脂类介质上调人中性粒细胞CD11b表达与同步释放过氧化物和弹性蛋白酶

通过增强与内皮细胞间的粘附并释出细胞毒性物质如过氧化物(O_2~-)、弹性蛋白酶,中性粒细胞(PMN)可促使炎症反应和引起直接的组织损伤。本实验研究了两种有激活PMN潜能的脂类介质——血小板活化因子(PAF)和白三烯B_4(LTB_4)预激PMN,以及对其表面粘附分子CD11b表达、弹性蛋白酶和过氧化物释放的作用。以Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离PMN,并保证PMN占分离细胞的95％、活力在99％以上。PMN用PAF或LTB_4预激2、5、10、15、30或60min,随后加趋化剂fMLP,测定过氧化物最大生成率(Vmax)和弹性蛋白酶释放百分率。PMN未经PAF或LTB_4预激单加fMLP     

中性粒细胞与急性肺损伤

在急性肺损伤（ALI）及ARDS的发生，中性粒细胞（PMN）过度活化起着重要作用。其机制涉及PMN与肺血管内皮细胞间的粘附反应、PMN的效应反应，如呼吸爆发、脱颗粒、释放炎性细胞因子、凋亡抑制、脂质介质释放等多个方面。     

全身炎性反应综合征中性粒细胞凋亡信号转导机制异常的研究进展

全身炎性反应综合征(SIRS)是多种疾病发展至多器官功能不全综合征(MODS)的前期表现,它的发生与中性粒细胞(PMN)凋亡延迟或障碍有关。PMN凋亡后被完整地吞噬而不释放细胞内容物,从而可以减少PMN介导的机体炎症损害,PMN的凋亡过程影响着SIRS的发展和转归。深入探讨PMN凋亡机制及SIRS时PMN凋亡的延迟机制,适度地调控PMN胞内凋亡信号或改变某些细胞信号的转导途径,对适当控制炎症反应,避免炎症的加重和迁延具有重要意义。     

中度低温对急性胰腺炎大鼠肺中性粒细胞浸润的影响

急性胰腺炎时炎症介质的过度释放是胰腺及胰外器官损伤的重要原因之一,而激活的中性粒细胞(PMN)在肺脏聚集,并释放蛋白酶和氧自由基是急性胰腺炎诱发急性肺损伤的主要发病机制之一。PMN从微血管迁移到组织间隙的过程,包括了PMN的贴壁、激活、粘附和移行等一系列细胞间反应,细胞因子和粘附因子在这个过程中起着重要的作用。有研究显示,低温能够抑制PMN浸润,抑制诸多炎症介质的基因表达和释放。但中度低温对急性胰腺炎的影响尚无定论。本研究拟观察中度低温对急性胰腺炎大鼠肺组织PMN浸润的影响及作用机制,为临床研究提供依据。     

靶控输注异丙酚对心脏瓣膜置换术患者静脉血中性粒细胞NF-κB表达的影响

心脏瓣膜置换术因手术创伤大,体外循环(CPB)等因素所致的术后患者全身炎症反应(SIR)是心脏外科中常见的临床问题。随着临床研究和基础实验的研究进展,静脉麻醉药异丙酚抗氧化、清除自由基的作用已有共识。近年来发现异丙酚还具有抑制中性粒细胞(PMN)功能的作用,其可作用于 PMN参与炎性反应的多个环节,并具有抗炎性反应效应。异丙酚能否通过基因调控蛋白来缩短过度延长的PMN的存活时间,减轻炎性介质的释放,减少全身炎性反应综合征 (SIRS)等术后并发症的发生有待进一步研究。本研究旨在观察靶控输注异丙酚对心脏瓣膜置换术患者静脉血(PMN) 核转录因子κB(NF-κB)表达及PMN相对数的影响,为临床应用提供参考。     

