TLR2 mRNA Upregulation in Ischemic Lobes in Mouse Partial Hepatic Ischemia／Reperfusion Injury Model

ThisresearchwasaimedtostudythevariationofTLR2mRNAexpressioninischemichepaticlobesunderapartialhepaticischemia/reperfusionpathologicalpro cess,andtoelucidatethemechanismoftoll likerecep tors (TLRs)activationandtheroleplayedbyTLRssig nalingpathwayinhepatici…     

罗格列酮对大鼠肝缺血再灌注损伤的保护作用

目的：探讨罗格列酮(rosiglitazone,RGZ)对肝缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的 保护作用及其相关机制。方法：用无创血管夹夹闭左、中叶肝蒂构建70%HIRI大鼠模型。30只Sprague-Dawley大鼠 随机均分为假手术组、HIRI组和RGZ组,每组10只。再灌注2 h后,检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)表达水平,以及肝丙二醛 (malondialdehyde,MDA)的含量和过氧化氢酶(content and catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, GPx)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性;HE染色检测肝病理形态;Western印迹检测肝过氧化物 酶体增殖物激活受体-γ(peroxisome proliferators-activated receptor γ,PPAR-γ)、磷酸化修饰的PPAR-γ(p-PPAR-γ)、核因 子相关因子2(nuclear factor related factor 2,Nrf-2)、抗氧化反应元件(antioxidant response element,ARE)、血红素氧化酶 1(heme oxygenase 1,HO-1)、还原型辅酶/醌氧化还原酶-1(quinone oxidoreductase-1,NQO-1)表达量。结果：与HIRI组 相比,RGZ组ALT,AST,LDH 和MDA表达水平均明显降低(均P<0.05),而p-PPAR-γ,Nrf-2,ARE,HO-1和NQO-1表 达水平,以及CAT,GPX和SOD活性均明显增高(均P<0.05),此外,肝组织肿胀和坏死以及病理损伤均明显减轻(均 P<0.05),而PPAR-γ表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论：PPAR-γ激动剂RGZ能减轻肝HIRI,其作用途径可能与 激活Nrf2/ARE信号途径而增强机体抗氧化能力有关。     

TLR4蛋白在小鼠肝脏部分缺血再灌注损伤中时序性表达及意义

目的通过研究Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)蛋白在小鼠肝脏部分缺血再灌注损伤模型中的动态表达,探讨TLR4受体的激活与肝功能损伤间的关系.方法以BALB/c小鼠复制肝脏部分缺血再灌注损伤模型,采用免疫组织化学染色方法动态观察TLR4在肝脏的分布,并用HPIAS-1000图文报告系统分析结果,同时动态监测血浆谷丙转氨酶水平及门静脉血清内毒素水平.结果肝脏左中叶缺血1 h后,不同的再灌注时间,缺血肝叶内有增强的TLR4蛋白的阳性表达,以再灌注1 h的表达最为强烈,阳性细胞主要是Kupffer细胞及血管内粒单核细胞,且TLR4的动态表达与肝功能的损伤不平行.门静脉血清内毒素水平在各时间点与假手术组相比无显著差异(P＞0.05).结论在非内毒素血症下,TLR4蛋白在肝脏缺血再灌注损伤过程中有动态表达.TLR4的激活参与了肝脏缺血再灌注损伤的过程.     

