脐血造血干细胞的生物特性及临床应用

20世纪70年代初，Kundtzon等人发现脐血中含有丰富的造血干(祖)细胞．提示脐血可能成为除骨髓和外周血之外的另一个很具潜力的造血干细胞来源，从而引起人们对脐血的广泛研究。现就脐血造血干细胞的性能及临床应用方面的进展综述如下。     

胎盘问充质干细胞对骨髓、脐血、胎盘不同来源造血干细胞的体外扩增支持作用比较

目的研究胎盘间充质干细胞（PDMSC）对骨髓、脐血、胎盘来源的CD34^＋造血干细胞体外扩增的支持作用。方法用酶消化方法从胎盘组织分离出贴壁细胞。流式细胞仪测定。用免疫磁珠法从骨髓、脐血、胎盘的单个核细胞里分离出CD34^＋细胞,建立以HPDMSC饲养层的CD34^＋细胞培养体系,并以无饲养层的培养体系作为对照。结果人胎盘中可以分离出hpdmscs,并可以证明其为间充质干细胞。以HPDMSCS作为以上三种来源的造血干细胞的滋养层,对胎盘来源的造血干细胞支持作用明显优于其他两组,脐血次之,骨髓来源的造血干细胞最差。结论胎盘间充质干细胞具有体外造血支持作用,可以作为骨髓、脐血、胎盘不同来源造血干细胞体外扩增的滋养层,尤其适于胎盘来源的造血干细胞。     

脐血间充质干细胞治疗肝衰竭的研究进展

肝干细胞按其来源可划分为肝源性干细胞和非肝源性干细胞,而非肝源性肝干细胞主要指骨髓间充质干细胞、脂肪间充质干细胞、脐带间充质干细胞和脐血间充质干细胞等,脐血间充质干细胞作为非肝源性肝干细胞的一种,具有低免疫原性、来源丰富、可扩增及多向分化的特点,在诱导剂的作用下可向肝细胞分化,表达肝细胞特异性标志物及相关功能,这为移植脐血间充质干细胞治疗肝衰竭提供了实验依据。     

脐血对恶性肿瘤周围血象影响的观察

脐血对恶性肿瘤周围血象影响的观察淮阴市第一人民医院输血科苗春桃，朱从奎，徐小平，朱爱华，王乃生自１９７４年Ｋｎｕｄｔｚｏｎ提出胎盘血（下称脐血）是有希望的重建造血系统的干细胞来源以来，国内外研究均表明，脐血可作为一种极有潜力造血干／祖细胞移植的来源。...     

脐血干细胞移植的研究及临床应用

脐血作为干细胞的主要来源,近年来国内外对其进行了大量的基础性研究和临床探索。已经证实脐血中含有大量造血干细胞、丰富的间充质干细胞。临床干细胞移植治疗采用脐血具有诸多优势,如来源丰富,组织配型时间短,抗原表达弱,加之间充质干细胞的免疫调节及加速造血恢复等影响,脐血的移植成功率高,移植反应弱、移植物抗宿主病少见。目前脐血移植治疗的疾病已经达到80余种,治疗的患者全世界已经超过了6000例。脐血移植已经在恶性肿瘤、免疫缺陷、心脏病、神经系统损伤、组织器官修复、糖尿病、血管疾病等的治疗上显示巨大的潜力。     

静脉输注脐血干细胞移植的护理进展

自法国Gluckman等1988年采用同胞脐带血移植治愈儿童范可尼贫血以来，全世界已有3万多例患者成功实施了脐血干细胞移植。干细胞具有再生为各种组织器官的潜能，被称为“万能细胞”。脐血（umbilical cord blood，UCB）已成为除骨髓以外的重要间充质干细胞（mesenchy-mal stem cells，MSCs）来源，是细胞替代治疗理想的种子细胞［1］。目前很多疾病，都可借助干细胞技术进行治疗。脐血干细胞排异反应小，再生能力和速度是成人造血干细胞的10～20倍。因此，在配型和移植方面具有更高的成功率。如何保证每份细胞数量有限的脐血安全、有效地输注到患者体内，确保达到植入要求非常重要。本文对脐血干细胞移植的特点、冷冻保存、复温、不良反应和静脉输注等相关护理问题进行综述。     

脐带血和成人外周血LTT及T亚群的区别

造血干细胞移植正日益广泛地用于各种肿瘤、白血病及某些遗传性疾病的治疗,由于脐血中造血干细胞含量高,加之脐血来源丰富,采集、保存简便,免疫源性低,容易克服组织相容性障碍,被认为是骨髓以外另一个极有潜力的造血干细胞移植的造血细胞来源.为此,我们对脐血淋巴细胞转化功能和T亚群进行了检测,以探讨脐血的免疫特性.     

