子宫颈组织中人乳头状瘤病毒的PCR检测

①目的探讨人乳头状瘤病毒１６，１８型（ＨＰＶ－１６，ＨＰＶ－１８）感染与慢性宫颈炎、宫颈癌的关系。②方法聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测２２例正常宫颈、５５例慢性宫颈炎、３０例宫颈癌的子宫颈组织。③结果正常宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８的检出率均为０．００％，慢性宫颈炎分别为１８．１８％和７．２７％，宫颈癌分别为５６．６７％和３．３３％．统计学处理表明，宫颈癌组织中ＨＰＶ－１６的检出率明显高于宫颈炎组织（χ２＝１３．６２４，Ｐ＜０．０１），而且Ⅲ度宫颈糜烂组织中ＨＰＶ－１６的检出率也较Ⅰ，Ⅱ度的检出率高，两者比较差异有显著意义（χ２＝１０．５５０，Ｐ＜０．０１），但不同宫颈疾患组织中ＨＰＶ－１８的检出率无统计学意义。④结论子宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，以ＨＰＶ－１６尤为明显，ＰＣＲ技术是检测组织中ＨＰＶ－ＤＮＡ的敏感、特异的方法     

子宫颈组织中人乳头状瘤病毒的PCR检测

探讨人乳头状瘤病毒１６，１８型感染与慢性宫颈炎，宫颈癌的关系。方法聚合酶链反应技术检测２２例正常宫颈，５５例慢性宫颈炎，３０例宫颈癌的子宫颈组织。正常宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８的检出率均为０．００％，慢性宫颈炎分别为１８．１８％和７．２７％，宫颈癌分别为５６．６７％和３．３３％。统计学处理表明，宫颈癌组织中ＨＰＶ－１６的检出率明显高于宫颈炎组织，而且Ⅲ度宫颈糜烂组织中ＨＰＶ－１６的检出率也较Ⅰ，     

宫颈癌病理学类型与人乳头瘤病毒感染型别的关系

探讨宫颈癌病理学类型与人乳头瘤病毒感染型别的关系。方法每例宫颈癌标本取样两份,一份进行组织病理学检查,包括ＨＥ、ＰＡＳ和粘液卡红染色;另一份用于提取ＤＮＡ,分别用于ＨＰＶ－１６和ＨＰＶ－１８基因组探讨针进行核酸杂交。结论宫颈鳞癌与ＨＰＶ－１６感染密切相关,宫颈腺癌与ＨＰＶ－１８感染密切相关;而宫颈鳞癌中的不同类型与ＨＰＶ－１６之间的以及宫颈腺癌中的不同类型与ＨＰＶ－１８之间均无明显的相关性。     

宫颈癌及癌旁组织中人乳头瘤病毒DNA检测

目的：探讨人乳头瘤病毒（ｈｕｍａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍａｖｉｒｕｓ,ＨＰＶ） 与宫颈癌及癌旁组织的关系。方法：应用原位ＰＣＲ技术（ＩＳＰＣＲ）对４４ 例宫颈癌、１８ 例癌旁组织及３０ 例慢性宫颈炎和１５ 例正常宫颈组织中的ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：４４ 例宫颈癌组织中ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性３５ 例（７９－５％ ）,ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阳性５ 例（１１－３ ％） 。其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性４ 例;ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阳性而ＨＰＶ１６ＤＮＡ阴性１ 例;ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性而ＨＰＶ１８ＤＮＡ 阴性３１ 例。１５ 例癌旁组织伴宫颈上皮内新生物（ｃｅｒｖｉｃａｌｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｎｅｏｐｌａｓｍ , ＣＩＮ） Ⅱ～Ⅲ级,ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性１２ 例（８０％ ）,其他３ 例癌旁组织中１ 例ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性;３０ 例慢性宫颈炎有４ 例ＨＰＶ１６ＤＮＡ 阳性（１３－３％ ） ;１５ 例正常宫颈组织ＨＰＶＤＮＡ均阴性。结论：宫颈癌及癌旁伴ＣＩＮⅡⅢ与ＨＰＶ１６、１８ 感染有密切关系,以ＨＰＶ１６ 感染为主     

