雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的抑制作用

目的探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠原位移植瘤生长的影响及其机制。方法建立人肝癌棵鼠肝原位移植瘤模型32只,随机分为空白对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组和高剂量组。用药两周后观察肿瘤体积的变化,免疫组织化学法检测肝癌组织中增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。结果对照组、FK506组、雷帕霉素常规剂量组、高剂量组平均肿瘤体积分别为:(310．15±40．16)、(605．59±116．23)、(99．19±15．27)、(151．61±27．81) mm3。与对照组相比,雷帕常规剂量组及高剂量组肿瘤体积明显缩小,PCNA、VEGF的表达均显著下调(P<0．01);FKS06组肿瘤体积与对照组相比明显增大,差异有统计学意义(P<0．01),PC- NA、VEGF的表达与对照组相比差异无统计学意义(P>0．01)。结论雷帕霉素具有显著抑制肝癌生长的作用,其机制可能是抑制了肝癌细胞的恶性增殖及VEGF的产生。     

乳酸-羟基乙酸-L-赖氨酸多肽接枝聚复合FK506和神经生长因子缓释膜促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

目的 观察乳酸.羟基乙酸-L-赖氨酸(RGD)多肽接枝聚复合FK506和神经生长因子(NGF)缓释膜桥接大鼠坐骨神经5 mm缺损促进神经再生的效果.方法 将24只雄性Wistar大鼠随机分成三组,切断左侧坐骨神经形成5 mm缺损,分别以RGD多肽接枝聚复合FK506和NGF缓释膜(A组)、RGD多肽接枝聚复合FK506缓释膜(B组)和RGD多肽接枝聚膜(C组)桥接缺损;A组膜FK506与NGF的含量分别为0.48 mg和2μg,B组膜FK506的含量为0.72 mg,C组为对照组.术后3个月,采用大体观察、神经电生理、小腿三头肌湿重恢复率、组织学观察和图像分析等方法规查神经再生情况. 结果术后3个月,膜外形完整、质脆;各组再生神经均通过了缺损,且A组的再生神经各项检测指标明显优于B组和C组.结论 RGD多肽接枝聚复合FK506和NGF缓释膜能够有效地促进损伤的大鼠坐骨神经再生,且FK506和NGF联合应用,可减少FK506的用量.     

基质细胞衍生因子1α诱导脂肪来源干细胞迁移促进糖尿病缺血下肢肌肉修复的实验研究

背景与目的：基质细胞衍生因子1α (SDF-1α)是一种定向诱导细胞迁移的趋化因子,研究显示,间充质干细胞（MSCs）在受损组织中可以沿着SDF-1梯度迁移到损伤部位并参与组织修复,然而目前尚缺乏SDF-1α诱导脂肪来源干细胞（ASCs）对糖尿病缺血下肢进行组织修复的体内研究。因此,本研究探讨SDF-1α促进大鼠脂肪来源干细胞（r ASCs）向糖尿病大鼠缺血下肢肌肉组织迁移及对组织修复的影响。方法：取SD大鼠脂肪组织分离培养rASCs,行细胞形态观察,鉴定成脂、成软骨及成神经分化能力,并使用带绿色荧光蛋白（GFP）的腺病毒转染和标记r ASCs。将大鼠用STZ法构建糖尿病模型,并结扎大鼠的右下肢股动脉造成下肢缺血后,随机分为两组,通过尾静脉向两组大鼠体内注射r ASCs,其中一组在患肢中段部位肌肉处注射SDF-1α蛋白（SDF-1α+rASCs组）,另一组则用同样方式注射等量磷酸盐缓冲溶液（rASCs组）。治疗后的第1、2周行大鼠双下肢血流量检测,计算及比较各组大鼠的缺血下肢-健侧下肢血流比值。在第4周时处死大鼠,取缺血部位的肌肉组织行HE染色,观察不同治疗方法组中肌肉组织的排列情况。...     