小鼠肝脏部分缺血再灌注过程中Toll样受体2的激活及意义

目的探索Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)在小鼠肝脏部分缺血肝叶中的激活,分析TLR2的激活与肝功能损伤之间的关系.方法BALB/c小鼠复制肝脏部分缺血再灌注(缺血1h再灌注4h)损伤动物模型(I/R组),假手术对照组(SH组)同样行开腹手术但不夹闭血管.采用实时荧光定量PCR(Real-time-PCR)方法定量检测缺血肝叶中TLR2mRNA的表达变化,同时采用Western blot检测缺血肝脏组织中TLR2蛋白的表达变化,检测门静脉血浆丙氨酸氨基转移酶(pALT)水平.结果肝脏部分缺血1h再灌注4h后,I/R组与SH组小鼠缺血肝叶TLR2 mRNA的表达(△Ct值)分别为(1.06±0.91)vs(5.08±1.32)(P＜0.01),由于△Ct值越小则基因表达水平越高,说明缺血再灌注过程中缺血肝叶TLR2mRNA的表达水平增高.且I/R组小鼠缺血肝叶TLR2蛋白的表达(OD值)水平较SH组高[(433.91±25.53)vs(102.86±13.58),P＜0.01],I/R组中门静脉血清ALT水平升高[(848.33±271.37)μ/Lvs(42.39±14.75)μ/L,P＜0.01].结论TLR2在肝脏缺血再灌注过程中缺血肝叶的表达增强,且这种变化与肝功能的损伤相关.     

缺血/再灌注大鼠心肌PPAR-γ表达变化对再灌注心律失常的影响

目的 探讨不同预处理的心肌缺血/再灌注(I/R)动物模型中PPAR-γ表达对再灌注心律失常的影响.方法 32只SD大鼠分为4组(n=8):罗格列酮+I/R组(ROS组),GW9662+I/R组(GW组),I/R组(I/R组),假手术组(Sham组).采用冠状动脉左前降支结扎法制造缺血/再灌注动物模型,缺血30 min,再灌注2h.动态肢体Ⅱ导联心电图检测,荧光定量PCR检测PPAR-γ mRNA和Western blot检测PPAR-γ蛋白质的表达变化.结果 分别在术前、缺血30 min、再灌注1h、再灌注2h4个时间点检测心电图QRS波宽度增加幅度由大到小依次是ROS组、I/R组、GW组、Sham组;ROS组较其他组大鼠再灌注心律失常评分明显较高(P＜0.05),GW组则相对减少.荧光定量PCR检测ROS组PPAR-γ mRNA表达水平明显上调(P＜0.05),GW较I/R组和ROS组表达下调(P＜0.05).PPAR-γ蛋白质表达结果与PPAR-γ mRNA相似.结论 心肌PPAR-γ表达上调可能增加心肌I/R动物模型再灌注心律失常的发生.     

依达拉奉对大鼠肠部分缺血再灌注后肝损伤保护作用的实验研究

目的观察依达拉奉（edaravone）对大鼠肠部分缺血再灌注所致肝损伤的保护作用。方法选择健康雄性SD大鼠30只，体重240—280g，随机分为三组，假手术组（C组）、肠部分缺血再灌注组（IR组）、依达拉奉治疗组（E组），每组10只。除C组外，用自行设计的血流阻断器阻断SMA血流量70％左右，缺血60min，然后开放SMA，再灌注120min，E组于开放SMA同时静脉内给予依达拉奉3mg／kg，在试验过程中均以生理盐水10ml／kg／h持续输注。光镜下观察肝组织的损伤情况，测定血和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）水平。结果IR组肝组织产生明显损伤，血和肝组织中SOD活性明显下降，MDA和NO水平明显升高，与C组比较差异具有显著性（P〈0．05）．与IR组比较，E组肝组织损伤程度较轻，血和肝组织中SOD活性升高，MDA和NO的水平明显降低。结论依达拉奉对大鼠肠部分缺血再灌注所致肝损伤具有良好的保护作用，与其清除自由基，抑制脂质过氧化，降低NO的释放有关。     

