系统性红斑狼疮患者外周血淋巴细胞凋亡及相关基因表达初步研究

随着研究手段的完善与对细胞凋亡作用的认识，现已证明细胞凋亡在免疫系统的发育以及免疫反应的过程中起重要作用。ＳＬＥ患者及实验小鼠体内细胞凋亡紊乱，表明细胞凋亡过程可能参与ＳＬＥ的发病。本研究应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）以及流式细胞技术，检测２９例ＳＬＥ患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬ）的凋亡及免作者单位：６１００４１成都，华西医科大学第一临床医学院内科疫组化技术检测ｂｃｌ２、Ｆａｓ蛋白的表达，旨在探讨ＳＬＥ患者的免疫异常与细胞凋亡及其调控之间的关系。１　资料与方法１１　…     

系统性红斑狼疮患者淋巴细胞粘附分子表达的观察

用流式细胞术及免疫双荧光染色法，分析了３５例系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者外周血淋巴细胞粘附分子表型（ＣＤ＿（１１ａ）／ＬＦＡ－ｌα、ＣＤ＿（１８）／ＬＦＡ－１β、ＣＤ＿（５４）／ＩＣＡＭ－１）。结合淋巴细胞变化对ＳＬＥ作进一步探讨。结果发现ＳＬＥ活动期ＣＤ＿（１１ａ）、ＣＤ＿（１８）表达随ＣＤ＿４细胞减少而降低、ＣＤ＿８细胞增多而增高，ＣＤ＿（５４）在ＣＤ＿（２０）细胞上亦增高。此外，ＣＤ＿８细胞的ＣＤ＿（１８）增高与ＣＤ＿４ＣＤ＿（４５）ＲＡ￣＋细胞降低呈负相关（Ｐ＜０．０５），而与ＣＤ＿（２０）细胞的ＣＤ＿（５４）增高呈正相关（Ｐ＜０．０１）。提示粘附分子可能在ＳＬＥ发病机理中具有重要意义。     

肝细胞癌患者肿瘤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞Fas抗原与Fas配体表达的研究

为研究肝细胞癌患者肿瘤细胞、肿瘤浸润淋巴细胞Ｆａｓ抗原与ＦａｓＬ配体的表达水平,探讨Ｆａｓ系统在肝细胞癌免疫逃逸及免疫反击中的作用,采用间接免疫荧光流式细胞术检测２０例肝细胞癌患者肿瘤细胞、肿瘤浸润淋巴细胞和外周血淋巴细胞Ｆａｓ和ＦａｓＬ的表达。结果显示,肝细胞癌患者肿瘤细胞Ｆａｓ与ＦａｓＬ表达水平较自身非肿瘤肝细胞上调;肿瘤浸润淋巴细胞与自身外周血淋巴细胞相比,Ｆａｓ表达上调而ＦａｓＬ表达下调。     

支气管哮喘淋巴细胞Fas抗原的表达

目的探讨哮喘患者淋巴细胞Ｆａｓ抗原的表达状况。方法取哮喘患者外周血淋巴细胞，加入地塞米松１０５ｍｏｌ／Ｌ进行细胞培养，分别于０、２、８、２４小时以流式细胞仪测定淋巴细胞表面的Ｆａｓ（ＣＤ９５）抗原。结果哮喘患者淋巴细胞Ｆａｓ抗原的自发表达较正常对照组低，哮喘组Ｆａｓ为５３％±２０％，正常组为８５％±１８％，（Ｐ＜０．０５）。体外经地塞米松诱导后其Ｆａｓ抗原表达显著增加（Ｐ＜０．０１）。结论哮喘患者免疫亢进可能与免疫细胞Ｆａｓ抗原自发性降低有关。地塞米松可诱导淋巴细胞Ｆａｓ抗原的高表达，可能是地塞米松诱导细胞凋亡的机理之一。     

系统性红斑狼疮患者血清sAPO-1/Fas水平测定及其意义

系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）免疫特征是Ｂ淋巴细胞多克隆活化,产生大量自身抗体,并有多个细胞因子异常［１］。近年作者单位：０３０００９太原市中心医院皮肤科（张开明、尹兴平、唱文娟）,内科（郭志杰）;长治市第二人民医院皮肤科（董峰）研究显示,ＳＬＥ患者体内细胞凋亡紊乱［２,３］,为此,我们采用ＥＬＩＳＡ法对ＳＬＥ患者血清中ｓＡＰＯ１／Ｆａｓ水平进行了测定,现将结果报告如下。１　资料与方法１－１　一般资料：不同程度的ＳＬＥ患者７１例,取自１９９４年８月—１９９８年６月皮肤科、内科及外院,女５１例,男２０…     

