糖基化终末产物对破骨细胞骨吸收功能的影响

目的　观察糖基化终末产物 (AGEs)对破骨细胞骨吸收功能的影响。方法　用人血清白蛋白和葡萄糖恒温孵育制备人AGEs,采用甲苯胺蓝染色和图像分析评价AGE对破骨细胞形成骨吸收陷窝的影响。结果　低浓度AGEs(50～ 2 0 0 μg/ml)对骨吸收陷窝的面积和数目无明显影响 ;只有高浓度AGEs(50 0～ 1 0 0 0 μg/ml)才能促进骨吸收陷窝面积的扩大和数目增加 (P <0 .0 5)。结论　AGE可能促进破骨细胞的骨吸收功能     

雌激素对体外培养破骨细胞功能的影响

目的　探讨雌激素对体外培养破骨细胞功能的影响。　方法　利用酶动力学法测定培养基中酸性磷酸酶 (ACP)和抗酒石酸酸性磷酸酶 (TRAP)活性 ;共聚焦显微镜观察破骨细胞内氢离子随雌激素浓度的变化情况 ;LeicaQuantimet 5 0 0图像分析系统对骨吸收陷窝进行图像分析 ;扫描电镜观察骨吸收陷窝变化。　结果　随着雌激素浓度的升高 ,处理组与对照组ACP和TRAP的活性分别从(1 6 9± 0 13)U/L和 (1 6 0± 0 14)U/L降低到 (1 16± 0 31)U/L和 (0 93± 0 34)U/L(均为P <0 0 1) ,骨吸收陷窝的数目与面积从 (13 2 5± 1 5 2 )个 /片和 (4 82 2 7± 2 2 5 2 3) μm2 减少到 (4 6 8± 0 2 4)个 /片与(35 6 35± 145 41) μm2 ,处理组与对照组比较差异具有显著性意义 (P <0 0 1)。破骨细胞相对荧光值经过短暂的下降后持续上升 ,在第 12 0 0s时达到最高值。　结论　雌激素能够抑制氢离子释放 ,同时能改变ACP和TRAP活性 ,因而能直接抑制破骨细胞的骨吸收功能。     

晚期糖基化终末产物抑制剂在心血管疾病中的研究进展

晚期糖基化终末产物（AGEs）通过各种机制参与心血管疾病的发生发展,AGEs抑制剂可通过减轻AGEs负荷而成为心血管病治疗的药物。本文分类概述了AGEs抑制剂的作用机制及临床应用,综合评价各类AGEs抑制剂的作用特点,便于其临床的合理应用。     

糖基化终末产物与急性冠状动脉综合征

<正> 糖基化终末产物(AGEs)由体内一些还原糖(如葡萄糖、果糖)与氨基酸结合,经非酶糖化和脂质氧化等一系列反应和结构重排而形成,其在血管壁沉积后可作用于内皮细胞外基质,刺激胶原蛋白发生交联,引起血管通透性增加和血管壁增厚,并可导致血管舒张功能障碍。在血管病变中,AGEs沉积是一个重要因素,其主要通过AGEs受体(RAGEs)起作用。AGEs在高血糖(糖尿病)和肾功能衰竭患者的血     

葡萄糖对大鼠骨髓破骨细胞骨吸收功能的影响

目的 观察葡萄糖对大鼠骨髓破骨细胞骨吸收功能的影响,探讨糖尿病骨质疏松的发病机制.方法 用巨噬细胞集落刺激因子、RANKL诱导大鼠骨髓单个核细胞分化为破骨细胞,同时给予不同浓度的葡萄糖(0、5.5、15、25 mmol/L)干预,通过观察骨吸收陷窝数量和面积比及破骨细胞膜表面整合索αvβ3(CD61)表达水平分析葡萄糖对破骨细胞骨吸收功能的影响.结果 (1)高糖(25 mmoL/L)组培养7 d骨吸收陷窝数量和面积比与其他3组相比明显增多(P＜0.05或P＜0.01).(2)高糖组破骨细胞膜表面CD61表达量及平均荧光强度3 d时与其他3组相比均明显上调(P＜0.05或P＜0.01);5、7 d时与对照组(0 mmol/L)相比明显上调(P＜0.05).结论 高糖可增强破骨细胞的骨吸收功能,这可能是糖尿病骨质疏松的发病机制之一.     

