22 CD4+CD25+调节性T细胞在肝癌微环境中的分布状况与局部免疫状态的关系

笔者对52例肝癌组织和癌旁组织用CD4和CD25双重酶标免疫组化染色标记Treg和CD4+T细胞，对20例肝癌组织和癌旁组织用CD8EnVision法染色标记CD8+T细胞，光镜下计数阳性细胞，对癌组织中Treg细胞和CD4+T,CD8+T及CD4+T/CD8+T值进行相关性分析，并用正常肝组织作对照。结果示8例正常肝组织中未发现Treg细胞。52例肝癌、癌旁组织中Treg细胞单个高倍视野平均数分别为7.6308±2.8368和5.1654±1.6718（P＝0.000）;肝癌中Treg细胞数目与肿瘤大小、有无子灶、有无癌栓及肿瘤临床病理分期有关，组间差异有显著性（P<0.05），而与患者年龄、性别、有无肝硬化、术前AFP浓度、肿瘤有无包膜及肿瘤Edmondson分级无明显关系（均P>0.05）;肝癌中Treg细胞数量与其浸润性CD4+T淋巴细胞的数量以及CD4+T/CD8+T值呈显著负相关（r=-0.539，P＝0.014;r=-0.545，P＝0.000），而与浸润性CD8+T淋巴细胞的数量分布无关（r=-0.403 P＝0.078）。提示肝癌微环境中的Treg细胞可能通过抑制肿瘤局部免疫，使肿瘤细胞逃避免疫监视，促进肿瘤的进展以及侵袭或转移;肝癌组织中的Treg细胞数量可能作为判断肝细胞癌预后的指标之一。     

原发性肝癌患者体内的CD4+CD25+ T细胞变化及其意义

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者体内CD4+CD25+T细胞变化的及其意义。 方法:实验分HCC组（n=20）与正常人对照组(n=10)，采用免疫荧光标记法，流式细胞仪分离出外周血CD4+CD25+T细胞，分析两组CD4+CD25+T细胞所占T细胞的比例。计算并比较癌组织与癌旁组织中CD4+CD25+T细胞所占T细胞的比例。结果:HCC组机体的CD4+CD25+T 细胞比例为(19.3±3.0) %，明显高于对照组(5.2±1.6) % (P<0.05)。癌组织中CD4+CD25+T 细胞比例为(6.5±2.9) %，癌旁组织中CD4+CD25+T 细胞比例为(5.8 ±2.1) %， (P>0.05)。结论:原发性肝细胞癌患者机体免疫功能降低的原因之一可能是外周血CD4+CD25+T 细胞数明显增加。     

肝癌患者CD8+CD28-Foxp3+调节性T细胞的变化及意义

目的:探讨肝癌患者外周血和癌组织中CD8~+CD28~-Foxp3~+调节性T细胞(CD8~+CD28-Foxp3~+Tregs)的改变及意义。方法:采用流式细胞仪检测72例肝癌患者和22例健康对照人群外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+T细与CD8~+T细胞比值(CD8~+CD28-Foxp3~+Tregs/CD8~+T),分析CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T与肝癌患者临床病理因素的关系;分别用免疫组化和Western blot检测肝癌患者癌组织及癌旁组织中Foxp3阳性细胞与Foxp3蛋白表达水平。结果:与健康对照人群比较,肝癌患者外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T明显升高(P0.05);外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T与患者TNM分期、淋巴结转移、分化程度有关(均P0.05);肝癌组织中平均Foxp3阳性细胞数与Foxp3蛋白表达量均明显高于癌旁组织(均P0.05);外周血CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs/CD8~+T,肝癌组织Foxp3阳性细胞数与Foxp3蛋白表达量在高、中、低分化的肝癌中均呈依次升高趋势,但差异均无统计学意义(均P0.05)。结论:CD8~+CD28~-Foxp3~+Tregs在肝癌患者外周血及癌组织中增多,可能与肿瘤免疫抑制作用有关,其检测对肝癌患者病情有一定评估价值。     

