雷公藤对哮喘的治疗作用及对痰液中嗜酸细胞IL4和IL-5mRNA表达的影响

目的 探讨雷公藤对哮喘的治疗作用及对痰液中嗜酸细胞(EOS)IL-4和IL-5mRNA表达的影响.方法 12例哮喘患者的诱导痰标本,与雷公藤内酯醇(10-7 mol/L)共同培养48小时设为雷公藤组(12例),单独培养48小时设为空白组(12例),健康自愿者痰液为正常对照组.采用斑点分子杂交检测EOS IL-4、IL-5mRNA表达.结果 哮喘患者痰液中EOS浸润密度与正常对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01);雷公藤组与空白组EOS IL-4、IL-5mRNA表达水平比较,差异有显著性意义(P<0.01),空白组与正常对照组EOS IL-4、IL-5mRNA表达水平比较,差异有显著性意义(P<0.01);雷公藤组与正常对照组EOS IL-4、IL-5mRNA表达水平比较,差异无显著性意义(P>0.01).结论 IL-4、IL-5mRNA表达增加可能是导致哮喘嗜酸气道炎症的原因,雷公藤内酯醇能抑制IL-4、IL-5mRNA表达,可能为哮喘抗炎治疗的机制之一.     

诱导痰嗜酸细胞及嗜酸细胞阳离子蛋白在评估哮喘气道炎症中的应用

目的 :观察哮喘发作期患者诱导痰中嗜酸细胞 (EOS)及嗜酸细胞阳离子蛋白 (ECP)的改变。方法 :4 2例哮喘发作期及 2 4例正常健康对照组 ,分别检测其诱导痰中EOS及ECP同步观察肺功能 (FEV1)的改变。结果 :哮喘患者吸入激素治疗 7～ 10天后 ,诱导痰中EOS及ECP分别由 33 4± 7 4 0及 86 78± 6 4 4 0降至 2 2 4 0± 5 3及 2 0 16± 9 84 ,FEV1则由 1 15± 0 98升至 1 78± 0 5 3,差异显著 ,不同病情程度哮喘患者的诱导痰EOS及ECP亦有一定差异。结论 :诱导痰EOS及ECP可用于评估哮喘气道炎症的病情及指导合理用药。     

支气管哮喘患者诱导痰EOS ECP及血清IL-13水平检测及其意义

目的 探讨哮喘患者急性期诱导痰液中嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)及血清白细胞介素-13(IL-13)的水平变化及在哮喘发病机制中的作用.方法选择55例支气管哮喘急性期患者和20例健康对照者的痰液,行EOS计数并测定ECP水平.同时采用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-13的水平,并对结果进行统计学处理.结果 支气管哮喘急性期患者诱导痰液中EOS、ECP分别与血清IL-13呈正相关,且诱导痰液中EOS、ECP及血清IL-13的水平均明显高于健康对照组(P<0.05).结论 嗜酸性粒细胞是导致哮喘的主要炎性细胞,而IL-13又是嗜酸性粒细胞激动剂并参与支气管哮喘发病的病理生理过程,诱导痰液EOS、ECP和血清IL-13检测是哮喘诊断及病情转归的一个重要实验室指标.     

支气管哮喘患者诱导痰EOS ECP及血清IL-13水平检测及其意义

目的探讨哮喘患者急性期诱导痰液中嗜酸性粒细胞(EOS)、嗜酸性细胞阳离子蛋白(ECP)及血清白细胞介素-13(IL-13)的水平变化及在哮喘发病机制中的作用。方法选择55例支气管哮喘急性期患者和20例健康对照者的痰液,行EOS计数并测定ECP水平。同时采用固相酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中IL-13的水平,并对结果进行统计学处理。结果支气管哮喘急性期患者诱导痰液中EOS、ECP分别与血清IL-13呈正相关,且诱导痰液中EOS、ECP及血清IL-13的水平均明显高于健康对照组(P<0.05)。结论嗜酸性粒细胞是导致哮喘的主要炎性细胞,而IL-13又是嗜酸性粒细胞激动剂并参与支气管哮喘发病的病理生理过程,诱导痰液EOS、ECP和血清IL-13检测是哮喘诊断及病情转归的一个重要实验室指标。     

