汉族女性乳腺癌患者has-mir-125a-5p基因的rs12975333位点的单核苷酸多态性及其在癌组织的表达研究

目的 探讨汉族女性乳腺癌患者has-mir-125a-5p基因rs12975333位点单核苷酸多态性(SNP)及has-mir-125a-5p基因在癌组织表达水平与乳腺癌发生发展的关系.方法 选取汉族女性乳腺癌患者289例、乳腺纤维腺瘤49例和相匹配的健康汉族妇女外周血338例,分离淋巴细胞,抽提基因组DNA,采用taqman-MGB探针检测338例乳腺肿瘤及338例健康对照组has-mir-125a-5p的rs12975333位点的单核苷酸多态性;采用茎环Real-time RT-PCR检测289例乳腺癌组织及其正常腺体组织中has-mir-125a-5p的表达水平.结果 乳腺癌组has-mir-125a-5p基因rs12975333位点基因型为GG型273例(94.5%)、GT型16例(5.5%);乳腺纤维腺瘤组及对照组has-mir-125a-5p基因m12975333位点基因型均为GG型;乳腺癌组织has-mir-125a-5p的表达水平(0.19 ±0.04)低于腺体组织(0.37±0.05),差异有统计学意义(P=0.04);携带T等位基因乳腺癌组织中has-mir-125a-5p下调水平较GG基因型表达者更为明显(P=0.022).has-mir-125a-5p的表达降低在发病年龄较晚(P=0.036),ERBB2(P=0.007)、ERBB3(P=0.04)受体表达阴性及存在腋窝淋巴结转移(P=0.001)的乳腺癌组织中更为明显.结论 汉族妇女has-mir-125a-5p基因rs12975333位点的G＞T变异可能与乳腺癌遗传易感性有关;has-mir-125a-5p表达与乳腺癌发生发展相关,是一个潜在的乳腺癌分子标志物.

Abstract：

Objective To investigate the relationship between the single nucleotide polymorphisms (SNPs) in has-mir-125a-5p rs12975333 and the expression of has-mir-125a-5p and clinicopathological cheracteristics of female breast cancer in Han Chinese women. Methods Genomic DNA was extracted from peripheral blood lymphocytes. taqman-MGB assay was used to type breast cancer of 338 cases and 338 controls. Expression levels of has-mir-125a-5p in 289 biopsies were examined using stem-loop real-time RTPCR and the clinicopathological cheracteristics of breast cancer were evaluated. Result The gene frequencies (GG,GT,TT) of rsl2975333 in the patients were GG 273 (94. 5% ), GT 16 (5.5%),TT 0(0%), while in breast fibroadenoma and controls there were GG 49 ( 100% ), 338 (100%). The expression level of has-mir-125a-5p in breast cancer(0. 19 ±0. 04) was lower than that in the matched nontumor adjacent tissue specimens (0. 37 ± 0. 05 ) ( P = 0. 04 ) .The expression level of minor T allele of mature miR-125a in breast cancer patients was lower than that in has-mir-125a-5p-GG carying(P =0.022). The expression of has-mir-125a-5p was down-regulated in primary breast cancer, especially in elder patients ( P = 0. 036) and lymph node metastasis groups (P = 0. 001) and with negative ERBB2 (P = 0. 007), ERBB3 (P =0. 04). Conclusions rs12975333 polymorphisms in has-mir-125a-5p gene may work as a risk factor of breast cancer in Han Chinese women. The altered expression of has-mir-125a-5p might play a role in the pathogenesis and progression of breast carcinoma.     