1，6—二磷酸果糖对体外循环期间中性粒细胞的影响

目的　研究体外循环下 1,6 二磷酸果糖 (FDP)对中性粒细胞 (PMNs)活化、释放的影响。方法　 2 0例先心病矫正术患者随机分成使用FDP( 2 2 0mg/kg)的观察组 (n =10 )和对照组 (n =10 ) ,动态观察中性粒细胞化学发光 (PMN CL)值、中性粒细胞内髓过氧化物酶 (MPO)及弹性蛋白酶(ELA)活性。结果　 ( 1)与阻断主动脉时对比 ,两组各时点PMN CL值均明显升高 (P <0 0 5、P <0 0 1或P <0 0 0 1) ,PMN MPO及ELA活性降低 (P <0 0 5或P <0 0 1) ,化学发光最高值、MPO及ELA活性最低值出现在主动脉开放后 (再灌注 ) 4 5分钟。 ( 2 )与对照组相比 ,在主动脉阻断 3 0分钟、主动脉开放后 (再灌注 ) 4 5分钟及 90分钟 ,观察组PMN CL值降低 ,PMN MPO及ELA活性升高 (P<0 0 5或P <0 0 1)。结论　 ( 1)体外循环时PMNs活化并释放多种活性物质 ,且主要发生于主动脉开放后 (再灌注 )早期。 ( 2 )FDP抑制PMNs的活化 ,减轻了PMNs的释放反应。     

集落刺激因子与中性粒细胞的凋亡

中性粒细胞(PMN)是炎症反应中的重要效应细胞。PMN可吞噬和杀死异物,也能诱发、放大炎症反应,所以维持一定数量的PMN十分重要。凋亡是维持PMN数目稳定的主要机制。集落刺激因子能抑制PMN的凋亡,在全身炎症反应的发生和发展中起着重要作用。     

中性粒细胞凋亡调控在炎症治疗中的潜在作用

中性粒细胞即多形核白细胞(PMN)是体内重要的炎症细胞,PMN凋亡是其介导的炎症反应终止的最主要步骤。在炎症控制与治疗中,明确PMN凋亡在全身性炎症反应中的作用及其相关影响因素十分必要,有利于为调节机体炎症反应开辟一条新途径。     

炎症反应中性粒细胞凋亡延迟机制研究进展

凋亡的PMN被巨噬细胞吞噬可限制PMN介导的机体损害，PMN凋亡的进程影响着炎症的发展和转归。近来，PMN受体超家族，促／抗凋亡蛋白以及分裂原激活的蛋白激酶家族(MAPKs)在炎症反应PMN凋亡延迟中的作用引起人们的广泛关注。本文阐述了PMN在炎症反应中凋亡延迟机制新进展，希望通过干扰PMN凋亡进程找到一种新的炎症治疗方法。     

烟雾吸入伤血清对中性粒细胞粘附及迁移作用的体外研究

目的通过鼠烟雾吸入伤血清体外刺激培养内皮细胞和中性粒细胞(PMN),了解PMN粘附与迁移变化,以及抗CD11a、抗CD11b和抗ICAM-1对PMN粘附与迁移的影响,探讨粘附因子在烟雾吸入性损伤中的作用。方法在体外实验中用荧光标记PMN,测定PMN与烟雾吸入性损伤血清刺激的内皮细胞的粘附率,在5μm滤膜上培养内皮细胞测定PMN迁移量,并采用抗体阻断技术,测定了粘附因子CD11a、CD11b和ICAM-1在PMN粘附和迁移中的作用。结果内皮细胞在此血清中培养12～24小时,PMN粘附率是正常时的3倍多,在此血清中培养24小时时PMN迁移量也增至2倍多,表明吸入伤血清能促进PMN与内皮细胞粘附和PMN通过毛细血管内皮向血管外迁移;PMN迁移量与粘附率呈显著正相关(r=0.975,P<0.01)。PMN和内皮细胞粘附因子抗体(抗CD11a、抗CD11b和抗ICAM-1)能减少PMN与内皮细胞粘附率(44％、55％和51％)和PMN迁移量(39％、65％和58％)。结论烟雾吸入伤血清能增加PMN的粘附和迁移,其可能是PMN浸润的病理基础。进一步研究证明,粘附因子CD11a、CD11b和ICAM-1的增加在PMN浸润过程中起重要作用,而且浸润的PMN释放氧自由基和蛋白酶能导致进一步的肺组织损害。     