缺血预处理对肝脏缺血再灌注所致急性肺损伤的保护作用

目的:观察全肝缺血再灌注后所致急性肺损伤的发病机制及缺血顸处理的保护作用.方法:通过脾静脉-股静脉转流建立大鼠全肝缺血再灌注模型.18只大鼠随机分3组,全肝缺血40 min再灌注3 h组(IR组);缺血预处理组(IP组),阻断肝脏血流5 min再灌注5 min后,再行全肝缺血40 mjn再灌注3 b;对照组(C组)仅行麻醉及假手术.3 h后检测各组肺泡灌洗液中总蛋白的含量、肺组织含水量以及髓过氧化物酶(MPO)含量和组织及血中丙二醛(MDA)含量.结果:与C组比较,IR组肺泡灌洗液总蛋白含量和肺组织含水量明显升高,而IP组增高不明显.IR组肺组织MPO和MDA及血清中MDA含量明显高于对照组,而预处理可以减少MPO和MDA的升高.结论:肝脏缺血再灌注通过中性粒细胞浸润和氧化应激反应导致急性肺损伤.缺血预处理可以减少粒细胞的浸润,增加抗氧化的能力,减轻肺损伤.     

Effects of curcumin on peroxisome proliferator-activated receptor γ expression and nuclear translocation/redistribution in culture-activated rat hepatic stellate cells

Background The function of peroxisome proliferator-activated receptor γ （PPARγ） in hepatic fibrogenesis remains largely unknown. Curcumin is a natural substance extracted form Curcuma Longa Linn and has a variety of pharmacological effects. In this study, the effects of curcumin on the proliferation, activation and apoptosis of rat hepatic stellate cells （HSCs） through PPARγ signaling were investigated. Methods HSCs were isolated from the normal Sprague Dawley rats through in situ peffusion of the liver with Pronase E and density-gradient centrifugation with Nycodenz. Cells were treated with curcumin, troglitazone, salvianolic acid B or GW9662. The effect on HSCs proliferation was determined by MTT colorimetry. Total RNA was extracted by TRizol reagent and gene levels were determined by semi-quantitative RT-PCR. Total cellular and nuclear protein were isolated and separated by 10% sodium dodecy Isulfate polyacrylamide gel electrophoresis. Protein levels were determined by Western blot. Cell apoptosis was detected by Hoechst 33258 staining. PPARγ subcellular distribution was detected by immunofluorescent staining. The activities of MMP-2 and 9 were measured by Gelatin zymograph assay. Results Curcumin suppressed HSCs proliferation in a dose-dependent manner. As HSCs underwent gradual activation with culture prolongation the PPARγ nuclear expression level decreased. Curcumin up-regulated PPARγ expression and significantly inhibited the production of a-SMA and collagen Ⅰ. PPARγ is expressed in the cytoplasm and nucleus and is evenly distributed in HSCs, but accumulated in the nucleus of HSCs and disappeared from cytoplasm after curcumin treatment. Hoechst 33258 staining showed that curcumin induced the apoptosis of culture-activated HSCs and significantly increased pro-apoptotic Bax expression and reduced anti-apoptotic Bcl-2 expression. Cyclin D1 gene, activated NFKB p65 protein and TGFβR-Ⅰ protein expression were down-regulated significantly by curcumin. The activities of MMP-2 and MMP-9 were enhanced significantly by curcumin. Conclusions Curcumin can inhibit the proliferation and activation of HSCs, induce the apoptosis of activated HSCs and enhance the activities of MMP-2 and MMP-9. The effects of curcumin are mediated through activating the PPARγ sianal transduction pathway and associated with PPARγ nuclear translocation/redistribution.     

