射频消融诱导兔VX2肝脏移植瘤细胞凋亡

目的　探讨射频消融 (RFA)对兔VX2 肝脏移植瘤的治疗机制。方法　通过VX2 肿瘤组织混悬液肝内注入法建立兔肝脏肿瘤模型 ,随机分为实验组及对照组 ,分别予以RFA治疗及假性处理 ,于治疗结束后 0、12h、1、2、4、8、16d共 7个时间点分别切取肿瘤中心组织及边缘组织为检测标本 ,进行HE染色、透射电镜检查并运用TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况。结果　治疗组毁损区边缘部组织中有大量阳性细胞 ,中心部分亦有较多的阳性细胞 ,两者凋亡细胞指数差异非常显著 (P <0 .0 1)。对照组标本中仅发现极少数阳性细胞 ,且其中心区与边缘区无统计学差异 ,其凋亡细胞指数与治疗组标本相比 ,差异均非常显著 (P <0 .0 1)。于不同时间点观察 ,治疗组细胞凋亡高峰在 2 4h左右 ,而对照组细胞凋亡则无明显时间分布特征。结论　诱导肿瘤细胞凋亡是射频消融治疗肝脏恶性肿瘤的一项重要机制。其发生的部位主要是肿瘤周边区 ,时间高峰在RFA作用后 2 4h左右。     

载VEGF siRNA环五肽RGD偶联纳米金颗粒的基本特性及在射频消融中的应用

目的：探讨VEGFsiRNA环五肽RGD偶联纳米金颗粒（GNP）复合物（GNP-TyrRGD-VEGFsiRNA）的基本特性,以及对肝脏射频消融（RFA）毁损效应的影响。
　　方法：利用化学和静电吸附的方法合成GNP-TyrRGD-VEGFsiRNA;电镜观察复合物的离散性;凝胶电泳检测复合物中VEGFsiRNA的稳定性;采用CCK-8法检测复合物对正常肝细胞的细胞毒性;电镜检测复合物与正常肝细胞、肝癌细胞共孵育后的结合能力;在离体猪肝上检测复合物对RFA毁损效果的影响。结果：复合物较单纯GNP有更好的离散性;复合物所含VEGFsiRNA量基本等于最初VEGFsiRNA加入量;复合物与单纯GNP在30%的浓度以下均对正常肝细胞几乎无毒性;复合物对肝癌细胞的结合力明显高于正常肝细胞（P<0.05）,而单纯GNP对两种细胞的结合力无明显差异（P>0.05）;经射频针注入复合物的射频毁损直径明显大于注入生理盐水的对照组[（2.19±0.24）cmvs.（1.71±0.14）cm, P<0.05）。
　　结论：GNP-TryRGD-VEGFsiRNA复合物集靶向浓集与靶向治疗于一体,且可能有助于增强肝癌RFA的疗效。     

诺帝-褐藻酸钠微球血管内介入治疗兔VX2肝癌

目的探讨诺帝-褐藻酸钠微球(KMG)血管内介入治疗兔VX2肝癌的效果。方法将50只VX2肝癌模型兔随机分为5组(n=10),于DSA引导下行靶血管灌注:A组灌注生理盐水,B组诺帝,C组KMG,D组5-氟尿嘧啶+KMG,E组诺帝-KMG。术前1天及术后2周行增强CT扫描,比较各组肿瘤体积及体积增长率。采用免疫组织化学方法检测肿瘤组织血管内皮生长因子(VEGF)表达,计数肿瘤微血管密度(MVD)。结果术前1天各组肿瘤体积差异无统计学意义(P均0.05);术后2周,A、B组肿瘤体积及体积增长率均大于C、D、E组(P均0.05)。5组间VEGF阳性率及MVD差异均有统计学意义(P均0.01),E组VEGF阳性率及MVD均低于其他各组(P均0.05)。结论诺帝-KMG血管内介入治疗兔VX2肝癌效果较好。     