MDM2基因启动子区rs2279744位点单核苷酸多态性与乳腺癌发病关系的Meta分析

目的:探讨鼠双微体基因(MDM2)启动子区rs2279744位点单核苷酸多态性与乳腺癌发病风险的关系。方法:检索多个国内外文献数据库,收集MDM2启动子区rs2279744位点基因多态性与乳腺癌的风险关系的病例对照研究,筛选出符合标准的文献,提取数据后行Meta分析,并对结果进行敏感性分析与发表偏倚评价。结果:共纳入28篇文献,共计乳腺癌病例组11 804例,对照组15 209例。Meta分析结果显示,总人群中突变型与野生型(TG/GG vs.TT)与等位基因(G vs.T)均有明显差异(OR=1.15,95%CI=1.06~1.24,P0.001;OR=1.12,95%=1.05~1.18,P0.001);按洲别分亚组分析显示,两者仅在亚洲人群中有明显差异(TG/GG vs.TT:随机效应模型OR=1.34,95%CI=1.15~1.57,P0.001,固定效应模型OR=1.34,95%CI=1.20~1.50,P0.001;G vs.T:随机效应模型OR=1.21,95%CI=1.09~1.35,P=0.001)。敏感性分析与Egger检验显示结论可靠,无明显偏倚。结论:亚洲人群MDM-2基因rs2279744位点的突变纯合子/杂合子(GG/TG)型相对于野生型(TT)的个体乳腺癌发病风险增加,MDM-2基因rs2279744位点的突变与亚洲人群乳腺癌密切相关。     

miR-22启动子区域的遗传变异与HBV相关肝癌发病风险的关系

目的：探讨微小RNA 22（miR-22）启动子区域的遗传变异与中国人群乙型肝炎病毒（HBV）相关肝癌易感性的关系。方法：采用病例-对照方法,收集1 020例确诊的乙型肝炎病毒（HBV）阳性HCC患者（病例组）和1 046例健康对照个体（对照组）静脉血标本。用TaqMan等位基因分型方法对miR-22启动子区域多态位点rs6502892（C→T）和rs721576（A→G）进行基因型检测,结合研究对象的基本资料,应用Logistic回归法分析不同基因型与HBV相关肝癌发病风险的关系。结果：rs6502892的基因型分布在病例组与对照组间差异有统计学意义（P=0.018）,而rs721576的基因型的分布在两组间差异无统计学意义（P>0.05）。与rs6502892野生型（CC）比较,rs6502892突变基因型（CT/TT）的HBV相关肝癌的发病风险明显增加（调整后OR=1.23,95% CI=1.02~1.47,P=0.029）。进一步的分层分析表明,rs6502892突变基因型（CT/TT）的危险效应在52岁以下年龄组、女性、吸烟者和饮酒者中更明显（均P<0.05）;而rs721576突变基因型（AG/GG）在男性和非吸烟者中HBV相关肝癌的发病风险降低（均P<0.05）。结论：miR-22 rs6502892突变基因型（CT/TT）增加中国人群HBV相关肝癌的发病风险,而rs721576突变基因型（AG/GG）降低男性和非吸烟者患HBV相关肝癌的风险。这一结论有待进一步的关联研究以及功能学研究的证实。

     

KITLG基因rs995030和rs4474514位点单核苷酸多态性与男性不育相关性研究

目的:探讨酪氨酸激酶受体的特异性配体(KITLG)基因rs995030和rs4474514位点单核苷酸多态性与男性不育之间的相关性。方法:收集南京周边地区特发性男性不育患者360例(病例组),已生育的健康男性338例(对照组);按照WHO《人类精液检查与处理实验室手册》第5版,将病例组分为无精子症组(n=143)、严重少精子症组(n=159)和少精子症组(n=58)。收集所有研究对象的临床基本资料,并采集病人外周血提取基因组DNA,用Sequence Mass-Array技术检测KITLG基因rs995030和rs4474514位点的基因型,通过Logistic回归分析两位点基因多态性与男性不育的相关性。结果:病例组与对照组比较,精子浓度[(13.23±24.52)×10~6/ml vs(78.74±61.25)×10~6/ml]、前向运动精子百分率[(18.71±15.19)%vs(39.36±9.75)%]、FSH[(16.09±17.31) IU/L vs(4.56±2.41) IU/L]差异显著(P0.01)。经Logistic回归分析,未发现各基因型与男性不育有统计学意义的相关性,亚组分析也未发现相关性。结论:KITLG基因rs995030和rs4474514位点的单核苷酸多态性与男性不育无显著相关性,后续可以通过扩大样本量以及样本选取范围来进一步研究验证。     