哮喘患者血浆IL-17、IL-10水平的测定及临床意义

目的 :探讨哮喘患者血浆IL 17、IL 10的水平及临床意义。方法 :急性发作期哮喘患者共 60例 (重度3 0例 ,中度 3 0例 ) ,正常对照组 3 0例。采用双抗体夹心酶联免疫吸附实验 (ELISA) ,检测其血浆IL 17、IL 10水平。结果 :急性期哮喘患者血浆IL 17值增高 (P =0 0 0 6) ,中、重度哮喘组与对照组比较差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ;血浆IL 10值明显降低 (P =0 0 0 3 ) ,中、重度哮喘组与对照组比较差异均有显著性 (P <0 0 5 ) ;相关性分析表明IL 17与IL 10之间无相关性 ,而且与血涂片中的嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞之间均无明显相关性 ,嗜中性粒细胞和淋巴细胞之间存在显著负相关。结论 :IL 17、IL 10参与哮喘的慢性气道炎症过程。     

哮喘豚鼠支气管肺组织IL-5及GM-CSFmRNA表达

目的 :探讨白介素 5 (IL 5 )及粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)在哮喘豚鼠支气管肺组织中的表达。方法 :实验分为哮喘组和对照组 ,每组各 15只豚鼠。采用原位杂交方法检测两组豚鼠支气管肺组织的IL 5和GM CSFmRNA表达。结果 :哮喘组支气管肺组织IL 5和GM CSFmRNA表达强度 (细胞数 /HP)分别为 36 0 0± 8 0 0和 32 0 0± 9 0 0 ,对照组分别为 14 0 0± 5 0 0和 18 0 0± 7 0 0 ,哮喘组IL 5和GM CSFmRNA表达强度显著高于对照组 (P <0 0 1)。哮喘组肺组织嗜酸细胞 (EOS)浸润密度 (细胞数 /HP)为 48 0 0± 2 6 0 0 ,对照组为 19 0 0± 6 0 0 ,哮喘组显著高于对照组 (P <0 0 1)。结论 :哮喘豚鼠支气管肺组织IL 5和GM CSFmRNA高表达可能在气道炎症中发挥重要作用。     

诱导痰CC16mRNA检测在评价孟鲁斯特治疗哮喘气道炎症中的作用

目的 探讨CC16mRNA检测在评价孟鲁斯特治疗哮喘气道炎症中的作用.方法 轻、中度非急性发作持续性哮喘患者22例,采用计算机随机分组法将患者分为对照组13例和试验组9例.对照组吸入糖皮质激素(ICS)、长效β2受体激动剂(LABA)等治疗;试验组在此治疗基础上,每日口服孟鲁斯特10 mg,观察两组患者诱导痰中的细胞分类、CC16蛋白以及CC16mRNA的变化情况.结果 22例完成了6周的治疗和随访.治疗后试验组和对照组诱导痰中CC16mRNA含量均较治疗前明显增加(P<0.01),试验组CC16mRNA增加较对照组更加显著(P<0.01);哮喘各组诱导痰中CC16mRNA与嗜酸性粒细胞(EOS)计数呈负相关(轻度组r=-0.69,P<0.05;中度组r=-0.72,P<0.05).结论 口服孟鲁斯特可增加诱导痰CC16mRNA表达,诱导痰CC16mRNA测定有助于监测轻、中度持续性哮喘患者嗜酸性粒细胞性气道炎症.     