FK506结合蛋白5在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨FK506结合蛋白5(FKBP5)在肝细胞癌(HCC)中的表达及临床意义。方法:用q RT-PCR和Western blot法检测30对新鲜HCC及相应癌旁组织中FKBP5 m RNA和蛋白的表达;免疫组化法检测107例HCC患者石蜡标本中FKBP5的表达,并分析其与HCC临床病理特征及预后的关系。结果:30例新鲜HCC标本中,26例(86.7%)HCC组织FKBP5 m RNA的表达水平明显高于相应癌旁组织,HCC组织中FKBP5蛋白表达量明显高于其癌旁组织。石蜡标本分析显示,FKBP5蛋白在HCC组织中的高表达率明显高于癌旁组织(63.6%vs.28.0%,P0.001);FKBP5的表达水平与肿瘤大小(P=0.009)、肿瘤个数(P=0.018)、微血管侵犯(P=0.020)、TNM分期(P=0.009)和BCLC分期(P=0.024)有关,且FKBP5高表达患者术后总体生存率和无瘤生存率均明显低于低表达组(均P0.001);FKBP5高表达是HCC患者术后总体生存(HR=1.992,95%CI=1.127~3.522,P=0.018)和无瘤生存(HR=1.787,95%CI=1.067~2.992,P=0.027)的独立危险因素。结论:FKBP5在HCC组织中高表达,且与患者不良临床病理特征及预后密切相关,提示其是一个潜在的HCC预后分子标志物。     

离体冻伤模型创面愈合过程中基质细胞衍生因子1促表皮干细胞迁移的研究

目的 了解离体皮肤冻伤模型创面愈合过程中,基质细胞衍生因子1(SDF-1)对创缘表皮干细胞(ESC)的运动趋化作用.方法 体外构建三维皮肤等价物全层冻伤模型(创面呈孔形),免疫组织化学染色观察冻伤后3、7 d创缘间质内SDF-1的表达情况.另将冻伤模型分为对照组(创面区添加PBS 50 μL/孔)、SDF-1组(创面区添加100 ng/mL SDF-1,50μL/孔)和AMD3100组[创面区用100 ng/mL AMD3100(50μL/孔)处理30 min后,添加SDF-1 50μL/孔],观察各组创缘中ESC的分布变化.结果 免疫组织化学染色显示,冻伤后3、7 d创缘间质内SDF-1的表达逐渐增加.与对照组及AMD3100组相比,SDF-1组创缘基底层整合素β1阳性细胞数量增多,且部分阳性细胞向上层表皮迁移聚集,创缘ESC数量更多,表皮细胞层数增加.结论 SDF-1促进ESC向创缘迁移聚集参与创面修复,这可能是ESC参与创面修复过程的机制之一.     

离体冻伤模型创面愈合过程中基质细胞衍生因子1促表皮干细胞迁移的研究

Objective To study the promotion effect of stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) on the migration of epidermal stem cells (ESC) in the healing process of frostbite-wound model ex vivo. Methods A three-dimensional model of full-thickness frostbite of skin was constructed (with slot-like wound) out of skin equivalent. The expression of SDF-1 in wound stroma was observed with immunohisto-chemistry staining on post injury days (PID) 3 and 7. The model frostbite wounds were divided into control group (treated with PBS 50 μL per wound) , SDF-1 group (treated with 100 ng/mL SDF-1, 50 μL per wound) , and AMD3100 group [treated with 100 ng/mL AMD3100 (50 μL per wound) for 30 minutes, and then SDF-1 50 μL was added per wound]. The redistribution of ESC around wound was observed. Results The expression of SDF-1 in wound stroma increased gradually on PID 3 and 7. Compared with those in control and AMD3100 groups, there were more ESC and epithelial cell layers, and more integrin β1-positive cells appeared at the basal layer of wound in SDF-1 group, and some of the positive cells migrated upward to epidermis. Conclusions SDF-1 contributes to wound repair through promoting ESC to migrate toward and gather around wound edge. This may be one of the mechanisms of ESC participating in wound repair.     

离体冻伤模型创面愈合过程中基质细胞衍生因子1促表皮干细胞迁移的研究

Objective To study the promotion effect of stromal cell-derived factor 1 (SDF-1) on the migration of epidermal stem cells (ESC) in the healing process of frostbite-wound model ex vivo. Methods A three-dimensional model of full-thickness frostbite of skin was constructed (with slot-like wound) out of skin equivalent. The expression of SDF-1 in wound stroma was observed with immunohisto-chemistry staining on post injury days (PID) 3 and 7. The model frostbite wounds were divided into control group (treated with PBS 50 μL per wound) , SDF-1 group (treated with 100 ng/mL SDF-1, 50 μL per wound) , and AMD3100 group [treated with 100 ng/mL AMD3100 (50 μL per wound) for 30 minutes, and then SDF-1 50 μL was added per wound]. The redistribution of ESC around wound was observed. Results The expression of SDF-1 in wound stroma increased gradually on PID 3 and 7. Compared with those in control and AMD3100 groups, there were more ESC and epithelial cell layers, and more integrin β1-positive cells appeared at the basal layer of wound in SDF-1 group, and some of the positive cells migrated upward to epidermis. Conclusions SDF-1 contributes to wound repair through promoting ESC to migrate toward and gather around wound edge. This may be one of the mechanisms of ESC participating in wound repair.     