全肝缺血再灌注小鼠肺泡巨噬细胞Toll样受体2/4的表达

目的:探讨小鼠肝脏缺血再灌注时肺泡巨噬细胞Toll样受体2/4的表达及意义.方法:24只BALB/c小鼠随机分为假手术组(n=6)和肝脏缺血再灌注组(n=18)2组,并于再灌注1 h、6 h、12 h后通过支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞,采用荧光定量PCR及流式细胞学检测其TLR2/4 mRNA和蛋白的表达.同时检测支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α的水平、肺组织湿干重比值及髓过氧化物酶活性,并进行肺组织学评分.结果:与假手术组比较,肝脏缺血再灌注组各时点肺泡巨噬细胞Toll样受体2/4蛋白及mRNA表达均增高(P＜0.01),TLR2表达水平持续升高(P＜0.01),TLR4在6 h达到峰值(P＜0.01).肝脏缺血再灌注时,支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α的水平6 h最高(P＜0.01,肺组织湿干重比值、髓过氧化物酶含量及肺组织学评分均从1 h开始增加,并在12 h达到峰值(P＜0.01).结论:肝脏缺血再灌注后肺泡巨噬细胞表面Toll样受体2/4被激活,并参与了肺损伤的过程.     

丙泊酚-瑞芬太尼靶控静脉麻醉对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨丙泊酚．瑞芬太尼靶控静脉麻醉对肝脏部分切除术缺血再灌注损伤的影响。方法40例患者随机分为丙泊酚-瑞芬太尼组和异氟烷组。分别于术前（TO）、麻醉诱导后（T1）、肝门阻断开放后10min（T2）、30min（T3）和60min（T4）取静脉血测定谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨瞬（ALT）、谷氟酰转肽酶、总胆红素等代谢指标，并测定血清总超氧化物歧化酶（T-SOD））和丙二醛（MDA）含量。结果两组的AST和ALT在肝门开放后10、30、60min均逐渐增高．与术前比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；丙泊酚-瑞芬太尼组的AST在T4明显高于异氟烷纽（P〈0．05）。两组SOD在肝门开放后10、30、60min逐渐降低，1’3和T4时与术前比较差异均有统计学意义（P〈0．05），在13和T4时异氟烷组的SOD明显低于丙泊酚一瑞芬太尼组（P〈0．05）。丙泊酚一瑞芬太尼组的MDA各时间点无显著变化，异氟烷组的MDA在13和T4时均较术前增高，同时明显高于丙泊酚．瑞芬太尼组（P〈0．05）。结论丙泊酚．瑞芬太尼麻醉对肝脏缺血再灌注损伤后超氧化物歧化酶和丙二醛的影响变化较小，提示其对肝细胞具有较好的保护作用。     

锌转运体ZIP13在小鼠肝脏缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨锌转运体ZIP13（SLC39A13）在肝脏缺血再灌注损伤中的作用及机制。方法:通过结扎肝左叶和肝中叶的门静脉及肝动脉共干,建立小鼠在体肝脏缺血再灌注模型,将小鼠分组如下:（1）ZIP13fl/fl-Sham组、ZIP13fl/fl+I1R12组和ZIP13LKO+I1R12组。（2）ZIP13fl/fl-Sham组、ZIP13fl/fl+I1R24组和ZIP13LKO+I1R24组。（3）Vector-Sham组、Vector+I1R12组和ZIP13OE+I1R12组。（4）Vector-Sham组、Vector+I1R24组和ZIP13OE+I1R24组,上述每组小鼠3～4只。采用电感耦合离子发射光谱仪（ICP-OES）测量肝组织的锌含量;试剂盒检测丙氨酸转氨酶（ALT）和门冬氨酸转氨酶（AST）水平;HE染色观察病理学改变;原位末端转移酶标记法（TUNEL法）检测细胞凋亡;Western印迹检测CHOP、GRP78和凋亡蛋白表达。结果:与ZIP13fl/fl小鼠相比,ZIP13LKO小鼠肝脏中ZIP13表达明显下降（t=6.26,P<0.01）,而与Vector感染对照小鼠相比,ZIP13OE小鼠肝脏ZIP13蛋白表达明显增加（t=4.17,P<0.05）。与ZIP13fl/fl-Sham组相比,ZIP13fl/fl+I1R12组血清ALT、AST水平升高（t= 11.43、13.70,均P<0.001）,ZIP13fl/fl+I1R24组小鼠肝组织锌含量明显降低（t=13.49,P<0.001）,内质网应激蛋白CHOP和GRP78表达增强（t=4.76、4.54,均P<0.05）,凋亡蛋白Cleaved Caspase9和Cleaved Caspase3表达升高（t=4.56、3.73,均P<0.05）。与相应的ZIP13fl/fl缺血再灌注组相比,ZIP13LKO+I1R12组血清ALT、AST水平进一步升高（t=2.95、3.20,均P<0.05）,ZIP13LKO+I1R24组肝组织中锌含量显著降低（t=3.29,P<0.05）,内质网应激蛋白表达上调（t=2.60、2.98,均P<0.05）,凋亡蛋白表达也明显升高（t=3.44、2.49,均P<0.05）。与相应的Vector感染缺血再灌注组相比,ZIP13OE+I1R12组血清ALT、AST水平明显下降（t=3.69、4.26,均P<0.05）,ZIP13OE+I1R24组小鼠肝组织中锌含量增加（t=3.88,P<0.05）,内质网应激蛋白表达下降（t=3.47、2.88,均P<0.05）,凋亡蛋白的表达水平也呈现降低（t=3.02、2.96,均P<0.05）。结论:肝脏缺血再灌注时,ZIP13通过维持肝脏锌稳态,减轻内质网应激和细胞凋亡。     

