JAK2/STAT3信号通路在肝细胞性肝癌中表达及意义

目的:探讨JAK2/STAT3信号通路在人肝细胞性肝癌(HCC)组织中的表达以及其意义。方法:用免疫组化法和Western blot法检测75例HCC组织及其相应的癌旁组织JAK2与STAT3蛋白的表达,分析两者与HCC患者病理特征及预后的关系。结果:JAK2与STAT3蛋白在HCC组织中的阳性表达率及表达量均高于相应的癌旁组织(62.7%vs.5.3%,69.3%vs.9.3%;均P0.05);JAK2与STAT3蛋白在HCC组织中的表达呈明显正相关(r=0.383,P0.01)。JAK2和STAT3蛋白的表达与肝硬化、门静脉癌栓、肿瘤分化程度、临床分期明显有关(均P0.05)。生存分析显示,JAK2与STAT3蛋白高表达患者的生存率及生存期均明显低于各自的低表达患者(χ2=13.591;χ2=6.842,均P0.05);Cox比例风险回归模型分析表明,JAK2与STAT3蛋白以及门静脉癌栓、肿瘤分化程度、临床分期均为影响HCC预后的独立危险因素(均P0.05)。结论:JAK2/STAT3信号通路在HCC组织中活性增高,且其活性高低与HCC患者预后密切相关。     

lncRNA TUG1在儿童肝母细胞瘤中的表达及其与miR-204介导的JAK2-STAT3通路关系

背景与目的:近年来,儿童肝母细胞瘤(HB)的治疗方面取得一定的进步,但整体临床预后仍然较差,因此探索其发病机制和有效治疗靶点具有重要意义。本研究探讨长链非编码RNA(lncRNA)牛磺酸上调基因1(TUG1)与JAK2-STAT3通路相关分子在HB组织中的表达,初步分析HB中TUG1与miR-204介导的JAK2-STAT3血管生成信号通路之间的关系。方法:选取2017年3月—2018年4月湖南省儿童医院收治的60例HB患儿为研究对象,收集所有患儿HB肿瘤组织及其远端瘤旁正常组织,分别采用免疫组化与Western blot法检测组织中JAK2、STAT3及下游血管生成相关分子蛋白的表达,用qRT-PCR法检测组织中TUG1、miR-204与JAK2、STAT3及下游血管生成相关分子的RNA表达,并分析HB组织中TUG1与miR-204的表达的相关性。此外,在人HB细胞系HepG2中,观察TUG1敲减或miR-204过表达后,JAK2、STAT3及下游血管生成相关分子的RNA表达的变化。结果:免疫组化结果显示,HB组织中JAK2与STAT3蛋白的阳性表达率明显高于瘤旁正常组织(JAK2:40.1% vs.16.9%;STAT3:55.7% vs.19.8%,均P0.05)。qRT-PCR结果显示,HB组织中TUG1、JAK2、STAT3及血管生成相关分子VEGF、VEGFR2、HIF-1α的RNA表达均较瘤旁组织明显上调(均P0.05);HB组织中,TUG1与miR-204的表达呈明显负相关(r=-0.962,P=0.014)。Western blot结果显示,HB组织中JAK2、STAT3及下游血管生成相关分子的蛋白表达均较瘤旁组织明显上调(均P0.05)。HepG2中,TUG1敲减或miR-204过表达后,JAK2、STAT3及下游血管生成相关分子的RNA与蛋白表达均明显下调(均P0.05)。结论:HB患儿肿瘤组织内TUG1的表达上调,并伴有JAK2-STAT3通路的活性升高,且TUG1与miR-204的表达呈负相关,这提示在HB中,TUG1可能通过抑制miR-204表达,从而激活JAK2-STAT3通路,促进HB的血管生成。     

JAK2-STAT3-波形蛋白信号通路对结肠癌细胞增殖迁移的影响

目的探讨JAK2-STAT3-波形蛋白信号通路在结肠癌细胞增殖迁移中的作用。方法应用JAK2抑制剂AG490处理人结肠癌Lovo细胞株。采用MTT法进行细胞增殖实验：采用细胞划痕实验检测细胞迁移能力;用免疫荧光染色和Western blot检测Lovo细胞中波形蛋白和磷酸化STAT3（P—STAT3）的表达水平。结果AG490处理后,Lovo细胞增殖明显受到抑制．且呈剂量依赖性和时间依赖性（P〈0．05）。细胞划痕后24h,AG490处理组（实验组）的细胞划痕宽度恢复20％,而对照组划痕宽度恢复60％（P〈0．05）。实验组Lovo细胞中P—STAT3和波形蛋白蛋白表达明显降低（P〈0．05）。结论JAK2-STAT3-波形蛋白信号通路参与调控人结肠癌细胞的增殖和迁移。     

