氟维司群联合曲妥珠单抗对人乳腺癌BT-474细胞株协同作用研究

目的 探讨氟维司群联合曲妥珠单抗对人乳腺癌BT-474细胞株的作用。方法 WST-1、Annexin/PI法分别测氟维司群、曲妥珠单抗单独与联合对BT-474细胞株增殖抑制率及凋亡率,Western blot法测药物对p-Akt、p-MAPK蛋白表达影响。结果 各组对BT-474细胞增殖抑制作用有浓度依赖性,CIED50=0.466,联合组较单药组凋亡率增高（P<0.05）,氟维司群组p-Akt、p-MAPK蛋白表达增高,联合组较氟维司群组明显降低。结论 氟维司群联合曲妥珠单抗对BT-474细胞作用协同,可能与增强抑制细胞增殖、促进细胞凋亡及抑制氟维司群增高p-Akt、p-MAPK蛋白表达有关。     

曲妥珠单抗对SW-620人结肠癌细胞增殖凋亡的影响及其与奥沙利铂协同作用的研究

目的观察不同浓度曲妥珠单抗单独或联合奥沙利铂对SW-620人结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响,并探讨其作用机制。方法体外培养SW-620人结肠癌细胞。(1)细胞增殖实验:将细胞分为2个大组:曲妥珠单抗组和曲妥珠单抗+奥沙利铂组,每个大组内设8个浓度小组(每个小组设5个复孔),曲妥珠单抗组的浓度依次为0、0.001、0.01、0.1、1、10、100及1 000μg/mL,对应的曲妥珠单抗+奥沙利铂组曲妥珠单抗的浓度与前相同,不同之处在于均加入了奥沙利铂(10μmol/L)。采用CCK-8法检测各组细胞的吸光度(A)值。(2)细胞凋亡实验:组别设置同增殖实验,只是曲妥珠单抗的浓度仅包括0、0.1、1及10μg/mL。采用流式细胞仪检测各组细胞的细胞凋亡率及细胞周期分布。(3)人表皮生长因子受体2(her-2)蛋白表达检测:分别以0、100及1 000μg/mL曲妥珠单抗,以及0、1及10μg/mL曲妥珠单抗联合奥沙利铂(10μmol/L)处理SW-620细胞,采用Western blot法检测各组细胞中her-2蛋白的表达。结果 (1)细胞增殖实验:同种浓度下曲妥珠单抗+奥沙利铂组的A值均低于曲妥珠单抗组(P0.05),且随着曲妥珠单抗浓度的增加,A值在逐渐降低。(2)细胞凋亡实验:同种曲妥珠单抗浓度下,曲妥珠单抗组+奥沙利铂组的细胞凋亡率均较曲妥珠单抗组高(P0.05)。流式细胞检测:不同浓度曲妥珠单抗+奥沙利铂处理后,随浓度增加,G_1期细胞比例呈下降趋势,S期细胞比例呈上升趋势,且呈剂量依赖性;至1μg/mL和10μg/mL时,与曲妥珠单抗组比较,曲妥珠单抗+奥沙利铂组的G_1期细胞比例较低,S期细胞比例较高(P0.05);在0.1、1和10μg/mL浓度的曲妥珠单抗条件下,曲妥珠单抗联合奥沙利铂组的G_2期细胞比例较曲妥珠单抗组升高(P0.01)。(3) her-2蛋白的表达水平:1、100及1 000μg/mL曲妥珠单抗组细胞中her-2蛋白的表达水平逐渐降低,3组间两两比较差异均有统计学意义(P0.05);0、1及10μg/mL曲妥珠单抗+奥沙利铂组中her-2蛋白的表达水平也逐渐降低,3组间两两比较差异也有统计学意义(P0.05)。结论高浓度曲妥珠单抗可抑制SW-620人结肠癌细胞的增殖,诱导其凋亡。曲妥珠单抗和奥沙利铂具有协同抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。     