肝内门-体分流在大鼠肝缺血/再灌注损伤中的作用

目的探讨肝内门-体分流（IPSS）在大鼠肝缺St／再灌注（I／R）损伤中的作用和机制。方法健康雄性SD大鼠12只，作右侧颈动脉、颈静脉插管，开腹后，经回结肠静脉作门静脉插管，分别用以输血、输液、给药、留样、检测等。随机分为2组（每组6只）。假手术组（对照组）：术中只分离肝周围韧带，不作肝门阻断及再灌注。I／R组：进行45min的部分肝门阻断及60min的再灌注。待I／R组再灌注60min后，2组于相同时点经门静脉输注D-山梨醇（10mmol／L，0．2ml／min），同时取颈动脉、门静脉、肝静脉血各1ml待测山梨醇浓度。电磁血流量计测定门静脉血流量（PVF）、肝动脉血流量（HAF）。根据颈动脉、门静脉、肝静脉的山梨醇浓度及PVF、HAF，计算肝山梨醇摄取率、功能性肝血流量（FHBF）和肝内门-体分流量（IHSF）。结果与对照组相比，I／R组肝山梨醇摄取率和FHBF减少，IHSF增加（P〈0．01）。结论肝I／R过程中，IPSS开放、FHBF减少可能与再灌注损伤有关。     

PPARγ1基因转染对缺血再灌注心肌细胞凋亡的作用和影响

 摘要：目的  探讨心肌细胞过表达过氧化物酶体增殖物激活受体γ1（PPARγ1）基因对缺血再灌注损伤导致细胞凋亡的作用和影响。方法  30只SD大鼠随机分为SHAM组、MIRI组、PPARγ1组,每组10只。SHAM组和MIRI组经冠状动脉转染携带绿色荧光蛋白的腺病毒载体（Ad-EGFP）,PPARγ1组转染携带PPARγ1基因的腺病毒载体（Ad-PPARγ1）至心肌组织。稳定3 d后,SHAM组只过线,不接扎;MIRI组和PPARγ1组行心肌缺血再灌注损伤（缺血30 min,再灌注120 min）。电镜下观察各组心肌的超微结构变化,Western blot检测B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl2）和Bcl2相关X蛋白（Bax）,DNA断裂的原位末端标记法观察心肌细胞凋亡情况。结果  缺血再灌注后,电镜下MIRI组心肌细胞结构损伤最严重,心肌纤维排列紊乱,有断裂和溶解现象,线粒体肿胀,结构模糊,部分嵴断裂溶解;PPARγ1组结构损伤较MIRI组减轻。与SHAM组比较,MIRI组Bcl2/Bax比值下降（P <0.05）,PPARγ1组无明显变化（P >0.05）;与MIRI组比较,PPARγ1组Bcl2/Bax比值上升（P <0.05）。MIRI组和PPARγ1组的心肌细胞凋亡数目较SHAM组升高（P <0.05）;MIRI组高于PPARγ1组（P <0.05）。结论  过表达PPARγ1基因能通过抗氧化应激、减少细胞凋亡来保护缺血再灌注心肌。

