革兰阴性杆菌产AmpC酶及ESBLs的检测及耐药性

为研究ESBLs、产AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药状况,我们对158株革兰阴性杆菌进行耐药性分析及产AmpC酶和ESBLs的检测,并将结果报告如下.     

同时产ESBLs和AmpC酶革兰氏阴性杆菌基因型和耐药性分析

目的研究同时产ESBLs和AmpC酶革兰阴性杆菌的耐药基因型及对常用抗菌药物的耐药特征,指导临床合理使用抗生素。方法采用德国西门子全自动细菌鉴定系统Walk away-40 plus鉴定细菌,双纸片确证试验检测ESBLs,硼酸双纸片增效试验检测AmpC酶,K-B法测定药敏结果,PCR技术分析基因型。结果 26珠同时产ESBLs和AmpC酶革兰阴性杆珠菌扩增出ESBLs基因型为TEM、CTX-M-1、CTX-M-9、SHV,未扩增出CTX-M-2;AmpC酶基因型为DHA-1;除亚胺培南全部敏感外,对常用抗生素均呈现高度耐药。结论同时产ESBLs和AmpC酶革兰阴性杆菌在不同地区存在不同耐药基因亚型,产酶珠对常用抗生素耐药率较高。     

136析革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题。已发现越来越多的革兰阴性杆菌对B-内酰胺类抗生素产生耐药性。细菌产超广谱B-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一。其中AmpC酶对β-内酰胺酶抑制剂不敏感,使高产AmpC酶的菌株引起的感染更加难治。此外,出现AmpC酶由原来局限于染色体编码向质粒转移的趋势,大大提高了AmpC酶的横向传播能力[1]。为调查革兰阴性杆菌的产酶情况,我们对136株革兰阴性杆菌进行ESBLs和AmpC酶检测,并对检测结果进行分析。     

肠杆菌科高活性β内酰胺酶的检测及耐药分析

随着三代头孢菌素在临床的广泛应用，致使由质粒介导的超广谱β内酰胺酶（extended—sepctrum betalanctamases，ESBLs）和由染色体或质粒介导的去阻遏高产AmpC酶的革兰阴性杆菌大量出现，鉴于其不但对ESBLs类抗生素耐药，而且也对氨基糖苷类和喹诺酮类药物交叉耐药，给临床抗感染治疗构成巨大威胁，受到国内外学者的广泛关注。     

质粒介导AmpC型β-内酰胺酶的基因型和检测方法

革兰阴性杆菌中质粒介导AmpC酶引起的耐药，因其耐药范围扩大、耐药性由质粒转移、发生率快速增长及新基因型的不断发现。已成为严重的公共卫生问题引起高度重视。现将质粒介导AmpC酶的来源、基因型和检测方法作一简要综述。[第一段]     

常见革兰阴性杆菌AmpC酶的检测分析

目的了解常见革兰阴性杆菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞AmpCs发生率及表型构成,以及产ESBLs的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌AmpC酶的发生率及表型构成。方法采用底物协同-拮抗法(MSSAT)检测大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌产AmpCs情况及表型构成。结果产ESBLs的大肠埃希菌和产ESBLs的肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍氏不动杆菌、阴沟肠杆菌AmpC酶检出率分别40%、56%、100%、100%、100%。结论产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌同时存在AmpC酶的机制,应引起临床和实验室工作者的重视。AmpC酶的耐药表型与菌株的耐药程度相关。     