过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后外周血IL-4及IL-5活性和IgE的变化

目的 :观察过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后外周血IL 4及IL 5活性和IgE的变化。方法 :分别测定发作期及缓解期过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后外周血IL 4及IL 5活性、IgE和肺功能的变化。结果 :(1)发作期过敏性哮喘患者外周血单个核细胞 (PBMC)培养上清液IL 5活性及IL 4明显高于缓解期过敏性哮喘患者和正常健康者 (P均 <0 0 1) ;(2 )发作期及缓解期过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗前后外周血IL 4及IL 5活性和肺功能 (FEV1、PEFR)有显著性或非常显著性统计学意义 (P <0 0 5或P <0 0 1) ;(3 )IgE浓度比治疗前明显降低 (P <0 0 1) ,与正常人无明显差异 (P >0 0 5)。结论 :过敏性哮喘患者新型免疫疗法治疗后外周血IL 4、IL 5活性明显降低 ,IgE有一定程度下降 ,提示IL 4、IL 5、IgE在支气管哮喘发病机制上起着重要作用     

IL-12／IL-4失衡与支气管哮喘

白介素(几)几一12和几一4对支气管哮喘(哮喘)异常免疫起关键作用。IL一12具有调节Thl／Th2细胞免疫应答作用。哮喘患者由于IL一12缺陷导致1112细胞免疫应答过强；IL一4作为1112细胞因子成员，它通过激活嗜酸性粒细胞(EOS)减少凋亡，促进IgE分泌等机制参与过敏性哮喘和炎症过程。有证据表明这两种关键性免疫细胞调节因子在哮喘患者的肺中产生不平衡，即IL一12的产生减少和IL一4的产生过量。IL一12／IL一4产生失衡是哮喘发病的关键因素之一，如何调整两者的平衡是哮喘治疗的一个方向。     

哮喘患者诱导痰嗜酸细胞趋化因子的改变及其意义

目的探讨嗜酸细胞趋化因子（嗜酸细胞趋化因子）在嗜酸细胞性气道炎症和气流阻塞发生中的作用。方法收集支气管哮喘（A组）急性发作期患者30例和健康对照者（B组）20例，分别给予肺功能检测和痰诱导检查。用酶联免疫吸附法（ELISA）测定诱导痰上清液中嗜酸细胞趋化因子浓度。结果A组诱导痰嗜酸细胞占白细胞百分比（EOS／Leu％）与B组比较，差异有显著性（P〈0．05）；A组嗜酸细胞趋化因子浓度与B组比较，差异有显著性（P〈0．05）。A组EOS／Leu％、嗜酸细胞趋化因子浓度与一秒钟用力呼气容积占预计值百分比（FEV1％）均呈负相关；A组嗜酸细胞趋化因子浓度与EOS／Leu％呈正相关。结论嗜酸细胞趋化因子可能通过对嗜酸细胞（EOS）的选择性趋化作用使其释放一系列炎性介质参与了嗜酸细胞性气道炎症和气流阻塞的发生机制。     

有氧运动训练对大鼠下丘脑、垂体IL-1βmRNA、IL-6mRNA的影响

目的：研究长时间运动对老年机体下丘脑、垂体IL-1、IL-6的基因表达的影响。方法：将大鼠随机分为3组：青年安静组（A组）、老年安静对照组（B组）、老年运动训练组（C组）,运动组大鼠在水中进行90d渐进游泳训练,采用PT-PCR的方法检测各组大鼠下丘脑、垂体IL-1、IL-6的基因表达。结果：在下丘脑老年大鼠与青年鼠相比IL-1mRNA和IL-6mRNA表达量显著升高（P〈0.01）,在垂体水平老年大鼠IL-1βmRNA的水平明显高于青年大鼠（P〈0.01）,而IL-6mRNA变化不显著（P〉0.05）。通过3个月的游泳训练老年大鼠下丘脑IL-6mRNA、垂体IL-1βmRNA水平有所下降（P〈0.01）,下丘脑IL-1βmRNA、垂体IL-6mRNA的表达水平变化不显著（P〉0.05）。结论：随着老化机体脑组织中炎性细胞因子的基因表达水平明显升高,运动可以抑制老年大鼠下丘脑、垂体细胞因子的基因表达水平,降低老年期神经细胞对炎症的反应性,有利于下丘脑-垂体-肾上腺轴的正常作用。     

Treatment of experimental asthma by long-term gene therapy directed against IL-4 and IL-13

