被动凝集法和ELISA法检测肺炎支原体抗体及其IgM、IgG分型研究

目的 研究成人呼吸道感染患者中肺炎支原体(MP)抗体效价检测和MP-IgM、MP-IgG抗体分型检测结果的一致性及其在MP诊断中的价值.方法 分别采用被动颗粒凝集法(PPA)、ELISA法检测527例成人呼吸道感染者的MP抗体效价、MP-IgG和MP-IgM,对所测结果进行对比研究.结果 经配对χ2检验发现,PPA法与ELISA法所测得的MP-IgM结果之间差异有统计学意义(P=0.000),且结果缺乏一致性(Kappa=0.256).而PPA法与ELISA法所测得的MP-IgG结果之间差异无统计学意义(P=1.000),且具有良好的一致性(Kappa=0.702).如果将MP-IgM和(或)MP-IgG阳性的患者均认为ELISA法检测阳性,与PPA法所报告的MP抗体结果之间差异无统计学意义(P=0.073),两种报告方式之间具有更好的一致性(Kappa=0.746).结论 在成人患者中,诊断MP感染不能仅依靠检测MP-IgM,而应动态检测MP-IgG或MP抗体效价,并结合患者病史、发病时间、用药情况等因素综合分析.     

两种肺炎支原体抗体检测方法的临床应用研究

目的 探讨两种实验室检测方法-被动颗粒凝集法（凝集法）和ELISA法检测在肺炎支原体（Mycoplasma pneumonia,MP）诊断中的临床应用价值.方法 选择191份MP感染疑似患者血清,采用凝集法检测各样本中MP抗体的水平,同时采用ELISA法对各样本中的MP IgM、IgA、IgG特异性抗体进行分型检测,并对检测结果进行统计学分析.结果 两种方法检测结果的阳性符合率为88.4％,阴性符合率为75.8％,总符合率为84.3％.两种方法检测结果一致性Kappa=0.642（P=0.001）,且检测结果存在相关性（r=0.642,P=0.025）.随着凝集法中抗体滴度由低到高,IgM、IgA亚型阳性的样本比例增加,且各滴度组间的比例差异均有统计学意义（P均＜ 0.05）.凝集法阳性样本中既往感染比例为26.4％,现症感染率为58.1％.特异性IgM抗体在幼儿组（43.3％）及青少年组（36.1％）患者中检出率最高,而IgG（100.0％）及IgA（66.7％）在老年组患者中检出率最高.结论 凝集法与ELISA法检测结果的符合性较好;较之凝集法,ELISA法检测IgM、IgA、IgG亚型可提示病程,区分现症感染和既往感染,对不同年龄段MP感染都具有诊断价值.建议同时参考抗体各亚型的检测结果来确定现症感染.     

实时PCR和颗粒凝集法检测儿童呼吸道肺炎支原体感染

目的分析呼吸道感染儿童中肺炎支原体的感染情况,比较肺炎支原体核酸（MP—DNA）和抗体（MP—Ab）检测结果。方法收集2011年深圳市宝安区妇幼保健院儿科门诊及住院呼吸道感染患者2781例,利用实时荧光PCR和颗粒凝集法分别检测MP—DNA和MP—Ab。利用McNemarg和Kappa检验比较两种方法检测结果;利用妒检验比较不同季节和年龄段儿童肺炎支原体感染率。结果①MP—Ab阳性率（19．17％）明显高于MP—DNA（5．57％）（χ2=257．0,P〈0．001）,两法间的一致性较差（kappa=0．115;95％CI,0．076～0．154）;②MP—Ab滴度为〈1：40、1：40、1：80、1：160及≥1：320组中MP—DNA的阳性率分别为4．2％、6．2％、9．2％、10．0％及22．2％,差异有统计学差异（χ2=99．48,P〈0．001）;③儿童MP冬季的感染率（31．01％）明显高于其它三季（P〈0．001）。④不同年龄段患儿MP感染率存在差异（χ2=378．209,P〈0．001）,〉16岁年龄段最高（59．66％）。结论①MP—Ab检测MP感染的阳性率高于MP—DNA,MP—DNA的阳性率随抗体滴度的增高而增加;②儿童肺炎支原体感染有季节性及年龄段差异。     