射频消融联合激活的树突状细胞疫苗对新西兰大白兔肝脏原位种植VX2肿瘤治疗的实验研究

目的 明确RFA联合激活的DC疫苗在对新西兰大白兔肝脏VX2种植瘤疗效以及生存率的影响.方法 24只雄性新西兰大白兔公分为2组(每组12只),分别为RFA+ PBS以及RFA+ DC组;建立新西兰大白兔肝脏VX2原位种植瘤模型,分离新西兰大白兔骨髓单核细胞体外培养并给予GM-CSF,IL-4诱导分化,加由VX2肿瘤组织制备的热休克抗原孵育加LPS刺激成熟,收集DC细胞接种至新西兰大白兔的爪垫处,3天后给予原位种植VX2肿瘤的新西兰大白兔进行超声引导下的射频消融治疗,观察90天后的存活率.结果 RFA对于肝脏原位种植VX2肿瘤的新西兰大白兔疗效确切,RFA联合激活的DC疫苗能够显著改善其生存率.     

MRI引导下兔肝血管旁VX2肿瘤射频消融的实验研究

目的探讨MRI引导下射频消融(RFA)治疗较大血管旁兔肝VX2肿瘤的疗效。方法选取11只新西兰大白兔,在MRI引导下将VX2肿瘤种植在兔肝大血管(直径≥3mm)旁。2~3周后行MR扫描,随机处死1只实验兔,行病理证实。剩余10只肿瘤兔行MRI引导下RFA,术后MR扫描后即刻处死实验兔行病理学检查。结果 11只实验兔肝脏VX2肿瘤均种植成功,肿瘤平均直径(1.35±0.22)cm。3D-vibe上肿瘤呈稍低信号,FS-TSE T2WI上呈稍高信号。10只肿瘤兔均成功接受RFA,消融灶在T2WI上呈等低信号;3D-vibe上呈同心圆状改变;大体病理上RFA凝固坏死区最大径为(2.16±0.50)cm,3D-vibe上高信号消融灶最大径为(2.27±0.66)cm,FS-TSE T2WI上低信号消融灶最大径为(2.25±0.58)cm,三者比较差异均无统计学意义。血管旁部分不完全消融的2个病灶,在3D-vibe显示为高信号环未完全包绕低信号瘤灶。结论 MRI引导下RFA治疗兔肝VX2肿瘤是一种有效、可行的治疗方法。     

射频消融联合亚砷酸局部治疗对兔肝VX2肿瘤MVD和VEGF表达的影响

目的探讨射频消融(RFA)联合亚砷酸(AA)局部治疗对兔肝VX2肿瘤微血管密度(microvesseldensity,MVD)和血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的影响。方法建立新西兰兔肝VX2肿瘤模型28只,按随机数字表法随机均分为4组,分别给予AA(AA组)、RFA(RFA组)、RFA AA(RFA AA组)和生理盐水(对照组)治疗,于治疗后第14d处死所有实验动物,通过免疫组织化学方法检测肿瘤组织MVD及VEGF的表达,并分析MVD与VEGF表达的相关性。结果对照组、AA组、RFA组及RFA AA组肿瘤组织MVD依次降低,分别为(38.50±0.44)、(23.07±0.47)、(18.65±0.39)和(11.36±0.36)个/HP,4组间两两比较均P<0.05;肿瘤组织VEGF表达阳性例数比也依次降低,分别为7/7、5/7、4/7和2/7,4组间两两比较均P<0.05。VEGF表达强度与MVD成正相关关系(r=0.47,P<0.01)。结论RFA AA联合治疗能减少肿瘤组织的MVD,抑制VEGF的表达。     

大剂量奥沙利铂逆行隔离灌注兔VX2肝癌观察

20世纪50年代就有学者提出采用肝脏隔离灌注(IHP)模式治疗肝癌[1].近年我们在既往实验基础上建立了兔VX2移植肝癌模型[2],将肝脏逆行隔离灌注模式应用于该肿瘤模型,观察不同剂量奥沙利铂(L-OHP)对兔VX2移植肝癌的作用,探讨高剂量L-OHP应用于隔离灌注的是否有可行性及其合适的剂量.     