宫颈癌及癌旁组织中人乳头瘤病毒DNA检测

目的：探讨人乳头瘤病毒与宫颈癌及癌旁组织的关系。方法：应用原信ＰＣＲ技术对４４例宫颈癌、１８例癌旁组织及３０例慢性宫颈炎和１５例正常宫颈组织中的ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ进行检测。结果：４４例宫颈癌组织中在６ＤＮＳ阳性３５例，ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性５例。其中ＨＰＶ１６ＤＮＡ和ＨＰＶ１８ＤＮＡ均阳性４例；ＨＰＶ１８ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１６ＤＮＡ阴性１例；ＨＰＶ１６ＤＮＡ阳性而ＨＰＶ１８ＤＮＡ阴性     

食管癌组织中人乳头瘤病毒的检测

用人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）保守基因的通用引物和１６、１８型特异性引物，通过聚合酶链反应（ＰＣＲ），检测２０例正常新鲜活检食管粘膜，４０例新鲜食管癌组织和５１例石蜡包埋的食管癌组织标本的ＨＰＶＤＮＡ，在２０例正常人食管粘膜组织中ＨＰＶＤＮＡ检出率９．１％，癌组织中为３６．２％，鳞癌和腺癌分别为３４．７％、４７．１％，鳞癌以１６型感染为主，腺癌以１８型为主。但肿瘤分化程度与ＨＰＶ感染无关。结果提示：ＨＰＶ感染与食管癌的发生有一定关系，不同型别的ＨＰＶ与不同组织的亲和性有差别。     

食管癌组织中人乳头瘤病毒的检测

用人乳头瘤病毒保守基因的通信引物和１６、１８型特异性引物，通过聚合酶链反应，检测２０例正常新鲜活检食管粘膜，４０例新鲜食管癌组织昨５１例石蜡包埋的食管癌组织标本的ＨＰＶＤＮＡ，在２０例正常人食管粘膜组织中ＨＰＶＤＮＡ检出率９．１％，癌组织中为３６．２％，磷癌和腺癌分别为３４．７％、４７．１％，鳞癌以１６型感染为主，腺癌以１８型为主，但肿瘤分化程度与ＨＰＶ感染无关，结果提示：ＨＰＶ感染与食砭 癌的发     

宫颈癌组织中H—ras基因突变与高危型HPV感染关系的研究

采用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＲＦＬＰ等方法检测５１例宫颈组织（其中宫颈癌标本３８例，正常宫颈组织标本１３例）中高危型人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）－１６，１８感染情况及Ｈ－ｒａｓ基因突变情况。研究结果显示，宫颈组织中ＨＰＶ－１６，１８感染率为７４％（２８／３８），表明高危型ＨＰＶ－１６，１８是宫颈癌发生的重要因素。Ｈ－ｒａｓ基因突变率为２９％（１１／３８）。正常宫颈组织中上述检测结果均为阴性。Ｈ－ｒａｓ基因突变与多种肿瘤发生有关；显示该基因突变与宫颈癌发生有关，但不是早期事件，也不能作为临床恶变与预后判断的指标；Ｈ－ｒａｓ基因突变与ＨＰＶ－１６，１８型感染具有相关性     

喉鳞癌及乳头状瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的PCR检测

①目的探讨人乳头瘤病毒１６型和１８型（ＨＰＶ１６和ＨＰＶ１８）与喉鳞癌、喉乳头状瘤的关系。②方法应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测３４例喉乳头状瘤、８３例喉鳞状细胞癌石蜡包埋组织中ＨＰＶ１６及ＨＰＶ１８的ＤＮＡ．③结果喉乳头状瘤及喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率为１４．７１％和３０．１２％，两组比较差异无显著性（χ２＝３．００６，Ｐ＞０．０５）；ＨＰＶ１８在喉乳头状瘤组织中未检出，而在喉鳞癌组织中为６．０２％，两组比较，差异无显著意义（χ２＝０．０８７，Ｐ＞０．０５）。高分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１６的检出率显著高于中分化鳞癌（χ２＝６．０３２，Ｐ＜０．０５），而高分化与低分化、中分化与低分化鳞癌之间的差异均无显著性（χ２＝０．３５１，１．５００，Ｐ均＞０．０５）；不同病理分化喉鳞癌组织中ＨＰＶ１８的检出率差异无显著性（χ２＝０．０６０，Ｐ＞０．０５）。④结论喉鳞癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，尤以ＨＰＶ１６明显     