原发性肝细胞癌、癌旁及肝硬化组织中CD3+细胞的研究

摘要：为探讨CD3在原发性肝细胞癌、癌旁、肝硬化及正常肝组织中的表达，并探讨CD3+细胞与肝癌、肝硬化的关系。笔者对60例原发性肝细胞癌组织、62例单纯性肝硬化及21例正常肝组织，用SP免疫组化法进行染色，定量分析其阳性细胞数。结果示： (1)CD3+细胞平均数从高到低依次为：肝癌癌旁组织、癌组织、肝硬化及正常肝组织（P<0.05）；(2)肝癌组织中CD3+细胞平均数与组织学分级和临床TNM分期无关；(3)肝癌15个月内有转移组的癌组织中CD3+细胞数少于无转移组（P<0.01）。提示CD3+细胞可作为反映机体抗肿瘤免疫状态及判断患者预后的重要指标。     

人肝癌浸润淋巴细胞的分离培养及其CD8阳性亚群特性研究

目的从原发性肝癌（HCC）患者术后的肿瘤组织中提取、培养肿瘤浸润性淋巴细胞（TILs），进一步分选、扩增其CD8阳性亚群（CD8+TILs），并研究其特性。 方法标本取自38例肝癌根治术后的肿瘤组织，免疫组织化学染色观察癌巢组织和癌旁组织TILs的分布，通过机械剪碎、混合酶消化和不连续密度梯度离心法分离提取TIL前体细胞。采用重组人白介素2进行激活，抗CD3、抗CD28抗体进行共刺激扩增，用磁珠分选出CD8+TILs，CCK8法观察CD8+TILs对肝癌细胞Hep3B、HepG2生长的影响。 结果TILs富集于癌旁组织，12例成功提取TILs，6例培养并实现大量扩增，扩增17~50倍后细胞数为（1.2~2.5）×10⁸个，CD3+细胞比例为（77.53±16.37）%，CD3+CD4+比例为（27.08±21.56）%，CD3+CD8+比例（44.55±12.73）%，细胞活力为（90.5±3.0）%，CD8+TILs对肿瘤细胞系Hep3B、HepG2有较强的生长抑制作用。 结论本研究成功建立高效提取、培养CD8+TILs的方法，获得具有高抗肿瘤活性的CD8+TILs，为晚期肝癌等实体瘤的过继免疫治疗提供研究基础。     

CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA及可溶性白细胞介素2受体检测在肾移植中的意义

目的 观察肾移植患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平及其表面特异性标志物Foxp3和可溶性白细胞介素2受体（sIL-2R）的变化，探讨其在诊断移植肾急性排斥反应中的作用和价值。 方法 选取42例维持性血液透析接受同种异体肾移植治疗的患者及30例健康体检对照者。在患者移植前、移植后1、2、4、8周或发生排斥反应时，以流式细胞仪检测外周血中CD4+CD25+调节性T细胞水平；荧光定量PCR检测Foxp3 mRNA表达；双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISB）检测血浆中sIL-2R水平。 结果 (1)移植后第1、2、4、8周急性排斥反应组CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA水平明显低于同期未发生排斥的肾功能稳定组，而sIL-2R水平却显著高于肾功能稳定组。(2)血液透析患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞[(9.22±3.53)%]、Foxp3 mRNA[（0.82±0.36）×10-3]及sIL-2R[（856.30±108.24） U/ml]水平与健康对照组[分别为(6.09±1.99)%、(0.50±0.28)×10-3、(247.35±11.24) U/ml]比较，差异均有统计学意义(P < 0.01)。(3)肾移植后随着肾功能的恢复，外周血CD4+CD25+调节性T细胞[(16.53±4.14)%]、Foxp3 mRNA[(4.97±1.94)×10-3]显著升高(P < 0.01)，而sIL-2R[（463.72±31.23）U/ml]水平明显降低(P < 0.01)。(4)当发生急性排斥反应时，CD4+CD25+调节性T细胞[(12.18±2.86)%]、Foxp3 mRNA[(3.15±1.22)×10-3]显著降低(P < 0.01)，而sIL-2R[(748.36±115.41) U/ml]水平明显升高(P < 0.01)，并且这些变化早于Scr的变化。(5)患者移植前后外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率与Foxp3 mRNA水平均呈正相关（分别为r ＝ 0.904、0.932，P < 0.01），但与sIL-2R水平无相关。 结论 外周血CD4+CD25+调节性T细胞、Foxp3 mRNA及sIL-2R水平的测定均可以作为肾移植患者移植后发生急性排斥反应的早期预测指标，并可判断预后。     