     

缺血预适应通过抑制TLR4/NF-KB信号通路保护大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的:研究缺血预适应对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用是否由toll样受体4(TLR4)/NF-kB途径所介导,以及是否与促进降钙素基因相关肽(CGRP)释放有关.方法:结扎Sprague-Dawley大鼠左冠状动脉前降支60 min,复灌3h造成心肌缺血再灌注损伤.缺血预适应为结扎大鼠左冠状动脉前降支5 min,复灌5min,共4个周期.RT-PCR分析心肌TLR4 mRNA表达.免疫组织化学法分析心肌TLR4和NF-κB蛋白表达.同时,测定心肌梗死面积、血浆CGRP浓度和血清肌酸激酶活性.结果:缺血预适应显著减少心肌梗死面积,降低肌酸激酶活性,增高血浆CGRP水平.心肌缺血再灌注可显著上调TLR4和NF-κB表达,缺血预适应可抑制其作用.结论:缺血预适应通过抑制TLR4/NF-κB信号通路保护大鼠心肌缺血再灌注损伤,其作用与促进CGRP释放有关.     

高氧液联合缺血后处理对家兔肠缺血再灌注致肝损伤的保护作用

目的探讨高氧液联合缺血后处理对家兔肠缺血再灌注所致肝损伤的保护作用。方法将家兔48只随机分为假手术组(SO组)、缺血再灌注组(IR组)、高氧液组(HO组)和高氧液缺血后处理组(HI组),每组12只。SO组家兔仅手术显露肠系膜上动脉(SMA);IR组家兔阻断SMA 60 min,再灌注120 min;HO组家兔在阻断SMA 60 min和再灌注120 min过程中静脉输入高氧液;HI组家兔于阻断SMA 60 min后,再灌注开始时静脉输入高氧液,同时进行3个循环的30 s再灌注/30 s阻断的缺血后处理。再灌注120 min后采集各组家兔动脉血、静脉血及部分小肠、肝组织,检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-10、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及内毒素水平,测定血清及小肠、肝组织内丙二醛(MDA)含量及髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)活性,Chiu 6级评分法观察肠黏膜损伤情况,细菌培养观察细菌移位率,免疫组织化学观察肝组织中核因子κB(NF-κB)p65的表达。结果 IR组家兔血清中TNF-α、IL-10、内毒素水平显著高于SO组(P<0.01);HO组和HI组家兔血清中TNF-α、内毒素水平显著低于IR组(P<0.05);HI组家兔血清中TNF-α、内毒素水平显著低于HO组(P<0.05,P<0.01)。HO组和HI组家兔血清中IL-10水平显著高于IR组(P<0.01),HO组和HI组家兔血清中IL-10水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。IR组家兔血清中MPO活性和MDA水平显著高于SO组(P<0.01),HO组和HI组家兔血清中MPO活性和MDA水平显著低于IR组(P<0.01);HI组家兔血清中MPO活性和MDA水平显著低于HO组(P<0.05,P<0.01)。IR组家兔血清中SOD活性显著低于SO组(P<0.01),HO组和HI组家兔血清中SOD活性显著高于IR组(P<0.01),且HI组家兔血清中SOD活性显著高于HO组(P<0.01)。IR组、HO组和HI组家兔肠黏膜损伤评分显著高于SO组(P<0.01),HO组和HI组家兔肠黏膜损伤评分显著低于IR组(P<0.01),HI组家兔肠黏膜损伤评分显著低于HO组(P<0.05)。IR组家兔小肠黏膜组织中MPO活性和MDA水平显著高于SO组(P<0.01);HO组和HI组家兔小肠黏膜组织中MPO活性和MDA水平显著低于IR组(P<0.01);HI组家兔小肠黏膜组织中MPO活性和MDA水平显著低于HO组(P<0.05)。IR组家兔小肠黏膜组织中SOD活性显著低于SO组(P<0.01);HO组、HI组血清SOD活性仍显著高于IR组(P<0.01);HI组家兔小肠黏膜组织中SOD活性显著高于HO组(P<0.05)。SO组家兔肝组织均无细菌移位,IR组家兔肝脏细菌移位率100.0%,HO和HI组家兔肝脏细菌移位率均为83.3%,HO和HI组家兔肝脏细菌移位率与IR组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。IR组、HO组、HI组家兔肝组织内NF-κB p65阳性表达显著高于SO组(P<0.01),HO组和HI组家兔肝组织内NF-κB p65阳性表达显著低于IR组(P<0.01),HI组家兔肝组织内NF-κB p65阳性表达显著低于HO组(P<0.05)。IR组家兔肝组织中MPO活性及MDA、ALT、AST水平显著高于SO组(P<0.01);HO组和HI组家兔肝组织中MPO活性及MDA、ALT、AST水平仍显著低于IR组(P<0.01);HI组家兔肝组织中MPO活性及MDA、ALT、AST水平显著低于HO组(P<0.05)。IR组家兔肝组织中SOD活性显著低于SO组(P<0.01),HO组和HI组家兔肝组织中SOD活性显著高于IR组(P<0.01);HI组家兔肝组织中SOD活性显著高于HO组(P<0.05)。结论高氧液联合缺血后处理可以减轻肠缺血再灌注引起的肝损伤。     

