白细胞介素-1受体拮抗剂对卵白蛋白致敏的哮喘豚鼠嗜酸性粒细胞凋亡的影响

目的研究白细胞介素-1受体拮抗剂(IL-1ra)，对慢性哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞凋亡及相关机制的影响。方法建立致敏豚鼠模型，连续吸入不同浓度IL-1ra,用卵白蛋白引喘豚鼠，连续8 d，分离血液、肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞，计数嗜酸性粒细胞，用放射免疫法测定上清液中阳离子蛋白（ECP），酶连免疫法（ELISA）测血清中IL-5，荧光显微镜观察嗜酸性细胞凋亡。结果IL-1ra能明显减少肺部嗜酸性粒细胞浸润，降低血清、肺泡灌洗液中ECP水平及血清中IL-5的含量，促进嗜酸性细胞凋亡。结论雾化吸入IL-1ra可以通过改变嗜酸性粒细胞的活性及浸润程度，达到治疗哮喘的目的。     

白细胞介素-1受体拮抗剂拮抗豚鼠哮喘的相关机制

目的：研究白细胞介素-1受体拮抗剂（IL-1ra)拮抗豚鼠哮喘的机制。方法：建立致敏豚鼠模型。吸入不同浓度的的IL-1ra。引喘豚鼠，检测引喘后8d血清，肺组织中，内皮素-1（ET），一氧化氮（NO），以及血液，肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸性粒细胞（EOS）的变化情况。结果：IL-1ra可以明显升高血清和肺组织中的NO浓度，降低血清和肺组织中的ET含量，减少血液和肺泡灌洗液中的EOS的数量；高剂量组缓解作用较强。结论：IL-1ra可增加机体内的NO浓度，降低ET的含量，减少EOS浸润，IL-1ra对豚鼠哮喘具有拮抗作用。     

孟鲁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸粒细胞炎症的抑制作用

目的　研究白三烯受体拮抗剂孟鲁司特 (mon telukast,MK )对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞 (Eosinophil,Eos)炎症的影响 ,探讨孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的可能机制。方法　以卵白蛋白致敏豚鼠制备哮喘模型。用密度梯度分离法分离并计数支气管肺泡灌洗液 (BALF)中不同密度的嗜酸性粒细胞 ;采用TUNEL技术原位检测嗜酸性粒细胞凋亡 ;通过ELISA法检测BALF中IL 5的含量 ;采用荧光酶标记法在PharmaciaUnicap 10 0System中测定BALF中嗜酸性粒细胞阳离子蛋白 (ECP)的水平。结果　孟鲁司特能降低哮喘豚鼠BALF中Eos的数量 ;在孟鲁司特治疗组 ,嗜酸性粒细胞凋亡指数明显升高 ,BALF中IL 5和ECP的含量降低 ,与模型组比较差异均有显著性。结论　降低气道IL 5和ECP的水平 ,促进嗜酸性粒细胞凋亡 ,减少嗜酸性粒细胞浸润 ,可能是白三烯受体拮抗剂孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的一个重要机制。     

孟鲁司特对哮喘豚鼠肺血管通透性的影响

目的 研究孟鲁司特（montelukast,MK）对哮喘豚鼠肺血管通透性和肺泡灌洗液（BALF）中一氧化氮（NO）水平的影响,探讨MK拮抗哮喘气道炎症的机制。方法 制备卵白蛋白致敏豚鼠哮喘模型。通过豚鼠引喘潜伏期和跌倒率的变化评价MK对哮喘的拮抗作用;苏木精-伊红（HE）染色观察肺组织炎症的改变;伊文思蓝分光光度法测定哮喘豚鼠肺血管的通透性;硝酸还原酶法测定BALF中NO的含量。结果 MK治疗组致敏豚鼠引喘潜伏期延长,跌倒率降低,肺组织炎症减轻;肺组织提取液中伊文思蓝含量及BALF中NO含量显著降低,与模型组相比差异有显著性。结论 降低BALF中NO水平和肺毛细血管通透性,是MK拮抗哮喘气道炎症的重要机制。     