经肝动脉或瘤体注射单纯疱疹病毒-胸苷激酶基因治疗兔肝癌

目的　观察瘤体内直接注射或经肝动脉注射载有单纯疱疹病毒胸苷激酶 (HSV TK)基因的EB病毒表达质粒 pDR2 /TK、丙氧鸟苷 (GCV )对原位兔肝癌的治疗效果。 方法　制作兔原位肝癌模型 (VX2 ) ,瘤体注射或经肝动脉注射质粒 pDR2 /TK ,腹腔注射GCV连续 10d。RT PCR检测肝癌HSV TK表达 ;螺旋CT监测肝癌大小 ,并观察兔存活时间。结果TK基因导入 10d后 ,直接注射组TK在肝癌组织强表达 ,癌旁组织弱表达 ,正常肝组织不表达 ;肝动脉注射组TK基因在肝癌表达稍强于癌旁及正常肝组织。直接注射组肿瘤大小 ( 3 .5 5± 0 .3 9)cm ,与经肝动脉注射+肝动脉结扎组肿瘤大小 ( 3 .70± 0 .3 7)cm无明显差别 (P >0 .0 5 ) ,但均明显小于对照组。瘤体直接注射TK基因 +GCV治疗组动物平均存活时间 ( 5 9.8± 3 .3 )d、肝动脉注射组 +肝动脉结扎组( 5 4.8± 4.5 )d明显长于各对照组 (P均 <0 .0 1)。结论　对实验性兔肝癌 ,瘤体内直接注射或经肝动脉注射导入治疗基因后 ,HSV TK/GCV系统具有较好的治疗效果。     

射频消融治疗兔肝脏肿瘤的实验研究

目的探讨射频消融(RFA)对肿瘤组织的治疗效果及其意义。方法通过VX2肿瘤组织混悬液肝内注入法建立兔肝脏肿瘤模型,随机分为实验组及对照组,分别予以RFA治疗及假性处理,比较RFA治疗前后模型动物的肝脏功能变化及B超影像学改变。结果1周内肝功能出现明显异常改变,多数指标在2周左右恢复(P<0.05);RFA治疗后肿瘤呈逐渐缩小趋势;瘤体血流信号明显减少或消失。结论射频消融治疗术对肝脏肿瘤疗效确切,会造成肝脏功能一过性损害改变;B超等影像学检查手段为临床RFA治疗提供了重要技术支持。     

兔肝VX2肿瘤模型的建立及影像学研究现状

VX2肿瘤细胞株是一种可移植的肿瘤细胞株,可接种到兔的肝脏、肾脏等部位,建立原位肿瘤动物模型。兔VX2肝癌模型是目前较常用的实验性动物肝癌模型,本文就兔肝VX2肿瘤模型的建立和影像学表现进行综述。     

入肝血流阻断下射频消融后毁损灶周围肝组织的病理变化

目的:评估血流阻断射频术后毁损灶周围正常肝脏组织的病理变化。方法:兔VX2肝肿瘤接种成功后分为单独射频组与射频联合入肝血流阻断组(联合射频组)。射频采用冷循环射频消融治疗(参数设定为30 W,8 min),入肝血流阻断采用Pringle法。1周后处死动物,通过HE染色观察术后毁损灶周围肝脏组织的病理变化。结果:与单独射频组比较,联合射频组毁损灶周边正常肝组织内中央静脉及Glisson鞘周围可见大量炎症细胞聚集,且肝细胞肿胀,门静脉、中央静脉扩张、胆管上皮增生等病理变化均更明显(均P<0.05)。结论:血流阻断后射频对毁损灶周围正常肝组织的病理损害较单独射频的损害严重。     