门静脉高压症脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞含量与免疫功能研究

目的 研究门静脉高压症(PHT)脾亢患者外周血CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞(Treg)与CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.探讨脾脏免疫功能改变及其可能的调节机制.方法 PHT脾亢患者20例(脾亢组),健康成人18例(对照组),采用流式细胞术检测外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg及CD3+、CD4+、CD8+T细胞的表达变化.结果 脾亢组外周血中CD4+CD25+CD127low/-Treg占CD4+T细胞的比例为(5.3±3.0)%,明显高于对照组的(2.5±0.9)%(P<0.01).脾亢组CD3+、CD4+、CD8+T细胞含量均低于对照组(P<0.05).CD4+CD25+CD127low/-Treg的含量与CD3+T细胞比例呈负相关(r=-0.630,P<0.01),与CD4+T细胞比例呈负相关(r=-0.561,P<0.05).结论 PHT脾功能亢进患者CD4+CD25+CD127low/-调节性T细胞表达量增多,可能对脾脏免疫功能的调节有重要作用.     

前列腺癌患者外周血中CD4~+CD25~(high)调节性T细胞及调节因子TGF-β1和COX-2的表达

目的:通过检测前列腺癌患者以及健康志愿者外周血中CD4+CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达,初步探讨CD4+CD25high调节性T细胞在前列腺癌发病机制中的作用及其与TGF-β1和COX-2的相关性。方法:应用流式细胞术检测30例前列腺癌患者治疗前后(其中前列腺癌局限组11例,非局限组19例)及20例健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4+CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测其外周血清中TGF-β1和COX-2的表达。对前列腺癌患者上述指标进行术前术后对比分析,另对CD4+CD25high调节性T细胞与TGF-β1及COX-2的相关性进行分析;并探讨上述指标在前列腺癌患者局限组和非局限组间是否存在差异性。结果:流式细胞术检测显示,前列腺癌患者治疗前PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞占CD4+T细胞的比例为(18.32±7.49)%,高于健康志愿者对照组(7.77±1.86)%(P<0.05)。前列腺癌患者治疗后其比值为(17.34±5.87)%,较治疗前稍减低,但两者相比无显著差异(P>0.05)。ELISA检测外周血清中TGF-β1和COX-2显示,前列腺癌组分别为(215.97±55.16)ng/ml和(6.88±5.14)ng/ml,对照组分别为(149.75±47.11)ng/ml和(5.65±2.69)ng/ml;前列腺癌患者外周血清中TGF-β1的表达水平高于健康志愿者对照组(P<0.05),COX-2的表达水平与对照组无显著差异(P>0.05)。通过多重线性回归分析表明,前列腺癌患者PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞的表达与血清中TGF-β1和COX-2的表达无显著相关。前列腺癌局限组和非局限组外周血中CD4+CD25high调节性T细胞、TGF-β1及COX-2的表达均无显著性差异(P>0.05)。结论:前列腺癌患者PBMC中CD4+CD25high调节性T细胞可能参与前列腺癌的发生,其增殖机制与血清中TGF-β1和COX-2的表达无关,可能与肿瘤本身及肿瘤局部微环境相关。     

CD8+肿瘤浸润淋巴细胞与乳腺癌预后的关系

目的：探讨CD8+肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）与乳腺癌患者临床病理特征及生存期的关系。 方法：用免疫组化法检测112例乳腺癌肿瘤切片CD8+ TIL的表达;根据表达情况将患者分为CD8+ TIL阳性组与CD8+ TIL阴性组,分析CD8+ TIL与临床病理特征及生存期的关系。 结果：乳腺癌标本中CD8+ TIL阳性率为32.14%（36/112）。统计分析显示,CD8+ TIL的表达在肿瘤分化程度、TNM分期及组织学分类的组间差异有统计学意义(χ2=6.277,P=0.043;χ2=3.963,P=0.047;χ2=4.299,P=0.038）;CD8+ TIL阳性组5年生存率明显高于CD8+ TIL阴性组（88.89% vs. 71.05%;χ2=4.360,P=0.037）;Log-rank检验表明CD8+ TIL阳性组总生存率明显高于CD8+ TIL阴性组（P=0.043）。 结论：乳腺癌组织CD8+ TIL可以作为患者预后的指标,癌组织中CD8+ TIL低密度浸润提示预后不良。     