基因多态性对原发性肾病综合征患者他克莫司个体化治疗的影响

他克莫司(tacrolimus,TAC,FK506)是一种高效免疫抑制剂,已越来越多地应用于原发性肾病综合征的治疗,但TAC的使用剂量过大或不足在临床实践中仍较为普遍.近期研究显示,细胞色素P4503A4酶(cytochrome P450 family 3 subfamily A4,CYP3A4)、细胞色素P4503A...     

白藜芦醇对胰腺癌细胞的抑制作用

目的检测白藜芦醇(resveratrol,Res)体外单独及联合化疗药物对胰腺癌MIAPaCa-2细胞的抑制作用。方法在体外培养条件下观察Res,5-氟脲嘧啶(5-flurouracil,5-FU)和吉西他滨(Gemcitabine,Gem)分别对胰腺癌MIAPaCa-2细胞增殖的影响,然后根据以上抑制结果,选择对MIAPaCa-2细胞抑制率在15%～30%的5-FU或Gem药物浓度,再与不同浓度的Res联合用药。在联合药物处理MIAPaCa-2细胞48 h后,同样用噻唑蓝(methyl thia-zolyl tetrazolium,MTT)法检测联合用药,检测其对细胞增殖的抑制作用。结果Res,5-FU及Gem体外单独用药均能显著抑制MIAPaCa-2细胞的生长增殖,Res联合384.4μmol/L 5-FU或5.0μmol/L Gem后,对MIAPaCa-2细胞增殖的抑制作用显著提高,与单独用药组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外Res能显著抑制人胰腺癌MIAPaCa-2细胞的增殖,Res联合5-FU或Gem能显著提高对MIAPaCa-2细胞增殖的抑制作用。     

基质细胞衍生因子-1及其受体CXCR4对结肠癌肝转移潜能的影响

目的 探讨趋化因子基质细胞衍生因子-1(SDF-1)及其受体CXCR4对结肠癌肝转移潜能的影响.方法 采用Western-blot法检测不同结肠癌细胞株中CXCR4蛋白及不同组织中SDF-1蛋白的表达,MTT法检测SDF-1及抗CXCR4单抗对结肠癌细胞HT-29增殖能力的影响,体外趋化实验检测HT-29细胞定向迁移能力的变化.建立裸鼠结肠癌肝转移瘤模型,观察CXCR4特异性拮抗剂AMD3100对裸鼠肝转移率和转移瘤数目的 影响.结果 HT-29细胞表达较高强度的CXCR4蛋白,而肝组织表达高强度的SDF-1蛋白.与对照组相比,SDF-1可以诱导HT-29细胞增殖(0.76±0.11 vs0.38±0.06,P<0.05),抗CXCR4单抗对SDF-1的诱导增殖具有显著的抑制作用(0.42±0.08 vs0.76±0.11,P<0.05);SDF-1可促进HT-29细胞的趋化迁移,抗CXCR4单抗可显著抑制SDF-1诱导下HT-29细胞的迁移能力(104.6±18.3 vs 148.8±26.2,P<0.05).AMD3100治疗组裸鼠结肠癌肝转移率显著低于对照组(40% vs 100%,P<0.05),平均瘤结节数目显著低于对照组(7.8±2.6 vs 22.4±8.6,P<0.05).结论 SDF-1/CXCR4生物轴参与了结肠癌肝转移过程,拮抗CXCR4功能可抑制裸鼠结肠癌肝转移,其机制与抑制CXCR4能够有效阻断结肠癌细胞在SDF-1诱导下的细胞增殖和定向迁移有关.     