盐酸氮(艹卓)斯汀对豚鼠实验性哮喘的作用及其机理研究

目的 :观察盐酸氮 艹卓 斯汀 (azelastinehydrochlo ride ,AZ)对豚鼠实验性哮喘的作用 ,并探讨其作用机制。方法 :采用组胺和乙酰胆碱诱发在体豚鼠实验性哮喘模型 ,观察AZ的整体作用 ;采用豚鼠离体气管螺旋条 ,观察AZ对组胺所致的豚鼠离体气管螺旋条痉挛的拮抗作用。结果 :AZ能够剂量依赖性地拮抗组胺和乙酰胆碱的引喘作用 ,明显延长引喘潜伏期 ,显著减少抽搐动物发生率 ,其ED50 为 0 .2 16mg·kg-1,95 %可信限为 0 .2 14～ 0 .2 19mg·kg-1。AZ可剂量依赖性地拮抗组胺对离体气管平滑肌的收缩作用 ,使组胺量效曲线平行右移 ,其pA2 值为 8.99。结论 :预先给予AZ能显著拮抗组胺和乙酰胆碱所诱发的在体豚鼠实验性哮喘 ,抑制组胺所致的气管螺旋条收缩     

孟鲁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞凋亡及Fas mRNA表达的影响

目的研究白三烯受体拮抗剂孟鲁司特(montelukast,MK)对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos)凋亡和Fas mRNA表达的影响。方法以卵白蛋白致敏豚鼠制备哮喘模型。用密度梯度离心法分离并计数支气管肺泡灌洗液(BALF)中的嗜酸性粒细胞；采用TUNEL技术原位检测嗜酸性粒细胞凋亡；通过逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术检测嗜酸性粒细胞Fas mRNA的表达。结果孟鲁司特能显著降低哮喘豚鼠BALF中Eos的数量；在孟鲁司特治疗组，嗜酸性粒细胞凋亡指数明显升高，Fas mRNA的表达显著增强，与模型组比较均有显著性差异。结论嗜酸性粒细胞凋亡与Fas mRNA表达增加高度相关；增强气道嗜酸性粒细胞Fas mRNA的表达，促进其凋亡，可能是孟鲁司特拮抗哮喘气道炎症的一个重要机制。     

小儿止咳平喘露的平喘作用及其对外周血可溶性细胞黏附分子-1的影响

目的在小儿止咳平喘露平喘、镇咳、祛痰的实验基础上，观察其对哮喘动物模型肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞计数及外周血可溶性细胞黏附分子-1（sICAM-1）的影响。方法①将预选合格的豚鼠30只随机分为3组，即正常对照组，细辛脑组，小儿止咳平喘露组，每组10只。采用豚鼠组胺引喘法观察小儿止咳平喘露的平喘作用。②采用豚鼠枸橼酸引咳法观察小儿止咳平喘露的镇咳作用，给药方式及剂量同平喘试验。③将ICR健康小鼠30只，随机分为3组，分组方式同平喘试验，采用小鼠气道酚红排泄法观察小儿止咳平喘露的祛痰作用。④将40只健康豚鼠随机分为4组，即正常对照组、模型组、细辛脑组、小儿止咳平喘露组，每组10只。建立卵蛋白致敏豚鼠哮喘模型，在肺泡灌洗液中计数白细胞总数和嗜酸性粒细胞数，并用ELISA法检测豚鼠血清sICAM-1的表达水平。结果小儿止咳平喘露能明显延长组胺诱导的豚鼠引喘潜伏期和枸橼酸引起的豚鼠咳嗽潜伏期，促进小鼠气道酚红排泄，降低哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞计数和血清sICAM-1水平。结论小儿止咳平喘露具有平喘、止咳、祛痰作用，其作用机制可能与降低哮喘豚鼠肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞计数和血清sICAM-1水平有关。     

