脂质体携载L-Arg对Wister大鼠心肌钙负荷的影响

目的 探讨NO对心肌钙负荷的影响.方法 脂质体包裹L-Arg离体灌注雄性Wistar大鼠心脏模型,观察心肌钙负荷及相关损害指标的变化.结果 脂质体包裹L-Arg组促进心肌细胞cGMP合成,并明显降低I/R心肌钙含量和45Ca2+内流,抑制心肌蛋白漏出;与I/R损伤组比较,L-NNA灌流,明显增加心肌钙含量(P＜0.05)和Ca2+内流(P＜0.01),心肌cGMP降低50%(P＜0.05),心肌蛋白漏出增加26.53%(P＜0.05);L-Arg脂质体的作用可被L-NNA所逆转.结论 L-Arg导人心肌细胞,可以改善缺血心肌的NO缺陷,抑制Ca2+内流,拈抗氧自由基,进而发挥细胞保护作用.     

脂质体携载精氨酸对大鼠钙化血管精氨酸/NO途径的影响

目的:观察钙化血管精氨酸/NO途径的改变和脂质体携载精氨酸对血管钙化及精氨酸/NO途径的影响。方法:维生素D3注射制备大鼠血管钙化模型,检测血管钙含量、血浆精氨酸和亚硝酸盐含量、血管环磷酸鸟苷(cGMP)含量、血管一氧化氮合酶(NOS)活性及血管精氨酸水平。结果:钙化组大鼠血管钙含量较对照组升高7.5倍(P<0.01),血浆NO生成减少,血管cGMP水平降低,血管NOS活性增高(P<0.01),但精氨酸含量明显减少(-19.1%,P<0.01)。脂质体携载精氨酸治疗后血管钙含量较钙化组降低51.2%(P<0.01),血浆NO生成增加,血管cGMP含量增加5.1%(P均<0.05),血管精氨酸含量增加15.7%(P<0.05)。结论:给予脂质体携载精氨酸治疗可以减轻大鼠的血管钙化程度,改善钙化血管L-Arg/NOS/NO/cGMP途径紊乱,提示脂质体携载精氨酸对防治动脉粥样硬化等疾病的血管钙化可能具有潜在临床意义。     

脂质体携载前列腺素E1对心肌再灌注损伤的影响

目的观察脂质体携载前列腺素E1(Lipo-PGE1)对心肌再灌注损伤的影响.方法以家兔左冠脉前降支(LAD)结扎60 min,再灌注120 min为再灌注动物模型.于再灌注前10 min分别静注Lipo-PGE1、PGE1及等容量的脂肪乳剂.于基础状态、心肌缺血及再灌注期分别抽血检测血清肌酸磷酸激酶(CPK)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)的含量.家兔处死后,通过Evans蓝及氯化三苯基四氮唑双重染色确定缺血心肌及梗塞心肌范围.结果Lipo-PGE1治疗组梗塞心肌占危险区心肌重量百分比(32.20±4.70)%较对照组(44.57±5.46)%及PGE1组(42.09±6.93)%显著降低(P＜0.01).Lipo-PGE1治疗组再灌注期血清CPK及MDA含量较对照组及PGE1组明显下降,SOD含量则显著增高.结论Lipo-PGE1能有效降低血清CPK、MDA含量,提高SOD活力,减轻心肌再灌注损伤.     