应用组织芯片技术检测mTOR和VEGF在结肠癌中的表达

目的 检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mammalian target of rapamycin,mTOR)和血管内皮生长因子( vascular endothelial growth factor,VEGF)在结肠癌中的表达,并探讨其变化与结肠癌病理参数的关系. 方法 在含有63例结肠癌标本的组织芯片上,利用免疫组化检测mTOR和VEGF在结肠癌和结肠正常组织中的表达,并统计分析相关结果与结肠癌临床参数的关系.结果 mTOR和VEGF在结肠癌中总表达率分别为42.6％和60.3％,在正常结肠粘膜组织中的表达率分别为21.4％和40.5％.结肠癌组织中mTOR和VEGF的表达率显著高于其在正常结肠组织中的表达(P＜0.05).mTOR的表达率与性别和年龄均无明显关系(P＞0.05).mTOR和VEGF与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移与远处转移呈显著正相关,mTOR和VEGF之间亦存在正相关性. 结论 mTOR和VEGF在结肠癌的发生发展中起到极其重要的作用,mTOR和VEGF可作为结肠癌治疗的靶点.     

他克莫司和雷帕霉素对肝癌肝移植患者Foxp3+ Treg的影响及防治排斥反应的研究

目的 探讨免疫抑制剂他克莫司和雷帕霉素对肝癌肝移植受者Foxp3+ Treg产生的影响及其防治排斥反应的疗效.方法 自移植后第2个月到第12个月,每月采血,采用实时荧光定量PCR法检测他克莫司组和雷帕霉素组肝癌肝移植受者新鲜外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA的表达水平,通过同期术后观察和实验室检查,比较两组受者间Foxp3 mRNA表达水平和急性排斥反应发生率的差异.结果 他克莫司组受者的外周血单个核细胞中Foxp3 mRNA表达水平(0.1032±0.0943)明显低于雷帕霉素组受者(1.2136±0.6738),差异有统计学意义(t=5.1610,P＜0.01);雷帕霉素组患者比同期他克莫司组受者术后急性排斥反应发生率明显减低,差异有统计学意义(x2=2.2222,P＜0.05).结论 他克莫司抑制了肝癌肝移植术后免疫耐受的诱导,而雷帕霉素可能参与了免疫耐受的诱导和维持;雷帕霉素对肝癌肝移植受者防治排斥反应的效果更好.     

吉西他滨诱导胰腺癌细胞ABCG2表达其化疗耐药的关系研究

目的：探讨吉西他滨诱导胰腺癌细胞ABCG2的表达及与其化疗耐药的关系。 方法：吉西他滨不同浓度、不同时间作用胰腺癌SW1990细胞后,用CCK-8法检测细胞的增殖抑制率,并计算吉西他滨不同作用时间的半数抑制浓度（IC50）;根据IC50值选择合适浓度的吉西他滨,作用SW1990细胞24、48、72 h后,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,并用Western blot和RT-PCR法检测ABCG2蛋白与mRNA的表达。 结果：吉西他滨作用后,SW1990细胞增殖明显抑制,并呈浓度与时间依赖性,但IC50值呈时间依赖性增加（均P<0.05）;3.9 mg/mL吉西他滨作用24、48、72 h后,SW1990细胞总凋亡率逐渐增加,但晚期凋亡率呈降低趋势,ABCG2蛋白与mRNA的表达明显升高,并呈时间依赖性（均P<0.05）。 结论：吉西他滨能抑制胰腺癌细胞SW1990的增殖,但作用呈时间依赖性减弱,这可能与其诱导ABCG2上调表达有关。     

五酯胶囊对他克莫司相关肝功能异常的影响及其与ABCB1基因多态性的关系

目的明确五酯胶囊对他克莫司相关肝功能异常的影响及其与ATP结合盒转运体B1(ABCB1)基因多态性的关系。方法选取联勤保障部队第九〇〇医院2014年11月至2018年3月接受肾移植、且术后应用他克莫司的受者170例,检测其ABCB1基因型,根据受者术后是否联用五酯胶囊分为研究组(105例)与对照组(65例),记录肾移植术后受者入院期间的用药情况、各项临床指标及他克莫司相关肝功能异常发生情况。比较两组受者及不同ABCB1基因型亚组间他克莫司相关肝功能异常发生率、类型及严重程度。结果两组受者间他克莫司相关肝功能异常发生率的差异无统计学意义(P>0.05)。对照组受者中,ABCB1 C1236T CC型受者的他克莫司相关肝功能异常发生风险为TT型受者的31.5倍(95%CI3.634～273.079,P=0.02),ABCB1 CGC单倍体携带者他克莫司相关肝功能异常的发生风险为非携带者的8.296倍(95%CI2.113～32.581,P=0.02)。而在研究组受者中则未发现类似情况。结论肾移植术后发生他克莫司相关肝功能异常的风险与ABCB1基因多态性显著相关,ABCB1 C1236...     