HER2阳性乳腺癌曲妥珠单抗耐药机理的研究进展

目的总结人表皮生长因子受体2(HER2)阳性乳腺癌曲妥珠单抗耐药机理的研究进展。方法在Pubmed及CNKI中检索与HER2阳性乳腺癌曲妥珠单抗治疗耐药的机理有关的最新研究,并对其结果进行综述。结果目前研究发现,HER2基因扩增及蛋白高表达、HER2结合位点受损、HER2与雌激素受体之间的交互作用、HER2下游信号转导通路的激活、其他酪氨酸酶受体(RTKs)及膜蛋白表达增加、细胞周期及凋亡机理的改变和乳腺癌细胞多基因突变均与曲妥珠单抗耐药相关。结论 HER2阳性乳腺癌曲妥珠单抗耐药的机理较为复杂,通过对现有的可能耐药机理的综合分析发现,适当的多靶点联合治疗有望减少曲妥珠单抗耐药的发生,提高HER2阳性乳腺癌的疗效。     

新辅助化疗联合曲妥珠单抗对HER-2过表达乳腺癌的疗效观察

目的:观察新辅助化疗联合曲妥珠单抗对HER-2过表达乳腺癌的临床疗效。方法:39例HER-2过表达的乳腺癌患者,均采用多西他赛及卡铂新辅助化疗联合曲妥珠单抗治疗,6个周期后观察疗效并对乳腺癌组织中雌激素受体(ER)表达状态与病理完全缓解(pCR)率之间行单因素分析。结果:39例患者总有效率(OR)为94.9%(37/39);其中临床完全缓解(cCR)26例(66.7%),部分缓解(PR)11例(28.2%),疾病稳定(SD)2例(5.1%),无疾病进展(PD)病例。病理完全缓解(pCR)27例(69.2%)。单因素分析显示,ER阴性组的pCR率为82.4%,ER阳性组为59.1%。结论:在HER-2过表达乳腺癌的新辅助化疗中,多西他赛及卡铂联合曲妥珠单抗疗效良好,且ER受体阴性患者可获较高的缓解率。     

姜黄素增强奥沙利铂对结肠癌裸鼠皮下移植瘤的抑制和诱导凋亡作用

目的:探讨姜黄素增强奥沙利铂对肠癌HT-29细胞裸鼠移植瘤的诱导凋亡作用及其机制.方法:建立耐药肠癌HT-29细胞的裸鼠皮下移植瘤模型,将荷瘤鼠随机分为Con组(生理盐水)、Oxa组(奥沙利铂7.5 mg/kg)、Cur组(姜黄素50 mg/kg)和Oxa+Cur组(联合用药,奥沙利铂7.5 mg/kg和姜黄素50 mg/kg).腹腔注射给药,每3 d 1次,共8次.给药后测量肿瘤体积.免疫组织化学法检测肿瘤组织细胞增殖子(Ki-67)、凋亡抑制子(XIAP)和核转录子(NF-κ B)的蛋白表达.RT-PCR检测NF-κB和XIAP mRNA的表达.结果: Oxa+Cur组肿瘤体积和质量明显小其他各组.与Con组相比较,Oxa组、Cur组和Oxa+Cur组的Ki-67蛋白表达显著下降;与Oxa组和Cur组相比较,Oxa+Cur组的Ki-67蛋白表达显著下降.与Con组相比较, Oxa组、Cur组和Oxa+Cur组的NF-κB和XIAP蛋白和mRNA的表达显著下降;与Oxa组和Cur组相比较,Oxa+Cur组的NF-κB和XIAP蛋白和mRNA的表达显著下降.结论:姜黄素可以通过下调Ki-67和NF-κB 及XIAP基表达,增强奥沙利铂对肠癌HT-29细胞移植瘤的抑制细胞增殖和诱导凋亡作用.     

