CD326在乳腺癌细胞系的表达及其与乳腺癌细胞耐药的关系

目的 探讨上皮细胞黏附分子(CD326)在乳腺癌细胞系中的表达及其与乳腺癌细胞耐药的关系.方法 流式细胞仪分析MCF-7、MCF-7/ADR及MDA-MB-231中cD326表达情况;细胞计数法(CCK-8法)检测流式细胞仪分选获得的CD326阳性和阴性细胞亚群体外对表阿霉素、多西他赛耐药情况;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同细胞亚群中多药耐药基因(MDR1)及乳腺相关耐药基因(BCRP)的表达情况.结果 MCF-7/ADR中CD326的表达(31.03%)明显高于亲本株MCF-7(27.02%),MDA-MB-231中CD326的表达(33.43%)明显高于MCF-7及MCF-7/ADR;MCF-7和MDA-MB-231中CD326阳性细胞亚群对表阿霉素及低浓度多西他赛(0.25～1.0*IC50)的体外耐受性明显高于阴性细胞亚群(P＜0.01),但对高浓度多西他赛(1.5～2.0* IC50)的体外耐受性差异无统计学意义(P＞0.05);CD326阳性与阴性细胞亚群间MDR1、BCRP基因表达差异元统计学意义(P＞0.05).结论 CD326与乳腺癌化疗药物的耐药有关,其诱导耐药并不是通过经典的耐药途径.     

人乳腺癌细胞中葡萄糖神经酰胺合成酶基因的表达和意义

目的：探讨葡萄糖神经酰胺合成酶（glucosylceramide synthase，GCS）基因在人乳腺癌细胞的表达及意义。方法：体外培养人耐阿霉素乳腺癌细胞MCF-7／ADR和人敏感乳腺癌细胞MCF-7，MTT法检测MCF-7／ADR细胞耐药倍数，RT-PCR法检测两种细胞GCSmRNA的表达，免疫细胞化学法检测GCS蛋白表达水平。结果：MCF-7／ADR细胞耐药倍数为53倍，RT—PCR检测结果显示两种细胞均有GCSmRNA表达，且MCF-7／ADR细胞GCSmRNA表达水平较MCF-7细胞有显著升高（P〈0．05），免疫细胞化学结果显示二者GCS蛋白均有表达且表达水平有显著差异（P〈0．05）。结论：GCS基因在乳腺癌细胞中表达，GCS对于乳腺癌的发生发展具有重要作用，GCS在耐药乳腺癌细胞的高表达证明GCS与肿瘤耐药密切相关，为肿瘤耐药的逆转治疗提供了新的方向。     

肥胖乳腺癌患者癌组织中PI3K/Akt信号通路的活性及意义

目的：观察肥胖乳腺癌患者乳腺癌组织中磷酯酰肌醇3激酶（PI3K）/Akt信号通路的活性。 方法：选取45例肥胖乳腺癌患者（肥胖组）与37例正常体质量乳腺癌患者（对照组）的乳腺癌组织标本,分别用RT-PCR法检测两组乳腺癌组织中PI3K mRNA的表达,及免疫组化法检测PI3K和磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的表达。 结果：RT-PCR结果显示,肥胖组乳腺癌组织中PI3K mRNA表达较对照组明显增高（P<0.05）;免疫组化结果显示,肥胖组PI3K和p-Akt蛋白表达均明显升高（均P<0.05）,且PI3K与p-Akt蛋白表达水平在两种组织中均呈正相关（r=0.76,r=0.81,均P<0.05）。 结论：肥胖乳腺癌患者癌组织中PI3K/Akt信号通路活性明显高于非肥胖患者,故推测这可能是导致肥胖者乳腺癌风险增高的原因之一。     

Ad-p53对乳腺癌阿霉素耐药细胞株多药耐药基因1/P-gp表达的影响

目的 观察腺病毒介导的p53基因(Ad-p53)逆转乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/Adr多药耐药作用及其对MDR1 mRNA/P-gP表达的影响.方法 以人乳腺癌MCF-7细胞及其阿霉素耐药株MCF-7/Adr为实验对象,以50 MOI Ad-p53感染MCF-7/Adr细胞,CCK-8法观察Ad-p53对多药耐药的逆转作用,实时荧光逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测MDR1 mRNA变化,免疫荧光组织化学及Western blot检测P-gP蛋白表达的变化.结果 50 MOI Ad-p53能使MCF-7/Adr细胞阿霉素IC50由(4.54±0.91)mg/L降到(0.26±0.11)mg/L,逆转耐药倍数为18.1倍(P《0.01);MDR1 mRNA相对表达量由1.32下降至0.85(P《0.01),P-gP蛋白表达量亦下降.结论 Ad-p53具有对人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/Adr多药耐药的逆转作用,其可下调MDR1 mR-NA/P-gP表达.     