革兰阴性杆菌β-内酰胺酶表型和基因型研究

目的了解铜陵地区临床分离的革兰阴性杆菌产生超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBL)的分布情况,并检测产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs基因型鉴定。方法采用三维试验检测革兰阴性杆菌产ESBLs和AmpC酶,纸片协同法检测MBL,用聚合酶链反应(PCR)对ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行TEM型、SHV型、CTX-M型三种耐药基因检测并克隆测序。结果356株革兰阴性杆菌检出产酶株90株,检出率25.3%。单产ESBLs革兰阴性杆菌57株,检出率16.0%,以肺炎克雷伯(31.6%)、大肠埃希菌(31.0%)检出率高;单产AmpC酶4株,检出率1.1%,其中阴沟肠杆菌3株;同时产ESBLs和AmpC酶16株,检出率4.5%,以鲍曼不动杆菌(12.5%)检出率最高;产MBL细菌13株,均为非发酵菌,以嗜麦芽窄食单胞菌检出率最高,为71.4%。17株ESBLs表型阳性的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌有16株检出ESBLs耐药基因,其中CTX-M型15株(88.2%),TME型13株(76.1%),SHV型2株(11.8%),有11株细菌同时带有两种ESBLs基因,1株带有3种ESBLs基因。结论革兰阴性杆菌产生ESBLs、AmpC酶和MBL多种β内酰胺酶,铜陵地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs基因型以CTX-M型为主。     

产质粒介导AmpC酶肠杆菌科细菌对常用抗生素的体外活性分析

目的通过对肠杆菌科细菌质粒介导AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的检测及其耐药性分析,探讨其主要耐药机理,指导临床合理用药。方法采用氯唑西林增效试验测定质粒介导AmpC酶,双纸片确诊试验测定ESBLs,并采用最小抑菌浓度法(MIC法)检测12种常用抗生素对这些菌株的体外抗菌活性。结果320株受检菌中共检出产质粒介导AmpC酶菌145株,产ESBLs菌160株,阳性率分别为45.3%、50.0%。产质粒介导AmpC酶组对氨曲南、头孢曲松、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦均存在不同程度的耐药(45.2%~68.5%),其耐药率明显高于非产AmpC酶组,两者相比有显著性差异(P均<0.05)。而产质粒介导AmpC酶组和非产AmpC酶组对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、环丙沙星,头孢唑啉、头孢吡肟的耐药率均较高(41.3%~94.2%);对阿米卡星、亚胺培南、头孢派酮/舒巴坦的耐药率均较低(0%~34.6%),两者相比无显著性差异(P均>0.05)。结论肠杆菌科细菌中产质粒介导AmpC酶的检出率较高,并且该类菌多呈多重耐药。临床可采用碳青霉烯类抗生素作为产质粒介导AmpC酶菌感染的经验治疗,也可根据药敏结果选用头孢派酮/舒巴坦、四代头孢菌素或阿米卡星等抗生素治疗。     

45株大肠埃希菌产ESBLs和AmpC酶的调查及药敏结果分析

近年来,由于革兰阴性杆菌产生的超广谱β-内酰胺酶和高产AmpC酶引起的耐药问题在临床越来越受到重视.因此,作者对本院分离出的1000株大肠埃希菌进行ESBLs和高产AmpC酶的检测,并对产ESBLs同时高产AmpC酶的菌株进行药敏分析.现将结果报告如下:     

革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药相关性

目的了解革兰阴性杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况及其耐药性，指导临床合理用药。方法K—B法检测184株革兰阴性杆菌对11种抗生素的耐药性；采用头孢西丁（FOX）药敏纸片进行AmpC酶的初筛，通过酶提取物三维试验方法确证产AmpC酶细菌；采用NCCLS推荐的纸片扩散确证试验检测184株革兰阴性杆菌中大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs的情况。结果184株革兰阴性杆菌中，AmpC酶阳性率为23．3％主要产生菌为鲍曼不动杆菌57．7％，铜绿假单胞菌37．5％，AmpC酶阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、复方新诺明（SXT）、左旋氧氟沙星（LEV）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、头孢他啶（CAZ）、阿米卡星（AK）、头孢吡肟（FEP）、美洛培南（MEM）的耐药率分男11为94．7％、86．8％、84．2％、81．6％、71．0％、68．4％、68．4％、55．3％、50．O％、5．3％；38株大肠埃希菌和26株肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为42．1％、23．1％，ESBLs阳性菌对头孢噻肟（CTX）、头孢曲松（CRO）、哌拉西林（PRL）、氨曲南（ATM）、复方新诺明（SXT）、头孢他啶（CAZ）的耐药率较高。对头孢吡肟（FEP）、阿米卡星（AK）、头孢西丁（FOX）、美洛培南（MEM）的耐药率较低，对左旋氧氟沙星（LEV）的耐药率大肠埃希菌则远高于肺炎克雷伯菌。结论在革兰阴性杆菌中，AmpC酶和ESBLs产生情况已相当严重，应重视对其的检测；产酶菌与非产酶菌对抗生素的耐药性有明显区别；临床用药以碳青霉烯类如美洛培南（MEM）为首选。     

