原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨葡萄籽提取物原花青素对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响和机制。方法体外培养的SKOV3细胞与25、50、100、200、400μg/ml的葡萄籽提取物原花青素共孵育,分别在24、48、72h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞和TUNEL分析细胞凋亡,RT-PCR检测survivin在mRNA的表达情况,Western blot检测SKOV3细胞survivin在蛋白水平的表达。结果不同浓度（25、50、100、200、400μg/ml）原花青素对SKOV3细胞作用48h的细胞增殖抑制率分别为48.67%、53.85%、67.03%、73.78%、77.39%。流式细胞和TUNEL检测经25μg/ml原花青素处理24、48h后SKOV3细胞凋亡率分别为31.98%、45.78%。葡萄籽原花青素还可以明显降低survivin的mRNA和蛋白水平的表达。这些作用均随原花青素浓度和作用时间的延长而增强。结论原花青素可能通过降低survivin的表达,在体外抑制SKOV3细胞增殖,并促进其凋亡。     

葡萄籽提取物诱导人卵巢癌SKOV3细胞凋亡及其机制的探讨

目的:探讨葡萄籽提取物(Grapee seed extract,CSE)对卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响及其机制.方法:体外培养的SKOV3细胞与25、50、100、200、400 μg/ml的GSE,共孵育,分别在24、48和72 h时观察细胞形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪和Tunel分析细胞凋亡,western-blot检测SKOV3细胞Caspase-3在蛋白水平的表达.结果:不同浓度(25、50、100、200、400μg/ml)GSE SKOV3细胞作用48 h的细胞增殖抑制率分别为48.67%、53.85%、67.03%、73.78%和77.39%.流式细胞和TUNEL检测经25 μg/mlGSE处理24、48h后,SKOV3细胞凋亡率分别为:31.98%、45.78%.GSE还可以明显增强Caspase-3蛋白的表达水平.这些作用均随GSE浓度和作用时间的延长而增强.结论:GSE可在体外抑制SKOV3细胞增殖,诱导其凋亡.其机制可能与激活Caspase途径有关.     

原花青素诱导前列腺癌PC-3细胞凋亡的机制研究

目的：探讨原花青素在体外诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡的机制。方法：体外培养人前列腺癌PC-3细胞株,用100,200,300μg／ml原花青素作用24h。荧光素标记的连接素V（Annexin V—fluoresein isothiocyanate,Annexin V—FITC）和碘化吡啶（propidium iodide,PI）双染检测原花青素对PC-3细胞凋亡的影响,采用流式细胞术检测以不同浓度原花青素作用后PC-3细胞线粒体膜电位（△ψm）的变化。结果：100μg／ml原花青素作用细胞24h,5．64％的细胞出现早期凋亡,84．7％的P03细胞呈现线粒体膜电位降低;300vg／ml原花青素组P＆3细胞凋亡率和坏死率分别为44．86％、50．81％。结论：源花青素可在体外诱导PC-3细胞凋亡,其机制与降低线粒体膜电位有关。     

葡萄皮渣中原花青素对HL-60细胞作用的研究

目的探讨原花青素(GPC)在体外对人白血病细胞(HL-60细胞)增殖抑制及细胞凋亡的诱导作用。方法体外培养HL-60细胞,分别用100、200、300、400、500μg/mL GPC作用。MTT法检测不同浓度GPC作用24、48、72h后HL-60细胞的增殖抑制率,流式细胞术检测24h后HL-60细胞的凋亡情况。结果随着GPC药物浓度的增加,其对HL-60细胞的增殖抑制率逐渐增高,呈时间-剂量依赖效应关系;GPC在低浓度(200μg/mL)时可引起少量的细胞发生凋亡,随着GPC浓度的增加,细胞凋亡率也在不断增加,呈明显的量效关系。结论 GPC可在体外抑制HL-60细胞的增殖,并诱导HL-60细胞凋亡。     