预处置对缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶的影响

目的观察冠状动脉结扎预处置(CAIP)和股动脉阻断预处置(FIP)对缺血再灌注大鼠心肌一氧化氮合酶(NOS)的影响,探讨NOS在预处置心脏自身保护中的作用。方法复制心肌缺血/再灌注模型;观察缺血/再灌注期间心脏收缩期左心室内压上升的最大变化速率(+LVdp/dtmax)及舒张期左心室内压下降的最大变化速率(-LVdp/dtmax);采用化学比色法观察大鼠心肌组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及结构型一氧化氮合酶(cNOS)活性。结果I/R组缺血60 min及再灌注30 min 2个时段(dp/dtmax均低于sham组(P<0.01);CAIP+I/R及FIP+I/R组均高于I/R组(P<0.01)。I/R组心肌cNOS低于sham、CAIP、CAIP+I/R及FIP+I/R组(P<0.01)。I/R组iNOS高于sham、CAIP、CAIP+I/R组(P<0.01),与FIP+I/R组差异无统计学意义。结论冠状动脉结扎预处置及股动脉阻断预处置方法均可拮抗心肌缺血及再灌注造成的心功能障碍;心肌缺血预处置拮抗缺血再灌注致心功能损伤的作用可能与其促进cNOS表达和抑制iNOS的激活有关;股动脉阻断预处置可能通过促进cNOS表达而起到延迟保护心脏作用。     

L-精氨酸对肠缺血再灌注鼠肺、血液ET-1、NO及MDA的影响

目的：探索Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）对缺血性再灌注大鼠肺的保护作用及其作用环节。     

Wister大鼠心肌缺血预调置与一氧化氮相关性的动物实验研究

目的探讨一氧化氮(NO)与心肌缺血预调置作用的相关性。方法将50只体质量300～350 g雄性健康Wistar大鼠分为对照组、缺血/再灌注损伤(I/R)组、预调置组、L-硝基精氨酸(L-NNA组)和L-精氨酸(L-Arg)+L-NNA等5组,分别观察冠脉灌注压(CPP)和心肌蛋白、乳酸脱氢酶(LDH)、环一磷酸鸟苷(cGMP)和丙二醛(MDA)含量等心肌损伤指标的变化。结果与I/R组比较,预调置组心肌蛋白漏出量明显降低、LDH漏出量显著下降、心肌MDA含量明显降低、cGMP水平则明显升高(P均<0.01),CPP降低(P<0.05);L-NNA灌流组可以阻断预调置的心肌保护作用,L-NNA+L-Arg灌流组可逆转L-NNA阻抑预调置的心肌保护作用。结论心肌缺血预调置明显提高缺血心肌对缺血缺氧的耐受力,与改善心肌I/R损伤时NO缺陷密切相关。     

缺血后处理对缺血再灌注大鼠心肌MMP-2表达及NO含量的影响

目的：观察缺血后处理对缺血再灌注损伤大鼠心肌MMP-2及一氧化氮的影响,探讨缺血后处理保护心肌间质的分子机制。方法：24只SD大鼠随机分为3组,假手术组（SC组）、缺血再灌注组（I/R组）和缺血后处理组（IPTC组）。记录各组左室血流动力学变化,观察心肌胶原含量,测定血浆一氧化氮（nitric oxide,NO）、肿瘤坏死因子-α（necrosis factor-α,TNF-α）和白细胞介素-6（intefliukine-6,IL-6）浓度改变。以RT-PCR法测定心肌基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达。结果：与对照组相比,I/R组血浆TNF-α、IL-6明显升高,NO降低,心肌MMP-2表达明显增多,而心肌胶原含量降低、左室舒缩功能明显受损。IPTC组在血浆TNF-α和IL-6浓度明显降低,NO明显升高的同时,心肌MMP-2表达明显降低,而心肌胶原含量、左室舒缩功能明显高于I/R组。结论：IPTC对心肌的保护作用之一可能是通过NO增多,减少炎性介质的释放,抑制MMP-2的表达,减轻心肌间质的损伤而实现的。     