经p38α通路激活的HO-1在乳腺癌发生和耐药中的作用

目的探讨p38α通路和血红素氧合酶（HO-1）在乳腺癌发生和耐药中的作用.方法应用MTT法和流式细胞术检测30例人乳腺癌细胞的增殖和凋亡变化,应用RT-PCR法检测p38α、HO-1 mRNA表达.结果78%的乳腺癌组织标本p38α mRNA表达水平显著高于正常组织的表达,其中有淋巴结转移标本的表达水平高于无淋巴结转移者（P＜0.01）.用吡喃阿霉素活化后在乳腺癌MCF-7/ADR细胞中的表达高于MCF-7细胞.结论p38α、HO-1在乳腺癌组织中高表达可能在人乳腺癌的过度增殖、凋亡受阻中起着重要作用;吡喃阿霉素经p38通路诱导乳腺癌细胞HO-1 mRNA表达,可能与乳腺癌细胞的耐药机制有关.     

Notch1在人乳腺癌细胞中的表达及其与乳腺癌耐药的关系

目的 检测乳腺癌细胞株MCF-7与MCF-7/ADR的 Notch1 表达、成球能力、干细胞池比例及干细胞内Notch1的表达,探讨Notch1 在逆转乳腺癌化疗耐药中的意义.方法 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-qPCR)及Western blot 法检测乳腺癌细胞株MCF-7、MCF-7/ADR 及表型为ALDH1+/CD44+/CD24- 乳腺癌干细胞中Notch1 的表达;无血清培养检测MCF-7及MCF-7/ADR 的成球能力;流式细胞仪检测MCF-7与MCF-7/ADR的干细胞比例并分选干细胞.结果 MCF-7/ADR的Notch1 的表达明显高于MCF-7(0.0748±0.0043比0.0461±0.0022,P＜0.05),微球体形成能力也明显高于MCF-7 (P＜0.05);流式细胞仪检测干细胞比例,MCF-7/ADR高于MCF-7(11.40％比1.89％);分选出的干细胞Notch1 的表达明显高于非干细胞(0.3096±0.0324比0.0428±0.0061,P ＜0.05).结论 Notch1 在乳腺癌及乳腺癌干细胞中高表达,干预Notch1 可能可以逆转乳腺癌治疗的耐药.     

索拉非尼联合表阿霉素对乳腺癌MCF-7细胞作用的研究

目的:探讨索拉非尼(Sorafenib)联合表阿霉素(Epirubicin)对乳腺癌MCF-7细胞的作用。方法:实验分为4组:空白对照组、索拉非尼单药组、表阿霉素单药组、索拉非尼联合表阿霉素组。根据索拉非尼及表阿霉素的IC50值设定联合给药浓度及时间。MTT法测定72h时间点索拉非尼及表阿霉素单用与联合对MCF-7细胞的增殖抑制率。结果:索拉非尼72h的IC50值为1.820μmol/l,表阿霉素72的IC50值为0.99μmol/l。在72h时,两药联合给药表现为协同或相加作用(P<0.05)。结论:索拉非尼和表阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7细胞的增殖有抑制作用,联合给药表现出协同或相加作用。     

Cdc42在人乳腺癌细胞MCF-7阿霉素敏感株和耐药株中的表达

目的探讨细胞分裂周期蛋白42(Cdc42)在乳腺癌细胞MCF-7阿霉素敏感株和耐药株MCF-7/Adr中表达的变化以及对细胞耐药性的影响。方法将Cdc42 siRNA转染MCF-7/Adr细胞株后,用RT-PCR和Weastern Blot方法检测MCF-7组,MCF-7/Adr组,MCF-7/Adr siRNA干扰组细胞Cdc42的转录以及蛋白的表达水平;采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定siRNA处理后阿霉素(ADM)对MCF-7/Adr细胞的杀伤作用;用荧光分光光度计测定细胞内ADM药物浓度。结果 MCF-7/Adr细胞中Cdc42 mRNA及蛋白表达量显著高于MCF-7细胞(P0.05);siRNA干扰后Cdc42表达受到明显抑制(P0.05),并显著提高细胞内ADM的浓度(P0.05)。结论特异性siRNA能明显抑制Cdc42 mR-NA及蛋白表达,并逆转细胞耐药性。     