献血员衄清中肺炎衣原体抗体检测及其意义

目的调查部队无偿献血者中肺炎衣原体（CP）的感染情况，防止因输血而发生医源性感染。方法应用ELISA法检测肺炎衣原体IgG和IgM抗体。结果212例无偿献血者中CP—IgM抗体和CP—IgG阳性率分别为36．8％和35．4％。结论军队献血员中有较高的CP感染率，为保证临床输血安全，应高度重视此类病原体的检测工作。     

两种抗中性粒细胞胞浆抗体检测方法的结果比较

目的比较间接免疫荧光法（IIF）和酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）结果的一致性。方法回顾1 337例同时使用IIF和ELISA检测ANCA的结果,比较2种方法结果的一致性并进行原因分析。结果 2种方法联合检测出90例ANCA阳性结果,阳性一致性为83.82%,阴性一致性为98.27%,结果一致性较好（Kappa值〉0.75）。22例IIF阴性、ELISA阳性的样本中有14例抗核抗体阳性。11例ELISA阴性,IIF阳性的样本中有1例杀菌/通透性增强蛋白（BPI）阳性。结论 IIF和ELISA单独检测均有漏检,联合检测的效果最佳。     

抗GOR抗体的检测及其与HCV感染和自身免疫性疾病的相关性

目的：建立抗GOR－IgM类抗体的ELISA检测方法,研究分析抗GOR－IgG和抗GOR－IgM抗体与HCV感染和自身免疫性疾病的相关性。方法：人工合成的并与兔血清蛋白（RSA）交联的GOR肽包被反应板,建立了检测抗GOR－IgM类抗体的间接ELISA。对70例HCV感染者、30例丙型肝炎患者、30例丙型肝炎患者、124例各类自身免性疾病患者进行了抗GOR－IgG和抗GOR－IgM抗体的检测,同时检测抗核抗体、类风湿因子、抗ds-DNA抗体、抗Sm抗体、抗RNP抗体、抗心磷脂抗体和ENA多肽抗体。分析抗GOR－IgG、抗GOR－IgM与HCV感染、HCV基因型、HGV感染和自身免疫性疾病的相关性。结果：1）HCV感染者中抗GOR－IgG阳性率为47．1％（33／70）,抗GOR－IgM阳性率为32．9％（23／70）;抗GOR－IgG和抗GOR－IgM总阳性率62．9％（44／70）;2）Ⅱ型与Ⅲ型两种基因型HCV感染者的抗GOR抗体检出率分别为73．1％（19／26）和66．7％（2／3）,无显著性差异（P＞0．05,x^2检验）。3）自身免疫性疾病患者抗GOR－IgG阳性率为21．0％（26／124）,抗GOR－IgM阳性率为4．0％（5／124）;抗GOR－IgG和抗GOR－IgM同时阳性者有3例。在29例抗GOR阳性患者中,有1例检出抗HCV－IgG。4）在健康人对照组中抗GOR－IgG和抗GOR－IgM检出率分别为3．1％（2／64）和1．6％（1／64）。HCV感染才和自身免疫疾病患者的抗GOR－IgG检出率与正常人相比均有显著性差异（P＜0．05）;HCV感染者的抗GOR－IgM检出率与健康人相比有显著性差异（P＜0．05）,而自身免疫病患者与健康人相比均无显著差异。5）6例HGV感染患者中有1例抗GOR－IgG、抗GOR－IgM均为阳性,阳性率均为16．7％（1／6）。结论：1）HCV感染者（抗HCV－IgG阳性）中,抗GOR－IgG和抗GOR－IgM的阳性率显著高于健康人,抗GOR－IgG与抗GOR－IgM联合检测可提高抗GOR抗体作为HCV感染血清标志物的意义。2）HCV基因型与GOR抗体的出现无关。3）有部分自身免疫病患者体内可出现抗GOR抗体。4）抗GOR抗体与其他自身抗体常不同时存在于同一患者体内,提示产生GOR抗体的机制与其他自身抗体产生的机制不所不同。5）抗GOR－IgG和抗GOR－IgM同时阳性者提示可能与早期HCV或HCV感染有关。     