左心引流对离体大鼠心肌影响

目的本实验的目的是研究左心引流的心肌保护作用。方法将健康 SD 大鼠随机分为两组:左心引流组(A组)和对照组(B 组,不建立左心引流)建立改良式 Langendorff 离体鼠心灌注模型,将大鼠离体心脏置于模型中,A 组做相当于左心引流效应的干预,对 B 组则不进行任何干预处理。记录干预前、恢复后5、10、20、30、60分钟测定心功能指标(LVEDP、LVESP、LVDP、dP/dt),CK-MB 含量,全程心电活动以及左室心内膜下心肌组织送电镜检查。结果左心引流组和对照组在心肌舒张收缩功能、心肌酶 CK-MB 的指标具有显著性差异(P<0.05),心肌的电镜超微结构也有明显的不同。结论左心引流对心肌有更好的保护作用(P<0.05)。     

左心引流对离体大鼠心肌影响

目的 本实验的目的是研究左心引流的心肌保护作用。方法 将健康SD大鼠随机分为两组：左心引流组（A组）和对照组（B组，不建立左心引流）建立改良式Langendorff离体鼠心灌注模型，将大鼠离体心脏置于模型中，A组做相当于左心引流效应的干预，对B组则不进行任何干预处理。记录干预前、恢复后5、10、20、30、60分钟测定心功能指标（LVEDP、LVESP、LVDP、dP／dt），CK-MB含量，全程心电活动以及左室心内膜下心肌组织送电镜检查。结果 左心引流组和对照组在心肌舒张收缩功能、心肌酶CK-MB的指标具有显著性差异（P〈0．05），心肌的电镜超微结构也有明显的不同。结论 左心引流对心肌有更好的保护作用（P〈0．05）。     

L-精氨酸对大鼠心肌肥厚的保护作用

目的 研究L-精氨酸(L-Arg)对异丙肾上腺素(ISO)所致大鼠心肌肥厚的保护作用及机制.方法 ISO皮下注射5 mg/(kg·d),建立大鼠心肌肥厚模型,同时预防性L-Arg给药,观察大鼠心电图变化,测定心脏质量指数、一氧化氦(NO)含量、丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)活性,并观察心肌间质改变.结果 L-Arg能明显减轻心脏质量,减少间质腔原含量,改善左室肥厚形成的"心肌劳损".降低血清MDA含量和LDH活性,增加NO含量.结论 L-Arg对ISO所致大鼠心肌肥厚具有保护作用.     

L-精氨酸-一氧化氮通路对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌肥大的影响

目的 探讨L-精氨酸对心肌肥厚的影响及相关机制.方法 皮下注射异丙肾上腺素(ISO)复制大鼠心肌肥厚模型,L-精氨酸作为干预因素,检测心脏重量参数,心肌组织胶原染色,心房利钠肽(ANP)的转录水平,观察L-精氨酸对心肌肥大的影响;不同时间段,应用Westem blot结合图像分析系统,检测各组大鼠心肌组织内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的蛋白表达水平;检测血清NO含量和NOS活性.结果 皮下注射ISO 7d后,心脏重量参数增加,ANP mRNA表达增加;L-精氨酸抑制心肌肥大,随着L-精氨酸作用时间延长,血清NOS活性增强,NO含量增加.同时,iNOS蛋白表达下调,eNOS蛋白表达上调.结论 L-精氨酸可以抑制病理性心肌肥大,这与其调节iNOS和eNOS表达,增加NO含量有关.     

nmhaFGF对大鼠缺血再灌注损伤心肌的保护作用

目的:研究非促分裂型酸性成纤维细胞生长因子(nmhaFGF)对缺血再灌注损伤心肌的保护作用。方法:大鼠冠脉左前降支闭塞30min后再灌注3h,再灌注前10min尾静脉注射不同剂量nmhaFGF。测定各组大鼠室性心动过速(VT)和心室颤动(VF)的潜伏期、持续时间和发生率,评定心律失常分数;再灌注24h后,测定血清AST、LDH、CK-MB含量,并计算大鼠心肌梗死面积。结果:静脉注射nmhaFGF(20,40,80μg/kg)能明显抑制缺血再灌注引起的心肌损伤。和模型组相比,nmhaFGF各组大鼠的VT和VF发生率减少,出现心律失常的潜伏期延迟,持续时间缩短;另外心肌梗死区占左室面积的百分比及梗死区占危险区百分比均有所降低;此外,血清心肌酶含量AST、LDH、CK-MB显著降低;以80μg/kgnmhaFGF作用较明显,其作用强度与8mg/kg普萘洛尔相当。结论:nmhaFGF对大鼠缺血再灌损伤心肌具有保护作用。     