雷公藤内酯醇-聚乙烯亚胺-环糊精对乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/Taxol逆转作用的研究

目的观察雷公藤内酯醇-聚乙烯亚胺-环糊精复合物(TP-PEI-Cy D)对乳腺癌细胞MCF-7/Taxol耐药性的逆转作用并探讨其可能的作用机制。方法 CCK-8法测紫杉醇和TPPEI-Cy D对MCF-7及MCF-7/Taxol的生长抑制率,计算出各自的IC50值、MCF-7/Taxol的耐药倍数以及TP-PEI-Cy D对MCF-7/Taxol的低毒浓度;根据所得IC50值选择低毒浓度TP-PEI-Cy D联合不同浓度的紫杉醇处理MCF-7/Taxol后,测得紫杉醇联合TP-PEI-Cy D后的IC50,并计算逆转倍数;选择低毒浓度TP-PEI-Cy D联合紫杉醇处理MCF-7/Taxol细胞后,应用流式细胞术测细胞凋亡情况;TP-PEI-Cy D和紫杉醇单独或联合分别作用于MCF-7/Taxol,用RT-PCR检测耐药基因多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)以及谷胱甘肽转移酶(GST-π)的表达水平。结果 TP-PEICy D对MCF-7/Taxol生长增殖有明显抑制作用,并提高MCF-7/Taxol对紫杉醇的敏感度,MCF-7/Taxol耐药性得到逆转(F=439.36,P0.01);紫杉醇联合TP-PEI-Cy D的细胞凋亡率明显高于紫杉醇单独用药(F=17.91,P0.05)。联合使用后MRP、LRP、GST-πmRNA表达水平降低(F=27.41、33.99、20.77,均P0.01)。结论 TP-PEI-Cy D对MCF-7/Taxol有增殖抑制和诱导凋亡作用,能有效逆转MCF-7/Taxo细胞的肿瘤耐药性,其机制可能与降低细胞耐药基因LRP、MRP以及GST-πmRNA表达水平相关。     

下调HDAC6表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响及机制

目的：探讨下调HDAC6表达对乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响及其分子机制。 方法：分别用HDAC6 siRNA和阴性siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞,以未处理的MCF-7细胞为空白对照,分别用RT-PCR和Western blot方法检测细胞HDAC6与p21基因和蛋白的表达,CCK-8试剂盒和流式细胞术分别检测细胞增殖与细胞周期,并用TUNEL法检测细胞凋亡。 结果：干扰效果验证结果显示,HDAC6 siRNA转染能有效降低MCF-7细胞HDAC6 mRNA和蛋白的表达（均P<0.05）,而阴性siRNA无此作用（P>0.05）。与空白对照组比较,HDAC6 siRNA组细胞增殖受到明显抑制,细胞G0/G1期比例增加,S期比例减少,细胞的凋亡率明显增加（均P<0.05）;阴性siRNA组无上述改变（均P>0.05）。HDAC6 siRNA组细胞p21 mRNA与蛋白的表达均较空白对照组和阴性siRNA组明显升高（均P<0.05）。 结论：下调HDAC6的表达能抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖,诱导细胞G0/G1期阻滞,并促进细胞凋亡,其机制可能与升高p21表达有关。     

MK-2206 Causes Growth Suppression and Reduces Neuroendocrine Tumor Marker Production in Medullary Thyroid Cancer Through Akt Inhibition

Background

Development of targeted therapies for medullary thyroid cancer (MTC) has focused on inhibition of the rearranged during transfection (RET) proto-oncogene. Akt has been demonstrated to be a downstream target of RET via the key mediator phosphoinositide-3-kinase. MK-2206 is an orally administered allosteric Akt inhibitor that has exhibited minimal toxicity in phase I trials. We explored the antitumor effects of this compound in MTC.