射频消融联合亚砷酸治疗兔肝VX2肿瘤的实验研究

目的:探讨射频消融联合亚砷酸局部治疗对兔肝VX2肿瘤的有效性和安全性，并探讨其机制。方法:建立新西兰兔肝VX2肿瘤模型28只，随机分为4组，每组7只，分别进行亚砷酸（亚砷酸组）、射频消融（射频组）、射频消融加亚砷酸（联合组）和生理盐水（对照组）治疗。于术前、术后1，3，7d和14d耳缘静脉抽血检查丙氨酸转氨酶（ALT），同时行超声学检查。治疗后第14天处死所有实验动物，通过免疫组织化学方法检测VEGF，并分析其与肿瘤体积的相关性。结果:联合组治疗后仅第1天ALT与术前差异有显著性（P<0.05）,第3天下降至接近术前水平;联合治疗能更好地抑制肿瘤生长;亚砷酸组、射频组及联合组肿瘤组织VEGF水平均低于对照组（P<0.05），射频组低于亚砷酸组（P<0.05），联合组低于其余2组，VEGF表达强度与肿瘤体积呈显著正相关（r=0.78,P<0.01）。结论:联合治疗能通过抑制肿瘤新生血管生成而抑制肿瘤生长，且对肝脏无明显损害     

经导管栓塞联合射频消融对兔VX2肝肿瘤的干预效果

目的 探讨经导管动脉栓塞术（TAE）联合射频消融（RFA）对兔VX2肝肿瘤的干预效果。方法 将兔VX2肝肿瘤模型分为4组,每组15只。对TACE+RFA组于TACE治疗15 min后行RFA,TAE+RFA组TAE治疗15 min后行RFA,RFA组仅给予RFA,TACE组仅给予TACE。分别于术前1天及术后3、7天检测血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）,术后7天检测肿瘤生长率、肿瘤坏死率及Suzuki评分;术后1、3、7天采用免疫组织化学法检测坏死区或凝固区周围肝组织热休克蛋白70（HSP70）表达,计算肝细胞凋亡指数及增殖指数。结果 TACE+RFA组术后3、7天血清ALT、AST水平均高于其他3组（P均<0.05）。术后7天,TACE+RFA组Suzuki评分高于其他3组,TACE+RFA组、TAE+RFA组肿瘤生长率低于RFA组和TACE组、肿瘤坏死率高于RFA组和TACE组（P均<0.05）。4组术后1、3、7天坏死区或凝固区周围肝组织HSP70表达均逐渐升高,TACE+RFA组术后1、3、7天均高于其他3组,术后1、3天TAE+RFA组均高于TACE组和RFA组（P均<0.05）。4组术后1、3、7天坏死区或凝固区周围肝细胞凋亡指数均逐渐降低,TACE+RFA组术后1、3、7天均高于其他3组,TACE组术后1、3天均高于TAE+RFA组、RFA组（P均<0.05）。4组术后3天肝细胞增殖指数均高于术后1、7天,TAE+RFA组术后1、3、7天均高于其他3组,RFA组术后1、3天均高于TACE+RFA组和TACE组（P均<0.05）。结论 TACE+RFA、TAE+RFA抑制兔VX2肝肿瘤生长效果优于单独应用TACE、RFA;TAE+RFA对肝损伤更小,促进肝细胞增殖、抑制其凋亡的效果更好。     

肝癌常用介入治疗方法疗效比较的实验研究

目的评价四种常用介入方法治疗兔VX-2肝癌的效果及不良作用。方法50只荷瘤兔随机分5组，表柔比星＋超液化碘油乳化剂注入组（EPI＋LP）；无水酒精组（PEI）；肝动脉化疗栓塞组（TACE）；射频消融组（RFA）；生理盐水治疗组（NS）。术前、术后2周行MRI扫描，比较肿瘤平均增长率；检测术前、术后肝肾功能指标；2周后取出肿瘤，比较坏死率，并行病理检查。结果除EPI＋LP组与TACE组外，各组两两间肿瘤平均增长率均有显著性差异（P〈0．05），RFA组肿瘤平均增长率最小。5组实验兔肿瘤坏死率均有显著性差异（P〈0．05），RFA组坏死率最大，达（98．43±2．76）％。除NS组外，各组肝肾功能指标术前、术后均有统计学差异（P〈0．05），RFA组及TACE组变化最明显。病理上，RFA组肿瘤呈重度坏死，有多核巨细胞反应，肉芽肿形成；其他各组呈轻-中度坏死，PEI组出现空泡变性（脂肪变性），部分血管有癌栓；各组胆管未受破坏。结论RFA的疗效最佳，PEI最差，EPI＋LP及TACE居中。临床上，应在兼顾肝肾功能情况下，选择适当的介入治疗方法。     