降钙素对破骨细胞骨吸收抑制作用的机理

降钙素对破骨细胞骨吸收抑制作用的机理于明香王洪复破骨细胞（ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔ，ＯＣ）是一种多核的骨吸收细胞，在骨再建过程中起着启动和先锋作用，与成骨细胞通过相互调控机制，共同完成骨的吸收与形成，使骨组织不断更新。破骨细胞功能过度活跃时，骨吸收亢进，...     

晚期糖基化终末产物与动脉粥样硬化

晚期糖基化终末产物(AGEs)是一种伴随糖尿病出现的重要的生化异常,本文将总结AGEs在动脉粥样硬化形成及进展过程中的分子学、细胞学机制以及最新的相关基础与临床研究结果,包括AGEs在细胞外基质、低密度脂蛋白修饰、血管损伤、氧化应激、免疫炎症反应中的作用机制,尤其是AGEs与其受体相互作用激活下游信号转导通路,促进活性氧产生及相关基因表达改变从而加速动脉粥样硬化进程。因此,更好地理解AGEs致动脉粥样硬化的生化机制,将有助于我们制定相应的预防及治疗糖尿病相关动脉粥样硬化的策略。     

骨质疏松症与破骨细胞性骨吸收

骨质疏松症是以骨量减少，骨组织微观结构退化为特征，以致骨的脆性增高而骨折危险性增加的一种全身性骨病，骨质疏松症就是由于骨代谢的失衡，破骨量大于成骨量所致，破骨细胞的分化或其功能的改变所导致的骨改建失衡是骨质疏松的重要病理基础，许多细胞因子在破骨细胞生成和骨吸收中起作用，破骨细胞骨吸收功能活跃是其发生的病理生理之一，对破骨细胞骨吸收功能的抑制是防治骨质疏松症的主要药理基础。     

晚期糖基化终末产物与骨代谢紊乱

晚期糖基化终末产物(AGEs)是碳水化合物以及Maillard反应中形成的代谢中间物,经蛋白质化学修饰后的产物。这些独特化合物是由AGEs受体识别。近来有研究指出骨蛋白也受糖基化修饰的影响。AGEs-AGE受体相互作用通过破骨细胞和成骨细胞核因子-κB途径导致细胞因子、生长因子和黏附分子的表达增加,进而导致骨重建过程紊乱,对骨质疏松发展起重要作用。另外,AGEs参与的骨组织微血管病变可能也是骨质疏松的一个病因。     

晚期糖基化终末产物对糖尿病大鼠主动脉结构和功能的影响

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)对主动脉血管结构和功能影响及氨基胍的保护作用。方法将80只雄性SD大鼠随机分为4组:空白对照组(A组),糖尿病组(B组),糖尿病氨基胍干预组(C组)和空白氨基胍干预组(D组),每组20只。药物应用12周观察主动脉功能和结构变化。结果与A组和D组比较,B组、C组主动脉环对去甲肾上腺素引起的收缩反应明显增强,对乙酰胆碱引起的舒张反应则均明显减弱,C组反应强度较B组明显减轻(P0.05,P0.01)。主动脉壁均有AGEs沉积,B组、C组较明显,C组较B组明显减轻(P0.01);超微结构观察显示,A组、D组主动脉内膜大致正常,B组、C组内膜破坏明显,与动脉环结果呈一致性趋势。结论糖尿病大鼠主动脉AGEs含量增多,损伤了主动脉的结构和功能,氨基胍能够减少AGEs的沉积,并对主动脉结构和功能有保护作用。     

Effect of pH on bone resorption by rat osteoclasts in vitro

Acidosis has been implicated in the pathogenesis of various metabolic bone diseases. Experimental acid ingestion is known to stimulate the release of bone mineral in humans and increase osteoclastic resorption surfaces in animals, but the mechanism has remained unclear. We have investigated the effect of medium pH on osteoclastic activity in vitro using a new method that allows direct measurement of bone resorption. Osteoclasts were disaggregated from neonatal rat long bones and allowed to settle onto thin slices of bovine cortical bone. After 24-h incubation in medium 199, adjusted to the required pH, bone slices were fixed, and the number and surface area of resorption pits per slice were determined. Reduction in medium pH from 7.4 to 6.8 resulted in a 14-fold increase in the mean area resorbed per bone slice (P less than 0.01). Five- and 9-fold increases were seen at pH 7.2 and 7.0, respectively. Incubation of bone cells with human PTH-(1-34) (100 ng/ml) did not significantly enhance resorption at either pH 7.4 or 6.4, whereas human calcitonin (50 pg/ml) produced near-total inhibition. Mean osteoclast and mononuclear cell numbers were unaltered by all treatments. This is the first direct demonstration that low pH stimulates cell-mediated bone resorption, an observation that may have considerable physiological and pathophysiological significance.     

糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞结缔组织生长因子表达的影响

目的 研究糖基化终产物对结缔组织生长因子(CTGF mRNA)及蛋白质表达的影响,探讨糖基化终产物致动脉粥样硬化机制. 方法 采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉平滑肌细胞.反转录聚合酶链反应、蛋白免疫印迹法检测血管平滑肌细胞结缔组织生长因子mRNA及蛋白质的表达. 结果 随着糖基化修饰的牛血清白蛋白(AGE-BSA)的干预浓度(100、200、400 mg/L)升高,CTGF mRNA的表达水平呈上升趋势,分别为(0.78±0.03)、(1.15±0.03)、(1.40±0.04)mg/L,与未干预(0.40±0.02)mg/L比较,差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度间差异亦有统计学意义(P<0.05).以200 mg/L的AGE-BSA对平滑肌细胞分别干预0、4、8、16、24、48、72 h,发现4 h时CTGF mRNA表达即已升高(0.93±0.04)mg/L,8 h时最高(1.29±0.04)mg/L,以后虽略有下降,但仍维持较高水平. 结论 糖基化终产物促进血管平滑肌细胞表达结缔组织生长因子,可能是其致动脉粥样硬化机制中的一个重要方面.     

糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞巨噬细胞炎性蛋白-1α表达的影响

目的　探讨糖基化终产物 (AGEs)对大鼠主动脉平滑肌细胞巨噬细胞炎性蛋白 1α(MIP 1α)mRNA及蛋白表达的影响。　方法　将培养的大鼠主动脉平滑肌细胞用不同浓度 (10 0、2 0 0、4 0 0mg/L)的AGEs孵育 2 4h及同一浓度 (4 0 0mg/L)AGEs孵育 0、12、2 4、36h ,采用RT PCR方法及流式细胞仪检测MIP 1αmRNA及蛋白的表达水平。　结果　对照组平滑肌细胞内MIP 1α呈弱表达 ,10 0、2 0 0、4 0 0mg/LAGEs培养平滑肌细胞 2 4h显著增高MIP 1αmRNA的表达 ,其电泳条带相对积分吸光度值分别为对照组的 1 36、1 75、2 4 5倍 (P <0 0 5 ) ;10 0、2 0 0、4 0 0mg/LAGEs孵育2 4h后 ,各组平滑肌细胞MIP 1α蛋白的平均荧光强度分别为 197± 3、2 6 0± 6及 375± 6 ,分别为对照组(15 8± 4 )的 1 2 4、1 6 3、2 37倍 (P <0 0 5 )。 4 0 0mg/LAGEs培养 12、2 4、36h后 ,各组平滑肌细胞MIP 1αmRNA的表达也明显增高 ,其电泳条带相对积分吸光度值分别为 0h组的 1 5 2、2 38、2 5 3倍(P <0 0 5 ) ;4 0 0mg/LAGEs孵育 12、2 4、36h后 ,各组平滑肌细胞MIP 1α蛋白的平均荧光强度分别为 2 4 4± 5、375± 6及 4 2 5± 3,分别为 0h组 (170± 5 )的 1 4 3、2 2 1、2 4 9倍 (P <0 0 5 )。　结论　糖基化终产物以时间及剂量     