脐血干细胞的免疫学特性概述

脐血来源丰富,避免了一些伦理问题。脐血干细胞表面表达人类白细胞抗原(HLA)Ⅰ类分子,存在但不表达HLAⅡ类分子,在多向分化过程中始终不表达HLAⅡ类分子,产生免疫逃避反应,移植入体内可以产生免疫抑制。经多种免疫刺激因子均不产生或较少产生免疫反应,这种免疫反应并不影响脐血干细胞和生物学效应。脐血具有抑制T细胞活性和调节免疫反应,并具有免疫抑制的调节能力。脐血干细胞可作为临床组织工程的来源细胞。     

脐血单个核细胞的免疫学研究进展

造血干细胞移植（HSCT）已成为治疗多种血液病、某些恶性实体肿瘤、部分遗传性疾病、重症免疫缺陷等疾病的最有效措施之一。骨髓、外周血和脐血是造血干细胞的三大来源。但异基因骨髓移植（allo—BMT）或外周血干细胞移植（allo-PBSCT）受HLA匹配供者来源的限制,自体造血干细胞移植又受到干细胞体外净化等问题的困扰,而脐血造血干细胞因其广泛的来源、较强的增殖分化能力及较弱的免疫原性而日益受到重视。     

助产人员脐血采集标准操作

脐血中含有比骨髓中造血干细胞更丰富、更原始、更具有扩增能力的造血干细胞,其优点是来源广泛、采集简单,是一个非常好的干细胞来源。成为继骨髓和外周血后的第三大造血干细胞来源。因此,助产人员采集脐血时一定要按严格标准操作规程进行,以确保供临床移植应用质量。现将助产人员采集标准操作规程叙述如下。     

人脐带血细胞分化为神经样细胞的实验研究

为探讨人脐带血细胞分化为神经样细胞的可行性 ,无菌条件下采集正常人脐血 5 0～ 10 0mL置于加有抗凝剂的采血袋中 ,分离脐血单个核细胞进行培养 ,并加入细胞因子加以诱导分化 ,利用免疫细胞化学方法进行鉴定。结果显示 :脐血单个核细胞能在体外培养中增生分化和表达干细胞特异性抗原神经巢蛋白 (nestin) ,并最终分化为神经元样和神经胶质样细胞。免疫组化染色可见神经元特异性烯醇化酶 (NSE)和胶质原性纤维酸性蛋白 (GFAP)抗原表达。碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)和表皮生长因子 (EGF)协同作用对脐血细胞的分化有促进作用。提示 :脐血单个核细胞具有增生和分化潜能 ,可分化为神经元样及神经胶质细胞样细胞 ,可以作为神经细胞的种子细胞。     

脐血移植新技术进展

脐血为需要接受异基因造血干细胞移植的患者提供了一种可供选择的干细胞来源。自第1例脐血移植治疗范可尼贫血
患儿获得成功以来,全球范围内脐血移植呈指数增长,在儿童恶性血液病及某些先天性代谢病的治疗方面取得了长足的进展。
然而由于采集的脐血量有限、输注的脐血中所含的造血干细胞较少,长期以来脐血移植只用于儿童,因而限制了其在成人患者
的应用。近年来,随着一系列新的移植技术应用于造血干细胞移植领域,成人脐血的治疗效果已得到了改善。本文就脐血移植
的最新技术进行综述。
     

造血干细胞的血管分化及其在肢体缺血性疾病中的治疗作用

造血干细胞是最早发现、研究最深入的组织干细胞,造血干细胞移植已成功治疗了多种血液及免疫性疾病.很早以前,有人推测造血干细胞和血管干细胞来自共同的干细胞-血液血管母细胞.近年研究显示,造血干细胞具有分化血管内皮细胞的能力.动物实验显示,缺血部位造血干细胞移植可以促进血管新生,改善肢体缺血.临床小规模试验研究表明,应用骨髓和外周血造血干细胞移植可以显著促进缺血下肢的血管重建.本文简要介绍骨髓、外周血、脐血造血干细胞的血管分化功能及其在肢体缺血性疾病中的治疗作用.     