槐耳浸膏对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨槐耳浸膏对骨髓瘤细胞株PRMI8226细胞增殖和凋亡的影响。方法取PRMI8226细胞与1.5mg/ml、3mg/ml、5mg/ml的不同浓度槐耳浸膏在体外孵育,分别在24h、36h、和48h时用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,并用流式细胞术（FCM）检测早期细胞凋亡情况。结果槐耳浸膏可抑制PRMI8226细胞增殖,不同浓度的槐耳浸膏对多发性骨髓瘤细胞增殖的抑制效果不同,以5mg/ml抑制增殖效果最好。且浓度为5.0mg/ml的金克诱导多发性骨髓瘤细胞48h抑制率达到高峰84%。FCM检测表明槐耳浸膏可诱导PRMI8226细胞早期凋亡,用5.0mg/ml槐耳浸膏处理48h后,可引起25.9%的PRMI8226细胞凋亡。这两种作用均随槐耳浸膏浓度和作用时间的延长而增强。结论槐耳浸膏可在体外抑制PRMI8226细胞增殖,并促进其凋亡。     

斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株毒性作用的研究

目的:探讨斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株的毒性作用. 方法:采用5,10,20 μg/ml斑蝥酸钠作用于EJ细胞株2,4,24,48 h后,观察细胞形态改变,MTT法检测药物对细胞生长的影响,流式细胞仪检测细胞增殖周期的改变以及细胞凋亡情况. 结果:5 μg/ml斑蝥酸钠作用2,4 h后细胞无明显改变,10,20 μg/ml作用2,4 h后细胞出现水肿、空泡、核固缩以及细胞溶解现象;药物作用细胞后其抑制率显著增高(P<0.05);细胞周期中G2/M期延长,细胞凋亡明显增加(P<0.05). 结论:斑蝥酸钠对膀胱癌EJ细胞株有明显的毒性作用,通过诱导细胞凋亡的途径抑制细胞生长.     

西红花苷对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞生长周期的影响及机制研究

目的研究西红花苷对子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞生长周期及凋亡的影响,从细胞水平初步探讨西红花苷在子宫腺肌病中的治疗作用。方法 2018年1～6月收集江西省妇幼保健院术后病理确诊为子宫腺肌病标本,不同浓度西红花苷(0、200、300、400、500μg/m L)作用于异位子宫内膜间质细胞后,分别在培养0、24、48、72、96 h取出,CCK-8法检测细胞增殖; Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测细胞凋亡;PI单染检测细胞周期。结果 CCK-8法检测西红花苷浓度分别为200、300、400、500μg/mL作用细胞72 h后,细胞抑制率分别为(7.60±0.03)%、(11.50±0.10)%、(18.26±0.14)%、(20.62±0.09)%,浓度为400μg/mL、500μg/mL组增殖抑制率明显高于浓度为200μg/mL组,结果显示不同浓度西红花苷对子宫腺肌病异位内膜细胞增殖有明显抑制作用,与药物浓度及时间呈正比,随着西红花苷浓度的升高和作用时间的延长,对细胞增殖的抑制率也越高;不同浓度西红花苷作用细胞48 h后,流式细胞术检测到子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞凋亡率随浓度的增加而增大,细胞周期G0/G1期比例增多。结论西红花苷在体外能显著抑制子宫腺肌病异位子宫内膜间质细胞增殖,诱导凋亡,使细胞周期阻滞在G0/G1期,这些结果在细胞水平上显示西红花苷可用于临床治疗子宫腺肌病。     

奈达铂联合β-榄香烯对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨奈达铂（nedaplatin,NDP）联合β-榄香烯（β-elemene）对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响. 方法 体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别将奈达铂（浓度为7.5,15,30,45,60 μg/ml）,β-榄香烯（浓度为25,50,100,150,200 μg/ml）,单独作用于HeLa细胞后24h、48h用MTT比色法检测细胞的增殖情况,并选取合适的药物浓度（奈达铂15μg/ml,β-榄香烯150 μg/ml）,进行联合用药,加药24 h、48 h后用MTT法检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测24 h细胞的凋亡率.结果 ①MTT法显示不同浓度β-榄香烯作用HeLa细胞24 h、48 h后,其增殖抑制率均明显高于正常对照组（P＜0.05）.奈达铂组除24h时7.5 μg/ml和15 μg/ml无显著差异外,其余各组增殖抑制率均明显高于相应正常对照组（P＜0.05）.②联合用药（奈达铂15 μg/ml,β-榄香烯150 μg/ml）时,对HeLa细胞的抑制作用显著高于单独用药（P＜0.01）. 结论 奈达铂、β-榄香烯单独或二者联合作用均能抑制HeLa细胞的增殖,且联合应用的作用显著高于单独用药,可协同促进HeLa细胞的凋亡.     