超氧化物歧化酶2基因rs4880位点单核苷酸多态性与男性不育发病风险的相关性研究

目的:探讨超氧化物歧化酶2(SOD2)基因rs4880位点单核苷酸多态性与男性不育发病风险的相关性。方法:采用病例-对照研究的方法,选取519例特发性男性不育患者作为病例组,年龄19~40(28.92±4.37)岁,并按精子浓度和前向运动(PR)精子百分率分为无精子症组(n=143)、严重少精子症组(n=175)、少精子症组(n=89)和弱精子症组(n=112)4个亚组;以338例正常生育的男性作为对照组,年龄19~40(28.40±4.25)岁,进行临床数据的采集。用Sequenom Mass Array技术对SOD2 rs4880位点进行基因分型,用Logistic回归模型分析SOD2 rs4880位点不同基因型与男性不育之间的关系。结果:病例组与正常对照组FSH、PR精子百分率、精子浓度存在显著差异(P0.01)。与野生型纯合TT比较,杂合突变型TC(OR=0.90,95%CI:0.65~1.25,P=0.516)与纯合突变型CC(OR=1.49,95%CI:0.38~5.81,P=0.566)均显示与男性不育无相关性;亚组分析中均显示该基因位点与男性不育不存在相关性:无精子症组中,TC/TT(OR=0.99.95%CI:0.62~1.58,P=0.967),CC/TT(OR=1.58,95%CI:0.26~9.59,P=0.619;严重少精子症组中,TC/TT(OR=1.07.95%CI:0.70~1.64,P=0.750),CC/TT(OR=1.31,95%CI:0.22~7.96,P=0.767;少精子症组中,TC/TT(OR=0.83.95%CI:0.47~1.48,P=0.535),CC/TT(OR=1.22,95%CI:0.13~11.90,P=0.865);弱精子症组中,TC/TT(OR=0.59.95%CI:0.33~1.05,P=0.074),CC/TT(OR=1.84,95%CI:0.30~11.16,P=0.510)。结论:SOD2 rs4880位点基因多态性与男性不育不存在相关性,但是由于实验样本条件的限制,需要更大的样本量以及样本选取范围来进一步研究验证。     

microRNA-25高表达与直肠癌细胞的侵袭和迁移的关系

目的:探讨micro RNA-25(mi R-25)在直肠癌细胞中的表达及作用。方法:检测多种不同直肠癌细胞中mi R-25的表达,并检测直肠癌细胞转染mi R-25前体(pre-mi R-25)上调mi R-25的表达或转染mi R-25抑制剂(anti-mi R-25)下调mi R-25的表达后生物学行为的变化。结果:与正常直肠黏膜组织比较,不同的直肠癌细胞中mi R-25的表达均不同程度的明显升高(均P0.05)。在mi R-25表达水平相对较低的直肠癌HR-834细胞中转染pre-mi R-25,在mi R-25高表达的直肠癌SW-837细胞中转染anti-mi R-25后,两种细胞的增殖、细胞周期、凋亡无明改变(均P0.05),但侵袭及迁移能力在HR-834细胞的明显增强,SW-837细胞减弱(均P0.05)。结论:mi R-25在直肠癌细胞中的表达升高,且其升高程度与细胞的侵袭和迁移能力密切相关。     

