附子理中汤对脾阳虚大鼠ANP含量、pGCmRNA表达及胃肠动力学的影响

目的： 观察附子理中汤对脾阳虚大鼠心房利尿钠肽（ANP）含量和非可溶性鸟苷酸环化酶（pGC）mRNA表达及胃肠动力学的影响。方法： 清洁级Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只。对照组常态饲养。模型组采用“肩胛骨间棕色脂肪组织（BAT）切除术+高脂饲料喂养+隔日寒冷环境刺激”方法造模。术后第1天喂高脂饲料共3周。在模型组基础上,附子理中汤低、中、高剂量组术后第1天按10,20, 40 g·kg^-1 ig给药,对照组及模型组则给予等容量的生理盐水,每天1次,连续3周。3周后第1天测空肠肌活动,然后取结肠标本,ELISA法检测ANP含量,RT-PCR法检测pGC mRNA表达。结果： 和对照组比较模型组的ANP含量、pGC mRNA相对表达量降低（P<0.05或P<0.01）,慢波频率显著下降（P<0.01）,快波出现频率、最大振幅、每丛快波数均增高（P<0.05或P<0.01）;纵肌收缩力振幅和环肌收缩力振幅均显著增大（P<0.01）。和模型组比较,附子理中汤高剂量组的ANP含量、pGC mRNA相对表达量升高（P<0.05或P<0.01）;附子理中汤中剂量组慢波频率上升（P<0.05）,快波出现频率、最大振幅、每丛快波数均减小（P<0.05或P<0.01）;附子理中汤高剂量组慢波频率显著上升（P<0.01）,快波出现频率、最大振幅、每丛快波数均显著减小（P均<0.01）;中剂量组纵肌收缩力振幅减小（P<0.05）,高剂量组纵肌收缩力振幅和环肌收缩力振幅均显著减小（P<0.01）。结论： 附子理中汤"止泻"的一种可能机制在于一方面上调ANP的含量及pGC mRNA表达量,进而恢复正常胃肠动力学,另一方面通过对水盐重吸收的调节作用而起效。     

附子理中汤对脾阳虚大鼠AQP4的影响及其止泻机制

目的:观察附子理中汤对脾阳虚大鼠水通道蛋白4(AQP4)的影响,探讨附子理中汤止泻作用的机制.方法:Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只.在模型组基础上,低剂量组按10g·kg-1ig,中剂量组按20 g·kg-1 ig,高剂量组按40 g·kg-1 ig,每天1次,连续4周.取结肠标本,酶联免疫法(ELISA)法检测AQP4含量,RT-PCR法检测AQP4 mRNA表达.结果:和对照组比较,模型组的AQP4含量(13.25 ±4.22) ng·L-1.AQP4mRNA相对表达量(0.38±0.11)均降低(P＜0.01或P＜0.05).和模型组比较,附子理中汤中剂量组的AQP4含量(23.84±5.68) ng·L-1,AQP4 mRNA相对表达量(0.54±0.26)均升高(P＜0.05).和模型组比较,高剂量组的AQP4含量(28.98±6.12) ng·L-1,AQP4 mRNA相对表达量(0.62±0.32)均显著升高(P＜0.01).结论:附子理中汤能恢复脾阳虚大鼠AQP4含量和AQP4 mRNA正常表达,以高剂量的恢复作用较明显,附子理中汤可能通过上调AQP4表达,促进胃肠道黏膜对水液的重吸收而起到止泻的作用.     

附子理中汤对脾阳虚证大鼠免疫细胞因子的影响

目的: 观察附子理中汤对免疫细胞因子白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响,探讨其对脾阳虚证免疫功能影响的可能机制。 方法: Wistar大鼠100只随机分为对照组、模型组、附子理中汤低、中、高剂量组5组,每组20只。在模型组基础上,附子理中汤低、中、高剂量组按5,10,20 g·kg^-1 ig,每天1次,连续4周。检测胸腺指数、脾脏指数、IL-2,IL-6,IL-10,TNF-α含量。 结果: 与对照组比较,模型组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均降低(P<0.05或P<0.01),IL-10显著升高(P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤中、高剂量组胸腺指数,脾指数,IL-2,IL-6,TNF-α均升高(P<0.05或P<0.01),IL-10降低(P<0.05或P<0.01)。 结论: 附子理中汤对细胞免疫因子产生影响,通过细胞免疫因子之间的效应可能是其改善脾阳虚大鼠免疫功能的机制之一。     