槐耳浸膏对骨髓瘤细胞株PRMI8226细胞的影响

目的：探讨槐耳浸膏（金克）对骨髓瘤细胞细胞株PRMI8226细胞增殖和凋亡的影响。方法：体外培养PRMI8226细胞与1.5、3、5mg/ml的不同浓度槐耳浸膏共孵育,分别在24、36和72小时时,用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术（FCM）检测早期细胞凋亡情况。结果：槐耳浸膏可抑制PRMI8226细胞细胞增殖,不同浓度的槐耳浸膏对多发性骨髓瘤细胞增殖的抑制效果不同,以5mg/ml时抑制增殖效果最好。且浓度为5.0mg/ml的槐耳浸膏诱导多发性骨髓瘤细胞48小时抑制率达到高峰84%。FCM检测表明,槐耳浸膏可诱导PRMI8226细胞早期凋亡,浓度为5.0mg/ml槐耳浸膏对PRMI8226细胞处理48小时引起25.9%的凋亡率。这两种作用均随槐耳浸膏浓度和作用时间的延长而增强。结论：槐耳浸膏可在体外抑制PRMI8226细胞增殖,并促进其凋亡。     

蜂毒素对肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡的影响

目的 :了解蜂毒素诱导肝癌细胞凋亡的作用。方法 :肝癌细胞BEL 74 0 2经不同浓度的蜂毒素处理后 ,采用台盼蓝排染法测定细胞增殖的抑制率 ,流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡及Fas蛋白的表达。结果 :16 μg/ml蜂毒素作用肝癌细胞系BEL 74 0 2 ,12h抑制率为 (78.13±6 .15 ) % ,2 4h抑制率为 10 0 % ;4 ,8μg/ml蜂毒素对细胞的生长也有抑制作用 ,并且可诱导细胞凋亡的产生 ,能够增加细胞Fas蛋白的表达。结论 :蜂毒素高剂量有杀伤肿瘤细胞作用 ,低剂量可诱导细胞凋亡     

Effects of blocking androgen receptor expression with specific hammerhead ribozyme on in vitro growth of prostate cancer cell line

Aseriesofstudieshaveindicatedthatandrogenreceptor(AR) playsakeyroleinthedevelopmentofprostatecancerbymediatingandrogenactivityontargetcells 1Ithasbeen proposedthatdecreasingandrogenandARlevelscouldbeaneffectivetherapeuticstrategyforprostatecancer 2 　InthisstudyaribozymeapproachtoselectivedegradationofARmRNAwasusedtoexploretheeffectsofblockingARexpressiononinvitrogrowthofhumanprostatecancercells METHODSRibozymedesignandsynthesisUsingtheMFOLDcomputerprogramanARspecificribozyme(RZ)was…     

RNAi沉默PSA基因对人前列腺癌细胞系LNCaP生长的影响

目的研究运用RNA干扰技术沉默PSA基因后对人前列腺癌细胞系LNCaP细胞产生的影响。方法构建针对PSA基因的小分子干扰RNA(PSA-siRNA),将前列腺癌LNCaP系进行分组,设PSA-siRNA转染组、阴性对照组、转染液组(只由转染试剂进行转染实验)和对照组(不添加任何转染试剂)进行实验。应用蛋白印迹法检测PSA的变化,并通过MTT法和流式细胞技术检测LNCaP细胞的调亡和细胞增殖方面的变化。结果蛋白印迹法检测结果显示,与阴性对照组、转染液和对照组比较,应用PSA-siRNA处理48h后的LNCaP细胞株,PSA的表达明显降低,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。MTT法和流式细胞仪检测示,转染组的细胞生长抑制率为27.5%,且观察到更强的细胞调亡(19.3%)。结论运用RNA干扰技术沉默PSA基因可以有效抑制LNCaP细胞中PSA基因的表达,进而抑制LNCaP细胞的生长与增殖,并可有效诱导细胞调亡。     