Radiofrequency ablation for eradication of pulmonary tumor in rabbits

BACKGROUND: Radiofrequency ablation (RFA) has emerged as an alternative for surgery in clinical oncology. This animal experiment was conducted to evaluate the feasibility of RFA in the treatment of pulmonary tumor. METHODS: Eighteen rabbits with pulmonary implantation of VX2 tumors were divided into two groups. Group A (n = 12) was treated with RFA by using a cooled-tip electrode technique. Group B (n = 6) received sham operation. The therapeutic efficacy was evaluated by survival rate, magnetic resonance imaging (MRI), postmortem microangiography, and histology. RESULTS: All animals in group B died within 3 months after tumor implantation. Tumor eradication was achieved in 9 of 12 rabbits (75.0%) in group A, of which 4 rabbits survived longer than 3 months free of disease and another 5 rabbits were found free of viable tumor when sacrificed. One rabbit was subjected to incomplete tumor ablation and two rabbits suffered from local tumor relapse and/or lung metastasis. The 3-month survival rate of RFA-treated rabbits was significantly higher (P < 0.01) than that of control rabbits. The typical MRI appearances of the acute RFA lesion consisted of five characteristic concentric zones, which corresponded to central needle track (zone A), tumor coagulation (zone B), pulmonary parenchyma coagulation (zone C), peripheral hemorrhage (zone D), and inflammatory layer (zone E) on histology. CONCLUSIONS: Eradication of pulmonary tumor could be achieved with current RFA technique in rabbits. MRI is a useful modality for assessment of lung tumor ablation.     

经皮瘤内注射艾迪注射液治疗兔移植性VX2肝肿瘤

目的探讨超声引导下复方中药艾迪注射液瘤内注射治疗兔移植性VX2肝肿瘤的作用效果及机制。方法建立新西兰大白兔移植性肝VX2肿瘤模型28只,随机分为3组,即艾迪注射液组（12只）、无水乙醇组（PEI组,8只）、生理盐水组（8只）。全部动物在接种2周后每隔3天向肿瘤内注入治疗药物,注射4次后处死动物。于术前术后兔耳缘静脉抽血行血生化检查,同时行64排螺旋CT扫描测量并计算肿瘤体积、肿瘤增长率及肿瘤坏死率,以及进行组织细胞学与细胞超微结构的观察。结果各实验组病灶均进行性增大,但艾迪注射液组肿瘤增长率及坏死率最小,与生理盐水组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,与无水乙醇组比较差异无统计学意义;TUNEL法检测显示艾迪注射液组凋亡指数明显高于无水乙醇组及生理盐水组（P〈0.05）;艾迪注射液组肝肾功能及白细胞计数治疗前后均无明显差异,组内及组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论艾迪注射液可诱导肿瘤细胞凋亡,对肿瘤细胞具有细胞毒性作用。     

兔肝VX2肿瘤RFA后残余瘤与 炎症的鉴别:CT与病理对照

目的通过CT扫描与病理对照,对兔肝VX2肿瘤RFA后残余瘤与炎症进行鉴别。方法兔肝VX2肿瘤射频消融（RFA）后不同时期行CT及病理检查,观察RFA后不同时期的残余瘤与炎症的CT表现。结果CT增强扫描,残瘤与炎症均表现为周边强化带,炎症还表现为强化带外侧的肝组织由内向外逐渐减弱强化影,炎症的这种强化影于术后第2天最强,之后逐渐减弱,2周后基本消失。结论RFA后1周内,CT增强扫描尚不能准确分辨残瘤与炎症反应带;两周后低密度灶周边出现强化影应考虑为残余瘤存在。