MDR1基因多态性对肾移植受者个体化应用他克莫司及预后的影响

目的 研究肾移植受者的多药耐药基因1(MDR1) C3435T和G2677T/A单核苷酸多态性(SNP)对他克莫司(Tac)个体化应用及受者预后的影响.方法 对127例移植肾功能稳定的肾移植受者进行随访,采用引物特异性聚合酶链反应技术分析其MDR1基因C3435T和G2677T/A的SNP,并监测受者全血Tac浓度谷值.结果 91例(71.65％)接受常规Tac三联免疫抑制治疗(非辅助治疗者),另36例受者(28.35％)需要辅助药物提高Tac浓度(辅助治疗者).3435C基因型者在辅助治疗者中占68.05％,在非辅助治疗者中占48.35％ (P＜0.01).非辅助治疗者中,MDR1G2677T/A、C3435T各基因型的血Tac浓度/剂量[单位为(μg/L)/(mg/kg)]的差异均无统计学意义(P＞0.05),C3435T-G2677T/A的单倍体分析也为相同结果(P＞0.05).4年随访期间,13例移植肾功能丧失,其中84.6％(11/13)的受者有MDR1 3435C基因位点,与移植肾功能正常者相比较,此基因型频率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 对于需要用辅助治疗升高Tac浓度的肾移植受者,其3435C基因型出现的几率高,C基因型受者可能倾向于发生移植肾功能丧失.     

DNT细胞对体内外胰腺癌生长的抑制作用

目的 探讨CD4 - CD8 - DNT细胞对体内、外胰腺癌生长的抑制作用.方法 采用四甲基偶氮唑盐法检测DNT细胞对人胰腺癌细胞株Panc-1生长的影响.将18只裸鼠随机分成3组,其中前两组皮下注射Panc-1细胞以建立荷瘤鼠人胰腺癌皮下移植瘤模型,第3组注射DNT与Panc-1细胞按数量5∶1共培养后的细胞混悬液.前两组待成瘤后,再随机分为对照组和治疗组.治疗组予塞来昔布4 mg/d口服,对照组每日给予等量蒸馏水口服.每2周测量裸鼠肿瘤体积一次,描绘肿瘤生长曲线.治疗结束后处死裸鼠,剥除瘤组织,测量肿瘤体积并计算抑瘤率.结果 (1)四甲基偶氮唑盐结果显示,DNT细胞能在体外抑制人胰腺癌细胞株Panc-1的生长,且DNT细胞对胰腺癌细胞的生长抑制呈剂量依赖性;(2) DNT细胞能够干预人胰腺癌裸鼠皮下移植瘤的生长.结论 DNT细胞能够抑制体内、外胰腺癌细胞的生长.     

SLC及其受体CCR7在胰腺癌中的表达及与淋巴管生成相关性的研究

目的 研究胰腺癌中次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体CCR7的表达情况,探讨其在胰腺癌淋巴管生成中的作用.方法 采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测30例胰腺痛病灶、癌旁组织、正常胰腺和胰周淋巴结中的中SLC、CCR7的表达情况,形态计量学图像分析法测定胰腺癌中微淋巴管密度(MLVD),分析其表达与胰腺癌MLVD间的关系.结果 SLC蛋白在胰腺癌组织、癌旁组织、胰周淋巴结、正常胰腺组织中的阳性率分别为16.7%、43.3%、46.6%和76.7%.CCR7蛋白在上述组织中阳性率分别为76.7%、66.7%、70.0%和30.0%;RT-PeR表明SLC、CCR7 mRNA表达与其蛋白表达强度相同.胰腺癌SLC阳性组与阴性组中MLVD无明显差异(P>0.05),CCR7阳性组中MLVD明显高于阴性组(P=0.004).结论 SLC与胰腺癌的分期及转移无关,CCR7的表达与胰腺癌TNM分期和淋巴结转移密切相关,其高表达对胰腺癌中淋巴管生成及淋巴结转移可能起促进作用.     