Methods

Human MTC-TT cells were treated with MK-2206 (0–20 μM) for 8 days. Assays for cell viability were performed at multiple time points with MTT (3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide). The mechanism of action, mechanism of growth inhibition, and production of neuroendocrine tumor markers were assessed with Western blot analysis.

Results

MK-2206 suppressed MTC cell proliferation in a dose-dependent manner (p ≤ 0.001). Levels of Akt phosphorylated at serine 473 declined with increasing doses of MK-2206, indicating successful Akt inhibition. The apoptotic proteins cleaved poly (ADP-ribose) polymerase and cleaved caspase-3 increased in a dose-dependent manner with MK-2206, while the apoptosis inhibitor survivin was markedly reduced. Importantly, the antitumor effects of MK-2206 were independent of RET inhibition, as the levels of RET protein were not blocked.

Conclusions

MK-2206 significantly suppresses MTC proliferation without RET inhibition. Given its high oral bioavailability and low toxicity profile, phase II studies with this drug alone or in combination with RET inhibitors are warranted.     

苦参碱诱导人乳腺癌细胞MCF-7/ADR的凋亡研究

目的 研究苦参碱对人乳腺癌MCF—7／ADR细胞的生长抑制作用及诱导凋亡机制。方法 四甲基噻唑蓝(MTT)法测定苦参碱对细胞的半数抑制浓度(IC50)，用荧光显微镜、电子显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪和DNA凝胶电泳等技术观察细胞凋亡。结果 0．3—2．5g／L浓度苦参碱对MCF—7／ADR细胞有明显的抑制作用，并诱导发生凋亡，实验范围内细胞凋亡的比率与药物浓度呈一定相关。结论 苦参碱能抑制人乳腺癌MCF—7／ADR细胞的生长，其机制与阻止细胞周期的进程，启动细胞自身调控程序，诱导凋亡有关。     

双硫仑联合铜离子对乐伐替尼耐药肝癌细胞Huh7增殖及凋亡的影响

目的建立乐伐替尼肝细胞肝癌(简称"肝癌")细胞耐药模型,以研究双硫仑联合铜离子对乐伐替尼耐药细胞Huh7增殖和凋亡的影响。方法通过CCK8法检测乐伐替尼作用下Huh7细胞的半抑制浓度(IC50),采用浓度递增法诱导Huh7细胞乐伐替尼耐药。各组细胞处理:对照组为Huh7细胞加普通培养液培养后的细胞;敏感组为Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼培养后的细胞;耐药组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼培养后的细胞;联合组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼+1μmol/L双硫仑+0.5μmol/L铜离子培养后的细胞;抑制剂组为耐药Huh7细胞加10μmol/L乐伐替尼+10μmol/L Akt抑制剂MK2206培养后的细胞。CCK8法及流式细胞术分别检测细胞的存活率和凋亡率;Western blot法检测磷酸化-Akt(p-Akt)和半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)和B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达;Transwell法检测细胞侵袭性。结果乐伐替尼耐药细胞系成功建立,选取10、20、40、60、80及160μmol/L 6个乐伐替尼浓度对Huh7细胞作用48 h后计算得出细胞IC50为12.35μmol/L。耐药组细胞存活率明显高于敏感组(P<0.01),联合组细胞存活率明显低于耐药组(P<0.01),抑制剂组细胞存活率明显低于耐药组(P<0.05)。与耐药组比较,联合组及抑制剂组p-Akt蛋白表达明显降低(P<0.01)、caspase-9明显升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白在耐药组和联合组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。联合组细胞凋亡率明显高于耐药组(P<0.01)。Transwell结果显示联合组的肿瘤细胞侵袭数明显少于耐药组(P<0.01)。结论双硫仑联合铜离子能增加乐伐替尼对乐伐替尼耐药肝癌细胞Huh7的敏感性,同耐药组相比其细胞抑制率明显提高,其机制可能与抑制磷脂酰肌醇-3-激酶/Akt通路及促进caspase-9蛋白表达有关。     

Effect of 5-aminolevulinic acid-mediated photodynamic therapy on MCF-7 and MCF-7/ADR cells