革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶和AmpC酶的检测与分析

目的：了解革兰阴性杆菌中超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶的产生情况，为临床用药提供参考依据。方法：用纸片扩散确证试验检测345株革兰阴性杆菌的ESBLs产生情况，同时用酶提取物三维试验检测其中194株菌的AmpC酶产生情况。结果：革兰阴性杆菌中，ESBLs阳性率为30．4％，主要产生菌为阴沟肠杆菌68．2％，大肠埃希菌45．9％，肺炎克雷伯菌31．0％；AmpC酶阳性率为11．9％，主要产生菌为阴沟肠杆菌29．5％，鲍曼不动杆菌18．2％。结论：在革兰阴性杆菌中ESBLs、AmpC酶产生情况已相当严重和普遍，应重视对这两类酶的检测。     

不动杆菌对β-内酰胺类抗生素耐药机制的研究

目的了解不动杆菌对β-内酰胺类抗生素的耐药情况,并探讨其对β-内酰胺类抗生素的主要产酶机制。方法采用K-B扩散法、ESBLs确证试验、纸片协同法、三维试验、等电聚焦法和PCR法检测126株不动杆菌的耐药情况以及所产的主要酶。结果126株不动杆菌中,经三维试验和PCR扩增ampC基因确证产AmpC酶的有38株,ESBLs确证试验和纸片协同法检测疑为ESBLs的3株菌经等电聚焦和基因扩增证实本组不动杆菌不产ESBLs。在头孢西丁筛选试验阳性的119株菌中,三维试验阳性的有62株。三维试验阴性的37株菌中,ampC基因阳性的有8株。这8株菌的共性是ampR、ampD均阳性。三维试验阳性,染色体ampC基因扩增阳性的38株菌中,ampD(-)、ampR( )有25株,ampD( )、ampR(-)有2株,ampD( )、ampR(-)有11株。结论临床分离的不动杆菌以鲍曼不动杆菌为主,其所产酶主要是质粒TEM-1型酶和染色体介导的AmpC酶。在不动杆菌染色体上存在ampD、ampR调控基因,而且这两个基因的变化影响不动杆菌AmpC酶的表达。不动杆菌对三代头孢类抗生素的耐药率较高,亚胺培南对不动杆菌的敏感率较高。     

细菌耐药基因研究中值得注意的问题（Ⅲ）

本文就细菌抗菌药物耐药基因研究中值得注意的问题继续作介绍，包括革兰阴性杆菌质粒介导的喹诺酮类药物耐药机制、革兰阴性杆菌复方新诺明耐药机制、β-内酰胺酶基因家族要分簇检测。     

肝移植术后感染的革兰氏阴性杆菌病原菌分布与耐药特征分析

目的研究肝移植术后感染的革兰氏阴性杆菌的病原菌及其药敏特征。方法采用KB法检测肝移植术后感染革兰氏阴性杆菌的药敏情况，双纸片确证法、三维试验检测肠杆菌的超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、AmpC酶产酶情况。结果55例肝移植术后感染的病原菌中革兰氏阴性杆菌占47．6％，对4种及4种以上抗生素的耐药率均超过40％．阴沟肠杆菌与大肠杆菌的产ESBLs与产AmpC酶检出率分别为32．4％、36．8％和38．8％、10．5％。结论肝移植术后以革兰氏阴性杆菌感染为主，对抗生素具有高耐药性与多重耐药性特点，产ESBLs与产AmpC酶是主要革兰氏阴性杆菌产生耐药性的重要因素，应引起临床的高度重视。     

儿童101株福氏志贺菌产超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

革兰阴性杆菌对β-内酰胺类的主要耐药机制是产生β-内酰胺酶和超广谱β-内酰胺酶（extended-spectrum β-lactamases,ESBLs）,ESBLs是指由细菌质粒介导的能水解氧亚氨基母一内酰胺抗生素,并可被β-内酰胺酶抑制剂（如克拉维酸）所抑制的一类酶。近年来,随着第三代头孢菌素的广泛应用,造成产ESBLs的细菌种类及ESBLs基因型种类不断增加。     