国产盐酸氮（艹卓）斯汀抗组胺作用的实验评价

目的 :评价国产盐酸氮 艹卓 斯汀的抗组胺作用。方法 :皮内注射组胺增加豚鼠皮肤通透性 ;静脉注射组胺诱导豚鼠休克 ;组胺诱导离体豚鼠回肠平滑肌收缩。结果 :盐酸氮 艹卓 斯汀 (0 .0 5 ,0 .15 ,0 .4 5mg·kg-1,ig)可剂量依赖性地抑制组胺所致皮肤血管通透性增加 ;盐酸氮 艹卓 斯汀 (0 .0 5 ,0 .1,0 .2mg·kg-1,ig)可剂量依赖性地降低休克的反应程度 ,延长休克的潜伏期 ,降低豚鼠的死亡率。盐酸氮艹卓 斯汀 (10 -8,3× 10 -8,10 -7,3× 10 -7mol·L-1)可剂量依赖性拮抗组胺所致离体回肠平滑肌收缩 ,使组胺量效曲线平行右移 (pA2 值为 8.5 5 )。结论 :国产盐酸氮 艹卓 斯汀具有较好的抗组胺作用     

小儿哮喘宁平喘作用的研究

目的初步评价小儿哮喘宁的平喘作用,为临床应用提供科学的实验依据。方法运用乙酰胆碱及组胺致豚鼠哮喘模型、内毒素（lipoplysaccharides,LPS）致小鼠急性肺损伤模型、卵白蛋白（ovalbumin,OVA）致豚鼠过敏性哮喘模型及OVA加LPS致小鼠过敏性哮喘模型,评价小儿哮喘宁的平喘作用。结果小儿哮喘宁20、10、5 g/kg均能延长乙酰胆碱＋组胺所致豚鼠化学刺激性哮喘的引喘潜伏期及OVA致豚鼠过敏性哮喘的引喘潜伏期并减少跌倒动物数;20 g/kg小儿哮喘宁能降低LPS致小鼠急性肺损伤程度;对嗜酸粒细胞（eosinophil,EOS）浸润型过敏性哮喘动物模型的作用优于对中性粒细胞（neutrophil,NEU）浸润型过敏性哮喘动物模型的作用。结论小儿哮喘宁有平喘的作用,该作用可能与其抑制肺水肿、降低气道EOS浸润有关。     

国产盐酸氮革斯汀抗组胺作用的实验评价

目的评价国产盐酸氮革斯汀的抗组胺作用.方法皮内注射组胺增加豚鼠皮肤通透性;静脉注射组胺诱导豚鼠休克;组胺诱导离体豚鼠回肠平滑肌收缩.结果盐酸氮(艹卓)斯汀(0.05,0.15,0.45 mg-kg-1,ig)可剂量依赖性地抑制组胺所致皮肤血管通透性增加;盐酸氮革斯汀(0.05,0.1,0.2 mg·kg-1,ig)可剂量依赖性地降低休克的反应程度,延长休克的潜伏期,降低豚鼠的死亡率.盐酸氮(艹卓)斯汀(10-8,3×10-8,10-7,3×10-7mol·L-1)可剂量依赖性拮抗组胺所致离体回肠平滑肌收缩,使组胺量效曲线平行右移(pA2值为8.55).结论国产盐酸氮(艹卓)斯汀具有较好的抗组胺作用.     

特异性免疫治疗对哮喘大鼠白细胞介素-10和CD_4~＋CD_（25）~＋调节性T细胞的影响

目的：探讨特异性免疫治疗（specific immunotherapy,SIT）对哮喘大鼠白细胞介素-10（IL-10）和CD4＋CD25＋调节性T细胞（CD4＋CD25＋Tr）的影响。方法：40只健康雄性清洁级Wistar大鼠随机均分成正常对照组、哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组,每组10只。通过卵蛋白（OVA）雾化吸入的方法对致敏大鼠进行SIT干预,观察各组支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞分类及计数结果、血清和BALF中IL-10水平及外周血CD4＋CD25＋Tr百分率变化。结果：正常对照组BALF和血清中IL-10浓度分别高于哮喘组和SIT对照组（均为P〈0.01）,哮喘组和SIT对照组BALF和血清中IL-10浓度低于SIT治疗组（P〈0.01,P〈0.05）;正常对照组外周血CD4＋CD25＋Tr百分率显著高于哮喘组、SIT对照组和SIT治疗组（P〈0.01）,而SIT治疗组CD4＋CD25＋Tr百分率分别高于哮喘组和SIT对照组（P〈0.05）。结论：通过上调体内IL-10和CD4＋CD25＋Tr趋于正常状态可能是SIT治疗哮喘有效的重要机制。     