肝癌凋亡相关抗原的表达与原位末端标记的关系

目的探讨Ｆａｓ等凋亡相关抗原在肝细胞癌（ＨＣＣ）的表达及其与凋亡的关系．方法剖腹ＨＣＣ３０例，标本作Ｆａｓ，Ｂａｘ，Ｉｃｅ，Ｂｃｌ２免疫组化和原位末端标记（ＩＳＥＬ）．结果ＩＳＥＬ与ＨＥ的凋亡形态及定位基本吻合，ＨＣＣ有小片及大片的凋亡；凋亡与坏死形态不同，且坏死ＩＳＥＬ阴性，可与凋亡鉴别．凋亡及健全癌细胞Ｆａｓ，Ｂａｘ阳性率均较高．癌旁及正常肝的Ｆａｓ，Ｂａｘ均较ＨＣＣ者低．Ｂｃｌ２在ＨＣＣ表达甚低．结论凋亡的ＨＣＣ组织Ｆａｓ表达高，较健全癌细胞、癌旁及正常肝组织的表达为高     

类风湿关节炎软骨组织中 Fas/FasL 表达的免疫组织化学研究

目的：观察研究Ｆａｓ／ＦａｓＬ配体（Ｆａｓ／ＦａｓＬ）在类风湿关节炎（ＲＡ）患者及骨关节炎（ＯＡ）软骨组织中的表达和定位。方法：用免疫组织化学的方法对１８例ＲＡ，８例ＯＡ患者软骨组织中Ｆａｓ／ＦａｓＬ表达进行描述和组织细胞定位。结果：Ｆａｓ／ＦａｓＬ在ＲＡ局部增生或邻近炎症区的软骨细胞和软骨下淋巴细胞有大量Ｆａｓ／ＦａｓＬ的表达（１５／１８），而ＯＡ仅在软骨下淋巴细胞和邻近炎症区的软骨细胞有少量表达（１／８）。ＲＡ的阳性细胞上可见环状、颗粒状或粉尘状褐染物质存在于细胞膜及细胞浆中。结论：Ｆａｓ／ＦａｓＬ在软骨细胞及软骨下淋巴细胞上的异常表达可能参与了ＲＡ软骨组织破坏的机制。     

系统性红斑狼疮患者红细胞I型补体受体与淋巴细胞细胞间粘附分子—1／淋巴细胞功能相关抗原—1表达的研究

系统性红斑狼疮 (ｓｙｓｔｅｍｉｃｌｕｐｕｓｅｒｙｔｈｅｍａｔｏｓｕｓ ,ＳＬＥ)是一种自身免疫性疾病 ,在免疫学上最突出特点是Ｂ细胞功能亢进 ,自发产生大量多克隆免疫球蛋白和自身抗体。其主要病理改变是由于大量的自身抗体与抗原结合形成免疫复合物并激活补体引起血管炎症。随着人们对ＳＬＥ发病机制探讨的进一步深入 ,粘附分子 (ＣＡＭｓ)在ＳＬＥ中的异常改变已引起了人们的高度重视。已知淋巴细胞功能相关抗原 1(ＬＦＡ 1,ＣＤ11ａ/ＣＤ18)和细胞间粘附分子 1(ＩＣＡＭ 1,ＣＤ5 4 )是一对存在配受体关系的重要粘附分子 ,与ＳＬＥ…     

转化生长因子β1正,反义基因对人肝癌细胞SMMC—7721增殖的影响

目的探讨人转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）正、反义基因对人肝癌细胞 ＳＭＭＣ－７７２１增殖的影响。方法将ＴＧＦβ１正、反义基因分别导入ＳＭＭＣ－７７２１细胞,观察各转染细胞生长情况、凋亡特征及Ｆａｓ、ｐ５３的表达。结果与空质粒转染细胞相比,正义ＴＧＦβ１基因转染细胞生长速度减慢,出现明显的细胞凋亡形态学改变,３－羟基末端标记法（ＴＵＮＥＬ）为阳性,而反义基因转染细胞未发生上述改变,两者都可检测到ｐ５３信号,但未检测到Ｆａｓ表达。结论ＴＧＦβ１可通过诱导ＳＭＭＣ－７７２１凋亡而对其生长起负调控作用,其机制可能与Ｆａｓ／ＦａｓＬ、ｐ５３无关。     