Wnt5a在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的：探讨Wnt5a在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达及意义。 方法：收集术后病理确诊为PTC的患者石蜡标本47例,包括癌组织及癌旁组织,以及手术切除的PTC新鲜标本及其癌旁组织10例。分别采用免疫组化法及real-time PCR检测Wnt5a在PTC及癌旁组织中的表达。 结果：47例患者的石蜡标本中,PTC及癌旁组织中,Wnt5a在PTC组织的阳性表达率为68.09%（32/47）,在癌旁甲状腺组织为6.38%（3/47）,两者间差异有统计学意义（P<0.01）;统计分析显示,Wnt5a的表达与患者的性别及年龄无关（均P>0.05）,而与肿瘤的TNM分期、淋巴结转移有关（P<0.05或P<0.01）。10例手术标本检测显示,PTC中Wnt5a mRNA的表达明显高于其的癌旁甲状腺组织（6.43±1.38 vs. 1.12±0.59,P<0.01）。 结论：PTC组织中Wnt5a表达水平增高,这可能对PTC的发生和发展有着重要的作用。     

肝细胞癌微环境中CD4+CD25+调节性T细胞的分布及其临床病理意义

目的研究CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）与肝细胞癌（HCC）临床病理之间的关系；探讨其在评价HCC侵袭性和癌症进展以及预后中的价值。方法用双重酶标免疫组织化学的方法测定52例HCC组织及癌旁组织中Treg数量分布状况。分析其临床病理学资料，研究在HCC微环境中Treg数量分布与其各项临床病理学指标间的关系。结果8例正常肝组织中未发现Treg分布，52例HCC病人的肝癌及癌旁组织标本中，在HCC组织中Treg数量明显高于癌旁组织，差异有显著意义。HCC组织的Treg数量与病人性别、年龄、肝硬化、病理学分级、包膜、术前AFP浓度无显著关系（P〉0．05），而与肿瘤的大小、癌栓、子灶、TNM分期有显著关系。25例小肝癌组和27例大肝癌组Treg细胞单个高倍视野平均数分别为7．1440±1．8535、8．0815±1．5122，两组比较在统计学上有显著差异（P〈0．001）；14例有血管癌栓组和38例无血管癌栓组Treg细胞单个高倍视野平均数分别为8．1143±2．4487、7．4526±1．8794，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05，P=0．014）；19例癌周有子灶组和33例癌周无子灶组Treg细胞单个高倍视野平均数分别为8．2211±2．4516、7．2909±1．8217，两组比较在统计学上有显著差异（P〈0．001）；不同临床病理分期18例Ⅰ期组、22例Ⅱ期组和12例Ⅲ期组中Treg细胞单个高倍视野平均数分别为6．7333±1．5980、7．8818±2．4171、8．5167±2．2480，在统计学上有显著差异（P〈0．001）。结论肝细胞癌微环境中Treg数量分布与肿瘤大小、血管癌栓、子灶，和临床分期有明显关系，而与其它指标无显著关系。HCC微环境中Treg数量与肝癌的侵袭、进展以及预后有密切关系，HCC微环境中Treg数量增多可以作为判断HCC侵袭性、进展以及预后的一个潜在重要指标。除去或减少肝癌微环境中的Treg细胞有可能提高肿瘤的免疫治疗效果。     

胃癌患者围手术期CD28及调节性T细胞的动态变化

目的:探讨胃癌患者手术前后外周血CD4+CD25+T细胞和CD8+CD28+的表达变化及其意义,探讨其在胃癌的发病机制中的作用.方法:用流式细胞仪检测89例胃癌患者手术前后外周血淋巴细胞表面的调节性T细胞和CD28的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较.结果:①术前胃癌组外周血中CD8+CD28+水平明显低于健康对照组和胃良性肿瘤组,CD4+CD25+水平显著增高;②胃癌组CD4+CD25+及CD8+CD28+表达水平随着临床分期的进展而有显著变化;③根治性及姑息性切除肿瘤后,CD8+CD28+表达显著升高;CD4+CD25+的表达明显降低.结论:胃癌患者外周血中CD8+CD28+表达水平低下,而具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞的数量较健康人明显增高,提示胃癌患者机体免疫功能低下,施行手术切除肿瘤有助于改善患者的细胞免疫功能.     