附子理中汤对脾阳虚证模型大鼠心肌电生理的影响

目的观察并讨论附子理中汤对脾阳虚证模型大鼠心肌电生理的影响。方法50只Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、附子理中汤低剂量组、中剂量组、高剂量组5组,每组10只。对照组常规饲养,其余大鼠组采用“肩胛骨间棕色脂肪组织（BAT）切除术＋高脂饲料喂养＋隔日寒冷环境刺激”方法造模。附子理中汤低、中、高剂量组分别以5、10、20g／kg附子理中汤灌胃,对照组及模型组给予等量的生理盐水。观察心率（HR）,动作电位时程（APD）,动作电位0相幅值（APA）,动作电位50％复极化时程（APD50）,90％复极化时程（APD。）的变化。结果和对照组比较,模型组HR、APD50均降低（P〈0．05）,APD、APD‰APA均显著降低（P〈0．01）。和模型组比较,中剂量组HR、APD、APD。均升高（P〈0．05）;和模型组比较,高剂量组HR升高（P〈0．05）,APD、APD50,APD90、APA均显著升高（P〈0．01）。结论附子理中汤能提高HR,延长APD和升高APA的效果与剂量有关,能改善心肌电生理病理变化。     

附子理中汤择时用药对脾阳虚家兔免疫功能的影响

采用苦寒泻下加饥饱失常法塑造脾阳虚家兔模型，然后分别于巳、申、亥时采用附子理中汤灌胃疗法，检测T淋巴细胞转化率，红细胞CRI活性。结果显示：附子理中汤能提高脾阳虚家兔T淋巴细胞转化率，红细胞C3b受体花环率，并以脾经的峰值时辰巳时组为著，申时组次之，亥时组又次之，且均显著优于自愈组，证明择时治疗的疗效是肯定的。为探讨临床辨证择时治疗提供了科学的实验依据。     

附子理中汤对脾阳虚证大鼠血糖、甘油三酯及总胆固醇的影响

目的:分析附子理中汤对脾阳虚证大鼠血糖、甘油三酯(TG)以及总胆固醇(TC)水平的影响和内在联系.方法:大鼠共4组,每组16只.①对照组:普通饲料喂养,自由饮水;②阳虚组:手术切除肩胛骨间棕色脂肪组织( brown adipose tissue,BAT),余同①组;③脾阳虚组:高脂饲料(83％普通饲料,15％ TG(TG),2％(TC)在19℃环境喂养,余同②组;④中药组:附子理中汤每天按4 g·kg-1ig;余同③组.全部4组动物4周后第1天左颈总动脉插管取血检测血糖、血清甘油三酯(TG),血清总胆固醇(TC)含量.结果:①各组血糖含量(mmol·L -)的比较:阳虚组(1.40±0.071)与对照组(5.41±0.08)相比血糖降低(P＜0.01);脾阳虚组(5.81±0.08)与阳虚组相比血糖升高(P＜0.01);附子理中汤组(5.01±0.08)与阳虚组相比,血糖升高(P＜0.01);附子理中汤组与脾阳虚组相比,血糖有下降趋势.②各组血清TG含量(mmol·L-1)的比较:阳虚组(0.284±0.110)与对照组(0.487±0.076)相比血清TG降低(P＜0.01);脾阳虚组(0.620±0.184)与阳虚组相比血清TG增加(P＜0.01);附子理中汤组(0.462±0.111)与阳虚组相比,血清TG升高(P＜0.01),附子理中汤组与脾阳虚组相比,血清TG有下降趋势.③各组血清TC含量(mmol·L -)的比较:脾阳虚组(0.183±0.025)、附子理中汤组(0.211±0.026)与对照组(0.081±0.020)相比血清总TC均升高(P＜0.01).结论:附子理中汤使血清TG降低;增加对葡萄糖的利用及加强其代谢,使血糖水平降低.附子理中汤“健脾”功效表现为促使糖和脂类代谢趋向正常,从而使血糖和血脂向恢复正常水平的方向转化.     