灯盏花素对肾缺血再灌注过氧化物酶体损伤的保护作用

目的:研究肾缺血再灌注对过氧化物酶体的损伤及灯盏花素的保护作用。方法:采用大鼠肾缺血再灌注模型,观察灯盏花素对缺血再灌注肾组织过氧化物酶体中SOD、GSH-PX、CAT活力及MDA含量的影响。结果:灯盏花素用药组过氧化物酶体中SOD、GSH-PX、CAT活力显著高于缺血再灌注组,MDA含量显著低于缺血再灌注组(P<0.01)。结论:灯盏花素在肾缺血再灌注中对过氧化物酶体的损伤有明显的保护作用。     

The Effect of Nitric Oxide／Endothelins System on the Hepatic Ischemia／Reperfusion Injury

In a hepatic ischemia/reperfusion( I/R) mod-el,we used three tool drugs,L- arginine( L- Arg) ,L- nitro- arginine methyl ester( L- NAME) and en-dothelins( ET) receptor antagonist TAK- 0 4 4 ( C4 5H51N9Na2 O11S) ,to regulate nitric oxide ( NO) /ETbalance and observe itsinfluence on hepatic I/R in-jury.1　 MATERIALSAND METHODS1 .1　Animal Grouping and Model EstablishmentSeventy- eight Wistar rats ( weighing 2 90 g-35 0 g,both sexes) were divided into operationcontrol group ( S…     

瘦素对小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨瘦素对局灶性腑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制.方法 线拴法制备小鼠大脑中动脉局灶性脑柃塞模型,缺血2h再灌注24h后评价神经功能状态,TTC染色测定脑梗死体积;采用比色法测定缺血侧脑组织匀浆乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量;HE染色观察组织病理学改变.免疫组化法测定脑组织胶质纤维酸性蛋白质GFAP表达.结果 瘦素能明显改善神经功能状态,缩小腩缺血再灌注后脑梗死体积,降低脑组织LDH、MDA、NO含量,同时减轻腩组织病理学损伤程度,维持星形胶质细胞正常细胞形态,上调GFAP表达水平.结论 瘦素对小鼠脑缺血再灌注损伤具有明显保护作用,其机制与扰氧化损伤、清除自山基和调节星形胶质细胞适度增生有关.     