结肠癌K-ras突变与对西妥昔单抗耐药的实验研究

目的：研究结肠癌K-ras基因突变导致对西妥昔单抗耐药的可能机制。方法：通过基因测序及免疫细胞化学染色,筛选表皮生长因子受体（EGFR）表达阳性,同时K-ras基因呈突变型及野生型的结肠癌细胞各1株,应用细胞增殖实验（CCK8方法）、流式细胞技术（Annexin V标记）,检测西妥昔单抗（C225）在体外对结肠癌细胞增殖和凋亡的影响。同时用K-ras呈野生型和突变型的结肠癌细胞株,分别建立裸鼠皮下移植瘤模型,分成HT29-C225、HT29-NS、SW620-C225及SW620-NS组,给予西妥昔单抗（每3天注射1次,每次0.5mL,共4周）。治疗后,绘制肿瘤生长曲线,用TDT介导的缺口末端标记技术（TUNEL）检测细胞凋亡,用定量PCR、免疫组织化学染色（IHC）及蛋白印迹（Western-blot）等技术检测移植瘤标本中EGFR信号转导通路中AKT及其磷酸化蛋白的表达。结果：体外增殖及凋亡实验显示,西妥昔单抗对不同K-ras基因型的结肠癌细胞均未能显示细胞毒作用。而体内研究发现,西妥昔单抗能明显抑制K-ras野生型结肠癌裸鼠皮下移植瘤的生长,但对K-ras突变型者抑制作用较差。对K-ras突变型结肠癌裸鼠皮下移植瘤的定量PCR检测结果显示,西妥昔单抗治疗组裸鼠的AKT基因表达率高于对照组。IHC及Western-blot显示,西妥昔单抗治疗组与对照组间AKT蛋白的表达率无明显差异,但西妥昔单抗治疗组裸鼠的p-AKT表达率高于对照组。结论：K-ras突变状态与西妥昔单抗的疗效相关,K-ras突变型者EGFR信号通路中的衔接蛋白AKT呈自主激活状态,该基因突变可能是导致对西妥昔单抗耐药的机制之一。     

早期Her-2阳性乳腺癌的替代靶向治疗

大约20％的早期乳腺癌过度表达Her-2(erbB-2)受体,在历史上被认为是预后不佳的一种类型[1].抗Her-2靶向治疗显著地提高了罹患此类乳腺癌女性的预后,此治疗现在标准方案为12个月的曲妥单抗治疗(一种可以抗Her-2细胞外结构域的单克隆抗体).有4组随机对照试验显示曲妥单抗能明显提高患者的无瘤生存期和总生存期,其中2组试验(美国乳腺与肠道外科辅助治疗研究计划[NSABP]试验B-31和美国北方中心癌症治疗组试验N9831)的联合分析显示曲妥单抗能减低33％的病死率且差异具有统计学意义[2-5].在标准的新辅助治疗及辅助化疗后,1年期的曲妥单抗化疗与安慰剂相比,前者可提高总生存率,危险比为0.66 (95％ CI=0.47-0.91).在中期报告及继续随访后,因为52％的对照组交叉影响,在继续随访过程中风险比将减低[5].患者对曲妥单抗耐受性普遍较好,但和其他Her-2靶向治疗一样,均可造成无症状的左心射血分数减低,罕见情况下可出现充血性心功能衰竭.最新证据表明使用非蒽环类的联合用药可在对预后无明显影响的情况下减低上述风险[4].     

大黄素增强顺铂对膀胱癌T24细胞移植瘤抑制作用的实验研究

目的 探讨大黄素增强顺铂对膀胱癌T24细胞裸鼠皮下移植瘤的化疗作用及其机制。方法 建立膀胱癌T24细胞的裸鼠皮下移植瘤动物模型,将荷瘤鼠随机分为:Con组(生理盐水)、Cis组(顺铂50mg/kg)、Emo组(大黄素40mg/kg)和Cis+Emo组(联合用药,顺铂50mg/kg+大黄素40mg/kg)。腹腔注射给药,每3d1次,共8次。给药后测量肿瘤体积及质量。采用原位末端转移酶标记技术(Tunel)检测各组标本肿瘤细胞凋亡情况。免疫组织化学法检测肿瘤组织核转录因子(NF-κB)、凋亡抑制因子(XIAP)和胱天蛋白酶(Caspase-3)蛋白的表达。RT-PCR检测NF-κB、XIAP和Caspase-3mRNA的表达。结果 Cis+Emo组肿瘤体积和质量明显小于其他各组。Tunel实验显示,Cis+Emo组细胞凋亡水平明显高于其他各组。免疫组化和RT-PCR结果显示:与Con组相比较,Emo组和Cis+Emo组的NF-κB、XIAP蛋白、mRNA的表达显著下降;与Cis组和Emo组相比较,Cis+Emo组的NF-κB、XIAP蛋白、mRNA的表达显著下降;与其他各组相比,Cis+Emo组的Caspase-3蛋白和mRNA的表达显著增强。结论 大黄素可以通过下调NF-κB和XIAP、上调Caspase-3基因和蛋白的表达,增强顺铂对膀胱癌T24细胞移植瘤诱导凋亡作用。     