肝门部胆管癌的诊断、治疗选择与处理策略

肝门部胆管癌（HC）是一种少见的疾病,通常在60岁左右发病,预后较差;在美国,每年约有3 000例患者被诊断为该病,但仅有不到一半的人可以行手术治疗;有多种因素与HC的发病有关,最常见的有原发性硬化性胆管炎（PSC）,胆石症以及寄生虫肝病。患者通常表现为腹痛、瘙痒、体质量减轻和黄疸。CT、MRI及超声可以用来发现胆道病损;逆行性胰胆管造影术（ERCP）及经皮肝胆管造影术（PTC）在评估肿块位置、长度的同时还可以行治疗性的胆汁引流。MRCP在辨别肿瘤延伸范围时同PTC及ERCP有相同的准确性,并且并发症较前两者少。HC的治疗方式主要为手术切除、放射治疗、化疗及光动力学治疗。残余肝脏胆汁引流有助于降低胆红素水平,进而促进残肝的生长;标准的治疗包括切缘为阴性切除（R0）,范围为肝外胆管切除、肝切除及周围的淋巴结清扫术;局部的切除术是不适当的;淋巴结侵犯的程度、肿瘤的级别以及切缘的性质是重要的预后指标;如果无法行肿瘤切除,那么在经反复选择后的患者中实施肝移植术也是种可行的方式;尽管数据有限,化疗对于不可切除的患者来说仍有一定的作用;经手术切除的HC患者5年生存率约为10%~40%,然而即使为R0切除,复发率也高达50%~70%。由于这种疾病的复杂性,多种学科的综合治疗是较为理想的治疗方式。

     

p28GANK在肝门胆管癌表达的意义及其与预后的关系

目的：探讨p28GANK在肝门胆管癌中表达的意义及其与患者术后预后的关系。 方法：用免疫组化染色检测p28GANK在肝门胆管癌组织（62例）及正常胆管组织（16例）表达,分析其表达水平与患者临床病理特征以及术后生存的关系。 结果：p28GANK在胆管癌组织中的阳性表达率为74.2%（46/62）,而在正常胆管组织中为0,两者差异有统计学意义（P<0.01）。p28GANK在癌组织表达水平与患者年龄、性别分组间差异无统计学意义（均P>0.05）,而在肿瘤分化程度、TNM分期、肝门静脉侵润、淋巴结转移分组间差异有统计学意义（均P<0.05）;p28GANK阳性表达患者术后5年生存率明显低于阴性表达者（P=0.001）。 结论：p28GANK在肝门胆管癌中表达增高,其高表达患者恶性进展程度密切相关,并提示术后预后不良。

     

TP53基因rs1042522单核苷酸多态性与男性不育相关性研究

目的:探讨肿瘤蛋白p53(TP53)基因rs1042522位点单核苷酸多态性与男性不育的关系。方法:采用病例-对照研究,收集南京地区特发性男性不育患者380例(病例组),有生育史的健康男性398例(对照组);并将病例组分为无精子症组(n=140)和少精子症组(n=240)。用Sequence Mass Array技术检测TP53基因rs1042522位点的基因型,通过Logistic回归分析该位点多态性与男性不育的相关性。结果:病例组与对照组前向运动精子百分率[(10.38±5.57)%vs(42.55±9.57)%]、精子浓度[(13.13±24.96)×106/ml vs(77.34±49.24)×106/ml]、T[(14.07±5.36)nmol/L vs(11.89±4.50)nmol/L]、FSH[(16.80±18.20)U/L vs(4.55±7.17)U/L]存在显著性差异(P0.05)。经Logistic回归分析,未发现各基因型与男性不育有统计学意义的相关性,亚组分析也未发现相关性。结论:TP53基因rs1042522位点的单核苷酸多态性与男性不育无显著相关性。     

MTRR A66G基因多态性与深静脉血栓形成的关系

目的探讨蛋氨酸合成酶还原酶(MTRR)基因的多态性与深静脉血栓形成的关系。方法采用病例对照的研究方法,以101例下肢深静脉血栓形成(DVT)患者与同期行健康体检的正常人群120例(对照组)的血白细胞为样本,应用等位基因序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)多态性技术检测两组MTRR基因第66位点的多态性,分别比较每两组的基因型和等位基因的分布频率。结果 MTRR的66位点AA,AG和GG基因型频率在DVT组中分别为26.76%,43.66%和29.58%,在对照组中分别为43.57%,44.28%和12.14%,两组的分布频率差异无统计学意义(χ2=3.22,P0.05)。结论 MTRR基因A66G多态性在我国可能不是DVT的独立遗传危险因素。     