缺血预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用及对缺氧诱导因子1α蛋白表达的影响

目的探讨缺血预处理(IP)对肝脏缺血再灌注(IR)损伤的保护作用及对缺氧诱导因子1α(HIF-1α)蛋白表达的影响。方法将120只Sprague-Dawley大鼠分为假手术(SO)组、IR组和IP组,每组40只。SO组术中只牵拉分离肝十二指肠韧带,操作完成后关腹;IR组阻断十二指肠韧带,造成缺血30 min后解除阻断;IP组在阻断肝十二指肠韧带前30 min进行持续5 min缺血及5 min再灌注。IR和IP组分别于再灌注2、6、12和24 h时间点各处死10只动物,取肝脏标本;SO组于术后2 h取肝组织标本。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)水平,免疫组织化学法测HIF-1α蛋白表达水平,用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)测定肝细胞凋亡,并计算细胞凋亡指数(AI)。结果再灌注后,IR组及IP组大鼠各时点的ALT、AST、TNF-α、IL-10与SO组相比均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。IP组大鼠各时间点TNF-α明显低于IR组,IL-10明显高于IR组(P<0.05)。IP组大鼠ALT和AST在2、6、12 h低于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。IR组和IP组大鼠细胞AI较SO组增加,差异有统计学意义(P<0.05);IP组大鼠各时间点AI低于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。在IR及IP组内,不同时点HIF-1α蛋白表达两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);除24 h外其他各时间点IP组大鼠HIF-1α蛋白表达明显高于IR组,差异均有统计学意义(P<0.05)。IR组和IP组大鼠肝组织的HIF-1α蛋白表达与AI、TNF-α、IL-10均呈正相关(r=0.624,0.470,0.312,P<0.05)。结论 IP通过上调HIF-1α蛋白表达,抑制细胞凋亡,减少促炎性因子的释放,增加抗炎性因子的表达,对大鼠肝IR损伤有明显的保护作用。     

MIS后病灶区灌注RSG对家兔ICH模型血肿周围继发性脑损伤的作用

目的 探讨立体定向微创颅内血肿清除术(MIS)后病灶区灌注罗格列酮(RSG)对家兔脑出血(ICH)模型血肿周围继发性脑损伤的作用.方法 60只家兔分为4组,分别为模型对照组(MC组)、罗格列酮组(RSG组)、微创手术组(MIS组)和微创手术+罗格列酮组(MIS+ RSG组).各组家兔均制作ICH模型,MC组及RSG组在模型制作成功后6h模拟手术过程进行假性血肿清除,RSG组病灶区灌注RSG,MIS组及MIS+ RSG组进行微创血肿清除,MIS+RSG组随后病灶区灌注RSG,于实施相关处理后第7天对各组家兔进行神经功能缺损(Purdy)评分并处死,取血肿周围脑组织检测过氧化物酶体增殖物激或受体γ(PPARγ)水平及血脑屏障(BBB)通透性.结果 MC组Purdy评分、BBB通透性明显高于其他组,提示颅内血肿损害神经功能并破坏BBB通透性;与MC组相比,RSG组及MIS+RSG组的PPARγ表达显著增加,而MIS组PPARγ表达减少,提示RSG能明显增加PPARγ的表达,而微创清除颅内血肿后则可减少PPARγ的产生;与MC组比较,RSG组及MIS组血肿周围伊文思蓝(EB)水平显著降低,提示RSG治疗及MIS均可降低BBB通透性,MIS+RSG组EB含量降低更为明显,提示MIS后病灶区灌注RSG降低BBB通透性的效果更加明显.结论 MIS后病灶区灌注PPARγ激动剂RSG能有效减少家兔ICH模型继发性脑组织损伤,改善神经功能.