时间点A、B组大鼠脊髓损伤区组织形态优于C组,而A组与B组大鼠脊髓损伤区组织形态基本相似。A组、B组和C组大鼠SCI后14d损伤脊髓组织中NF200阳性细胞平均光密度（AOD）值均显著低于D组（P〈0.01）,但A、B组均显著高于C组（P〈0.01）,A组和B组间无显著性差异。结论：经蛛网膜下腔注入GM-1PLGA微球对大鼠脊髓损伤后神经功能具有良好的保护作用,与外周应用普通GM-1制剂比较,能减少药物用量,快速提高局部药物浓度,并较长时间维持稳定,提高生物利用率,且疗效相当。     

术前口服曲马多缓释剂对瑞芬太尼复合麻醉病人术后急性阿片类药物耐受的影响

目的 评价术前口服曲马多缓释剂对靶控输注瑞芬太尼复合麻醉病人术后急性阿片类药物耐受的影响.方法 择期拟行腹腔镜胆囊切除术病人60例,ASA Ⅰ或Ⅱ级,年龄18～64岁,随机分为2组(n=30):安慰剂组(C组)和曲马多组(T组).C组于术前48、36、24、12、0.5 h时口服维生素C片1片(100 mg),T组于相同时点口服曲马多缓释片1片(100 mg),共计500 mg.两组均采用靶控输注瑞芬太尼和异丙酚复合麻醉,拔除气管导管后在麻醉恢复室(PACU)观察1h送返病房.PACU内静脉注射芬太尼5～10μg,5 min后重复注射,维持VAS评分＜4分.病房内采用10 μg/ml芬太尼100 ml行PCIA(负荷量10μg、背景输注速率20 μg/h、PCA剂量5μg、锁定时间15 min).记录PACU内芬太尼用量、术后48 h内PCIA芬太尼用量、有效按压次数(D_1)和实际按压次数(D_2),计算D_1/D_2比值.结果 与C组比较,T组术后PACU内芬太尼用量减少(P＜0.05),术后48 h内PCIA芬太尼用量和D_1/D_2比值差异无统计学意义(P＞0.05).结论 术前口服500 mg曲马多缓释剂可减轻靶控输注瑞芬太尼复合麻醉病人术后急性阿片类药物耐受.     

The effect of cyclodextrins on the in vitro and in vivo properties of insulin-loaded poly (D,L-lactic-co-glycolic acid) microspheres

In this work we describe the development and characterization of a new formulation of insulin (INS). Insulin was complexed with cyclodextrins (CD) in order to improve its solubility and stability being available as a dry powder, after encapsulation into poly (D,L-lactic-co-glycolic acid) (PLGA) microspheres. The complex INS : CD was encapsulated into microspheres in order to obtain particles with an average diameter between 2 and 6 microm. This system was able to induce significant reduction of the plasma glucose level in two rodent models, normal mice and diabetic rats, after intratracheal administration.     

Preparation and in vitro activity of controlled release microspheres incorporating bFGF

Objective： To study the preparative method of controlled release microspheres incorporating basic fibroblast growth factor （bFGF） and the bioaetivities of bFGF, which were released from bFGF mierospheres, on the cultured Sehwann cells.
Methods： bFGF was microcapsulated with the multiple emulsion encapsulative method using polylactic-coglycolic acid （PLGA） as coating material. Its morphology, particle size distribution, drug loading, enveloping rate and in vitro release property were studied. The cultured Schwann cells were grouped according to the different ingredients being added to the culture medium of bFGF group or bFGF-PLGA group. Then the cytometry, cytoactivity detection and mitotic cycle analysis of Schwann cells were performed.
Results： The morphology and the particle size distribution of the bFGF-PLGA microspheres were even and good. The drug loading and enveloping rate of microspheres were （ 27.18×10^-3 ） % ± （0.51×10^-3） % and 66.43 % ± 1.24 %. The release property of microspheres in vitro was good and the overall release rate was 72. 47 % in 11 days. The in vitro cellular study showed that： at the first 2 days of plate culture, the cell number and viability of the bFGF group were statistically higher than the bFGF-PLGA group; at the 3rd and 4th days of plate culture, the cell number and viability of bFGF and bFGF-PLGA groups showed no difference; at the 6th and 8th days of the plate culture, the cell number and viability of the bFGF-PLGA group were statistically higher than the bFGF group. By flow eytometry examination, at the 2nd day of plate culture, the G2/M ＋ S percentage of bFGF group was statistically higher than the bFGF-PLGA group, at the 4th and 8th days of plate culture, the G2/M ＋ S percentage of the bFGF-PLGA group was statistically higher than the bFGF group.
Conclusions： It is practical to prepare the bFGF- PLGA microspheres with the multiple emulsion eneapsulative method, bFGF-PLGA mierospheres can preserve the bioaetivities of bFGF effectivel     

异烟肼聚乳酸缓释体的制备及体内外释药特性

目的探讨异烟肼聚乳酸微球的制备方法和体内外释药特性.方法用复乳法制备异烟肼聚乳酸微球,扫描电子显微镜观察微球的特征,高效液相色谱法测定其包封率、载药率;用溶出法、高效液相色谱法测定其体外释药特性.观测第3、6、9、12、15、18、25、32、39、42、49、56天的释药情况,并计算其日均释药率、累计释药率将异烟肼聚乳酸微球、异烟肼(INH)分别置入24只新西兰大白兔的左右股骨粗隆间髓腔内,测定微球在体内3、7、14、28、42、56d时的释药情况;实验组将第42、49、56天时的异烟肼聚乳酸微球洗涤液(空白组用磷酸缓冲液)与结核菌、钛块一起共同培养7d,扫描电子显微镜下观察结核菌生长情况.结果异烟肼聚乳酸微球呈比较完整的球形且分散性好,无明显聚集现象;微球平均直径为59.4±2.9μm,包封率为(67.51±0.57)%,载药率为(32.82±0.65)%.体外释药结果显示,最初14d累计释药达3.784±0.359mg,约占总量的30%,日平均释药0.270±0.024mg;随后42d累计释药5.328±0.203mg,约占总量的50%,日平均释药0.126±0.013mg,第56天时释药0.032±0.009mg.体内释药实验显示,3d时右侧股骨粗隆间骨质内INH浓度明显高于左侧(P＜0.01);7～56d右侧INH浓度明显降低并低于左侧(P＜0.01);7～56d左侧股骨粗隆间骨质内INH浓度持续在20±g/s以上.空白组钛块表面有大量结核菌生长,实验组钛块表面几乎无结核菌生长.结论异烟肼聚乳酸微球具有缓慢释放药物的特性.可以作为持久抗结核治疗的缓释体置入骨结核病灶清除术后病灶局部.