妇女异常妊娠与弓形虫感染之间关系的探讨

目的探讨十堰地区妇女异常妊娠与弓形虫感染的相关性。方法采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测105例异常妊娠孕妇（实验组）及500名正常育龄孕妇（对照组）血清中弓形虫特异性抗体IgM、IgG,进行2组间感染率差异的分析。结果异常妊娠孕妇弓形虫IgM、IgG抗体阳性率分别为13．33％和23．81％,而同时间段正常孕妇相应的IgM、IgG抗体阳性率为3．60％和9．80％,2组间差异有统计学意义（P〈0．001）。结论孕妇弓形虫感染是异常妊娠的重要原因之一,应重视弓形虫感染的早期筛查和诊治。     

ELISA法诊断大疱性类天疱疮价值

目的汁价应用新型BP180抗体检测试剂盒,采用ELISA法诊断大疱性类天疱疮（bulbuspemphigod．BP）的价值。方法拟诊BP患者13例,采用ELISA法检测BP180抗体,并行间接免疫荧光学法（indirectimmunofluorescence-IIF）及组织病理学检查,以组织病理检查结果为金标准,比较ELISA法、IIF法诊断BP的符合率。结果组织病理学诊断BP13例,与组织病理检查结果进行对照,ELISA法、IIF诊断BP的符合率分别是92．31％（12/13）和76．92％（10/13）,二者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论应用新型BP180抗体检测试剂盒,采用ELISA法检测患者血清BP180抗体许计算ELISA指数。可为临床诊断BP提供重要依据。     

小儿肺炎支原体感染的血清学检测及临床应用

目的：通过对呼吸道感染患儿血清肺炎支原体（MP）特异性抗体IgM（抗－MP－IgM)及冷凝集试验（CAT）的检测,协助临床早期诊断MP感染,及早治疗,缩短病程。方法对154例呼吸道感染患儿同时作血清冷凝集试验及用μ－捕获ELISA方法检测其肺炎支原体特异性抗体IgM。结果：154例受检样品中抗－MP－IgM阳性检测结果25例（占16．2％）;在26例临床诊断为MP感染的病例中,血清抗－MP－IgM和（CAT均阳性10例;MP－IgM阴性,CAT阳性4例;抗－MP－IgM的敏感性84．6％,冷凝集试验的敏感性53．8％,抗－MP－IgM敏感性较冷凝集试验高（P＜0．05）。结论：临床上同时检测抗－MP－IgM和冷凝集试验可提高MP敏感的早期诊断率、然而抗－MP－IgM检测阳性率也受到患儿年龄、病程及免疫功能状态等的影响。在临床诊断中不容忽视,以免误诊、漏诊。     

两种方法检测戊型肝炎病毒IgM抗体的临床验证

目的：对MP生物医学亚太私人有限公司（简称MP公司）生产的戊型肝炎病毒IgM抗体快速检测试剂（胶体金法）和戊型肝炎病毒IgM抗体检测试剂（酶联免疫吸附试验,ELISA）进行临床验证,评价其与参比试剂的等效性。方法采用SFDA注册的试剂（北京万泰生物药业股份有限公司生产,ELISA）为参比试剂,与MP公司生产的上述两种试剂,同时对250例标本进行比对试验;如MP公司试剂与万泰试剂检测结果不一致,用SFDA注册的第3方试剂（上海科华生物工程股份有限公司生产,戊型肝炎病毒IgM抗体,ELISA）进行复核。结果MP公司的胶体金法和ELISA试剂与万泰ELISA试剂检测戊型肝炎病毒IgM抗体阴性符合率分别为96．9％和94．9％,阳性符合率分别为94．5％和92．7％,总符合率分别为96．4％和94．4％。两公司试剂检测结果比较,差异无统计学意义（P＞0．05）。结论MP公司胶体金法和ELISA检测戊型肝炎病毒IgM抗体试剂,与参比试剂（万泰试剂）具有等效性,可以在临床诊断中应用。     