The effect of sex hormones on bone resorption by rat osteoclasts

Although sex hormones are important in the attainment and maintenance of bone mass, the mechanism by which they exert their effect is unknown. We therefore tested the effects of estradiol-17 beta, dihydrotestosterone, and progesterone on osteoclasts, the cells that resorb bone. Osteoclasts were disaggregated from neonatal rat long bones, and incubated with or without the addition of osteoblastic cells or osteoblast-like cell lines. Bone resorption was assessed by scanning electron microscopy as the extent of excavation of the bone surface after incubation. We found dihydrotestosterone (1-100 nmol/l) and progesterone (10-1000 nmol/l) to have no significant effect on bone resorption. By contrast, E2 (1 nmol/l) reduced bone resorption in osteoclast cultures to which osteoblasts had been added, by approximately 25%, although consistent inhibition with other concentrations (0.01, 0.1, 10 nmol/l) was not observed. To our surprise, E2 was also associated with a delayed, dose-responsive, stimulation of bone resorption, in the range 0.1-10 nmol/l, in osteoclast cultures free from added osteoblastic cells. Tamoxifen, which itself had no effect on bone resorption, appeared to antagonise these E2 effects. Although the physiological significance of the stimulatory effect is unclear, we hypothesize that its presence prevented us, and previous workers, from observing dose-responsive inhibition of bone resorption by E2 in vitro.     

KB-R7943 restores endothelium-dependent relaxation induced by advanced glycosylation end products in rat aorta

ObjectivesThe aims of this study were to examine the effects of KB-R7943, an inhibitor of Na⁺/Ca^2 + exchanger, on impaired endothelium-dependent relaxation (EDR) induced by advanced glycosylation end products (AGE) in isolated rat aorta.MethodsBoth acetylcholine (ACh)-induced EDR and sodium nitroprusside (SNP)-induced endothelium-independent relaxation (EIR) were measured after the rings were exposed to AGE in the absence and presence of KB-R7943.ResultsCo-incubation of aortic rings with AGE (0.1 g/L) for 24 h resulted in a significant inhibition of EDR, but had no effects on EIR. After incubation of the rings in the co-presence of KB-R7943 (0.1–10 μM) with AGE for 24 h, KB-R7943 (10 μM) significantly attenuated impaired EDR. Superoxide dismutase (200 U/mL) and l-arginine (3 mM) could ameliorate the impairment of EDR caused by AGE, whereas d-arginine (3 mM) had no effect on EDR. Similarly, AGE decreased superoxide dismutase (SOD) activity and the release of nitric oxide (NO), and increased superoxide anion (O₂^.?) production in aortic tissue. KB-R7943 (10 μM) significantly decreased O₂^.? production and increased SOD activity and the NO release.ConclusionsThese results suggest that KB-R7943 attenuated the impairment of EDR elicited by AGE partially through scavenging oxygen free radicals.     

糖尿病大鼠主动脉糖化终产物的免疫组化研究

目的　研究糖尿病时主动脉壁非酶糖化的程度以及非酶糖化机制在糖尿病血管重建和慢性并发症发生发展中的作用。方法　应用抗糖化终产物（ＡＧＥｓ） 多克隆抗体,对糖尿病大鼠和氨基胍治疗后的糖尿病大鼠进行主动脉壁ＡＧＥｓ 的免疫组化研究,计算机图像处理系统定量分析。结果糖尿病时主动脉壁中膜ＡＧＥｓ 的相对面积呈进行性增加,４ 周时其相对面积就显著大于对照组（ Ｐ＜０．０１）,氨基胍治疗４ 周后主动脉壁中膜ＡＧＥｓ 的相对面积较糖尿病组显著降低（ Ｐ＜ ０．０５）,治疗２４周后降低更为明显（Ｐ＜ ０．０１）。结论　主动脉壁ＡＧＥｓ 的免疫组化定量研究能更直观地反映血管组织非酶糖化的程度,非酶糖化是引起血管重建的重要机制之一。     

运用流动注射分析检测血清糖基化终产物—肽水平

目的 建立小分子糖基化终产物－肽（ＡＧＥ－Ｐ）的一种检测方法 方法利用高效液相色谱仪（ＨＰＬＣ）构建流动注射分析系统,检测不同人群知清ＡＧＥ－Ｐ水平。结果 批内、批间ＣＶ分别为１．２１％和６．３５％,上率９４．８８％－１０１．８９％;与２４小时尿蛋白定量、尿白蛋白排泄率、血肌酐以及荧光法ＡＧＥ均显著相关,与ＨｂＡ１ｃ不相关;糖尿病和尿毒症患者血清ＡＧＥ－Ｐ均高于正常对照组,尿毒症透析前最 高,透析