联合血管切除在手术治疗肝门部胆管癌中作用的Meta分析

目的:系统评价联合血管切除(VR)在肝门部胆管癌(HCCA)手术治疗中的作用。方法:系统检索国内外多个文献数据库,收集手术联合VR对比未联合VR治疗HCCA的文献,评估联合VR的安全性及疗效,并根据联合切除血管的类型分亚组分析。结果:共纳入27篇文献,总计3 218例HCCA患者,其中联合VR治疗888例(联合VR组),未联合VR治疗2 330例(对照组)。Meta分析的总体结果显示,与对照组比较,联合VR组安全性方面降低(病死率:OR=2.83,95%CI=1.80~4.44;术后并发症:OR=2.48,95%CI=1.44~4.28)且疗效不佳(1、3、5年生存率:OR=0.60,95%CI=0.49~0.73、OR=0.57,95%CI=0.47~0.69、OR=0.61,95%CI=0.41~0.91)(均P0.05)。在门静脉切除亚组中,虽然术后并发症发生率较对照组高(P0.05),但在其他有效性及安全性指标方面与对照组之间无统计学差异(均P0.05);在肝动脉切除亚组中,所有的合并效应与总体的分析结果一致(均P0.05)。结论:对于仅有门静脉被侵犯的HCCA患者,手术联合VR是可行的,然而,一旦有肝动脉受累,则联合VR治疗需慎重施行。     

Snail在肝内胆管癌中的表达及其临床意义

目的:探讨Snail在肝内胆管癌组织中的表达及其与患者临床病理特征和生存预后的关系。方法:回顾性分析1999年12月—2010年1月外科手术治疗的55例肝内胆管癌病例及随访资料,免疫组织化学检测上述患者癌组织及癌旁组织标本中Snail的表达情况,分析Snail表达与临床病例资料、病理特征及预后的关系。结果:肿瘤组织中Snail表达量(2.764 vs.0.914)与高表达率(48.6%vs.18.0%)均明显高于癌旁组织(均P0.05),且Snail表达与肿瘤分化(χ~2=4.231,P=0.040)、TNM分期(χ~2=6.631,P=0.010)、淋巴结转移(χ~2=4.134,P=0.042)、微血管侵犯(χ~2=10.197,P=0.001)以及复发(χ~2=4.610,P=0.032)有关,与Snail低表达患者比较,Snail高表达患者总体生存率降低(P=0.018)、术后累计复发率升高(P=0.032)。单因素分析与多因素Cox回归模型分析结果示,微血管侵犯、淋巴结转移以及Snail表达是肝内胆管癌患者预后的独立影响因素(均P0.05)。结论:Snail在肝内胆管癌组织中表达增加,且Snail过表达与肝内胆管癌患者恶性病理特征及不良预后密切相关。     

microRNA let-7a对胆管癌细胞凋亡和周期的影响

目的:探讨microRNA(miRNA) let-7a在胆管癌组织中的表达及其意义.方法:用Real-time PCR检测let-7a在胆管癌与正常胆管组织中的表达;将胆管癌HuCCT-1细胞分为let-7a过表达组(转染let-7a mimics),阴性对照组(转染阴性对照序列)和空白对照组(无转染),分别用Real-time PCR和流式细胞仪检测各组细胞let-7a的表达,细胞凋亡和周期情况.结果:let-7a在胆管癌组织中表达较正常胆管组织明显下调(P＜0.01);与空白对照组比较,let-7a过表达组HuCCT-1细胞的let-7a表达明显升高,细胞凋亡率明显增加(均P＜0.01),而阴性对照组与空白对照组间无统计学差异(均P＞0.05);各组间细胞周期差异无统计学意义(P＞0.05).结论:胆管癌组织中let-7a表达下调,let-7a表达下调抑制了细胞凋亡,从而可能在促进胆管癌发生与发展中起了重要作用.     