糖尿病自身抗体在不同年龄组段糖尿病患者的阳性率分析

目的 探讨糖尿病自身抗体在不同年龄组段糖尿病患者的阳性率。方法采用ELISA法检测三个年龄组（5-25岁52例、26-49岁135例及50-80岁250例）共437例糖尿病患者ICA、IAA及GAD抗体。结果IAA阳性率5-25岁组明显高于26-49岁组和50-80岁组．差异有非常显著性（P〈0．01）；ICA和IAA＋ICA阳性率在5-25岁组明显高于26-49岁组和50-80岁组（P〈0．01），26-49岁组和50-80岁组阳性率无明显差异（P〉0．05）：GAD和ICA＋GAD阳性率在26-49岁组和50-80岁组明显高于5-25岁组（P〈0．01），26-49岁组和50-89岁组阳性率无明显差异（P〉0．05）。结论青少年糖尿病患者（5-25岁）ICA、IAA抗体阳性率较高，较高年龄组糖尿病患者（〉25岁）GAD抗体阳性率较高。     

1202例糖尿病患者检测自身抗体与年龄相关的分析

目的探讨糖尿病自身抗体与年龄的相关性。方法采用ELISA方法检测1202例糖尿病患者GADI、CAI、AA抗体。结果1202例受检患者中,GAD刚性309例,刚性率25.71%,ICA刚性316例,刚性率26.29%,IAA阳性118例,刚性率9.82%,不同年龄组段的GAD刚性率卡方趋势结果P<0.05,ICAI、AA阳性率卡方趋势结果均P>0.05。     

ANA、抗SSA抗体、抗SSB抗体阳性患者血细胞分析参数的变化

目的探讨抗核抗体(ANA)、抗干燥综合征A抗体(抗SSA抗体)、抗干燥综合征B抗体(抗SSB抗体)均阳性患者血细胞分析参数的变化。方法采用间接免疫荧光法(IIF)检测ANA,采用免疫印迹法检测抗SSB抗体和抗SSA抗体,以日本希森美康XE-2100全自动仪检测血红蛋白(Hb)、白细胞(WBC)、血小板(PLT)、中性粒细胞百分比(NE%)、淋巴细胞百分比(LY%)。结果与ANA荧光、抗SSA抗体、抗SSB抗体均阴性对照组相比,ANA、抗SSA抗体、抗SSB抗体均阳性组中,血细胞分析参数Hb、WBC、PLT明显减少,差异有统计学意义(P<0.05),其中仅Hb减少53例占29.94%;仅WBC减少59例占33.33%;仅PLT减少24例占13.56%;Hb和WBC同时减少46例占10.50%;WBC和PLT同时减少12例占6.78%,Hb和PLT同时减少26例占14.59%;Hb、WBC、PLT三者同时减少12例占6.78%。结论血液系统自身抗体阳性患者的异常损伤造成的血细胞分析参数变化对临床自身免疫病的诊断治疗具有一定意义。     