严重烧伤早期大鼠中性粒细胞、巨噬细胞凋亡实验研究

目的探讨严重烧伤后中性粒细胞(PMN)凋亡及烧伤血清刺激后PMN、巨噬细胞(Mφ)凋亡,以及巨噬细胞吞噬凋亡PMN的变化.方法选用Ⅲ度30%TBSA烧伤大鼠模型,收集伤后0、6、12、24hPMN,分离伤后24h烧伤血清,应用流式细胞技术检测PMN凋亡百分率;同时收集大鼠腹腔巨噬细胞,检测烧伤血清对Mφ凋亡变化的影响及烧伤后24h大鼠腹腔Mφ对凋亡PMN吞噬能力.结果伤后大鼠PMN凋亡百分率明显降低,伤后6、12、24h各时相点无显著差异.烧伤大鼠血清刺激24h后,PMN凋亡百分率为(15.4±1.2)%,较正常大鼠血清刺激后(50.6±3.9)%显著降低;而Mφ凋亡百分率为(23.2±2.1)%,较正常大鼠血清刺激后(¨.5±1.6)%增多;严重烧伤后大鼠腹腔Mφ对凋亡PMN吞噬能力由(35.0±2.6)%降至(21.8±2.1)%.结论严重烧伤后及在烧伤血清刺激下大鼠PMN凋亡延迟,Mφ吞噬凋亡PMN能力降低,可能凋亡的PMN被Mφ吞噬不完全,最终坏死,释放毒性内容物,是引发SIRS的重要因素之一.     

不同氧合器对体外循环心脏手术患儿中性粒细胞凋亡的影响

目的 研究小儿体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)中不同氧合器对中性粒细胞(PMN)凋亡的影响,为减轻体外循环伞身炎症反应提供新的思路.方法 将60例室间隔缺损患儿随机分为两组(n=30):西京-90鼓泡式氧合器组(B组)和希健-Ⅱ膜式氧合器组(M组).分别于CPB前、CPB结束时、CPB结束后4、8、24 h 5个时点采取静脉血,以伞血细胞计数仪测定PMN数量,流式细胞仪测定PMN凋亡率和PMN表面黏附分子CD11b表达变化,ELISA法测定血浆弹性蛋白酶浓度.结果 两组患者CPB结束后PMN凋亡率明显降低(P<0.05),PMN数量、CD11b表达、血浆弹性蛋白酶浓度明显升高(P<0.05),在CPB结束时及CPB结束后4、8 h PMN凋亡率M组均高于B组(P<0.05);而PMN数量、CD11b表达、血浆弹性蛋白酶水平B组均高于M组(P<0.05).CPB结束后24 h PMN数量B组高于M组(P<0.05).结论 与西京-90鼓泡氧合器相比,应用希健-Ⅱ膜式氧合器可以减轻CPB对PMN凋亡的抑制,进而减轻全身炎症反应.     

氯胺酮对LPS刺激后人中性粒细胞效应作用影响的实验研究

目的：研究氯胺酮在体外对LPS刺激后人中性粒细胞（PMN）效应作用的影响。方法：采健康人静脉血，分为LPS组，氯胺酮1，2，3组（K1，K2，K3组），各组氯胺酮终浓度分别为0，3，30，300μg/ml，以全血法测定PMN吞噬（NBT吞噬试验，n=8)和呼吸爆发的强度（DHR）标记，流式细胞法，n=5)，以分离纯化后的PMN测定弹性蛋白酶，溶菌酶和β－葡萄糖醛酸酶的释放量（n=9)。结果：氯胺酮可剂量依赖性地抑制LPS刺激后PMN的吞噬，呼吸爆发和几种蛋白水解酶的释放，其中抑制PMN呼吸爆发所需的氯胺酮浓度高于抑制吞噬和几种蛋白酶释放所需浓度。结论：氯胺酮抑制LPS刺激后PMN吞噬，呼吸爆发和蛋白水解酶释放的作用。可能有助于减弱LPS刺激后PMN的炎性损伤效应。     

体外循环术中持续吸入一氧化氮对人体多核粒细胞计数和呼吸爆发功能的影响

多核粒细胞(PMN)是人体重要的免疫杀伤细胞,参与人体特异性和非特异性炎症反应,体外循环术中的PMN激活可累及多脏器功能,是引起术后并发症、增加术后死亡率的重要因素之一。有效地调节PMN的功能对减少机体损伤有重要意义[1,2]。本研究拟在了解体外循环心脏手术中持续应用一氧化氮(NO)对病人全血PMN计数和呼吸爆发功能的影响。     