伊尼妥单抗联合吡咯替尼治疗HER2阳性晚期乳腺癌1例

HER2阳性乳腺癌约占所有乳腺癌的15%~20%,其侵袭性强且预后较差。曲妥珠单抗的应用显著改善了患者的预后,但仍有部分患者会出现曲妥珠单抗耐药。本文报道一例应用"伊尼妥单抗"联合"吡咯替尼"及"艾立布林"后疗效显著的曲妥珠单抗原发耐药的晚期乳腺癌患者。     

柳氮磺胺吡啶和5-氟尿嘧啶对裸鼠皮下移植瘤胰腺癌细胞BxPC-3凋亡基因的影响

目的 探讨5-氟尿嘧啶(5-FU)和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine, SZ)对裸鼠皮下移植瘤胰腺癌细胞BxPC-3凋亡基因的作用.方法 用RT-PCR和Western blot法分别检测5-FU及SZ单独或联合作用后裸鼠皮下移植瘤凋亡相关基因NF-κB (p65)、bcl-2及cyclinD1 mRNA和蛋白表达水平以及Bax蛋白表达水平的变化.结果 5-FU (7.5和15 mg/kg)和SZ(10和20 mg/kg)单独或联合作用裸鼠皮下移植瘤,其NF-κB (p65) mRNA表达相对含量和蛋白表达水平与各自对照组比较,除SZ组2个亚组外,其余各组均明显降低(P＜0.01); bcl-2和cyclinD1 在mRNA和蛋白水平以及Bax蛋白表达量与各自对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.01); 上述指标经多因素方差分析显示二者间有明显的交互作用.结论 Bax水平上调, bcl-2、cyclinD1及NF-κB (p65)水平下调可能是SZ可协同增强5-FU诱导裸鼠皮下移植瘤胰腺癌细胞BxPC-3凋亡的机理之一.     

反应停对人肝细胞癌生长侵袭的作用

目的 观察反应停对人肝细胞癌（HCC）血管生成和肿瘤生长侵袭的干预作用。方法 建立高转移潜能人肝癌裸鼠肝原位移植模型，随机分成4组。各组模型自建立次日起分别经腹腔注射0．5％羧甲基纤维素钠（CMC）、反应停（200mg／kg体重）、紫杉醇（13mg／kg体重）、反应停（200mg／kg体重）＋紫杉醇（13mg／d）。给药第30天处死裸小鼠，观察肿瘤生长、转移情况，分别用免疫组织化学和半定量逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）的方法检测癌组织CD34和血管内皮生长因子（VEGF）mRNA的表达并记录微血管密度（MVD）。结果 反应停组肿瘤重量、体积均与空白对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。各药物处理组肺转移灶计数、MVD和VEGF均低于对照组，以联合用药组最为显著。结论 反应停对HCC生长无明显抑制作用，但能抑制肿瘤血管生成并降低肺转移。     

KDR启动子驱动的CD/TK双自杀基因联合survivin基因干扰抑制肝癌细胞生长的体内研究

目的：探讨腺病毒介导的KDR启动子驱动的CD/TK双自杀基因系统（Ad-KDRP-CD/TK）联合survivin基因干扰对肝癌细胞在裸鼠体内生长的抑制作用。
　　方法：将20只裸鼠随机分均为模型组（皮下植入BEL-7402肝癌细胞成瘤,不加任何处理）、双自杀基因转染组（皮下植入转染Ad-KDRP-CD/TK的BEL-7402细胞,成瘤后瘤内注射前药更昔洛韦与5-氟胞嘧啶）、survivinsiRNA转染组（皮下注射BEL-7402肝癌细胞,成瘤后瘤内注射survivinsiRNA/Lip-DMEM转染混合物）、联合转染组（双自杀基因转染+survivinsiRNA转染处理）。治疗2周后处死各组小鼠,称取肿瘤质量,计算肿瘤抑制率,检测瘤组织微血管密度（MVD）及survivinmRNA与蛋白表达。结果：各治疗组的肿瘤质量明显小于模型组（均P<0.05）,且联合转染组的抑瘤率最大（均P<0.05）;肿瘤组织MVD、survivinmRNA与蛋白水平均明显降低,且联合转染组的降低程度最为明显（均P<0.05）。
　　结论：双自杀基因联合survivin干扰是抑制鼠肝癌细胞在体内生长的有效途径。     