BACKGROUND AND OBJECTIVES: Photodynamic therapy (PDT) has been proposed as an alternative approach in overcoming multidrug resistance (MDR) phenotype. To verify whether 5-aminolevulinic acid (ALA)-mediated PDT is effective in MDR cells, we studied the protoporphyrin IX (PpIX) content, intracellular localization, and phototoxicity in human breast cancer cells MCF-7 and derived MDR subline, MCF-7/ADR. STUDY DESIGN/MATERIALS AND METHODS: The fluorescence kinetics of ALA-induced PpIX was evaluated by spectrofluorometer. The phototoxicity of MCF-7 and MCF-7/ADR cells was determined by tetrazolium (MTT) assays and clonogenic assay. Furthermore, Annexin V and propidium iodide (PI) binding assays were performed to analyze the characteristics of cell death after ALA-PDT. RESULTS: MCF-7/ADR accumulated a lower level of PpIX as compared to parental MCF-7 cells. Significant phototoxicity was observed in MCF-7 and increased in a fluence-dependent manner with LD(50) around 8 J/cm(2). Compared to its parental counterpart, MCF-7/ADR cells were less sensitive to ALA photodynamic treatment and PDT-induced cytotoxicity did not increase in a dose responsive manner as the concentration of ALA increased or the fluence of light increased. ALA-PDT was less effective for MCF-7/ADR cells than MCF-7 cells even under the condition when these two cell lines contained the similar amounts of PpIX. CONCLUSIONS: These results indicate that, except for the MDR related characteristics, MCF-7/ADR cells might possess intrinsic mechanisms that render them less sensitive to ALA-PDT induced phototoxicity.     

microRNA-124对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及其与PI3K/Akt信号通路的关系

背景与目的:研究显示,microRNA-124(miR-124)在多种肿瘤中发挥抑癌基因的功能,并且在胃癌细胞及组织中表达下调,在胃癌的发生发展中发挥重要调控作用。本研究探讨miR-124对人胃癌细胞增殖、凋亡的影响及其与PI3K/Akt信号通路的关系。方法:用qRT-PCR检测人胃癌细胞系MGC803、AGS、MNK-45、SGC-7901和人正常胃黏膜上皮细胞GES-1中miR-124的表达。用miR-124模拟物(miR-124模拟物组)及miR-124阴性对照序列(阴性对照组)分别转染至MGC803细胞后,用CCK-8法及细胞克隆实验检测MGC803细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测PI3K、Akt、p-PI3K和p-Akt蛋白水平,qRT-PCR检测PI3K和Akt mRNA 表达。结果:与人正常胃黏膜上皮细胞GES-1比较,miR-124在各胃癌细胞中的表达均明显降低(均P0.05)。与阴性对照组比较,miR-124模拟物组转染后的OD450值与细胞克隆形成数均明显降低(P0.05);细胞凋亡率明显增加(P0.05);PI3K/Akt信号通路中关键分子PI3K、Akt、p-PI3K和p-Akt蛋白水平明显降低(均P0.05),PI3K和Akt基因表达水平也明显降低(均P0.01)。结论:miR-124表达的下调可促进胃癌细胞的增殖、抑制其凋亡,该作用机制可能与PI3K/Akt信号通路活化有关。     

Dual blockade of the PI3K/Akt/mTOR pathway inhibits posttransplant Epstein‐Barr virus B cell lymphomas and promotes allograft survival

Posttransplant lymphoproliferative disorder (PTLD) is a serious complication of organ transplantation that often manifests as Epstein‐Barr virus (EBV)‐associated B cell lymphomas. Current treatments for PTLD have limited efficacy and can be associated with graft rejection or systemic toxicities. The mTOR inhibitor, rapamycin, suppresses tumor growth of EBV+ B cell lymphoma cells in vitro and in vivo; however, the efficacy is limited and clinical benefits of mTOR inhibitors for PTLD are variable. Here, we show constitutive activation of multiple nodes within the PI3K/Akt/mTOR pathway in EBV+ PTLD‐derived cell lines. Inhibition of either PI3K or Akt, with specific inhibitors CAL‐101 and MK‐2206, respectively, diminished growth of EBV+ B cell lines from PTLD patients in a dose‐dependent manner. Importantly, rapamycin combined with CAL‐101 or MK‐2206 had a synergistic effect in suppressing cell growth as determined by IC₅₀ isobolographic analysis and Loewe indices. Moreover, these combinations were significantly more effective than rapamycin alone in inhibiting tumor xenograft growth in NOD‐SCID mice. Finally, both CAL‐101 and MK‐2206 also prolonged survival of heterotopic cardiac allografts in C57BL/6 mice. Thus, combination therapy with rapamycin and a PI3K inhibitor, or an Akt inhibitor, can be an efficacious treatment for EBV‐associated PTLD, while simultaneously promoting allograft survival.     