糖尿病自身抗体阳性患者治疗后其自身抗体随时间的变化

目的探讨糖尿病自身抗体阳性患者其自身抗体治疗后随时间的变化。方法采用ELISA方法分别检测87例治疗前(第一次)和治疗半年后至一年内(第二次)及其中23例治疗一年后至两年内(第三次)糖尿病患者GADI、CAI、AA抗体。结果受检患者中,第一次和第二次、第三次GAD阳性率分别为69.0%、52.9%、47.8%,三次GAD阳性率卡方检验(P<0.05)有统计学意义;ICA阳性率分别为63.2%、47.1%、39.1%,三次ICA阳性率卡方检验(P<0.05)有统计学意义;IAA阳性率分别为24.1%、11.5%、8.7%,三次IAA阳性率卡方检验(P<0.05)有统计学意义。结论糖尿病患者GADI、CAI、AA阳性率在治疗后随时间逐渐降低。     

15055例拟受血者血液传播疾病血清指标的分析

目的探讨拟受血者输血前各项血液传播性疾病血清标志物情况。方法对15 055例拟受血者血液传播疾病血清指标进行分析,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对拟受血者进行丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)和人类免疫缺陷病毒抗体(抗-HIV)检测;梅毒螺旋体(抗-TP)检测采用ELISA、明胶颗粒凝集试验和快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)3种方法检测。结果抗-HCV阳性率为1.67%,抗-HIV阳性率0.03%。单独ELISA检测抗-TP阳性、ELISA和RPR检测抗-TP均阳性、单独RPR检测抗-TP阳性率分别为2.76%、0.58%和0.03%。15例同时抗-HCV和抗-TP阳性。结论做好输血前血液传播疾病检测,不仅可以了解该地区血源性疾病的感染情况,还可减少和避免医疗纠纷及医源性感染,保证医患双方的合法权益。     

急性白血病流式细胞术免疫分型中系相关抗体的敏感性和特异性分析

为了评估急性白血病流式细胞术免疫分型中系相关抗体的敏感性和特异性，参考St Jude研究医院的急性白血病免疫分型方案对184例急性白血病患者进行流式细胞术免疫分型。结果表明：AML系相关抗体CD13和CD33的敏感性较高(95.5％和91．2％)，特异性不足(72．5％和62．2％)；MPO敏感性低(69．1％)，特异性高(100％)；CD117敏感性、特异性都高(88．2％和100％)。CD14、CD15敏感性低(18．4％和27．2％)，CD14对单核细胞特异性高。B细胞系ALL系相关抗体CD19具有高敏感性(100％)，而特异性(83．4％)差；CD79a、CD22(CyCD22)敏感性(96．4％和100％)和特异性(100％和100％)都高；CD10和CD20的敏感性(53．6％和70．4％)、特异性(82．5％和87．5％)均低。T—ALL系列相关抗体CD3(CyCD3)高特异性(97．5％)，而敏感性(80．0％)欠佳；CD7敏感性高(100％)，特异性低(77．9％)；CD5、CD2、CD1a敏感性、特异性均不理想。结论：184例急性白血病系相关抗体的敏感性和特异性分析与St Jude免疫分型方案基本一致，只是在确定AML时CD117似乎优于MPO；确定B细胞系ALL时CD22和CD79a具有相似的敏感性和特异性，所以可以任选一个。     

甲状腺自身抗体定量检测的临床应用

目的探讨血清中3种甲状腺自身抗体定量检测,在甲状腺疾病诊治中的价值。方法收集2009—2010年于我院门诊就诊及住院的甲状腺疾病患者238例,通过患者的病史、症状、体征及相关的辅助检查将患者分组。分别检测患病组及正常对照组血清中TPOAb、TGAb、TRAb浓度,观察3个抗体水平在不同疾病中的变化情况。结果不同疾病组及正常对照组血清中TPOAb、TGAb浓度水平差异具有统计学意义,其中桥本病、Graves’病组,血清中两种抗体水平与其他各组比较差异具有统计学意义,且桥本病患者血清中两种抗体水平明显高于其他三组;Graves’病发作组的TRAb阳性率及血清浓度水平均明显高于正常对照组,而Graves’病缓解组TRAb阳性率及测定值明显低于发作组。结论TPOAb、TGAb在桥本病致病中起重要作用,而TRAb对于Graves’病有较高的诊断价值,可以作为诊断Graves’病的特异性指标,但与Graves’病的病情轻重无关。     