LAP~+CD4~+T细胞在肝癌微环境中的分布特点及意义

目的研究肝癌患者肿瘤组织中LAP~+CD4~+T细胞的分布特点,探讨LAP~+CD4~+T细胞在肝癌发生发展中的作用。方法抽取北京大学深圳医院2011年10月到2012年12月期间28例肝癌患者的手术肝组织标本与28例因良性病变行肝切除的正常肝组织标本,采用双重酶标免疫组化染色法检测LAP~+CD4~+T细胞在肝癌组织、癌旁组织及正常肝组织中的分布特点,并取单个高倍视野平均数进行半定量分析。结果肝癌患者肿瘤组织中LAP定位于CD4~+T细胞的胞浆和胞膜上;正常肝组织及癌旁组织中LAP~+CD4~+T细胞以散在方式分布,而在癌组织中多数以簇丛状方式聚集分布于肿瘤间质内,与CD4~+T细胞伴行并与之紧密接触。肝癌组、癌旁组以及正常对照组中LAP~+CD4~+T细胞单个高倍视野平均数分别为(11.25±3.00)、(5.75±1.00)及(2.61±0.83);肝癌组与癌旁组比较、肝癌组与正常对照组比较、癌旁组与正常对照组比较,三组比较差异均有统计学意义(P=0.000,P=0.000,P=0.000,P0.05)。结论肝癌患者肿瘤组织中LAP定位于CD4~+T细胞的胞浆和胞膜上,肝癌微环境中LAP~+CD4~+T细胞明显聚集,多以簇丛状方式分布,与其它淋巴细胞紧密接触,分布数量较癌旁组织及正常肝组织均增多,提示LAP~+CD4~+T细胞在肝癌微环境中浸润,并有可能通过细胞接触的方式抑制肿瘤局部免疫,促使肝癌细胞逃避免疫监视。     

门静脉主支癌栓PDGF-mRNA和E-CD蛋白的表达及意义

目的　探讨血小板源性生长因子 (PDGF mRNA)和内皮钙粘附蛋白 (E CD)在门静脉癌栓中表达水平的变化及其在肝癌肝内转移中的作用。方法　采用原位杂交技术检测 12例门静脉癌栓中PDGF mRNA基因的表达 ;采用免疫组化方法检测 33例门静脉癌栓中E CD蛋白和PDGF蛋白的表达 ,并与各自原发灶和癌旁组织进行对照。结果　 (1)E CD蛋白的表达 :门静脉癌栓、肝癌原发灶、癌旁组织的平均吸光度分别为 0 0 15 2± 0 0 0 36 ,0 0 5 2 7± 0 0 0 71和 0 10 0 8± 0 10 6 3。 (2 )PDGF蛋白的表达 :门静脉癌栓、肝癌原发灶、癌旁组织的平均吸光度分别为 0 10 5 9± 0 0 10 4 ,0 0 5 2 1± 0 0 0 92和 0 0 10 8± 0 0 0 2 9。 (3)PDGF mRNA的表达 :门静脉癌栓、肝癌原发灶、癌旁组织的平均吸光度分别为 0 12 0 7± 0 0 16 9,0 0 6 74± 0 0 0 71和 0 0 0 89± 0 0 0 0 6。经方差分析和t检验 ,各组间和各两组间均存在显著性差异 (P <0 0 1)。结论　门静脉癌栓中存在有促进转移和抑制转移两方面的因素 ,E CD蛋白表达减少 ,增加了门静脉癌栓中癌细胞脱落转移 ;而门静脉癌栓中PDGF mRNA表达的增加 ,则促进门静脉癌栓中结缔组织的形成 ,阻碍了癌细胞的脱落转移     