瘦素对人乳腺癌裸鼠移植瘤雌激素受体α、βmRNA的调控作用

目的通过荷人乳腺癌裸鼠模型来进行在体研究外源性人类瘦素对移植瘤组织内雌激素受体(ER)a、β mRNA的调控作用.方法应用人乳腺癌MCF-7细胞制备荷人乳腺癌裸鼠模型,随机分成瘦素实验组(n=30)及0.9%的氯化钠溶液对照组(n=30).实验组采用瘤周皮下注射人重组瘦素连续15 d,对照组给予皮下注射相同剂量0.9%的氯化钠溶液.实时荧光PCR法扩增移植瘤组织内ERα、ERβ mRNA并进行相对定量分析.结果成功建立荷人乳腺癌裸鼠模型,并进行了瘤周皮下注射人类瘦素干预.ERα mRNA表达量在瘦素组高于0.9%的氯化钠溶液组(P＜0.01),ERβmRNA表达量在瘦素组低于0.9%的氯化钠溶液组(P＜0.01).结论通过瘤周皮下注射人类瘦素来干预荷人乳腺癌裸鼠是安全的.ERα与ERβ都可作为人类瘦素的作用靶点.外源性人类瘦素可以上调人乳腺癌裸鼠异种移植瘤内ERαmRNA的表达,下调ERβ mRNA的表达.

Abstract：

Objective To investigate the different effect of exogenous leptin on estrogen receptor α,β mRNA in human breast tumor tissue in nude mice xenograft models. Methods We made nude mice xenograft models of MCF-7 human breast cancer cells cultured in vitro, then divided them into experimental group of]eptin( n = 30)and control group of normal saline( n = 30)randomly. The models of experimental group were injected subcutaneously the recombinant human leptin for 15 consecutive days, the models of control group were injected subcutaneously the same dose of normal saline. A real- time quantitative RT- PCR assay was developed to quantify the expression of estrogen receptor α, β mRNA in tumor tissue, using the relative quantitative analysis. Results The leptin-intervened nude mice xenograft models were safely established. The relative quantitation of estrogen receptor α mRNA was significantly higher in the leptin group than in the normal saline group ( P ＜ 0.01 ), the relative quantitation of estrogen receptor β mRNA was significantly lower in the leptin group than in the normal saline group ( P ＜ 0. 01 ). Conclusion The nude mice xenograft models can be safely intervened with human leptin by subcutaneous injection around tumor.Estrogen receptor is one of the targets of leptin in the progress of breast cancer. Exogenous human leptin can up- regulate the expression of estrogen receptor α and down- regulate the expression of the estrogen receptor βin nude mice xenograft models of human breast tumor.     

Survivin反义寡核苷酸对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究

目的探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法30只裸鼠建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机分3组，每组10只。分别于瘤周及瘤体注射阳离子脂质体（1ipofectin，Lip），ASODN／Lip及NODN／Lip，每5天1次，共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和裸鼠体重的变化。用TUNEL法，透射电镜观察体内瘤体的细胞调亡情况；用Western—blot检测各组肿瘤的survivin蛋白表达情况。结果成功建立了裸鼠皮下移植瘤模型。ASODN／Lip治疗组的肿瘤体积在治疗期内减少，抑瘤率达70．10％；而NODN／Lip治疗组和Lip对照组肿瘤体积增加。各组裸鼠体重无明显变化。ASODN／Lip组细胞凋亡率为38．6％明显高于其他两组，差异有显著性（P〈0．05）。ASODN／Lip组肿瘤的survivin蛋白表达明显降低。结论survivin反义寡核苷酸可有效地抑制人乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长速度，并促进诱导肿瘤细胞的凋亡。     