脐血干细胞的研究进展

脐血干细胞是近几年来发观的．类具有与骨髓干细胞相同的多向分化潜能的原始祖细胞。本文就其细胞特性、诱导分化以及在临床治疗中的研究现状作一综述，并与研充卡日对较为成熟的骨髓干细胞进行比较。对脐血干细胞在组织工程学中的应用前景作进一步的探讨     

脐血干细胞移植治疗血管性痴呆

血管性痴呆（vascular dementia,VD）是由缺血或出血性脑血管病以及全脑缺血、缺氧引起的认知障碍。传统药物治疗效果欠佳,脐血干细胞具备很强的增殖和分化能力,在一定条件下可分化为神经元,进而起到治疗VD的作用。脐血干细胞治疗VD研究已取得了一定进展,部分实验可明显改善模型动物的认知障碍。     

特定微环境下诱导脐血间充质干细胞向神经细胞的分化

目的 在体外分离培养人脐血间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs),探讨脐血间充质干细胞体外培养生长特性及向神经细胞分化的诱导条件.方法 在体外将脐血MSCs进行向神经细胞的定向诱导,观察脐血MSCs的形态变化,并在诱导后第5天用免疫荧光染色检测脐血MSCs中神经元细胞特异性的标志物;并与单纯低糖DMEM培养基培养的对照组脐血MSCs相比较.结果 诱导组中的脐血MSCs生长伸展,形成突起,呈放射状,并可互相形成连接,免疫荧光显示特异性烯醇化酶(neuronspecific enolase,NSE)阳性,表现出神经元细胞的特性.而对照组中的脐血MSCs未形成神经样形态结构,免疫荧光NSE阴性.结论 脐血MSCs可在体外经化学方法 定向诱导分化为神经细胞,可应用于神经修复及再生等领域.     

成人脂肪源间充质干细胞培养上清对人脐血间充质干细胞体外培养及扩增的支持作用

目的：研究人脂肪间充质干细胞培养上清对人脐带血（HUCB）中所含有间充质干细胞（MSCs）的影响。方法：取脐带血,肝素抗凝,Percoll淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,低糖DMEM培养获得贴壁细胞层。与人脂肪源间充质干细胞培养上清共孵育。流式细胞仪检测表面抗原。结果：脐带血的单个核细胞与人脂肪源间充质干细胞培养上清共孵育经体外培养贴壁后出现形似纤维状细胞形态并表达与MSCs相关的抗原（CD13,CD44,CD71,CD166）,但不表达造血细胞抗原（CD34,CD45）,这与源于骨髓的MSCs一致。结论：人脐血间充质干细胞与脂肪源间充质干细胞培养上清共孵育,对脐血间充质干细胞体外分离培养及扩增有支持作用。     

脐带源性和脐血源性间充质干细胞分离培养方法的比较

目的建立分离培养人脐带间充质干细胞（UCMSCs）和脐带血间充质干细胞（UCBMSCs）的方法,并比较其效果。方法无菌条件下采集健康足月新生儿脐带及脐血各30份,分别通过原代贴壁培养法、酶消化法培养UCMSCs,及淋巴细胞分离液法、羟乙基淀粉沉降与淋巴细胞分离两步分离法获得脐血中单个核细胞培养UCBMSCs。应用含10％胎牛血清的DMEM／F12培养基,比较UCMSCs和UCBMSCs分离培养的效果与生长形态。流式细胞术检测其表面标志及诱导分化鉴定其分化能力。结果UCMSCs原代贴壁培养法8d左右可见成纤维样细胞从组织块边缘爬出且成簇生长,酶消化法培养UCMSCs5d左右均匀生长;UCBMSCs分离培养用羟乙基淀粉沉降与淋巴细胞分离两步法得到的细胞数量较淋巴细胞分离法明显增多。两种来源MSCs培养方法相比较,UCMSCs原代培养的时间短,培养成功率明显增高。流式细胞仪检测两种来源的MSCs具有MSCs表面标志特征。定向诱导分化结果表明MSCs具有被诱导为成骨细胞、脂肪细胞的分化能力。结论人脐带来源间充质干细胞原代培养周期短,培养效率更高;脐血间充质干细胞的分离方法中羟乙基淀粉沉降与淋巴细胞分离两步法效率更高。     

血清对脐带间充质干细胞体外培养的影响

目的探讨血清对脐带间充质干细胞体外培养的影响。方法将人脐带间充质干细胞分别培养在不含血清、含灭活血清和含未灭活血清的低糖达尔伯克改良伊格尔培养基(L-DMEM)中。每天用显微镜观察脐带间充质干细胞在3种培养基中的生长情况,并计算细胞总数、统计细胞成活率。结果脐带间充质干细胞在含未灭活血清的L-DMEM中生长状况最好,在不含血清的L-DMEM中生长状况最差。结论含未灭活血清的L-DMEM是脐带间充质干细胞体外培养的最佳培养基。