The clinical manifestations of allergic asthma are believed to result from a dysregulated, T helper 2 lymphocyte (Th2)-biased response to antigen. Although asthma symptoms can be controlled acutely, there is a need for a therapy that will address the underlying immune dysfunction and provide continuous control of chronic airway inflammation. The Th2-type cytokines, IL-13 and IL-4, have been demonstrated to play a crucial role in asthma pathogenesis and their selective neutralization results in the alleviation of asthmatic symptoms in mouse models. The activity of both of these cytokines can be inhibited by a mutant IL-4 protein, IL-4 receptor antagonist (IL-4RA), and thus, continual IL-4RA therapy might be beneficial in treatment of chronic asthma. To explore the potential utility of long-term gene therapy for the treatment of asthma we used a recombinant adeno-associated virus (AAV) vector to deliver and provide sustained expression of IL-4RA in vivo. We show that AAV-mediated delivery of IL-4RA to the airways of mice reduces airway hyperresponsiveness (AHR) and airway eosinophilia triggered by either IL-13 or IL-4. Furthermore, AAV-delivered IL-4RA, expressed either systemically or in the airways of mice following allergen sensitization, significantly inhibited development of airway eosinophilia and mucus production and reduced the levels of asthma-associated Th2 cytokines and AHR in the experimental mouse model of allergic asthma. Thus, gene therapy can be a potential therapeutic option to treat and control chronic airway inflammation and asthmatic symptoms.     

血必净注射液对卵蛋白致敏小鼠气道MUC5AC及Th1／Th2细胞因子表达的影响

目的研究血必净注射液对卵蛋白（OVA）致敏小鼠气道MUC5AC及Th1/Th2细胞因子表达的影响,探讨干预气道黏液高分泌的机制。方法卵蛋白腹腔注射致敏小鼠,32只小鼠随机分组为：对照组、哮喘组、地塞米松治疗组和血必净治疗组,每组8只,酶联免疫吸附试验（ELISA）检测小鼠肺泡灌洗液（BALF）中IL-4、IFN-γ的水平变化,实时RT-PCR检测小鼠肺组织MUC5AC mRNA表达变化。结果 （1）与对照组小鼠气道MUC5A mRNA表达（0.377±0.021）相比,哮喘组（1.103±0.087）明显增多（P〈0.01）;地塞米松治疗组（0.403±0.038）及血必净治疗组（0.437±0.031）小鼠气道MUC5A mRNA表达较哮喘组明显降低（P〈0.01）;（2）与对照组小鼠BALF表达IL-4[（22.812±1.978）ng/L]及IFN-γ[（101.232±9.664）ng/L]比较,哮喘组BALF表达IL-4[（87.234±6.901）ng/L]水平升高（P〈0.01）,而IFN-γ表达[（47.231±3.887）ng/L]明显降低（P〈0.01）;与哮喘组比较,地塞米松治疗组（[36.289±3.012）ng/L]及血必净治疗组IL-4水平[（38.112±2.761）ng/L]均显著降低（P〈0.01）;结论血必净注射液降低IL-4和MUC5AC的表达,提示在抑制气道黏液高分泌及控制哮喘方面具有意义。     

自拟理肺化瘀方剂治疗支气管哮喘临床疗效分析

目的探讨自拟理肺化瘀方剂治疗支气管哮喘的临床疗效。方法将110例支气管哮喘患者按照随机数字表法分为研究组与对照组,各55例。两组均给予常规对症治疗,研究组在此基础上给予自拟理肺化瘀方剂治疗,观察1个月。比较两组临床疗效,治疗后比较两组患者气道高反应性的发生率。比较两组超氧化物歧化酶、丙二醛、8-异前列腺素、白细胞介素-5、白细胞介素-33水平。采用哮喘控制测试评分评定两组哮喘症状控制情况。结果研究组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05),气道高反应性发生率显著低于对照组(P<0.05)。治疗后两组超氧化物歧化酶水平较治疗前显著升高(P<0.01),丙二醛、8-异前列腺素水平较治疗前显著降低(P<0.01),研究组较对照组变化更显著(P<0.01);两组白细胞介素-5、白细胞介素-33水平均较治疗前显著降低(P<0.01),研究组较对照组下降更显著(P<0.01)。治疗后研究组哮喘控制测试评分显著优于对照组(P<0.05)。结论自拟理肺化瘀方剂治疗支气管哮喘疗效显著,可降低气道高反应性,减轻机体氧化应激损伤和炎症反应,有效控制哮喘。     