CD4+CD25+FOXP3+T细胞在肝癌肝移植肿瘤复发中的作用

目的 探讨肝癌肝移植病人移植前后外周血和肿瘤组织中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例变化及其临床意义.方法 用流式细胞仪检测肝癌肝移植病人和其他肝移植病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞的比例,并采用正常人作对照.用免疫组化法检测肝癌病人和非肝癌病人肿瘤组织中FoxP3的表达及CD8+T细胞浸润的比例.观察肝癌肝移植病人术后及肿瘤复发后调节性T细胞的变化及其对肿瘤复发的影响.结果 流式细胞检测显示肝癌肝移植、非肝癌肝移植的病人术后外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞的比例较正常人明显升高,分别为(10.15±1.00)%、(5.30±1.64)%和(3.20±1.18)%,P<0.05.肝癌肝移植肿瘤复发病人较未复发病人外周血CD4+CD25+FOXP3+T比例明显升高,分别为(15.15±1.50)%和(6.80±1.50)%,P<0.01.免疫组化检测显示肿瘤组织中FOXP3+T细胞增多,CD8+T细胞浸润明显减少.结论 肝癌肝移植肿瘤复发的病人外周血中CD4+CD25+FOXP3+T细胞比例升高.调节性T细胞可能通过减少CD8+T细胞浸润,加速肿瘤复发.     

原发性肝癌患者肿瘤浸润T淋巴细胞亚群分析

目的:了解原发性肝癌患者肿瘤浸润T淋巴细胞中CD4+及CD8+的表达特点。方法:收集30例原发性肝癌患者(均有乙型肝炎病毒感染背景)的癌组织(乙肝肝癌组)和癌旁组织(乙肝癌旁组)以及30例因良性病变而行肝切除的患者的新鲜肝组织(对照组),分离组织浸润淋巴细胞,用抗CD3、CD4和CD8单克隆抗体同时荧光染色,用流式细胞仪检测各表面标志的表达情况。结果:1)乙肝肝癌组、乙肝癌旁组及对照组CD3+CD4+T细胞占浸润淋巴细胞的比例分别为(22.31±3.68)%、(10.69±2.47)%及(4.21±4.26)%。乙肝肝癌组显著高于乙肝癌旁组及对照组,差异有统计学意义(P=0.000,P=0.001),乙肝癌旁组高于对照组,差异亦有统计学意义(P=0.019)。2)乙肝肝癌组、乙肝癌旁组及对照组CD3+CD8+T细胞占浸润淋巴细胞的比例分别为(26.10±5.82)%、(21.82±2.70)%及(41.31±14.01)%,乙肝肝癌组及乙肝癌旁组显著低于对照组,差异有统计学意义(P=0.014,P=0.004),而乙肝肝癌组与乙肝癌旁组之间差异无统计学意义(P=0.651)。3)乙肝肝癌组组织浸润淋巴细胞中CD3+CD4+T细胞与CD3+CD8+T细胞的比值为0.91±0.30,显著高于乙肝癌旁组(0.47±0.11,P=0.003)及对照组(0.11±0.13,P=0.000),CD3+CD4+与CD3+CD8+T细胞的比值出现失衡。结论:原发性肝癌患者肿瘤浸润淋巴细胞中T细胞亚群失调,表现为CD3+CD4+T细胞所占比例升高,CD3+CD8+T细胞所占的比例下降,CD3+CD4+/CD3+CD8+明显升高。     

CD105 mRNA在原发性肝细胞癌的表达与术后复发的关系

目的研究原发性肝细胞癌（HCC）组织CD105 mRNA表达与根治术后早期复发的关系。方法用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）方法，检测32例HCC行根治性切除术后随访1年以上患者及20例肝内胆管结石患者（对照组）肝组织CD105 mRNA的表达情况。结果中心处癌组织中CD105 mRNA的表达水平为0．45±0．02，明显高于对照组肝组织的0．26±0．02（P〈0．05）；肿瘤边缘处癌组织中CD105 mRNA的表达水平为0．65±0．08，明显高于中心处癌组织（P〈0．05）。边缘癌组织CD105 mRNA高表达与根治术后早期复发有关（t=4．34，P=0．00）；中心处癌组织CD105 mRNA表达与根治术后早期复发无关（t=0．81，P=0．43）。中心癌组织、边缘癌组织CD105 mRNA表达与患者年龄、肿瘤的大小、临床病理分期和病理类型等均无关（P〉0．05）。结论HCC边缘处癌组织CD105 mRNA表达水平明显高于中心处癌组织及对照组肝组织，且其高表达水平与HCC根治术后早期复发有关。     

