临床细菌检验快速方法应用进展

临床细菌检验程序包括标本分离、菌种鉴定及药敏试验３个步骤，其中菌种鉴定的快慢是影响整个检验时间的关键。因此临床细菌检验快速方法的研究也多以菌种鉴定为主。一、用分离培养基对菌种直接鉴定在分离培养基中加入检测某些菌种特异性酶的底物，在菌种分离的同时直接进...     

搞好细菌质量控制的体会

临床细菌检验是一门定性的学科,是从各临床标本中分离出活细菌,因此与标本收集、培养、鉴定、药敏试验及培养基、试剂、仪器密切相关,其中某一环节误差,将会直接影响最终结果。为了保证检验质量,减少误差。我们充分认识到室内质量控制是提高检验质量的重要手段,只有搞好质量控制工作,才能给临床     

参加美国病理家学会细菌学能力比对试验总结分析

为提高我室临床细菌学检验水平，我们于2004年申报参加了美国病理家学会（CAP）组织的临床细菌学检验能力比对试验活动（ProficiencyTestSurveyD—C）。截至2006年9月共收到20份质评标本，按照我室不同标本的细菌检验标准操作程序进行分离培养、菌种鉴定和部分细菌的体外药敏实验，现将3年的能力比对试验结果进行总结，重点分析我们鉴定错误的原因，并介绍CAPD—C回报总结的教育特点。     

Vitek—AMS仪对1504株临床分离菌种的鉴定

为探讨临床细菌菌种的分布，本文用Vitek-AMS对临床标本中分离的1504株进行了菌种的鉴定．材料和方法一、标本及处理临床送检的细菌和真菌培养标本按《全国临床检验操作规程》进行处理，其中痰液和咽拭子接种血平板、麦康凯及沙氏平板，大便接种SS和中国蓝平板．二、菌种鉴定根据分离菌株的形态及生理特征选择相应的鉴定卡，用Vitek-AMS进行菌种鉴定，少数不能鉴定的菌株，按文献方法检索菌种[1]。结果一、1504株细菌鉴定结果分离的1504细菌分属36个菌属98个菌种（表1）．菌种的分离标本以痰液为主（36．7％），其次为尿液（19．6％）、…     

一起沙门氏菌食物中毒的病原学分析

目的用传统的鉴定方法和细菌生化鉴定系统检测手段相结合,对一起食物中毒进行病原学分析。方法按照GB／T47892003（（食品卫生微生物学检验》和WS／T13—1996（（沙门氏菌食物中毒诊断标准及处理原则》进行检验分离病菌,用传统方法结合细菌生化鉴定仪检测手段,同时测定患者血清效价,结合流行病学调查、临床资料分析中毒原因。结果在两份食品中分离到可疑菌,经传统生化分型和血清学试验,采用ATB细菌鉴定仪鉴定,为韦太夫雷登沙门氏菌。测定4份患者血清效价,恢复期滴度均高于急性期4倍以上。结论综合流行病学调查、l临床资料和实验室检测结果,证实本起食物中毒由韦太夫雷登沙门氏菌引起。     

浅谈细菌检验室内质控及管理

目的：制定细菌检验室内质控，避免实验人员因操作、主观判断、试剂质量等因素影响，导致试验错误。方法：采用标准菌株进行同步和定期以内质控，制定相应的室内质控措施。结果：规范细菌检验的直接涂片、接种培养、生化鉴定及药敏试验。结论：增强室内质控意识，确保细菌检验结果表明、可靠、准确，更好地为临床服务。     

痰液细菌学检验的标准化操作程序初探

目的提高痰液细菌学检验的临床符合率的同时,尽可能缩短检验时间,促进呼吸科感染病诊治水平的提高和抗生素滥用的控制。方法通过对痰标本质量和首代分离培养基质量控制的改进,合理搭配使用多种选择性培养基,坚持在直接涂片镜检结果的指导下分离鉴定,采用具有培养鉴定作用的多功能培养基配合快速酶法编码鉴定系统进行鉴定并在鉴定的同时进行药敏试验;以病历调查统计临床符合率。结果痰标本合格率仅为20%～30%,筛选后2000份合格标本分离率为64.7%,苛养性细菌分离率24.7%,其中肺炎链球菌分离率14.4%,流感嗜血杆菌分离率20.8%;629株常见细菌的鉴定正确率97.0%,与常规微量生化编码法对556株非苛养菌的鉴定比较,x2=13.56,P<0.005,差异具有显著性;所有常见菌全部试验可在45h～96h内完成;400份病历初步调查,临床符合率74%。结论痰标本采集合格率低是影响痰液临床符合率的主要因素;应用作者建立的痰液细菌学标准化操作程序(SOP)可提高痰液细苗学检验的阳性率和临床符合率,在一定程度上缩短试验时间,加快报告的进程。     