哮喘患儿外周血RORC mRNA、IL-17水平及其与气道重塑的关系研究

目的：研究Th17细胞上游调控基因维甲酸相关孤儿核受体C （RORC）mRNA及主要效应分子IL-17在支气管哮喘患儿外周血单个核细胞中的表达变化,并探讨其与哮喘气道重塑的关系。方法收集2010年9月至2012年8月中山大学孙逸仙纪念医院儿科就诊的中重度持续哮喘儿童45例,其中哮喘急性发作期25例,临床缓解期20例,以20名健康儿童为对照组。采用荧光实时定量PCR技术和双抗体夹心ELISA法分别检测PBMC中 RORC mRNA和IL-17的表达;选取其中14例病程较长的临床缓解期患儿,采用高分辨螺旋CT进行胸部检测及支气管壁测量,并与同期IL-17水平进行相关分析。结果哮喘儿童急性发作期外周血PBMC 表达RORC mRNA、IL-17水平均显著高于缓解组和正常对照组;缓解期患儿IL-17水平比对照组明显增高（P＜0．05）,而RORC mRNA表达水平与对照组比较差异无统计学意义（P＞0．05）。中重度哮喘患儿气道壁厚度、气道壁面积均明显增加,且与IL-17水平呈正相关（r 分别为0．78、0．77,P＜0．05）。结论转录因子RORC及IL-17参与儿童哮喘发病,其中IL-17水平升高与儿童哮喘气道重塑密切相关。     

支气管哮喘患儿诱导痰中炎性细胞类型及炎症相关细胞因子的临床价值研究

目的 探讨支气管哮喘患儿诱导痰中炎性细胞类型及炎症相关细胞因子的临床价值.方法 选取支气管哮喘患儿54例(研究组)作为研究对象,根据哮喘发作期严重程度将研究组分为轻度哮喘组、中度哮喘组和重度哮喘组.另选取性别和年龄相当的支气管肺炎(不合并哮喘)患儿42例作为对照组,检测对照组和研究组治疗前、后诱导痰中炎性细胞类型、T淋...     

重组鼠白细胞介素-12腺病毒载体对哮喘小鼠模型IL-4、IFN-γ表达的影响

目的探讨重组鼠白细胞介素-12(IL-12)基因的腺病毒载体(AdCMVIL-12)对小鼠支气管哮喘模型IL-4、IFN-γ表达的影响。方法雌性BALB/c小鼠50只,按数字随机表法分为5组,每组10只:哮喘模型组、AdCMVIL-12组、AdCMVLacZ组、激素治疗组和正常对照组。并于第20天分别鼻内吸入50μL生理盐水和5×108 PFU AdC-MVIL-12。第28天收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),检测IL-4、IFN-γ的变化,RT-PCR方法检测各组肺组织中IL-4、IFN-γmRNA的表达水平。结果哮喘模型组与对照组、AdCMVIL-12组相比较,BALF中的IL-4表达水平明显升高,而IFN-γ在AdCMVIL-12组中的表达水平显著上升。RT-PCR结果显示,哮喘模型组小鼠肺组织IL-4mRNA的表达与AdCMVIL-12组、激素治疗组及正常对照组相比较明显升高;而IFN-γmRNA的表达水平明显下降。结论 AdCMVIL-12对哮喘小鼠的气道及肺组织内的IL-4表达有明显的抑制作用,其机制可能与AdCMVIL-12阻断IL-4的表达,调节Th1/Th2类细胞因子的平衡有关。     