不同分期白癜风患者TPOAb、TGAb、TRAb表达分析

目的分析不同分期白癜风患者血清甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TGAb)、促甲状腺素受体抗体(TRAb)的表达。方法 161例白癜风患者依据病情分为进展期组(n=84)和稳定期组(n=77),并选择健康者60例为对照组。检测3组血清TPOAb、TGAb、TRAb水平,并比较以上指标在3组中的表达水平及阳性率差异。结果3组TPOAb、TGAb、TRAb水平比较,差异有统计学意义(H=14.371、6.335、8.284,P0.05)。两两比较,进展期组TPOAb、TGAb、TRAb水平高于稳定期组和对照组(U_(与稳定期组)=9.380、7.923、8.381,P0.05;U_(与对照组)=23.244、19.026、25.873,P0.05);稳定期组TPOAb、TGAb、TRAb水平高于对照组(U=11.356、12.450、16.351,P0.05)。3组TPOAb、TGAb、TRAb表达水平由高到低依次为:进展期组、稳定期组、对照组。3组TPOAb、TGAb、TRAb阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=18.676、23.618、23.857,P0.05)。两两比较显示,进展期组TPOAb、TGAb、TRAb阳性率高于稳定期组、对照组(χ_(与稳定期组)~2=5.273、6.484、6.305,P0.017;χ_(与对照组)~2=14.997、18.352、17.829,P0.017),稳定期组TPOAb、TGAb、TRAb高于对照组(χ~2=5.233、5.036、6.719,P0.017)。3组TPOAb、TGAb、TRAb阳性率由高到低依次为:进展期组、稳定期组、对照组。结论白癜风患者存在甲状腺自身抗体(TPOAb、TGAb、TRAb)表达异常,病情进展与否也与此类抗体表达水平有关。     

抗核小体抗体对儿童系统性红斑狼疮诊断的应用价值

目的评价抗核小体抗体(Anu A)对儿童系统性红斑狼疮(JSLE)诊断的应用价值。方法选取54例JSLE患者,28例非JSLE患者及26例健康人作为研究对象,采用酶联免疫法检测抗核抗体,免疫印迹法检测抗核小体抗体、抗ds DNA抗体、抗组蛋白抗体及抗Sm抗体;同时收集临床资料及相关实验室检查结果,并进行相关性分析。结果 Anu A对JSLE诊断的敏感性为77.78%,特异性为96.30%;Anu A并联抗核抗体、抗ds DNA抗体及抗Sm抗体检测诊断JSLE的敏感性高于单项检测;Anu A与发热、口腔/鼻咽部溃疡、肺部损害、淋巴细胞绝对值、尿蛋白和补体C3正相关。结论 Anu A可作为诊断JSLE有价值的指导性血清标志物,其联合抗核抗体、抗ds DNA抗体及抗Sm抗体检测更有利于JSLE疾病的诊断。     

不孕不育患者血清中抗精子抗体与抗心磷脂抗体的检测价值

目的探讨抗精子抗体(AsAb)、抗心磷脂抗体(ACA)在不孕不育患者中的检测价值。方法采用酶联免疫吸附试验检测878例不孕不育患者及20例健康对照组血清中的AsAb及ACA。结果不孕不育组抗精子总抗体(AsAbT)的总阳性率为21.4%,IgM阳性率为13.5%;健康组AsAbT总阳性率为7.5%,IgM为0%,P<0.01。不孕不育组ACA检测总阳性率为36.6%,其中IgA阳性率为5.1%,IgG阳性率为30.5%,IgM为12.3%;健康组阳性率为5.0%,其中IgG阳性率为5.0%,IgM为2.5%,P<0.05。结论 AsAb、ACA与不孕不育关系密切,其检测有助于免疫性不孕不育的诊断。