雄激素应答元件陷阱DNA诱导前列腺癌细胞LNCaP凋亡

目的：研究雄激素应答元件陷阱DNA(ARE decoy DNA)对前列腺癌细胞LNCaP生长活性和凋亡的影响。方法：人工合成双链硫代ARE decoy DNA并提取LNCaP细胞核蛋白．应用电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)检测ARE decoy DNA与雄激素受体的特异结合。2μg／ml ARE decoy DNA转染LNCaP细胞。48h后相差显微镜观察细胞超微结构变化：MTT比色法检测细胞生长活性;DNA Ladder检测细胞凋亡;流式细胞技术(FCM)测定细胞凋亡率。结果：EMSA显示．ARE decoy DNA能特异与核蛋白中雄激素受体结合。LNCaP细胞转染ARE decoy DNA后．镜下可见部分细胞出现凋亡形态学的改变,有凋亡小体形成,细胞体外生长受到抑制．DNA Ladder可见明显梯形条带。转染后48h的凋亡率为22．5％。结论：ARE decoy DNA能竞争结合雄激素受体(androgen receptor,AR)。阻断AR的作用而诱导LNCaP细胞凋亡。     

前列腺癌细胞LNCaP中雄激素依赖性和雄激素非依赖性蛋白差异性表达研究

目的评估LNCaP细胞中雄激素依赖性和雄激素非依赖性蛋白质组学特征,探讨前列腺癌的雄激素非依赖性生长的分子机制。方法雄激素敏感性LNCaP细胞在常规细胞培养基中持续培养。在雄激素递减环境中培养雄激素敏感的LNCaP细胞,且培养出了稳定传代的细胞,命名为LNCaP s细胞。检测两种不同的LNCaP细胞生长特性和对雄激素的反应,观察饥饿细胞的形态学变化。通过双相凝胶电泳（2 DE）和基质辅助激光解析电离/飞行时间质谱测量法(MALDI TOF MS)分析前列腺癌 LNCaP细胞的蛋白表达。结果在2 DE LNCaP蛋白谱中,成功鉴定出了222种蛋白质。与LNCaP细胞相比,在LNCaP s细胞中发现150种蛋白表达差异有统计学意义,成功鉴定出75种蛋白质。LNCaP 蛋白谱中发现在LNCaP s 细胞中有26种蛋白表达上调或下调,且其蛋白受生长激素抑素（sms）以及其类似物（smsdx）的影响。鉴定出的蛋白参与多种生理过程,包括应激反应、细胞内信号转导和凋亡。在LNCaP s 细胞中,150种蛋白中7种蛋白表达上调,其余表达下调。蛋白质表达的定性分析显示,LNCaP细胞中有6种蛋白在LNCaP s细胞中无表达。与LNCaP细胞相比,LNCaP s细胞系中未发现新蛋白。结论LNCaP细胞中雄激素依赖性和雄激素非依赖性蛋弊质表达不同,且受sms及smsdx影响,可提供潜在的诊断和预后判断的标记物及药物治疗靶点并充实前列腺癌蛋白库,对基础和临床研究有重要意义。     