溃疡性结肠炎患者淋巴细胞凋亡调控蛋白的表达

溃疡性结肠炎（ＵＣ）的病因和发病机制尚未完全阐明,已知免疫功能紊乱在ＵＣ发病机制中有重要作用［１－３］,但对发生免疫功能紊乱的基因调控机制以及皮质激素对参与ＵＣ免疫调控基因表达的影响还不了解,由于淋巴细胞凋亡发生异常是导致免疫紊乱和一些疾病发生的重要原因［４－７］,为此,我们应用免疫荧光标记和流式细胞技术动态分析了调控淋巴细胞凋亡的３个关键性蛋白ＣＤ９５（Ａｐｏ－１／Ｆａｓ）,Ａｐｏ－２－７,Ｂｃｌ－２在ＵＣ患者外周血淋巴细胞（ＰＢＬＣ）中的表达如下．１　材料和方法１．１　材料　ＵＣ患者３４例,…     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织细胞凋亡及Fas/FasL表达的变化及意义

目的　探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ） 发病中的作用机制。方法　ＡＲＤＳ组９ 例,对照组５ 例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组织化学技术观察ＡＲＤＳ患者肺组织细胞凋亡及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达的变化。结果　ＡＲＤＳ急性期患者肺组织细胞凋亡率明显高于对照组,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ 抗原、ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ急性期患者肺组织中的表达与对照组比较明显上调,并且与肺组织细胞凋亡增加呈正相关。结论　肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加和Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统活化可能参与ＡＲＤＳ急性期的发病。     

慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中FasL的表达

Ｆａｓ(ＣＤ95 )和ＦａｓＬ(ＣＤ95Ｌ)是近年来发现的一对介导细胞凋亡的细胞表面分子 ,在慢性乙型肝炎 (ＣＨＢ)患者的肝脏浸润淋巴细胞中可以检出ＦａｓＬ。一般认为 ,ＦａｓＬ的表达与肝脏炎症活动程度呈正相关 ,即肝脏的炎症活动性越强 ,ＦａｓＬ表达亦越强[1] 。我们采用流式细胞仪检测慢性乙型肝炎患者外周血淋巴细胞中ＦａｓＬ表达阳性细胞的百分率 ,以期为肝病的预后判断及指导治疗提供一个客观而简便快速的检测方法。材料及方法一、研究对象慢性乙型肝炎病例均选自第二军医大学长征医院1998年 5月至 1999年 4月的住院患者 ,共 5 2…     

Fas,Fas 配体与系统性红斑狼疮

Ｆａｓ、Ｆａｓ配体与系统性红斑狼疮杨正国＊综述梅长林审校关键词细胞凋亡系统性红斑狼疮抗原ＣＤ９５中图法分类号Ｒ３２９．２８系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）是一种典型的自身免疫性疾病，其特征是患者血中出现大量的自身抗体，并表现为多系统损害，其发病机理与多基因、...     

HepG2.2.15细胞诱导MT2淋巴细胞凋亡及其意义

观测表达Ｆａｓ抗原（Ｆａｓ）的Ｔ淋巴细胞一感染乙型肝炎病毒的ＭＴｓ细胞对表达Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）的实质细胞一ＨｅｐＧ２２．１５细胞的敏感性,了解乙型肝炎病毒感染对淋巴细胞和肝实质细胞交互作用的影响。方法体外培养ＭＴ２细胞,用乙型肝炎病毒诱导表达ＦａｓＬ。将表达ＦａｓＬ的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞与其共孵育后,以Ｔｕｎｅｌ法观测ＭＴ２细胞凋亡情况。结果ＭＴ２细胞感染乙型肝炎病毒后可测到Ｆａｓ表达信号。与表达ＦａｓＬ的ＨｅＰＧ２．２．１５细胞共孵育４８～７２小时以后,出现凋亡信号。结论乙型肝炎病毒诱导表达Ｆａｓ的ＭＴｓ细胞与表达ＦａｓＬ的ＨｅｐＧ２．２．１５细胞交互作用后发生凋亡,表明通常在乙型肝炎发病中作为效应细胞的淋巴细胞,亦可成为凋亡靶细胞。     

肝细胞生长因子表达载体的构建及在人肝细胞中的表达

１．材料和方法：质粒ＰＢＳ—７由日本大皈医学院 Ｔｏｓｈｉｋａｚｕ Ｎａｋａｍｕｒａ教授惠赠，内部含人类肝细胞生长因子（ＨＧＦ）的ｃＤＮＡ全长片段。真核表达载体ＰＥＧＦＰ—Ｎ３（美国ＣＬＯＮＴＥＣＨ生物技术公司产品），该质粒含绿色荧光蛋白（ｇｒｅｅｎ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ，ＧＦＰ）序列，在细胞内表达后可发出绿色荧光。首先根据真核表达载体ＰＥＧＦＰ—Ｎ３上的多克隆位点和ＨＧＦ的ＣＤＮＡ质粒酶切位点图谱，选定ＢａｍＨⅠ和 Ｓａ１Ⅰ做双酶切，构建ＨＧＦ的真核细胞表达载体，命名为ＰＥＧＦＰ…     