川芎嗪对哮喘大鼠GATA-3及Th2型细胞因子表达的影响

目的研究腹腔注射川芎嗪对大鼠哮喘模型的防治作用及机制。方法按常用方法制作大鼠哮喘模型并分为哮喘模型组(A组),川芎嗪治疗组(L组),地塞米松治疗组(D组)和正常对照组(N组)4组,每组8只。用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白介素-4(IL-4)和白介素-5(IL-5)的浓度。用HE染色法观察气道炎症变化。用免疫组化法研究肺组织GATA-3的表达。结果L组BALF中IL-4和IL-5的浓度以及肺组织GATA-3阳性细胞的光密度值(OD值)明显低于A组BALF的IL-4和IL-5的浓度以及肺组织GATA-3阳性细胞的OD值,差异有显著性(P<0.01),与D组无显著差异(P>0.05)。结论腹腔注射川芎嗪可以抑制哮喘大鼠IL-4和IL-5的合成,其机制可能与其降低GATA-3在肺组织的表达,从而继发抑制Th2型免疫反应有关。     

白细胞介素4、白细胞介素8、白细胞介素10在哮喘和慢性阻塞性肺疾病发病中的作用

目的:探讨外周血白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)在哮喘和慢性阻塞性肺疾病(COPD)发病中的作用。方法:采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测急性发作期和缓解期哮喘患者各50例(哮喘组)、急性加期和缓解期COPD患者各50例(COPD组)及健康志愿者50例(健康对照组)血清中IL-4、IL-8、IL-10的水平。结果:哮喘组急性发作期IL-4、IL-8水平均显著高于缓解期(P<0.01),且2期均显著高于正常对照组(P<0.01);哮喘组急性发作期IL-10水平显著低于缓解期(P<0.01),且2期均显著低于健康对照组(P<0.01)。COPD组急性加重期IL-4、IL-8水平均显著高于缓解期(P<0.01),且2期均显著高于健康对照组(P<0.01)。哮喘组急性发作期IL-10水平显著低于缓解期(P<0.01),且2期均显著低于健康对照组(P<0.01)。哮喘急性加重期IL-4水平显著高于COPD急性加重期(P<0.01);COPD急性加重期IL-8水平高于哮喘急性发作期(P<0.01);哮喘急性发作期IL-10水平显著低于COPD急性发作期(P<0.01)。结论:IL-4、IL-8、IL-10均参与了哮喘和COPD的气道炎性反应,IL-4、IL-8是促炎因子,而IL-10是抑炎因子。IL-4在哮喘的气道炎症形成中起重要的作用。而IL-8、IL-10为COPD的主要炎症因子。     

幽门螺杆菌毒力蛋白CagA诱导AGS细胞IL-8mRNA表达的研究

目的 研究AGS细胞的白细胞介素8(IL-8)mRNA表达与野生型幽门螺杆菌(H.pylori)和cagA基因突变株感染的关系.方法 采用RT-PCR法检测野生株西方型(WSS-type)H.pylori 26695和东方型(ESS-type)H.pylori HPK5、cagA基因突变株(cagA disrupted mutant strain)26695CA 和HPK5CA,按照细菌与细胞比例( multiplicity of infection,MOI) 150感染AGS 细胞的 IL-8 mRNA 动态(time-course)含量.同步感染试验排除菌株动力(motility)可能影响感染早期IL-8表达水平.结果 H.pylori诱导AGS细胞IL-8 mRNA表达.野生株西方型26695感染AGS细胞3小时后,IL-8 mRNA呈现时间依赖性(time-dependent)升高,持续升高至48小时;野生株东方型HPK5时间依赖性(time-dependent)表现为感染3小时后升高,随后降低,12小时再次出现峰值,随后又降低;突变株26695CA感染3小时后升高,持续至48小时,峰值表现在6小时和12小时;而突变株HPK5CA 感染3小时后未升高,6小时迅速达峰值,随后降低,48小时又出现峰值.结论 虽然cagA基因是诱导细胞表达IL-8 mRNA的重要因子,但并非是唯一因素,其他信号通路也参与IL-8 mRNA表达.