重视对细菌产AmpC酶的检测与研究

AmpC酶是革兰阴性细菌产生的头孢菌素酶,对β—内酰胺类抗生素严重耐药和对氨基糖苷类等多种抗生素交叉耐药,根据其产生机制分为染色体介导型和质粒介导型。检测方法主要为表型检测和采用PCR、核酸杂交技术等方法进行分子生物学检测。近年来AmpC酶的检出率逐年增高,细菌耐药性增强,应加强监测和研究。     

AmpC酶的检测方法及研究进展

细菌耐药性已成为全球性的问题，特别是近年来，产AmpC酶的革兰阴性杆菌引起的耐药性在临床上越来越受到重视。AmpC酶又称Bush-Ⅰ型(头孢菌素酶或染色体介导的)β-内酰胺酶，是由革兰阴性杆菌产生，能水解三代头孢菌素，不被克拉维酸抑制。目前产AmpC酶细菌已成为院内感染最常见病原菌，仅对四代头孢菌素及碳青霉烯类敏感。     

对产AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶的细菌耐药性调查

目的:了解临床产AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的细菌检出率及其耐药性,以指导临床合理用药。方法:菌株鉴定采用法国梅里埃公司API系列产品,采用改良三维试验方法,分别进行AmpC酶、ESBLs酶测定。根据产AmpC酶,ESBLs酶细菌检测结果与病历结合,调查产AmpC酶、ESBLs酶的发生情况。结果:400株革兰氏阴性杆菌中检出产AmpC酶15株,产ESBLs酶102株,检出率分别为3.8%和25.5%,产酶菌株对16种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论:产AmpC酶,ESBLs酶细菌对大多数常用抗生素耐药率超过50%,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青酶烯类抗生素。     

儿童感染肺炎克雷伯菌产AmpC酶和ESBLs的检测及耐药性分析

目的了解广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产质粒介导的AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及其耐药特征,为临床合理用药提供参考依据。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs,头孢西丁三维试验法检测AmpC酶,K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对抗菌药物的敏感性。结果共检出248株肺炎克雷伯菌,其中46株产AmpC酶,阳性率为18.5%;157株产ESBLs,阳性率为63.3%;同时产AmpC酶和ESBLs菌株阳性率为18.1%。产AmpC酶肺炎克雷伯菌对第三代头孢菌素高度耐药,耐药率达80%～100%;对头孢吡肟、含酶抑制剂复合药的耐药率也在56.5%～93.5%之间;但对环丙沙星、阿米卡星的耐药率则在30%以下,对亚胺培南全部敏感。产ESBLs菌株对头孢菌素、含酶抑制剂复合药的耐药率也较高,在50%～91.7%之间,但对阿米卡星、环丙沙星、亚胺培南仍高度敏感。ESBLs阴性肺炎克雷伯菌对所测抗生素的敏感率均在81.2%以上。产酶菌株耐药率明显比非产酶菌株高。结论广州地区儿童感染肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶的状况已十分突出;产酶菌株对常用抗生素的耐药率较高;碳青霉烯类抗生素可作为治疗产AmpC酶和/或E...     

碳青霉烯类抗生素对产酶革兰阴性杆菌药敏分析

目的：了解250抹G^-杆菌产ESBLs和AmpC酶的状况，比较产酶菌与非产酶菌对碳青霉烯类和其他11种抗生素的耐药率，为临床治疗产酶菌引起的感染提供理论依据。方法：应用纸片扩散确证法和头孢西丁三维试验分别检测ESBLs和AmpC酶。用K—B琼脂扩散法做药敏试验。结果：250株G^-杆菌中，53株(21．2％)产AmpC，98株(39．2％)产ESBLs，6株(2．4％)同时产AmpC ESBLs。碳青霉烯类抗生素对ESBLs菌株，AmpC菌株和AmpC ESBLs菌株的耐药率分别为3．1％，3．8％和0，较其它抗生素低。结论:对产酶菌引起的感染应首选碳青霉烯类抗生素。