HPV16／18感染,p53蛋白,PCNA表达与维吾尔族子宫颈鳞癌发病？…

目的：探讨新疆维洋族子宫颈鳞癌发生中ＨＰＶ１６／１８,Ｐ５３、ＰＣＮＡ三因素失航船主相关性。方法：应用ＰＣＲ和免疫组化法检测１２７例维于尔族患者宫颈组织的ＨＰＶ１６／１８ＤＮＡ和Ｐ５３蛋白、ＰＣＮＡ的表达。结果：ＨＰＶ１６／１８在正常宫颈、宫颈上皮内瘤样病变（ＣＮ）、宫颈鳞癌中检出率分别为１２．５％、２２．５％和５０．０％,Ｐ５３,ＰＣＮＡ在三组阳性表达率分别为６．３％、２２．５％、５４．７％和６     

人类乳头瘤病毒16,18型,p53基因与胃癌

３０例新鲜胃癌标本，采用多聚酶链反应技术检测人类乳头瘤病毒１６、１８感染、并采用多聚酶链反应－单链构象多态性技术对ｐ５３基因突变进行检测。结果：ＨＰＶ１５阳性率为４０．０％，未发现ＨＰＶ１８感染：Ｐ５３基因突变率为５０．０％，ＨＰＶ１６感染和Ｐ５３基因突变同时存在者为１６．７％。     

人乳头状瘤病毒和p53基因及H-ras基因在喉癌细胞中的表达

目的：研究喉癌细胞p53基因、H－ras基因突变及其与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系，探讨其在喉癌发生发展中可能起的作用。方法：采用分子生物学技术，包括聚合酶链反应、单链构型多态性分析、限制性内切酶长度多态性分析，及DNA序列分析等方法，对28例喉癌进行人乳头状瘤病毒、p53基因及H－ras基因检测。结果：28例喉癌中有50％在p53基因的第7－8外显子有突变，其中4例行DNA序列分析表明均有碱基替换、插入或丢失；而H－ras基因第12密码子的突变率仅3．57％；高危型HPV（HPV－16或－18）感染在喉癌细胞中有一定的特异性，且与p53基因突变有一定的相关性。结论：在喉癌的发生发展过程中高危型HPV感染和p53基因突变起着重要的作用，且两者之间可能存在某种内在的联系。     

p53和ras基因突变及HPV感染与喉鳞癌的关系

①目的　探讨人乳头瘤病毒 16 ,18型 (HPV16 ,18)感染 ,抑癌基因p5 3和癌基因ras突变与喉鳞癌的关系 ,并初步分析 3种致癌因素的相互关系。②方法　应用聚合酶链反应 (PCR)和限制性片段长度多态性 (RFLP)分析技术 ,检测 40例喉鳞状细胞癌组织中 p5 3基因第 5 ,7外显子及ras基因 (N ras ,K ras,H ras)第 12密码子的突变情况 ,同时用PCR技术检测 40例标本中HPV16 ,18的感染情况。③结果　 40例标本检出HPV16阳性标本 14例 ,HPV18阳性标本 4例。 4例标本 p5 3基因第 5外显子第 143密码子发生突变 ,其中 1例HPV16阳性 ,p5 3基因第 7外显子未发现突变。 9例标本ras基因发生突变 (N ras 6例 ,K ras 2例 ,H ras 1例 ) ,其中 2例HPV16阳性 ,但未见 p5 3与ras基因同时发生突变者。HPV阳性和阴性标本中p5 3基因突变率、ras基因突变率的差异均无显著性(χ2 =0 .10 1,1.392 ,P >0 .0 5 )。④结论　HPV感染、p5 3和ras基因突变与喉鳞癌的发生密切相关 ,三者之间的关系尚待进一步探讨。     

P53基因突变、人乳头瘤病毒16，18型感染与肺鳞癌发病的关系

应用单链构象多态性分析多聚酶链反应ＥＢ染色法（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ－ＥＢ）对４０例肺癌组织标本的Ｐ５３基因序列５～８外显子突变进行分析，同时应用ＰＣＲ方法检测上述标本及１８例肺良性疾病组织标本中ＨＰＶ１６、１８型ＤＮＡ相关序列，旨在分析二者在肺鳞癌发病中的作用及相互关系，并就肺鳞癌与Ｐ５３基因结构和功能异常的关系进行初步探讨。     