蜈蚣提取液对裸鼠移植肝癌抑癌作用及机制的研究

目的探讨蜈蚣提取液对裸鼠移植肝癌的治疗作用及机制。方法建立裸鼠Bel-7404人异位肝癌移植模型,以蜈蚣提取液灌胃31d后,用免疫组化法对肿瘤组织标本进行X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、Bax基因、血管内皮细胞生长因子(VEGF)和促血管生成素2(Ang-2)的检测。结果对照组XIAP,VEGF与Ang-2的染色细胞数、染色强度及OD值均较治疗组多而强,而Bax的染色强度、染色细胞数及OD值较治疗组少而弱,差异均有统计学意义(P0.01)。结论蜈蚣提取液能抑制裸鼠Bel-7404移植瘤的生长,其机制与抑制肿瘤血管生成、促进肿瘤细胞凋亡有关。     

乳腺癌间质成纤维细胞对MDA-MB-231种植肿瘤生长和转移的影响及其机理探讨

目的通过裸鼠接种方式进行体内实验,观察乳腺癌间质成纤维细胞（CAFs）对种植肿瘤生长和转移的影响,并探讨其作用机理。方法选择MDA．MB．231乳腺癌细胞系细胞（简称MDA）、乳腺癌患者的CAFs和癌旁正常乳腺组织的正常成纤维细胞（NFs）,结合不同的试剂,包括生理盐水（NS）、基质细胞衍生因子-1（SDF-1）配体拈抗剂1,4,8,11．四氮杂环十四烷（AMD3100,简称AMD）,组合成以下6种处理：MDA＋NS、NFs＋NS、MDA＋NFs＋NS、MDA＋NFs＋AMD、MDA＋CAFs＋AMD及MDA＋CAFs＋NS。将36只Bal b／c无胸腺裸小鼠按配伍随机方法分成6组,分别接受上述处理。将细胞悬液接种于裸鼠,接种后饲养46d处死,观察种植肿瘤的大小,有无淋巴结、肺及肝脏转移。采用ELISA法检测6组裸鼠的血浆SDF-1浓度,采用real-timePCR法检测6组裸鼠肿瘤组织中的SDF．1mRNA水平,采用Westernblot法检测6组裸鼠肿瘤组织中SDF-1蛋白的表达水平。结果除NFs＋NS组外,其余5组均有种植肿瘤形成。MDA＋CAFs＋NS组裸鼠的种植肿瘤体积[（9．092±2．662）cm3]、血浆SDF．1浓度[（75．25±16．23）ng／L]、肿瘤组织中SDF-1 mRNA（中位数为14．714）及其蛋白（中位数为0．673）的表达水平均最高,与其他5组比较差异均有统计学意义（P〈0．050）。6组裸鼠的肝和肺组织均未见转移灶。但MDA＋CAFs＋NS组有4只、MDA＋NS组有2只裸鼠存在腋窝淋巴结转移,其他组均未发现腋窝淋巴结转移。结论乳腺癌CAFs对乳腺癌的生长起促进作用,且可促进肿瘤淋巴结的转移;其作用可能是通过乳腺癌CAFs分泌SDF-1,与其特定的受体即趋化因子受体4（cxcR4）结合来实现的。     

携紫杉醇和Herceptin高分子超声造影剂体外寻靶及体内肿瘤药物含量分析

目的探讨携紫杉醇和Herceptin高分子造影剂(Pac-PLGA-HER)的体外寻靶能力及体内肿瘤药物含量。方法通过双乳化法及碳二亚胺法制备Pac-PLGA-HER,观察其与乳腺癌细胞MCF-7的结合能力。将25只种植有乳腺癌细胞MCF-7的裸鼠分为单纯紫杉醇(PTX)组、单纯载药微球(Pac-PLGA)组、单纯载药微球+超声(Pac-PLGA+US)组、靶向载药微球(Pac-PLGA-HER)组及靶向载药微球+超声(Pac-PLGA-HER+US)组,根据微球载药量调整到相应药物浓度,经尾静脉注入裸鼠体内,观察各组在荷瘤裸鼠肿瘤内药物含量情况。结果Pac-PLGA-HER平均粒径为(777.40±65.90)nm,包封率为(65.84±2.25)%,载药量为(6.58±0.23)%,体外寻靶实验可观察到Pac-PLGA-HER与乳腺癌细胞MCF-7大量结合。体内药物释放实验显示Pac-PLGA-HER+US组在裸鼠肿瘤内药物浓度高于其他各组(P0.01)。结论 Pac-PLGA-HER与乳腺癌细胞MCF-7有较好的结合能力,体内药物释放实验中Pac-PLGA-HER+US组在裸鼠肿瘤内有较高的药物浓度。     