附子理中汤对脾阳虚大鼠骨骼肌能荷及CNTF mRNA的影响

目的:观察附子理中汤对脾阳虚大鼠骨骼肌能荷及睫状神经营养因子(CNTF)mRNA表达的影响。方法:大鼠分为对照组、模型组和附子理中汤组,模型组施行肩胛骨间棕色脂肪组织(brown adipose tissue,BAT)切除术,饲以高脂饲料,19℃环境喂养3周。附子理中汤组在模型组基础上以附子理中汤按5 mL·kg-1体重ig,每日1次,连续ig4周。测定大鼠骨骼肌能荷值,RT-PCR法检测CNTF mRNA表达。结果:与对照组大鼠骨骼肌能荷(0.042±0.018)比较,模型组(0.032±0.014)与附子理中汤组(0.024±0.012)的能荷值均降低(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤组的能荷值降低明显(P<0.05)。对照组CNTF mRNA相对表达量为(0.862±0.072),模型组CNTF mRNA相对表达量(0.426±0.056)较对照组降低(P<0.01)。与模型组比较,附子理中汤组CNTF mRNA相对表达量(0.838±0.068)升高(P<0.01)。结论:附子理中汤对CNTF mRNA表达有调节作用,通过上调CNTF mRNA表达,增加CNTF含量,发挥CNTF对骨骼肌营养作用和能量代谢调节作用。     

附子理中汤对脾阳虚证大鼠血清瘦素和神经肽Y水平影响的实验研究

目的:观察附子理中汤对脾阳虚证大鼠血清瘦素和神经肽Y水平的影响。方法:动物实验。分为对照组、阳虚组、脾阳虚组、中药组4组,中药组给予附子理中汤干预。以体重增长率、血清瘦素和神经肽Y水平为观察指标并检测其变化,以SPSS 13.0版统计软件包进行统计学处理。结果:阳虚组(1.13±0.402)、脾阳虚组(0.85±0.410)和对照组(1.69±0.411)相比,体重增长率均下降明显(P<0.01);中药组(1.30±0.411)用附子理中汤干预后,与脾阳虚组相比,体重增长率上升(P<0.01)。脾阳虚组(18.46±4.89)和对照组(11.98±2.95)相比,血清瘦素水平升高明显(P<0.05),脾阳虚组(17.58±9.98)和对照组(28.71±12.3)相比,神经肽Y水平下降明显(P<0.05);中药组用附子理中汤干预后,血清瘦素水平(12.62±3.06)与脾阳虚组(18.46±4.89)相比下降(P<0.05),神经肽Y水平(26.32±11.24)与脾阳虚组(17.58±9.98)相比升高(P<0.05)。结论:附子理中汤的干预作用是通过恢复血清瘦素和神经肽Y分泌水平的平衡状态,间接发挥调控饮食和体重的作用。     

脾阳虚证失眠大鼠模型的建立和附子理中汤的干预效应

目的:探讨附子理中汤对脾阳虚证失眠大鼠下丘脑增食素(orexin) mRNA表达及下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA axis)的影响及机制.方法:100只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、附子理中汤低剂量组,中剂量组和高剂量组5组,每组20只.模型组按400 mg· kg-1 ip对氯苯丙氨酸(PCPA)每天1次,连续2d,建立脾阳虚证失眠模型.低剂量组、中剂量组、高剂量组分别以附子理中汤10,20,40 g·kg-1 ig,每日1次,连续7d.疗程结束后对各组大鼠用ELISA法检测下丘脑5-羟色胺(5-HT)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)含量,RT-PCR法检测下丘脑orexin mRNA表达.结果:与正常组相比,模型组orexin mRNA表达量显著升高(P＜0.01),5-HT含量显著降低(P＜0.01);CRH,ACTH含量显著升高(P ＜0.05,P＜0.01).与模型组相比,附子理中汤高剂量组orexin mRNA表达量显著降低(P＜0.01),附子理中汤高、中剂量组5-HT含量显著升高(P＜0.01,P＜0.05);高剂量组CRH,ACTH含量显著降低(P ＜0.05,P＜0.01).结论:附子理中汤下调orexin mRNA表达,抑制HPA轴激活,降低应激反应性,可能是其治疗失眠的机制之一.     