胸腺肽β_4对哮喘小鼠气道炎症的作用

目的观察胸腺肽β_4对哮喘小鼠气道炎症的影响。方法 60只健康C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组,哮喘模型组,地塞米松(25 mg·kg~(-1))组,胸腺肽β_4高剂量(5 mg·kg~(-1))组、中剂量(2.5 mg·kg~(-1))组和低剂量(1.25 mg·kg~(-1))组,每组10只。用卵白蛋白致敏法建立小鼠哮喘模型。正常对照组及哮喘模型组腹腔注射生理盐水,其他组注射相应药物,每日1次,共7 d。Medlab生理信号采集系统测定各组小鼠的肺功能,收集小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)进行细胞分类计数并检测小鼠血清中白细胞介素5(IL-5)的含量。结果哮喘模型组呼吸频率高于正常对照组,潮气量和肺每分钟通气量低于正常对照组,血清中IL-5浓度和BALF中嗜酸粒细胞百分比高于正常对照组(P<0.05)。胸腺肽β_4高剂量组和地塞米松组潮气量和肺每分钟通气量高于哮喘模型组,血清IL-5浓度低于哮喘模型组(P<0.05)。胸腺肽β_4各剂量组和地塞米松组呼吸频率均低于哮喘模型组,BALF中嗜酸粒细胞百分比也均低于哮喘模型组(P<0.05)。结论胸腺肽β_4能抑制哮喘小鼠嗜酸粒细胞、调节IL-5的水平,改善小鼠的肺通气功能。     

异丁司特对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞凋亡的作用及其机制

研究异丁司特 (ibudilast) 对哮喘豚鼠气道嗜酸性粒细胞 (eosinophil, EOS) 凋亡的作用及其机制。采用卵白蛋白致敏法制备豚鼠哮喘模型。收集支气管肺泡灌洗液 (BALF) 并进行白细胞计数及分类计数, TUNEL技术原位检测EOS凋亡, RT-PCR技术检测EOS的Fas mRNA表达, 酶联免疫吸附 (ELISA) 法测定BALF中粒细胞-巨噬细胞刺激因子 (GM-CSF) 及白介素-5 (IL-5) 的含量。结果表明, 异丁司特可明显减少哮喘豚鼠的白细胞总数和EOS数目; 在异丁司特剂量组, EOS凋亡细胞明显增多, Fas mRNA的表达显著增强, BALF中GM-CSF、IL-5含量显著降低, 与模型组比较有显著性差异。因此, 异丁司特抑制哮喘豚鼠气道EOS数目的增加、诱导EOS凋亡、增强Fas mRNA的表达、降低GM-CSF、IL-5含量可能是其拮抗哮喘的重要机制。     

射干麻黄药对对支气管哮喘小鼠模型气道炎症及外周血Th1/Th2的影响

目的:观察不同比例射干麻黄药对对支气管哮喘小鼠模型气道中炎症细胞及外周血Th1/Th2平衡的影响.方法:将80只BALB/c小鼠随机分为A正常对照组、B哮喘模型组、C地塞米松组、D麻黄单药组、E射干单药组及不同比例射干麻黄药对组F、G、H),每组10只.采用鸡卵蛋白(OVA)致敏和激发建立小鼠哮喘模型,给予不同药物对小鼠进行干预.干预完成后取支气管肺泡灌洗液(BALF)测定白细胞总数及嗜酸性粒细胞计数,采用ELISA检测小鼠血清中IL-4、IL-5、IL-13及IFNγ的水平,HE染色观察小鼠肺组织病理炎症等改变.结果:射干麻黄药对组可以显著减轻哮喘小鼠的哮喘症状,降低外周血中IL-4、IL-5、IL-13水平、升高IFN-γ水平,并能降低BALF中白细胞总数及嗜酸粒细胞水平.结论:射干麻黄药对可以显著减轻哮喘小鼠气道炎症,抑制炎症介质的释放,纠正Th1/Th2失衡,从而达到治疗哮喘的作用.     