革兰阴性菌耐药266例分析

对革兰阴性菌266例耐约分析如下。1临床资料 1．1一般资料 2005-01～2006-12我院门诊及住院患者分离的菌株共266例。1.2 细菌分离鉴定 按《全国临床检验操作规程》进行分离培养，用微生物自动分析仪phoenix100鉴定到种。1.3 药敏试验 微生物自动分析仪phoenix100行药敏试验，纸片扩散法作补充。     

应用MALDI-TOF MS技术快速鉴定布鲁菌

目的利用MicroflexTMLT型MALDI-TOF质谱仪建立布鲁菌蛋白质量指纹图谱数据库,并评估其在布鲁菌临床分离株鉴定中的应用价值。方法 2013年10月该院微生物实验室分离到1株疑似布鲁菌,经VITEK~2 Compact全自动微生物分析系统及16SrDNA基因测序确认为马耳他布鲁菌,按照厂家推荐方法自建了布鲁菌蛋白质量指纹图谱数据库。对2015年4月及2016年6月该实验室分离到的2株疑似布鲁菌进行革兰染色、柯氏染色及氧化酶、触酶、快速尿素酶等生化反应试验。使用Microflex~(TM)LT型质谱仪收集这2株及外院3株布鲁菌疑似菌株的质量图谱,比对分析图谱时在MALDI Biotyper数据库基础上添加自建数据库,同时使用16SrDNA基因测序法鉴定上述细菌。结果按照自建库推荐操作流程成功获得了基于BRUxh1的自建布鲁菌质量指纹图谱数据库。2015年4月及2016年6月分离到的布鲁菌疑似菌株,涂片染色镜检均为革兰阴性短小球杆菌,氧化酶阳性,触酶阳性,尿素酶阳性(5min内)。这5株疑似菌株的质谱鉴定结果均为布鲁菌(质谱评分分别为2.407、2.475、2.436、2.466、2.397),16SrDNA基因测序确认这5株细菌为布鲁菌。其中来自外院的2株细菌于外院VITEK~2 Compact系统鉴定时均错误地鉴定为吉氏玫瑰单胞菌。结论联合MALDI Biotyper数据库与自建布鲁菌数据库对临床分离株进行质量图谱比对分析,可以实现对布鲁菌属细菌的准确鉴定,该方法快速、灵敏,对布鲁菌病的临床快速诊断具有较高的应用价值。     

584株临床分离株的菌属及耐药率分析

随着抗生素的广泛使用，细菌的耐药性也随之增加，给治疗带来一定困难。为了解医院细菌性感染菌谱特点及耐药情况。本文报告1996年临床分离株和耐药情况一、菌株鉴定584株细菌从我院1996年1月～12月病人的标本中分离得到，细菌按《全国临床检验操作规程》鉴定到种。＝、药敏试验（K－B法）每月用ATCC标准菌株测定抗生素抑菌圈，均在NCCLS规定的范围之内。三、结果从临床标本中分离到的菌株见表1，我们将出现率大于2％的革兰氏阴性杆菌菌株进行抗生素耐药率分析，结果见表2。从我院的总体看细菌的分布前五位依次是：假单胞菌瞩，不动杆…     

临床细菌检验结果的可靠性分析

临床细菌检验面临一个重要问题就是检验结果的可靠性。细菌检验结果的可靠性影响因素很多，包括标本的采取（采取标本的时机、方法）、标本的运送（运送方式及标本的保存）、分离培养技术方法和鉴定手段等。现从以下三个方面加以简要分析。     

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术在快速检测病原菌中的研究进展

摘要：传统的临床微生物学检验依赖于长时间的对病原菌的分离、培养及复杂的生化鉴定,有些病原微生物的生化反应不典型则难以准确鉴定。分子生物学技术如PCR技术要求较高,常规实验室不易开展。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）作为一种跨学科的检测新技术,在细菌和真菌的快速鉴定、细菌的耐药性检测、流行病学分析方面呈现出较传统鉴定法较多的优势。     

临床微生物学检验新技术及质量控制学习班顺利召开

<正>为进一步提高临床微生物检验水平,做好临床微生物实验室质量控制管理,规范细菌分离、鉴定及耐药性监测,指导临床合理使用抗菌药物,上海市临床检验中心临床微生物学研究室于2019年6月12—14日举办了临床微生物学检验新技术及质量控制学习班[国家级继续医学教育项目2019-11-00-238(国)]。上海、北京等地的临床微生物实验室检验人员、微生物检验设备和试剂研发企业的技术骨干及科研人员共90余人参加了此次培训。     

89株白色念珠菌的分离鉴定

８９株白色念珠菌的分离鉴定赵建英，王越（吉林四平市中心医院检验科１３６０００）白色念珠菌是临床常见的机会性致病菌之一。多引起呼吸道、肺部、肠道等感染。因此，白色念珠菌的分离与鉴定，在临床细菌检验中，日益争多。也引起了我们临床医院工作者的重视。现将１９...     