复方守宫散对Lewis肺癌小鼠JAK2-STAT3信号通路的影响

目的观察复方守宫散对Lewis肺癌小鼠JAK2-STAT3信号通路的影响。方法将55只C57BL/6J小鼠按常规方法接种Lewis肺癌瘤株,6d后选取荷瘤成功的小鼠50只随机分为5组:阳性对照组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,每组10只。阳性对照组:灌服生理盐水0.2mL,1次/d;中药组灌服复方守宫散高剂量组0.6mL(相当于120mg/kg),中剂量组0.4mL(相当于60mg/kg),低剂量组0.2mL,(相当于40g/kg),1次/d;顺铂组按1mg/kg给药,0.1mL/只腹腔注射。每天1次,共14d。在光镜下用HE染色法观察肿瘤组织病理形态学改变情况,用Western Blot法检测JAK2、STAT3蛋白的表达水平。结果各给药组JAK2、STAT3蛋白的表达水平出现不同程度降低,且JAK2降低较为明显。结论复方守宫散能够抑制肿瘤生长,降低Lewis瘤细胞中JAK2、STAT3蛋白的表达,并通过此方式阻断JAK2-STAT3信号转导。     

高糖状态下JAK2-STAT3通路的活化对系膜细胞转化生长因子β1、纤连蛋白表达的影响

JAK-STAT通路是近年发现的一组信号转导通路,能介导多种细胞因子和生长因子的细胞内信号转导过程.有研究提示JAK2-STAT3通路可能与系膜细胞的增殖、肥大及细胞外基质分泌有关[1].本研究旨在探讨高糖培养下大鼠肾小球系膜细胞JAK2-STAT3信号转导通路的活性变化及用AG-490(tyrphostin B42,JAK-STAT通路特异性阻断剂)抑制此通路活化对大鼠肾小球系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)、纤连蛋白(FN)表达的影响,为进一步探讨JAK-STAT信号转导通路与糖尿病肾病发病机制的关系提供新的思路.     

JAK2-STAT3通路和E-cadherin在结直肠癌进展中的相互作用分析

目的:探讨JAK2-STAT3通路和E-cadherin在结直肠癌进展中的相互作用。方法:选取择期行手术治疗的结直肠癌患者87例,利用Westernblot检测结直肠癌及癌旁组织中STAT3、p-STAT3和E-cadherin蛋白的表达,并计算p-STAT3/STAT3值。结果:结直肠癌组织中STAT3、p-STAT3蛋白相对表达量和p-STAT3/STAT3值均高于癌旁组织,而E-cadherin蛋白相对表达量则低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P0.05);结直肠癌患者STAT3、p-STAT3和E-cadherin蛋白表达均与肿瘤大小、分化程度、淋巴结转移、浸润深度和TNM分期有关(P0.05);Pearson相关分析显示,结直肠癌组织中STAT3表达与p-STAT3呈正相关(r=0.736,P0.05),而与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.497,P0.05),p-STAT3表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.642,P0.05)。结论:STAT3和p-STAT3蛋白在结直肠癌组织中表达上调,可能通过激活JAK2-STAT3通路抑制E-cadherin蛋白表达而实现对肿瘤细胞浸润、转移的调控作用。     

JAK2/STAT3通路参与过氧化氢抑制小鼠原代颗粒细胞增殖的研究

目的通过过氧化氢(H2O2)处理体外培养的小鼠原代颗粒细胞(mGC),探讨JAK2/STAT3信号通路在H2O2抑制mGC增殖中的作用。方法应用H2O2、JAK2抑制剂AG490(不同浓度、不同作用时间)处理mGC;用CCK-8、增殖细胞核抗原蛋白(PCNA)水平检测细胞增殖情况,RT-PCR检测JAK2mRNA水平,Western blot检测JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3、Cyclin D1的蛋白表达水平。结果 H2O2与AG490均以剂量和时间依赖方式降低mGC活率。750μmol/L的H2O2处理mGC 24h明显降低细胞活率(P0.01),降低PCNA蛋白水平(P0.01),并下调JAK2mRNA和蛋白表达水平(P0.01);80μmol/L的JAK2抑制剂AG490可降低细胞活率(P0.01),且使细胞中的p-JAK2、JAK2、STAT3、p-STAT3、PCNA、Cyclin D1表达均下降(P0.05)。结论 H2O2抑制mGC增殖可能与JAK2/STAT3信号通路有关。     