家兔未成熟心肌摄钙功能的实验

目的：从亚细胞水平研究未成熟心肌缺血-再灌注损伤中肌浆网(sarcoplasmic reticulum，SR)摄钙功能，及其mRNA表达．方法：将48只兔随机分为4组，进行Langendorff灌注．组I：幼兔，单纯灌注30min；组Ⅱ：幼免，灌注30min，停搏60min，再灌注30min。组Ⅲ和组IV为成免，处理分别同组I和组Ⅱ，进行对照．测定各组心功能、冠状动脉流出液血气，单细胞内游离钙离子浓度([Ca^2 ]i)，肌浆网钙离子—三磷酸腺苦酶(sarcoplasmic reticulum Ca^2 -adenosine triphosphatase,SR Ca^2 -ATPase)活性，肌浆网^45Ca^2 摄取，并用斑点杂交(dot blot)检测SR Ca^2 —ATPase mRNA表达．结果：缺血—再灌注后，成熟与末成熟心肌均发生钙超载(P＞0．05)．成熟心肌SR Ca^24—ATPase活性，SR ^45Ca^2 摄取初始量，SR^45Ca^2 摄取最大量明显减弱，SR Ca^2 —ATPase mRNA表达明显上调，未成熟心肌则变化不明显，两相比差异显(P＜0．05)．结论：缺血—再灌注后，未成熟心肌SR Ca^2 —ATPase活性恢复率，SR ^45Ca^2 摄取恢复率，明显高于成熟心肌，SR Ca^2 —ATPase mRNA表达上调明显低于成熟心肌．未成熟心肌缺血—再灌注损伤钙超载机制不同于成熟心肌：SR钙摄取功能在钙超载损伤中不起主要作用．     

缺血预处理对高血脂大鼠心肌线粒体酶及氧自由基的影响

目的观察缺血预处理对高血脂大鼠心肌线粒体ATP酶及氧自由基的影响。　方法建立高血脂大鼠离体心肌缺血预处理模型 ,观察预处理对缺血再灌注心肌Na+ -K+ -ATP酶、Ca2 + -ATP酶、Ca2 + -Mg2 + -ATP酶、胱甘肽过氧化物酶 (GSH -Px)、超氧化物歧化酶 (SOD)及丙二酰二醛 (MDA)的影响。　结果与单纯缺血再灌注组相比 ,预处理组心肌线粒体Na+ -K+ -ATP酶、Ca2 + -ATP酶、Ca2 + -Mg2 + -ATP酶及GSH -Px降低幅度减小 (P <0 .0 5 ) ,SOD活性上升 ,MDA含量下降。　结论高血脂大鼠经心肌缺血预处理后 ,可减少再次长时间缺血后复灌对心肌的损伤 ,具心肌保护作用     

L-精氨酸对大鼠肾缺血再灌注损伤HSP70表达的影响

目的：探讨左旋精氨酸（L-arg）对大鼠肾缺血再灌注损伤（RIRI）HSP70表达的影响。方法：健康雄性SD大鼠48只,随机分为6组：假手术（Sham）6 h、24 h组;缺血再灌模型（IR）6 h2、4 h组和L-精氨酸（L-arg）6 h2、4 h组。IR组和L-arg组采用夹闭双侧肾动、静脉45 min后松夹再灌的方法制备RIRI模型,L-arg组于夹闭前和再灌前15 min分别尾静脉注射L-arg 0.2 mL（100 mg/kg）,于再灌后6 h和24 h测定血清肌酐（Scr）、一氧化氮（NO）及尿NAG酶（UNAG）含量,观察肾组织形态学改变和肾皮质HSP70表达。结果：缺血再灌注后6 h和24 h,大鼠肾功能和肾小管上皮细胞明显受损,Scr和UNAG含量均明显高于假手术组（P〈0.01）,血清NO及肾皮质细胞HSP70表达明显增加。尾静脉注射L-arg可明显改善RIRI大鼠肾功能,减轻肾损伤,并明显增加血清NO及肾皮质细胞HSP70表达（P〈0.05）。结论：L-arg可通过增加体内NO水平,提高肾小管上皮细胞HSP70表达,对大鼠RIRI起到一定的保护作用。     