附子理中汤择时用药对脾阳虚家兔免疫功能的影响

采用苦寒泻下加饥饱失常法塑造脾阳虚家兔模型,然后分别于巳、申、亥时采用附子理中汤灌胃疗法,检测T淋巴细胞转化率,红细胞CRI活性.结果显示附子理中汤能提高脾阳虚家兔T淋巴细胞转化率,红细胞C3b受体花环率,并以脾经的峰值时辰巳时组为著,申时组次之,亥时组又次之,且均显著优于自愈组,证明择时治疗的疗效是肯定的.为探讨临床辨证择时治疗提供了科学的实验依据.     

脾阳虚证用药规律浅析

目的:通过对近现代临床应用于脾阳虚证的方剂进行统计分析,探讨脾阳虚证用药规律。方法:运用SPSS 19.0统计软件,对脾阳虚证方剂中的中药进行频次分析,并对所用中药的性味、功效进行统计分析。结果:共收集方剂83首,涉及药物86味。药物使用频次显示甘草、干姜、人参、白术、陈皮、附子、木香、肉桂、茯苓、丁香等为常用药物,以补气药、温里药、理气药为主。性味分布情况显示治疗脾阳虚证以温、热、平性及辛、甘、苦味药为主,以辛热、辛温、甘平、辛苦温药居多。结论:脾阳虚证的遣方用药规律为药性上以温药、热药为主,药味上以辛、甘味为主,药物选择以补气药(甘草、人参、白术)和温里药(干姜、附子)为主,为临床脾阳虚证的治疗提供了理论依据。     

颗粒剂四君子膏对脾气虚证模型大鼠心功能的影响＊

目的 探讨颗粒剂四君子膏对脾气虚证模型大鼠心功能的影响。方法 将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、四君子汤组、颗粒剂四君子膏高组、颗粒剂四君子膏中组及颗粒剂四君子膏低组。采用隔日饮食加力竭游泳及大黄水灌胃法制备脾气虚证大鼠模型。超声诊断仪测定大鼠的心功能变化，ELISA法测定大鼠血清与心肌组织中脑钠肽（BNP）、环磷酸腺苷（cAMP）的含量，Western blot法及免疫组化法测定心肌组织中BNP的蛋白表达情况。结果 脾气虚证模型大鼠心功能下降，血清及心肌组织中BNP、cAMP的含量增多，心肌组织中BNP蛋白表达增加（P < 0.05），给予四君子汤及不同浓度颗粒剂四君子膏后大鼠脾气虚症状及心功能情况得到改善，体内BNP及cAMP水平均有所下降，BNP蛋白表达下调（P < 0.05）。结论 颗粒剂四君子膏的功效较为理想，可以改善脾气虚证大鼠的心功能，颗粒剂膏亦可运用于临床。     

桂枝茯苓丸合真武汤治疗慢性心功能不全心肾阳虚证临床研究

目的:探究桂枝茯苓丸合真武汤治疗慢性心功能不全(CHF)心肾阳虚证的临床疗效。方法:选取130例CHF心肾阳虚证患者作为研究对象,按随机数字表法分为观察组和对照组各65例。对照组行常规西药治疗,观察组在对照组基础上给予桂枝茯苓丸合真武汤治疗。观察2组临床疗效,检测心功能、脑尿钠肽(BNP)、一氧化氮(NO)等指标。结果:观察组总有效率为92.31%,高于对照组64.62%(P<0.05)。治疗前,2组中医证候积分比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组中医证候积分较治疗前下降(P<0.05),且观察组中医证候积分低于对照组(P<0.05)。治疗前,2组左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)、左室射血分数(LVEF)、6分钟步行距离(6MWD)水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组LVEDD较治疗前下降(P<0.05),而LVEF、6MWD较治疗前升高(P<0.05);且观察组LVEDD低于对照组(P<0.05),而LVEF、6MWD高于对照组(P<0.05)。治疗前,2组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、BNP、NO水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,2组TNF-α、hs-CRP、BNP、NO水平较治疗前降低(P<0.05),且观察组hs-CRP、TNF-α、BNP、NO水平均低于对照组(P<0.05)。结论:桂枝茯苓丸合真武汤能够改善CHF心肾阳虚证患者心功能,降低血浆BNP和NO水平,改善患者临床症状,值得临床推广应用。