经典Wnt信号通路在原发性肝癌发生中的作用

原发性肝癌（HCC）是世界第5大肿瘤,死亡率高,其发病率呈上升趋势。研究表明,多种信号通路参与了HCC的发生发展如p53信号通路、Rb信号通路、经典Wnt信号通路等[2]。Wnt基因家族编码蛋白的异常表达可引起经典Wnt信号通路的激活,进而导致核心因子β-catenin稳态并定位于核内,激活下游靶基因的转录,与肿瘤发生有关。了解该通路在HCC发生发展中的作用有重要意义。     

JAK2信号通路介导人恶性黑素瘤A375细胞的自噬和凋亡机制研究

目的:探讨JAK2/STAT3信号通路介导人恶性黑素瘤A375细胞的自噬和凋亡活性,为黑素瘤的发生机制和潜在干预靶点提供理论依据。方法:人恶性黑素瘤A375细胞经复苏和传代后随机分为对照组和JAK2抑制剂干预组,比较两组细胞培养12h、24h、48h和72h的增殖率(采用MTT定量法)及凋亡率(采用流式细胞术),培养72h的细胞JAK2、p-JAK2、STAT3、LC3B和p-STAT3蛋白相对表达量(采用Western blot法),检测IL-6和TNF-α水平(采用ELISA法),检测Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNA相对表达量[采用反转录PCR(RT-PCR)法]。结果:两组培养12h、24h、48h和72h的细胞增殖率比较,干预组各时间点均明显小于对照组,而凋亡率明显大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。干预组培养72h的细胞p-JAK2和p-STAT3蛋白相对表达量、IL-6和TNF-α水平明显低于对照组,但LC3B蛋白、Caspase-3和Bax/Bcl-2 mRNA相对表达量均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:JAK2/STAT3信号通路异常激活可能是人黑素瘤A375细胞恶性增殖的重要通路之一,靶向干预JAK2/STAT3信号通路可以促进细胞自噬和凋亡活性上调,有望成为临床干预的重要靶点。     

JAK/STATs信号通路在慢性肾脏病领域作用机制的研究进展

<正>JAK/STATs为酪氨酸蛋白激酶(JAK)/信号转导因子和转录活化因子(STAT)途径缩写。广泛参与细胞多种生理病理过程,介导细胞生殖分化、免疫调节、迁移凋亡等,是维护机体稳态的重要信号通路,与多器官密切相关。就肾脏而言,JAK/STATs在原发性肾脏病、继发性肾损害、慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)并发症中均发挥重要作用,笔者将近年来相关研究归纳分析,梳理如下。1 JAK/STATs信号通路的结构基础JAK有JAK1、JAK2、JAK3和TYK2,4位家族成员; JAKs下游信号是STAT,STATs家族目前发现共7个成员,包括STAT1、STAT2、STAT3、STAT4、STAT5a、STAT5b、STAT6等。     

Expression of the JAK/STAT signaling pathway in the ligamentum flavum of patients with lumbar spinal canal stenosis

Background

Ligamentum flavum (LF) hypertrophy is an important cause of lumbar spinal canal stenosis (LSS), one of the most common spinal disorders in the elderly. Although many cytokines are reported to be associated with LF hypertrophy, the intracellular signaling system is rarely discussed. The purpose of this study was to identify the JAK/STAT signaling pathway and to examine the role of the JAK/STAT systems in the hypertrophied LF.