FIG-ROS融合基因在肝内胆管细胞癌中表达及其意义

目的:探讨FIG-ROS融合基因在肝内胆管细胞癌(ICC)细胞中的表达,以及对其干预后ICC细胞的生物学行为的变化。方法:用Western blot法检测4份不同ICC组织样本及3种ICC细胞株(HUCCT1、REB、QBC939)中ROS蛋白的表达;选择ROS阳性ICC细胞,用一系列表达不同序列ROS-sh RNA与FIG-sh RNA的质粒分别转染该细胞后,用Western blot检测ROS和FIG蛋白表达;选择对ROS和FIG表达抑制作用最强的ROS-sh RNA与FIG-sh RNA序列分别或联合转染上述细胞后,观察细胞增殖、细胞周期、凋亡及集落形成情况。结果:2份ICC组织样本与1个细胞株(HUCCT1)呈ROS阳性表达;转染ROS1-6290 sh RNA和FIG-363 sh RNA对HUCCT1细胞ROS与FIG蛋白表达的抑制作用最强。与未转染的HUCCT1细胞比较,单独转染FIG-363 sh RNA对细胞增殖、凋亡及细胞周期无明显影响(均P0.05),但能明显减少细胞集落形成(P0.05);ROS1-6290 sh RNA单独或联合FIG-363 sh RNA转染均能明显抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡与细胞周期阻滞、减少细胞集落形成,且联合转染的效应更为明显(均P0.05)。结论:部分ICC存在FIG-ROS融合基因表达,对两种基因的联合抑制可能是靶向治疗该类ICC的有效途径。     

肝内胆管细胞癌淋巴结清扫争议

肝内胆管细胞癌是第二常见原发肝脏恶性肿瘤,手术是治愈肝内胆管细胞癌的唯一手段,淋巴结转移是影响预后的不良因素之一。肝内胆管细胞癌淋巴结清扫意义尚不明确,本文将就淋巴结清扫相关争议进行讨论。     

肝胆管结石合并肝脓肿和胆管癌：附14例报告

目的：探讨肝胆管结石合并肝脓肿和胆管癌的诊断和治疗方法。
方法：对2004年7月—2009年12月收治的14例肝胆管结石并肝脓肿和胆管癌的临床资料进行回顾性分析。
结果：全组肝胆管结石并肝脓肿和胆管癌的发生率为0.58%（14/2 432）,术前确诊5例（5/14,35.7%）;另术中快速病检发现7例,术后病检发现2例。肿瘤切除7例（7/14,50.0%）。随访的5例行肿瘤切除者生存期均超过1年,其中1例存活5年3个月;4例非切除性姑息性手术分别存活1,6,7,13个月。
结论：有多年肝胆管结石病史患者合并肝脓肿时要考虑胆管癌的可能。早期诊断及早行肿瘤根治切除是提高疗效的关键。

     

肝内外胆管结石合并胆管癌的临床特征及诊治

目的：探讨肝内外胆管结石合并胆管癌的临床特征及诊治方法。
方法：回顾性分析1998—2009年武汉大学中南医院收治的肝内外胆管结石合并胆管癌54例患者的临床资料。
结果：全组肝内外胆管结石合并胆管癌者的发生率为5.45%;术前诊断率为83.3%。54例均行手术治疗,其中根治性切除率38.9%;病理诊断为腺癌; 45例患者（占总数的83.3%）术后平均随访24个月,行根治性手术病例平均存活21个月,行姑息性引流手术病例平均存活8.5个月,仅行探查术病例存活平均3.5个月。
结论：胆管癌伴有肝内外胆管结石的疗效较差,有可能时应力争行根治性切除。

     

巨噬细胞清道夫受体单核苷酸多态性与前列腺癌易感及患者预后的相关性分析

目的 探讨分析巨噬细胞清道夫受体(MSR1)单核苷酸多态性与前列腺癌易感及患者治疗预后的相关性.方法 选择2017年3月至2019年5月在本院治疗的前列腺癌患者103例设为前列腺癌组,再选取同期在本院健康体检的男性受试者97例设为对照组.检测两组受试者MSR1基因rs918位点及rs1904577位点的基因多态性分布情...