急性呼吸窘迫综合征患者肺组织细胞凋亡及Fas／FasL表达？…

目的 探讨细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征（ＡＲＤＳ）发病中的作用机制。方法 ＡＲＤＳ组９例,对照组５例,采用ＴＵＮＥＬ法以及免疫组织化学技术观察ＡＢＤＳ患肺组织细胞凋亡及Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统表达的变化,结果 ＡＲＤＳ急性期患肺组织细胞凋亡率明显高于对照组,且主要表现为肺泡上皮和肺血管内皮细胞凋亡增加;Ｆａｓ抗原,ＦａｓＬ在ＡＲＤＳ急性期患肺组织中的表达与对照组比较明显下调,并且与肺组织细胞凋亡     

Fas抗原与可溶性Fas在急性淋巴细胞白血病中的表达

目的：研究Ｆａｓ和可溶性Ｆａｓ在急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）中的表达,探讨Ｆａｓ在白血病细胞凋亡障碍中的作用。方法：分别用免疫组化ＳＡＢＣ法和双抗夹心ＥＬＩＳＡ法,检测３６例ＡＬＬ患者和１０例正常对照组骨髓Ｆａｓ抗原表达以及血浆可溶性Ｆａｓ（ｓＦａｓ）的水平。用半定量逆转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测１２例ＡＬＬ患者和７例正常对照骨髓细胞Ｆａｓ ｍＲＮＡ的表达。     

乙型肝炎患者肝组织中FasL的检测

目的探讨乙型病毒性肝炎患者肝组织中Ｆａｓ配体（ＦａｓＬ）的表达与分布及其与Ｆａｓ抗原的相互关系。方法应用免疫组织化学双标记技术，以免抗－ＦａｓＬ及兔抗一Ｆａｓ多克隆抗体，对４６例慢性肝炎及活动性肝硬化患者石蜡包埋肝组织中的ＦａｓＬ及Ｆａｓ进行了检测。结果Ｆａｓ及ＦａｓＬ的检出率分别为７１．７％（３３／４６）及６５．２％（３０／４６），Ｆａｓ于肝细胞胞浆内表达；ＦａｓＬ多在肝组织中浸润的淋巴细胞胞浆内表达（２３／３０，７ｔｉ，７％），也见于肝细胞浆中（２０／３０，６６．７％）。ＦａｓＬ阳性淋巴细胞主要分布于汇管区，肝小叫内很少见，ＦａｓＬ阳性肝细胞的分布类同Ｆａｓ阳性肝细胞：即多集聚于碎屑样坏死灶和假小叶的周边。免疫组化双标记染色显示Ｆａｓ及ＦａｓＬ可在同一或不同肝细胞胞浆内表达，但多分布于同一区域。结论病毒性肝炎肝组织中ＦａｓＬ的分布与Ｆａｓ抗原密切相关，Ｆａｓ／ＦａｓＬ系统在肝细胞损伤中起了重要的作用，肝细胞内ＦａｓＬ表达的意义尚待进一步研究。     

Fas L／Fas与自身免疫性甲状腺炎

Ｆａｓ和Ｆａｓ配体（Ｆａｓ Ｌ）是肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）受体及配体家族中的一对跨膜蛋白,也是控制细胞凋亡的死亡因子之一。自身免疫性甲状腺炎（ＡＩＴ）病人的甲状腺滤泡上皮细胞上Ｆａｓ,Ｆａｓ Ｌ的较高表达可能是机体抵抗自身免疫攻击的一种保护机制。向实验性自身免疫性甲状腺炎鼠体内转移编码Ｆａｓ Ｌ的质粒ＤＮＡ的结果表明,Ｆａｓ Ｌ的表达可诱使淋巴细胞,尤其是自身反应性Ｔ淋巴细胞的凋亡,达到治疗ＡＩＴ的     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞骨调素表达及临床意义

目的 探讨骨调素在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者中的表达及临床意义。方法 用流式细胞仪和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ杂交方法分别检测ＳＬＥ患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＯＰＮ蛋白和ｍｔｎＡ的表达。结果 活动期和稳定期ＳＬＥ患者ＰＢＭＣ ＯＰＮ蛋白和ｍＲＮＡ的表达均高于正常人（Ｐ〈０．０１）,ＳＬＥ患者ＯＰＮ蛋白主要在淋巴细胞表达,而活动期患者ＰＢＭＣ ＯＰＮ蛋白及ｍＲＮＡ的表达高于稳定期患者（Ｐ〈０