JAK-STAT通路在小鼠单侧输尿管梗阻模型肾间质纤维化中的作用

目的 探讨Janus蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)通路在小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型.肾间质纤维化过程中的作用.方法 选用30只雄性Balb/c小鼠建立小鼠UUO模型(n=24)和假手术小鼠(n=6),术后第1、4、7和14天检测JAK-STAT磷酸化情况.另把18只雄性Balb/c小鼠随机分为假手术组、UUO模型组和治疗组,每组各6只.治疗组在建模前2 h开始给予选择性JAK2抑制剂AG490治疗,每天1次;模型组仅注射溶媒.术后第14天处死动物.组织学评估肾小管损伤和.肾间质纤维化程度;免疫组化检测肾脏巨噬细胞浸润和α-SMA表达;RT-PCR检测Ⅲ型胶原和单核细胞趋化蛋白(MCP)1 mRNA表达;Western印迹检测JAK2和STATl磷酸化.结果 JAK2-STAT1在UUO模型中被激活,其磷酸化水平与病情、肾小管组织学损害以及.肾间质纤维化相一致.AG490能显著抑制JAK2和STAT1的磷酸化(P＜0.01).AG490治疗显著减轻肾小管损害[(21.7±1.7)%比(49.4±1.0)%]和肾间质纤维化(1.0±0.1比2.3±0.2)、α-SMA表达(0.9±0.1比2.1±0.2)和巨噬细胞积聚[(13.3±1.6)细胞/HPF比(34.4±1.0)细胞/HPF](均P＜0.01).AG490治疗显著抑制Ⅲ型胶原和MCP-1 mRNA表达.结论 JAK-STAT信号通路在肾小管间质炎性反应和纤维化中发挥重要作用.     

JAK2-STAT3 pathway regulates the expression of complement factor B in autosomal dominant polycystic kidney disease

Objective To investigate the role of JAK2-STAT3 pathway in the expression of complement factor B (CFB) in autosomal dominant polycystic kidney disease (ADPKD). Methods Renal tissue samples of patients with ADPKD after nephrectomy were collected. Normal renal tissue samples as control were taken from patients after radical nephrectomy. Renal tissue samples of Han: SPRD Cy/+ rats (ADPKD model) and wild-type Han: SPRD +/+ rats were also collected at 4, 8, 16 week. Han:SPRD Cy/+ rat renal tubular epithelial cells (16 w) were primarily cultured in vitro, then stimulated with the JAK2 inhibitor (WP1066) and STAT3 inhibitor (pyrimethamine) for 24 h respectively. Western blotting was used to detect the expression of p-JAK2, JAK2, p-STAT3, STAT3, CFB protein. Results Compared with control group, the protein expressions of p-JAK2, p-STAT3, STAT3, CFB significantly increased in the renal tissue of ADPKD patients (all P＜0.05). The protein expressions of p-JAK2, JAK2, p-STAT3, STAT3 and CFB also significantly increased in the renal tissue of Cy/+ rats compared with wild-type rats (all P＜0.01). When the Cy/+ renal tubular epithelial cells were treated with WP1066, the expressions of p-JAK2, p-STAT3, CFB were suppressed (P＜0.05) and the degree of inhibition was correlated with the WP1066 dose. Pyrimethamine inhibited the protein expressions of p-STAT3 and CFB in the tubular epithelial cells of Cy/+ rats (all P＜0.05) and the degree of inhibition was correlated with the pyrimethamine dose. Conclusions The JAK2-STAT3 pathway is abnormally activated in ADPKD and increases the protein expression of CFB. CFB protein level is correlated with the progress of ADPKD, suggesting that it may take part in the growth and development of ADPKD vesicles.     

Prevention of CD40-Triggered Dendritic Cell Maturation and Induction of T-Cell Hyporeactivity by Targeting of Janus Kinase 3

Pharmacological targeting of Janus kinase 3 (JAK3) has been employed successfully to control allograft rejection and graft-vs.-host disease (GVHD). Recent evidence suggests that in addition to its involvement in common-gamma chain (cgamma) signaling of cytokine receptors, JAK3 is also engaged in the CD40 signaling pathway of peripheral blood monocytes. In this study, we assessed the consequences of JAK3 inhibition during CD40-induced maturation of myeloid dendritic cells (DCs), and tested the impact thereof on the induction of T-cell alloreactivity. Dendritic cells triggering through CD40 induced JAK3 activity, the expression of costimulatory molecules, production of IL-12, and potent allogeneic stimulatory capacity. In contrast, JAK3 inhibition with the rationally designed JAK3 inhibitor WHI-P-154 prevented these effects arresting the DCs at an immature level. Interestingly, DCs exposed to the JAK3-inhibitor during CD40-ligation induced a state of hyporeactivity in alloreactive T cells that was reversible upon exogenous IL-2 supplementation to secondary cultures. These results suggest that immunosuppressive therapies targeting the tyrosine kinase JAK3 may also affect the function of myeloid cells. This property of JAK3 inhibitors therefore represents a further level of interference, which together with the well-established suppression of cgamma signaling could be responsible for their clinical efficacy.