宫颈癌组织中P53基因5～6外显子的检测及分析

应用ＧＰ ＰＣＲ 技术对４０ 例宫颈癌活检组织进行ＨＰＶ 感染的检测，发现有３５ 例为阳性（ 阳性率为８７％ ），同时利用ＰＣＲ ＳＳＣＰ（单纯ＤＮＡ构象多态性）分析技术，对３５ 例ＨＰＶ 阳性的宫颈癌组织进行Ｐ５３ 基因５ ～６外显子的检测，其突变率仅为２－８５ ％（１／３５），而在５ 例ＨＰＶ 阴性的宫颈癌组织中未检测到Ｐ５３ 基因突变，结果表明：Ｐ５３ 基因的突变在宫颈癌的发生过程中不起主要作用，并且与ＨＰＶ的感染无相关性。     

某市食管癌组织中人类乳头状瘤病毒感染情况的研究

目的研究河南省食管癌高发区食管癌组织中人类乳头状瘤病毒感染与食管鳞状细胞癌发生的关系。方法利用PCR和免疫组织化学技术检测68例食管癌,15例非典型增生食管上皮和53例正常食管黏膜组织中人类乳头状瘤病毒HPV16／18感染和HPV16／18E6蛋白的表达情况。结果68例食管癌中,HPV DNA阳性率为67．6％（46／68）。在正常食管黏膜、非典型增生上皮及鳞状细胞癌组织中HPV16／18E6的阳性率分别为9．4％（5／53）、40．0％（6／15）和61．2％（42／68）,癌组织中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率明显高于非典型增生上皮和正常食管黏膜（P〈0．05）,非典型增生上皮中HPV16／18E6蛋白的阳性表达率亦明显高于正常食管黏膜（P〈0．05）。结论HPV16／18型感染可能在某食管癌高发区食管癌的发生中起重要作用。     

端粒酶和人乳头病毒16/18在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的:探讨端粒酶(hTERC)和人乳头病毒(HPV)16/18在宫颈癌中的表达及其临床诊断意义。方法:随机选择2009年3月～2012年3月,我院妇产科收治的宫颈癌确诊病例40例作为观察组。同时,随机选择在本院门诊就诊的宫颈诊断正常40例病理标本作为对照组。分别采用聚合酶链反应(PCR)技术和重复片段扩增方法银染定性法(TRAP-PCR),对所有样本宫颈组织中hTERC和HPVl6/18的感染和表达情况进行检测。利用SPSS17.0软件运用Logistic分析各组HPVl6/18和hTERC的感染和表达与宫颈病变的关联性。结果:宫颈癌组hTERC阳性率为60.0%,显著高于正常宫颈组的2.5%(P<0.01);HPV-16/18阳性率达到92.50%,显著高于正常宫颈组阳性率7.50%(P<0.01);宫颈癌易感性与hTERC、HPV16和HPV18阳性率关联关联系数分别为3.94、4.022和4.73,均达到显著水平(P<0.05)。结论:hTERC基因表达和HPV16/18感染与宫颈癌宫颈组织病变有密切的关联性,在宫颈癌发生发展中起重要作用,两者可以作为宫颈癌早期诊断的临床指标之一。     