异丙酚对中性粒细胞活性氧生成及细胞内游离Ca~(2 )浓度的影响

目的 :测定异丙酚对中性粒细胞 (PMN)激活后活性氧生成以及细胞内游离Ca2 浓度 ([Ca2 ]i)的影响 ,探讨异丙酚影响PMN呼吸爆发的内在机制。方法 :利用电子自旋共振 (ESR)技术和自旋捕捉法 ,观察异丙酚对PMN呼吸爆发产生氧自由基 (ROS)的抑制作用 ;同时采用钙荧光指示剂 (Fura 2 /AM)负载离体PMN并行双波长模式测定不同浓度异丙酚对静息和激活状态下PMN细胞内 [Ca2 ]i 的影响。结果 :高浓度 (75 μM)异丙酚可使静息状态下PMN细胞内 [Ca2 ]i升高 ;在有钙基质中 ,异丙酚对趋化三肽 (fMLP)诱发的PMN胞内 [Ca2 ]i 的升高有明显的降调作用 ,而在无钙基质中则不明显。在无钙基质中 ,高浓度 (≥ 5 0 μM )的异丙酚对fMLP诱发PMN呼吸爆发产生ROS有明显的抑制作用 ;而存在胞外钙浓度时 ,2 5 μM异丙酚的抑制程度更为明显。结论 :异丙酚可通过作用于胞外钙内流和胞内储存钙释放影响静息及激活状态下PMN胞内 [Ca2 ]i;异丙酚在有钙基质中对PMN呼吸爆发产生ROS的抑制作用更为明显 ,提示异丙酚影响PMN胞内 [Ca2 ]i,特别是对胞外钙内流的抑制作用 ,可能是其抑制PMN呼吸爆发的内在机制之一。     

全身炎症反应综合征时中性粒细胞凋亡表达调节障碍

多核中性粒细胞(PMN)在宿主早期对抗入侵的感染中起中心作用,PMN介导的炎症反应是通过其凋亡过程而中止的。全身炎症反应综合征(SIRS)是一种伴有高并发症率和死亡率的持续和逾常炎症状态。已知在烧伤患者中PMN存活延长是由于凋亡延迟表达的缘故,为了解SIRS是否也存在同样现象,遂进行了临床研究。选自ICU的16例SIRS患者、7例拟行择期主动脉瘤切除术患者(AAA,供作无感染的应激性对照)和8名健康志愿者(供作正常对照),     

丙泊酚麻醉对胆管手术患者中性粒细胞凋亡及白细胞介素-10的影响

目的探讨丙泊酚麻醉对胆管手术患者围术期外周血中性粒细胞(PMN)凋亡及白细胞介素-10(IL-10)的影响。方法ASAⅠ~Ⅱ级择期行胆管手术的非肿瘤患者43例,随机分为丙泊酚麻醉组(P组,n=22)及安氟醚麻醉组(E组,n=21),另选择健康成年人作健康对照组(C组,n=16)。分别于术前(T1)、手术开始即刻(T2)、手术开始后3 h(T3)、24 h(T4)和72 h(T5)采集外周静脉血5 ml,检测PMN凋亡及IL-10的水平。结果P组和E组T1时PMN凋亡率明显低于C组;与E组相比,P组分别在T3、T4时PMN凋亡率及IL-10的水平明显升高(P<0.01)。结论丙泊酚麻醉与安氟醚麻醉相比,具有明显地减轻手术创伤后PMN凋亡的延迟作用,可能与丙泊酚促进手术创伤后IL-10的释放有关。     

激活的中性粒细胞在体外通过蛋白酶引起肝细胞损害

脓毒症和创伤引起肝功能衰竭的机理尚不十分清楚,对中性粒细胞在脓毒症中引起肝功能改变的研究较少。中性粒细胞在机体防御系统中具有很多重要作用,它们能释放很多蛋白分解酶和氧自由基可能引起脏器功能异常。作者应用中性粒细胞(PMN)和肝细胞(HC)混合培养来研究PMN在脓毒症引起肝细胞损害的机理,实验方法如下:     

集落刺激因子与中性粒细胞的凋亡

中性粒细胞（PMN）是炎症反应中的重要效应细胞。PMN可吞噬和杀死异物，也能诱发、放大炎症反应，所以维持一定数量的PMN十分重要。凋亡是维持PMN数目稳定的主要机制。集落刺激因子能抑制PMN的凋亡，在全身炎症反应的发生和发展中起着重要作用。     

前列腺素E_1防治大鼠急性坏死性胰腺炎的作用及机理

研究前列腺素E_1防治大鼠急性坏死性胰腺炎的作用及其机理。方法:向大鼠胰管内注射5％牛磺胆酸钠溶液制成急性坏死性胰腺炎(ANP)模型。结果:ANP时,胰腺毛细血管通透性(PCP)明显增高,胰腺组织中性粒细胞过氧化酶(MPO)活性及脂质过氧化物(LPO)水平明显增高。病理示组织内大量PMN浸润、片状出血、坏死。PGE_1使PCP明显下降,MPO、LPO显著降低,动物存活明显改善结论:PGE_1通过抑制中性粒细胞(PMN)活化减少氧自由基(OFR)释放,减轻血管内皮细胞及胰腺组织损伤。