原发性肝癌及其癌旁组织、Bel-7402人肝癌细胞株生长激素受体的定量研究

目的定量测定原发性肝癌(HCC)及其癌旁组织、国内常用Bel-7402人肝癌细胞株生长激素受体(GHR)的表达水平,探讨重组人生长激素(rhGH)在原发性肝癌患者中的适用性。方法采用放射配体分析法对45例原发性肝癌组织及其癌旁组织、8例正常肝组织、Bel-7402人肝癌细胞株进行GHR的检测,肝组织及肝癌细胞的GHR受体最大结合量(RT)采用Scatchard法计算;并分析肝癌组织GHR的表达量与肝癌患者各临床病理参数的关系。结果在38例HCC组织与45例癌旁组织,以及7402肝癌细胞株均检测到GHR的存在,GHR受体结合容量(RT)在有GHR表达的肝癌组织为(19.673 00±3.876 6)fmol/mg蛋白,癌旁组织GHR的RT值为(33.628 3±3.621 8)fmol/mg蛋白,GHR在7402肝癌细胞位点数量(Site,103/cell)为7.348±0.891;同正常肝组织相比,肝癌与癌旁组织GHR的表达量均降低(P<0.05),肝癌组织GHR的表达量又低于癌旁组织;肝癌组织GHR的表达量与肿瘤大小、患者临床分期的延迟呈负相关,而与肿瘤分化程度、患者年龄、是否合并肝硬化无关;有7例肝癌组织未检测到GHR存在。结论大多数原发性肝癌组织及全部癌旁组织均表达一定水平的GHR,在它们受体功能未明的情况下,rhGH在肝癌患者中的应用可能需慎重。     

胃癌组织中HIF-1α,CD68及CD206在胃癌及癌旁组织中的表达及临床意义

目的 分析低氧诱导分子-1α（HIF-1α）及肿瘤相关巨噬细胞（TAM）相关抗原CD68、CD206在胃癌及癌旁组织中的表达情况。方法 利用免疫组化技术检测43例胃癌和癌旁组织中HIF-1α、CD68、CD206的表达状态,计算三种蛋白表达的阳性率及阳性细胞数,揭示其与临床因素的相关性。结果 HIF-1α、CD68、CD206的阳性表达率分别为58.1%、69.8%、51.2%,均高于癌旁组织（P<0.05）。胃癌、癌旁组织中每个视野下CD68⁺细胞数分别为（39.7±7.6）、（8.5±2.8）个;CD206⁺阳性细胞数分别为（32.0±9.2）、（3.4±1.8）个;HIF-1α⁺细胞数（22.9±5.6）、（2.1±1.2）个;组间比较差异均有统计学意义（P<0.01）。胃癌组织中CD206⁺细胞数与HIF-1α⁺细胞数表达呈正相关（P<0.01,R²=0.641）。三种蛋白的表达与胃癌病理分期、淋巴结转移明显相关（P<0.05）。结论 胃癌组织中CD68、CD206、HIF-1α表达率及阳性细胞数明显增加,且CD206与HIF-1α表达呈正相关。胃癌缺氧区域对M2型巨噬细胞有趋化作用,促进胃癌发生发展。     

凋亡抑制基因x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因在肝癌细胞中的表达及临床意义

目的探讨x-相关细胞凋亡抑制蛋白基因（XIAP）mRNA及蛋白在肝癌组织和癌旁组织中的表达情况，及其与肝癌发生的关系。方法肝癌患者手术切除标本10例，应用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）分别检测肝癌组织和癌旁组织细胞XIAP mRNA基因的相对表达量，并通过免疫组织化学SP法检测10例肝癌组织和癌旁组织标本XIAP蛋白的表达情况。结果（1）半定量RT-PCR显示：XIAP基因在肝癌组织中均呈高表达，相对表达量为3．211±2．43，而在对应的癌旁组织中呈低表达或无表达，相对表达量为1．947±1．890，两组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。（2）免疫组织化学及图像分析结果显示：在肝癌组织和癌旁组织中XIAP蛋白平均灰度扫描值分别为161．800±29．470和144．240±26．290，两组之间差异有统计学意义（P〈0．01）。结论XIAP在肝癌中的表达明显增高，可能在肝癌的发生、发展过程中发挥重要作用。