p53基因第72位密码子多态性与宫颈癌及HPV-16、18 E6之间关系的研究

目的探讨宫颈癌及其癌前病变中p53基因第72位密码子多态性的表达及其与HPV16、18E6表达之间的关系,以了解p58基因第72位密码子多态性是否可以作为预测宫颈癌发生的一项高危因子。方法以PCR法检测81例宫颈鳞癌（高分化13例、中分化24例、低分化44例;Ⅰb期24例、Ⅱa期15例、Ⅱb期37例、Ⅲa期5例）、18例宫颈腺癌、88例宫颈上皮内瘤样病变（CINⅡ30例、CINⅢ58例）及60例正常宫颈组织中p53基因第72位密码子多态性及HPV16、18E6的表达。结果p53Arg纯合子、p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子在宫颈鳞癌、腺癌和CIN（Ⅱ～Ⅲ）中分别占58．02％、30．86％、11．12％;55．55％、27．78％、16．67％I59．09％、21．59％、19．32％。各组中p53Arg纯合子明显高于p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子,且差异有统计学意义（P〈0．05IP〈0．01）。正常宫颈组织中p53Arg纯合子、p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子分别为23．33％、40．OO％、36．67％,三者间无统计学意义（P〉0．05）。宫颈癌组（鳞癌及腺癌）、CIN（Ⅰ～Ⅱ）组中p53Arg纯合子均高于正常对照组中p53Arg纯合子,且差异有统计学意义（P〈0．05）;宫颈鳞癌中HPVl6、18E6（＋）亚组中p53Arg纯合子显著高于HPV16、18E6（-）亚组及HPVl6、18E6（＋）正常对照组亚组（P〈0．05,P〈0．01）。各组中p53Arg纯合子均高于p53Pro纯合子（P〈0．05）;p53Arg纯合子及等位基因均未随宫颈癌临床分期及分化程度而变化,与宫颈癌前病变程度亦无关系。结论p53Arg纯合子可作为预测宫颈癌及其癌前病变的一项高危因子,与高危型HPVE6同时检测可提示宫颈病变的发展趋势;p53Arg纯合子与宫颈癌临床分期及分化程度无明显相关性。     

子宫颈癌HPV16/18感染与微血管密度和血管内皮生长因子表达的关系

目的 探讨人乳头状瘤病毒16／18（HPV16／18）在子宫颈癌组织中的感染情况及与微血管密度（MVD）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的关系。方法 用原位杂交法检测HPV16／18在60例子宫颈癌（鳞癌40例、腺癌20例）、29例宫颈上皮内肿瘤（CIN）和16例正常子宫颈组织中的HPV16／18感染情况；采用免疫组织化学方法（SP）检测VEGF蛋白的表达，并以CD34抗原作为血管内皮细胞标记，测定其微血管密度。结果 HPV16／18在子宫颈鳞癌、腺癌、CIN和正常子宫颈组织中感染率分别为67．50％（27／40）、35．00％（7／20）、68．97％（20／29）、6．25％（1／16）。HPV16／18感染率鳞癌组与腺癌组和正常组比较差异均有显著性意义（均P〈0．01），而鳞癌组与CIN组相比差异无显著性意义（P〉0．05）。随着宫颈病变的进展，MVD逐渐增大，VEGF的阳性表达率渐增高。MVD在以上5种组织间相比差异均有极显著性意义（均P〈0．01）。VEGF在子宫颈鳞癌、腺癌、CIN、正常宫颈组织细胞质中的阳性表达率分别为95．00％（38／40）、100．00％（20／20）、82．80％（24／29）、18．80％（3／16）。病变患者与正常者相比差异有极显著性意义（P〈0．01）。HPV16／18感染与VEGF表达呈正相关（r=0．245，P〈0．05），而与MVD无相关性（r=．04，P〉0．05）；VEGF的表达与MVD无相关性（r=0．01，P〉0．05）。淋巴转移阳性者MVD的表达量较阴性者高（P〈0．05）。结论 在子宫颈癌的发生发展中HPV16／18的感染起一定的作用，MVD与VEGF在子宫颈组织的不同病变中的表达均有差异性，推测VEGF有促进子宫颈癌组织血管形成作用，MVD与子宫颈癌的恶性程度密切相关。HPV16／18感染可能通过促进VEGF的表达而有利于子宫颈癌组织的生长。     

宫颈癌组织中HPV16 E7序列多态性分析

目的探讨广东地区宫颈癌组织中HPV16肿瘤相关性抗原E7基因序列的多态性.方法采用通用引物PCR直接测序法对宫颈癌标本中的HPV分型,从含有HPV16型的标本中采用自行设计的多重引物通过巢式PCR扩增出HPV16E7,经DNA序列测定法检测其基因变异,进而寻找其热点突变.结果50例宫颈癌组织HPV-DNA的检出率为78%,其中HPV16和HPV18型混合感染18例,单纯HPV16型感染15例.33例含有HPV16型的标本中扩增出25例HPV16E7,其中17例647位核苷酸“T”变异“C”,导致相应的蛋白质由天冬氨酸变异为丝氨酸.结论广东地区宫颈癌组织中HPV16E7DNA序列发生碱基替换的区域主要在647位至846位,热点突变点为Nt647和Nt846.