秦氏循经敷贴对实验性哮喘豚鼠的作用

目的：探讨中药秦氏循经敷贴对哮喘豚鼠的作用。方法：30只健康豚鼠随机分为空白对照组（A组）、哮喘模型组（B组）和秦氏循经敷贴组（C组）,每组10只。以鸡卵蛋白攻击致敏。C组敷贴秦氏循经敷贴;B组敷贴含生理盐水的医用纱布。于末次敷药后检测豚鼠外周血嗜酸性粒细胞百分比、中性粒细胞百分比和白细胞总数,肺组织和支气管HE染色后观察病理改变。结果：与A组相比,B组外周血嗜酸性粒细胞百分比显著升高（P〈0.05）,C组较B组显著降低（P〈0.05）;中性粒细胞百分比和白细胞总数3组间无显著性差异（P〉0.05）。B组肺组织大量炎症细胞浸润,部分肺泡腔阻塞、实变,肺泡间隔明显增宽,支气管管壁血管扩张、管壁增厚;C组炎症细胞浸润较少,肺泡充气,无间隔增宽;A组炎症细胞浸润程度较轻,无支气管壁增厚。结论：秦氏循经敷贴能改善实验性哮喘豚鼠的肺及支气管的炎症反应,减少外周血嗜酸性粒细胞百分比,对哮喘豚鼠具有治疗作用。     

滨蒿内酯对哮喘豚鼠IL-4和IFN-γ含量的影响

目的 研究哮喘豚鼠血清及肺组织匀浆中IgE、白细胞介素-4(IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)的含量变化及滨蒿内酯对其的影响。方法 将动物分为3组:正常组、哮喘组和滨蒿内酯组,采用卵蛋白致敏复制豚鼠哮喘模型,滨蒿内酯组雾化吸入滨蒿内酯。分别采用化学发光法、放免法和双抗夹心ABC-ELISA法检测血清及肺组织匀浆IgE、IL-4和IFN-γ的含量。结果 哮喘豚鼠血清及肺组织匀浆中IgE、IL-4含量均明显增加(P<0.05),IFN-γ含量降低(P<0.05),而滨蒿内酯降低哮喘豚鼠IgE水平及IL-4含量(P<0.05),提高IFN-γ的含量(P<0.05)。结论 滨蒿内酯可调节因IL-4及IFN-γ之间失衡而导致的IgE异常合成,从而抑制哮喘的发生。     

氨茶碱对哮喘豚鼠嗜酸细胞IL-3、IL-5及GM-CSF受体表达的影响

目的　观察氨茶碱(AM)对嗜酸细胞(Eos)上白介素 5受体α(IL 5Rα)、白介素 3受体α(IL 3Rα)、粒 巨噬细胞集落刺激因子受体α(GM CSFRα)及共同β链(βcR)mRNA表达的影响,探讨茶碱促进哮喘Eos凋亡的机制。方法　 18只健康豚鼠随机分为正常组、哮喘组、茶碱组,每组 6只,以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型,密度梯度分离法分离支气管灌洗液(BALF)中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos),以末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,原位杂交检测各受体mRNA表达,RT PCR法检测EosIL 5Rα、IL 3Rα相对含量。结果　哮喘组HEos及NEos凋亡 (4±2, 3±2)明显低于正常组(8±2, 7±2,P<0 01),而哮喘组细胞数 (75±13, 51±11 )明显高于正常组(5±2, 10±3,P<0 01)。用AM 24h后不同密度Eos数量 ( 36±14, 33±8 )均明显低于哮喘组 (P<0 01, 0 05),AM组Eos凋亡 ( 15±5, 14±4 )明显高于哮喘组(P<0 01);哮喘组Eos表达IL 5、IL 3及GM CSFα受体mRNA,明显低于正常组 (P<0 01, 0 05 ),AM组中低密度Eos表达各受体mRNA均明显高于哮喘组 (P<0 05 );而哮喘组βcR表达(41±6, 39±7)表达显著高于正常组 (28±5,26±5,P<0 01),AM组βcR表达与哮喘组比较差异无显著性(P>0 05)。HEos表达各受体与NEo