六磷酸肌醇对人前列腺癌细胞增殖的抑制作用及其与胰岛素样生长因子结合蛋白-3的关系

目的：研究六磷酸肌醇（IP6）抑制人前列腺癌细胞LNCaP细胞增殖的情况,及该抑制过程与胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）表达水平的关系。方法：将LNCaP细胞分为四组：空白对照组不做任何处理;小分子干扰RNA（siRNA）组使用siRNA技术对LNCaP细胞实施IGFBP-3基因沉默;siRNA+IP6组为接受IP6刺激的IGFBP-3基因沉默的LNCaP细胞;IP6组为接受IP6刺激的普通LNCaP细胞。MTT法计算不同浓度IP6处理后各组细胞的存活率。PI染色结合流式细胞技术分析各组细胞的细胞周期,AnnexinV-FITC/PI双染结合流式细胞技术分析IP6对LNCaP细胞的凋亡诱导情况。荧光实时定量PCR技术和蛋白质印迹法分析各组细胞内IGFBP-3和Bcl-2的表达变化。结果：1.5 mmol的IP6可以引起LNCaP细胞的增殖抑制,诱导G₂期阻滞,并可以诱导细胞凋亡。IP6刺激细胞后可以引起IGFBP-3的表达增高,Bcl-2的表达降低,而IGFBP-3基因沉默可以减轻IP6对LNCaP细胞的增殖抑制作用,同时抑制Bcl-2的表达降低。结论：IP6可引起LNCaP细胞的增殖抑制,其机制可能与IGFBP-3的高表达有关,IGFBP-3可能通过影响Bcl-2的表达发挥作用。     

非那雄胺抑制前列腺癌细胞LNCaP增殖的基因芯片观察

目的 探讨非那雄胺抑制前列腺癌细胞增殖的分子机制,筛选特异性的治疗靶点。方法 利用基因芯片技术检测非那雄胺作用前列腺癌细胞株前后LNCaP差异表达的基因。结果 非那雄胺能够显著抑制前列腺癌细胞株LNCaP的增殖,在96条基因中受非那雄胺作用有差异表达的基因有29条,其中表达上调的基因有11条,下调的基因有18条。结论 非那雄胺抑制LNCaP增殖可能涉及多基因、多通路的共同作用。     

鞘脂激活肽真核表达载体的构建及其对前列腺癌细胞增殖的影响

目的：构建含有鞘脂激活蛋白原神经营养序列短肽－鞘脂激活肽NP（neurotrophic peptide, NP）的真核表达载体以及NP与TAT的融合蛋白真核表达载体(TAT NP)，探讨NP在前列腺癌细胞中的作用。方法：根据NP和TAT的氨基酸序列合成其DNA序列，利用基因克隆技术构建含有TAT和NP读码框架的真核表达载体pcDNA-TAT-NP和pcDNA-NP。在前列腺癌PC3、LNCaP细胞中转染上述载体后通过RT-PCR、MTT和流式细胞术，分别检测TAT-NP、NP的mRNA的表达，NP对前列腺癌细胞的增殖情况以及对细胞周期的影响。结果：经测序鉴定，成功构建pcDNA-TAT-NP和pcDNA-NP真核表达载体。RT-PCR结果显示，TAT-NP、NP能够在前列腺癌细胞中表达。MTT结果表明，TAT-NP、NP均对前列腺癌细胞增殖具有促进作用。流式细胞结果显示，TAT-NP、NP具有促进细胞进入S和G₂/M期的作用。结论：外源表达的鞘脂激活肽NP能够促进前列腺癌细胞的增殖，并能影响细胞周期各时相的变化。     

环巴胺对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨环巴胺（Cyclopamine）对人前列腺癌LNCaP细胞增殖和凋亡的影响.方法 不同浓度环巴胺（1、5、10、15μmol·L^-1）干预LNCaP细胞,分别在不同作用时间（24、48、72h）用MTT法检测环巴胺对LNCaP细胞增殖的抑制,Hoechst染色观察细胞凋亡形态的变化,流式细胞术检测细胞凋亡率的变化.结果 环巴胺5、10、15μmol·L^-1浓度组对LNCaP细胞增殖有显著抑制作用,与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.01）.随着浓度的增大对细胞增殖的抑制作用显著增强.10μmol·L^-1组于48 h达到半数抑制量（IC50）.环巴胺10μmol·L^-1组24、48、72h凋亡率分别为37.21％、57.38％、57.98％,15μmol·L^-1组凋亡率分别为21.16％、71.31％、72.90％,与对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）.随着浓度的增大细胞凋亡率逐渐增大.细胞凋亡形态的改变随着环巴胺浓度增大和作用时间的延长而增强.结论 环巴胺能够明显抑制LNCaP细胞的增殖,诱导细胞凋亡.