Dual inhibition of the epidermal growth factor and vascular endothelial growth factor phosphorylation for antivascular therapy of human prostate cancer in the prostate of nude mice

BACKGROUND: Androgen-independent prostate cancer (PCa) may be susceptible to modulation of the tumor microenvironment. We determined whether a dual tyrosine kinase inhibitor (AEE788) of the epidermal growth factor receptor (EGF-R) and vascular endothelial growth factor receptor (VEGF-R) combined with chemotherapy can produce therapy of human PCa in nude mice. METHODS: PC-3MM2 human PCa cells were injected into the prostate of nude mice. Three days later, the mice were randomized into four groups: saline control, paclitaxel, AEE788, and AEE788 and paclitaxel. The mice were treated for 5 weeks and necropsied. Tumor incidence, weight, and incidence of lymph node metastasis were recorded. Tumor tissue was analyzed immunohistochemically. RESULTS: Treatment of mice with AEE788 or AEE788 plus paclitaxel significantly decreased tumor incidence, total tumor weight, and incidence of lymph node metastasis. AEE788 treatment alone or in combination with paclitaxel inhibited the phosphorylation of EGF-R and VEGF-R on tumor cells and tumor-associated endothelial cells. Therapeutic efficacy correlated with an increase in apoptosis of tumor cells and tumor-associated endothelial cells. CONCLUSION: Blockade of EGF-R and VEGF-R signaling pathways coupled with chemotherapy suppressed the progressive growth and metastasis of human PCa cells growing orthotopically in nude mice.     

5-LOX siRNA人肝癌HepG2细胞裸鼠瘤模型的建立及意义

目的建立5-脂氧合酶(5-lipoxygenase,5-LOX)5-LOX siRNA转染人肝癌细胞HepG2裸鼠瘤动物模型,探讨iR-NA干扰技术在裸鼠瘤模型中应用的可行性,为肿瘤的实验研究提供平台。方法分别用pRNAT-U6.1-5-LOX siRNA转染的HepG2细胞、空白质粒pRNAT-U6.1转染的HepG2细胞和未转染的HepG2细胞接种裸鼠建立移植瘤模型,分为转染组、转染空载体组和未转染组。建模前,用免疫荧光定量PCR检测转染HepG2细胞5-LOX mRNA表达,成瘤后测量种植瘤体积,并用Western-blot和RT-PCR检测瘤体5-LOX的蛋白和mRNA表达。结果 5-LOX siRNA转染的细胞5-LOX mRNA表达量下降(P<0.01),转染组肿瘤平均体积与转染空载体组及未转染组比较明显减小(P<0.01),而且瘤体5-LOX蛋白及mRNA表达量亦明显下降(P<0.01)。结论 5-LOX siRNA转染肝癌细胞HepG2裸鼠移植瘤瘤实验模型建立成功。将干扰技术和裸鼠移植瘤相结合,为肿瘤的实验研究提供一种更可靠有效的研究方法。     

Long-Term Partial Remission with Capecitabine/Trastuzumab in a Patient with Metastatic Breast Cancer Following Progression on Trastuzumab Alone

BACKGROUND: Since the introduction of trastuzumab into the treatment of Her-2/neu-positive metastatic breast cancer, cases of long-term survival have become more frequent. Even after tumor progression, trastuzumab seems to retain its antitumor activity which is potentiated by the combination with a chemotherapeutic agent. CASE REPORT: We are reporting about the unusual clinical course of a young patient with Her-2/neu-positive breast cancer, who experienced progression of pulmonary and bone metastases under treatment with trastuzumab. Upon progression, a combination therapy with capecitabine/trastuzumab was initiated, and a partial remission was achieved which has continued for over 4 years. CONCLUSION: This unusual clinical course shows that continuing trastuzumab-based therapy beyond progression is a safe, effective, and well-tolerated option which can induce long-term remissions in some patients with Her-2/neu-positive metastatic breast cancer.