葡萄籽多酚对人乳腺癌细胞MCF-7/ADR在裸鼠体内的多药耐药逆转作用

目的　研究葡萄籽多酚 (GSP)对人乳腺癌耐阿霉素细胞MCF 7/ADR的体内多药耐药逆转作用。方法　采用人乳腺癌裸鼠移植瘤模型研究GSP对肿瘤多药耐药的体内逆转作用 ;采用流式细胞术测定不同用药P 糖蛋白 (Pgp)表达变化及肿瘤细胞凋亡率变化。 结果　体内裸鼠抑瘤实验显示GSP有一定抑瘤作用 ,抑制率为 18 35 % ,联合应用阿霉素 (ADR)可显著抑制肿瘤生长 ,2 0mg/kgGSP可有效逆转MCF 7/ADR细胞的耐药性 ,抑瘤率为 5 4 6 4 %。流式细胞术结果显示应用GSP后肿瘤细胞Pgp表达显著降低 ( 32 0 3± 2 0 9) ,与对照组 ( 5 5 13± 2 12 )相比差异有显著意义 (P <0 0 5 )。平均凋亡率为 15 12 %± 1 0 4 % ,显著高于对照组 9 0 7%± 0 4 3% (P <0 0 5 )。结论　GSP能在体内逆转MCF 7/ADR细胞的耐药性 ,其机制可能是通过抑制Pgp表达 ,并可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来起作用     

乳腺癌组织中miR-34a与VEGF的关系及临床意义

目的:探讨乳腺癌组织中miR-34a与VEGF的关系及临床意义。方法:检测40对乳腺癌及其癌旁组织组织中miR-34a与VEGF的表达,分析乳腺癌中miR-34a表达与临床病理因素及VEGF表达的关系;用双荧光素酶报告系统检测miR-34a对乳腺癌细胞MCF-7中VEGF转录活性的影响;用miR-34a模拟物转染MCF-7细胞后,检测细胞增殖情况与VEGF及下游Akt蛋白表达的变化。结果:与癌旁组织比较,乳腺癌组织中miR-34a表达明显降低,而VEGF表达明显升高(均P0.05);乳腺癌中miR-34a的表达与TNM分期有关(P0.05),且与VEGF的表达呈负相关(r~2=0.4469,P=0.0033)。miR-34a模拟物转染后,MCF-7细胞中VEGF的转录活性明显抑制;增殖率明显降低,VEGF的表达以及Akt的磷酸化水平明显下调(均P0.05)。结论:miR-34a在乳腺癌组织中表达降低,削弱了对VEGF及其下游Akt磷酸化的抑制,从而促进了乳腺癌的生长。     

雌激素受体真核表达质粒对乳腺癌耐药细胞耐药性和细胞增殖的影响

目的　研究雌激素受体 (ER )表达质粒对MCF 7/ADR乳腺癌阿霉素耐药细胞耐药性和细胞增殖的影响。方法　Westernblot法检测MCF 7细胞和MCF 7/ADR细胞ER状态。构建ER的真核细胞表达质粒 pCER ,导入MCF 7/ADR细胞 ,流式细胞仪检测细胞周期分布 ,MTT法检测细胞生长。结果　MCF 7细胞ER为阳性 ,MCF 7/ADR细胞ER为阴性。成功构建真核细胞表达质粒 pCER ,转染MCF 7/ADR细胞 ,获得阳性克隆MTER/ADR。与对照组相比 ,MTER/ADR生长速度增快 ,S期细胞为 17.2 3 % (对照组为 14 .66% ) ,细胞对阿霉素的耐药性下降 ,阿霉素为 3mg/L时对细胞的抑制率为 45 % ,大于对照组细胞的抑制率 (为 2 4% ) ;且雌二醇 (E2 )能增加阿霉素对MTER/ADR细胞生长的抑制作用。结论　MCF 7/ADR乳腺癌耐药细胞的耐药性与其雌激素受体的表达缺失有一定关系。