ATP-MgCl2对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞一氧化氮合成酶的影响

目的寻找心肌缺血再灌注损伤与一氧化氮（NO）的关系，进一步探讨高能磷酸盐制剂ATP—MgCl2对缺血再灌注大鼠心肌保护作用的机制。方法选用健康SD大鼠16只，随机分为两组（n=8），开胸取心，在Langgendorff灌流装置上进行主动脉灌注10min，待心肌收缩稳定后，停止灌流30min，再分别以相应灌注液灌注20min，对照组：使用Krebs—Henseleit（KH）缓冲液；ATP—MgCl2组：使用KH缓冲液＋ATP—MgCl2（0．1mmol／L）。以Knowles方法测定心肌原生型NOS（cNOS）和诱导性NOS（iNOS）活性。结果对照组iNOS活性显著高于ATP—MgCh组，而对照组cNOS活性则显著低于ATP—MgCh组。结论ATP—MgCl2通过减少因iNos所产生的氧自由基浓度而起到心肌保护作用。     

缺血后处理对缺血/再灌注心肌保护作用的研究

缺血后处理是指在心肌再灌注之前进行数次短暂再灌注/缺血的循环,是近年提出的一种新的减轻缺血/再灌注损伤的方法。它具有同缺血预处理相似的心肌保护效应。后处理的这些保护作用可能和内源性活性物质如腺苷、一氧化氮和阿片肽增多、蛋白激酶的活化、线粒体的ATP敏感性钾通道开放和线粒体通透性转换孔道关闭有关。现就缺血后处理的发现、心肌保护机制和临床应用予以简要综述。     

离体大鼠心肌顿抑模型的建立

目的 :利用离体大鼠心脏建立心肌顿抑模型并进行可靠性分析 .方法 :以K H灌注液对 3 0只离体大鼠心脏行Langendorff法灌注 ,根据缺血时间不同分为 5组 ,测量缺血前后心室收缩和舒张功能的变化并于再灌注 60min后进行坏死面积分析 .结果 :各功能指标在缺血前无组间差别 ,缺血后差异明显 (P <0 .0 1) .非缺血组、缺血 15min组和缺血 2 0min组的坏死区比率分别是 (2 .2± 3 .4 ) %、(7.5± 5 .2 ) %和 (9.0± 4 .8) % ,两两间比较无明显差异 (P >0 .0 5 ) .缺血 2 5min和缺血3 0min组的坏死区比率分别是 (2 1.7± 5 .5 ) %和 (3 9.7± 8.8) % ,明显高于前 3组 (P <0 .0 1) .结论 :在离体灌注的大鼠心脏上建立的心肌顿抑模型是可靠的 ,全心肌常温缺血 2 0min仅造成心肌顿抑 .     

再灌液中Ca~(2+)浓度的变化对心肌缺血再灌注损伤的影响

在大鼠Langendorff灌流模型上观察灌流液含不同浓度Ca~(2+)对心肌缺血再灌注损伤的影响。结果表明:随再灌液中Ca~(2+)浓度的增加(分别为0、1.5、3.0、5.0mmol/L),以心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶活力下降、脂质过氧化物(MDA)含量、Ca含量及乳酸脱氢酶(LDH)漏出量增加为指标的组织损伤进行性加重。