血清ANGPTL2与胰腺癌临床病理特征的关系及其在胰腺癌诊断中的价值

背景与目的：胰腺癌临床起病隐匿,患者确诊时大多数已属晚期,失去了根治性治疗的机会。因此,寻找一种新的生物标志物用于胰腺癌的诊断具有重要意义。本研究探讨胰腺癌患者血清血管生成素样蛋白2（ANGPTL2）与病理特征的关系及其在胰腺癌诊断中的价值。 方法：比较125例胰腺癌患者和66例健康体检者血清ANGPTL2水平;用统计学方法分析胰腺癌患者血清ANGPTL2水平高低与临床病理参数、CA19-9水平的关系以及胰腺癌的危险因素;采用ROC曲线分析血清ANGPTL2、血清CA19-9以及两者联合检测对胰腺癌的诊断效能。 结果：胰腺癌患者血清平均ANGPTL2水平明显高于健康人群（6.52 ng/mL vs. 3.78 ng/mL,P<0.05）;胰腺癌患者血清ANGPTL2水平与肿瘤的大小、组织学分级、淋巴结转移和TNM分期密切有关（均P<0.05）,而与性别、年龄、远处转移无关（均P>0.05）;血清ANGPTL2水平与CA19-9水平呈明显正相关（r=0.772,P<0.001）;单因素分析和多因素分析显示,糖尿病（P=0.016）和ANGPTL2（P=0.014）是引起胰腺癌的独立危险因素;血清ANGPTL2、CA19-9及两者联合检测对胰腺癌诊断的AUC分别为0.939、0.953、0.966,特异度与阳性预测值分别为92.4%与95.7%、84.8%与91.9%、98.5%与96.4%。 结论：胰腺癌患者血清ANGPTL2水平升高,其表达与临床病理特征密切相关;ANGPTL2与CA19-9联合检测对胰腺癌的诊断具有一定价值。     

下调G蛋白信号调控因子2表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

目的:探讨下调G蛋白信号调控因子2(GPSM2)表达对胰腺癌细胞化疗敏感性的影响。方法:构建GPSM2低表达的胰腺癌MIA-PaCa-2细胞并鉴定;将16只裸鼠随机均分为两组,分别皮下接种GPSM2低表达与自然表达的MIA-PaCa-2细胞构建荷瘤模型,两组中分别一半注射吉西他滨(100 mg/kg),一半注射等体积生理盐水(腹腔注射,3次/周,共注射4周),绘制瘤体生长曲线,并于末次注射后第3天处死裸鼠,测量肿瘤体积。结果:成功构建GPSM2表达下调的MIA-PaCa-2细胞。移植瘤的生长速度与体积大小的趋势均表现为GPSM2自然表达+生理盐水组GPSM2自然表达+吉西他滨组GPSM2低表达+生理盐水组GPSM2低表达+吉西他滨组。析因设计分析结果显示,单独吉西他滨或单独下调GPSM2基因表达对于抑制裸鼠瘤体生长的主效应均具有统计学意义(均P=0.000);吉西他滨联合下调GPSM2基因表达对于抑制裸鼠瘤体生长的交互效应尚未达到统计学意义(P=0.073);但吉西他滨联合下调GPSM2基因表达对于肿瘤生长的抑制作用相对于单独吉西他滨或单独下调GPSM2基因表达的单独效应均有统计学意义(P=0.000、0.003)。结论:下调GPSM2基因表达是否有增强胰腺癌细胞化疗敏感性的作用尚不确定,但下调GPSM2基因表达的同时予以化疗对胰腺癌生长的抑制效果明显强于两者单独作用。     

MBD1 RNA干扰对胰腺癌细胞VIMENTIN、GRP78表达影响的实验研究

目的：观察下调甲基化CpG结合域蛋白1（MBD1）表达后对胰腺癌细胞甲基化相关基因VIMENTIN、GRP78表达的影响,探讨MBD1介导的甲基化调控网络在胰腺癌发生、发展中的重要作用。方法：人工设计合成针对MBD1基因的小分子干扰RNA,构建MBD1-siRNA重组质粒,脂质体法转染人胰腺癌细胞株BxPC-3,RT-PCR和Western印迹法检测转染前后MBD1、VIMENTIN和GRP78 mRNA与蛋白表达的变化。结果：MBD1-siRNA重组质粒成功转染胰腺癌细胞系BxPC-3,并筛选得到稳定表达的细胞株。转染后胰腺癌BxPC-3细胞株MBD1、VIMENTIN和GRP78的mRNA与蛋白表达水平均明显降低。结论：MBD1下调可使胰腺癌细胞VIMENTIN和GRP78表达下降：MBD1可能通过调控甲基化相关基因的表达,在胰腺癌的发生、发展过程中起重要的作用。