浙江省临床少见细菌及真菌鉴定的室间质评分析

由于细菌的基因突变,促使其表型的改变,非典型菌株出现于临床标本已日渐增多.而广谱抗生素的广泛使用,也使真菌感染明显增加.为使临床细菌检验人员增长见识,提高鉴定少见菌种、新菌种的能力,减少漏诊率,我们在开展浙江省临床微生物学室间质量评价工作中,特意发放一些临床检出率较低的少见菌种及真菌,以期提高工作人员的鉴定水平和常规检验能力,从而更好地为临床诊断服务. 1 材料和方法 1．1 菌种来源 一部分菌种来自WHO临床微生物学室间质量评定协作中心,另一部分菌种购自国内菌种保藏中心等单位或分离自临床标本.发放的质控菌种,都经临床…     

MALDI-TOF 质谱仪在临床常见细菌鉴定中的应用

目的：探讨两种质谱仪 Biotyper MS 和 Vitek-MS 系统在临床常规分离细菌鉴定中的应用价值。方法收集沈阳军区总医院2012年3月至2013年1月分离自血液、尿液、脑脊液、分泌物和痰液等标本的临床常见菌细菌149株（包括14个菌属和30个菌种）。同时采用两种 MALDI-TOF-MS 系统对上述菌株进行鉴定,结果与 Vitek2 compact 常规生化鉴定进行比较,对3种方法检测结果不一致菌株用16S rRNA 测序进行确认。结果在149株常见细菌中,Bruker Biotype 属和种的正确鉴定率分别为98％和96％,Vitek-MS 属和种的正确鉴定率分别为97％和95％。两者均无错误鉴定菌株。结论对该组常见细菌,两种质谱仪鉴定结果比较差异无统计学意义（P ＞0．05）,均呈现出优异的鉴定水平,适合用于临床微生物的常规鉴定。     

MALDI-TOF质谱仪在临床常见细菌鉴定中的应用

目的 探讨两种质谱仪Biotyper MS和Vitek-MS系统在临床常规分离细菌鉴定中的应用价值。方法 收集沈阳军区总医院2012年3月至2013年1月分离自血液、尿液、脑脊液、分泌物和痰液等标本的临床常见菌细菌149株(包括14个菌属和30个菌种)。同时采用两种MALDI-TOF-MS系统对上述菌株进行鉴定,结果与Vitek2compact常规生化鉴定进行比较,对3种方法检测结果不一致菌株用16Sr RNA测序进行确认。结果 在149株常见细菌中,Bruker Biotype属和种的正确鉴定率分别为98%和96%,Vitek-MS属和种的正确鉴定率分别为97%和95%。两者均无错误鉴定菌株。结论 对该组常见细菌,两种质谱仪鉴定结果比较差异无统计学意义(P>0.05),均呈现出优异的鉴定水平,适合用于临床微生物的常规鉴定。     

938株临床分离菌对16种抗生素的耐药特征

细菌耐药性的显著增加，给临床治疗带来困难[1]．为了解近年本地区细菌耐药情况，现报告我院1996年临床分离株的耐药结果．材料和方法一、菌株鉴定938株细菌均从我院1996年1月至12月住院和门诊病人的痰、脓、尿、及血液等标本中分离得到。细菌经常规分离培养后，用全自动激生物鉴定仪（Vitek－AMS，法国BioMerieu），按操作规程鉴定到种。二、药敏试验（K-B法）每月用ATCC标准菌株测定抗生素抑菌圈，均在NCCLS规定的范围之内．结果一、细菌的分布从临床标本中分离到的菌株见表1．我们将出现率大于2％的菌株进行抗生素耐药率分析。二…     

快速分离培养基的简易制备方法及其临床应用

目的制备用于临床标本快速分离病原菌的培养基,以提高临床标本细菌培养的检出速度。方法在实验室制备分离培养基过程中按一定比率加入商品化BD快速血培养液,并使用标准菌株和临床标本进行实验观察。结果将标准菌株及临床标本按不同的标本类型分别接种于普通组分离培养基和快速组分离培养基,使用快速分离培养基可显著提高临床标本细菌分离培养速度至8 h左右,两组培养基中血琼脂平板典型菌落溶血结果符合率95.7%(22/23);细菌鉴定结果符合率为98.6%(144/146)。结论快速分离培养基的制备过程简单、对细菌分离效果良好,可显著提高细菌标本检验速度,为临床细菌性感染疾病的快速诊断提供了有效的途径。     

临床分离革兰氏阴性厌氧杆菌的快速法

现已公认,类杆菌-梭形杆菌群的革兰氏阴性无芽胞厌氧杆菌是一群重要的病原菌,同时也是胃肠道下段、口腔和阴道正常菌丛的主要组分。但这些细菌的分类不清,在常规检验中很少加以确切鉴定。明确鉴定这类菌株将有助于评价检验结果,确定传染源,选定治疗方案和判定预后。该类细菌原有的几种常规试验需48小时才能完成。而本研究的目的在于设计一组简单而快速的试验方法,能在24小时内鉴定临床标本中分离的革兰