蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4的提纯及抑瘤活性观察

目的：分离纯化东亚钳蝎原毒,提取活性多肽成分SVⅡ—A4,并观察其抑瘤活性。方法：（1）分离纯化,采用分子筛凝胶柱层析和离子交换柱层析分离纯化蝎毒;（2）纯度分析,用SDS—PAGE电泳和HPLC色谱法对SVⅡ—A4进行纯度分析;（3）活性观察,用MTF法（酶反应比色法）观察比较不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其成分与SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞（A549、HL-60、K562／S及K562／ADR）的抑制作用。结果：经过两步的分离纯化获得5个蝎毒多肽成分,其中的蝎毒抗肿瘤有效成分SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞的抑制作用与阳性对照组相当。结论：经过优化提纯方法,两步即可从东亚钳蝎原毒中获得色谱纯度达96．73％的抑瘤活性单体成分SVⅡ-A4,初步观察,SVⅡ-A4对4种肿瘤细胞均显示出明显的抑制作用及一定的剂量-效应关系,而且它对布耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用较阳性对照组强有进一步开发利用的价值。     

脑胶质瘤化疗耐药机制的研究进展

化疗对胶质瘤治疗效果不理想相当一部分是由于胶质瘤对化疗药物耐药,严重影响了化疗效果。肿瘤细胞一旦对一种抗肿瘤药物产生耐药,对其他结构不同,作用机制不同的抗肿瘤药物也产生交叉耐药性,即多药耐药（MDR）。MDR有两种表型：（1）首次使用化疗药物就产生耐药,称为原发性或内在性耐药;（2）在化疗过程中产生耐药,称为获得性或继发性耐药。目前肿瘤MDR可能存在的分子机制有以下几种：（1）药物在肿瘤细胞内的积聚减少;（2）药物失活增加;（3）药物作用靶减少;（4）凋亡与抗凋亡机制失衡;（5）MDR中的DNA修复机制等。总之,胶质瘤MDR是一个十分复杂的生物学过程,胶质瘤MDR呈现多机制、多因素的特点。因此,有必要明确肿瘤细胞的耐药机制,以便对临床制定更合理的治疗方案,预防和逆转胶质瘤抗癌药物耐药性的产生。     

青蒿素对人宫颈癌Hela细胞的抑制作用

1 研究背景 青蒿素（Artemisinin）又名黄花蒿素、黄蒿素,是从菊科植物黄花蒿（artemisia annual）中提取的有效抗疟成分,为我国传统抗疟中药。其化学成分是含内过氧化基团的倍半萜内酯化合物。近年来的国内外研究表明,青蒿素及其衍生物（青蒿琥酯、二氢青蒿素、蒿甲醚）具有抗肿瘤作用,可抑制肿瘤细胞生长和诱导肿瘤细胞凋亡,同时也发现青蒿素及其衍生物不仅与传统化疗药不存在交叉耐药,而且能逆转肿瘤细胞的多药耐药现象。青蒿素及其衍生物体外对多种肿瘤细胞具有抑制、杀伤作用,对人肺腺癌A549细胞、人乳腺癌（MCF-7细胞）、人结肠癌（SW620细胞）生长有明显抑制和杀伤活性。     

整合素β-1对实体瘤细胞耐药的影响研究

目的：初步探讨附分子β－1整合素对肿瘤耐药的影响。方法：采用人肺腺癌细胞株A549，分别以不同浓度阿霉素诱导建立耐药细胞株，采用MTT法检测肿瘤细胞结合纤维粘连蛋白（FN）及阻断β－1整合素后对肿瘤细胞耐药的影响。结果：经致死剂量的阿霉素作用，MTT法检测药物敏感的肿瘤细胞抑制率为97．1％，耐药细胞株为45．2％，与纤维粘连蛋白结合后，药物敏感细胞株抑制率为68．5％，耐药细胞株为56．4％，阻断β－1整合素后与纤维粘连蛋白结合，药物敏感细胞株抑制率达到94％，耐药细胞株为49．4％，与纤维粘连蛋白结合后，肿瘤细胞抑制率明显下降（P＜0．05）；阻断β－1整合素功能后，肿瘤细胞抑制率显著上升，结论：肿瘤细胞与细胞外基质作用是造成肿瘤耐药的原因之一，阻断肿瘤细胞与细胞外基质的作用可以逆转肿瘤耐药。     

左金丸抗肿瘤机制的研究进展

左金丸抗肿瘤的作用机制主要有4个方面:诱导凋亡、抑制增殖、抑制侵袭转移、逆转多药耐药。研究发现,左金丸通过线粒体依赖性途径激活Caspase级联反应,从而促进肿瘤细胞的凋亡;抑制AP-1、NF-κB、c-myc的活性,从而使肿瘤细胞增殖受到抑制;抑制Wnt/β-catenin信号通路的活性,使MMP-7表达下降,进而抑制肿瘤细胞的侵袭转移;抑制PI3K/AKT/NF-κβ通路的活性,从而逆转P-gp介导的多药耐药,还可激活线粒体途径的凋亡通路,诱导耐药细胞凋亡,从而逆转肿瘤细胞的多药耐药。     

三种中药制剂Ams-11、Fw-13、Tul-17逆转肿瘤细胞多药耐药性的研究

为寻找能有效逆转肿瘤细胞多药耐药性的药物，作者通过体外细胞实验，对从３２个中药制剂中筛选出的Ａｍｓ－１１、Ｆｗ－１３、Ｔｕｌ－１７三种中药制剂逆转肿瘤细胞多药耐药性的作用进行了分析。结果：在无细胞毒性的剂量范围内，该三种中药制剂均能明显增强多药耐药细胞对抗癌药物的敏感性，而且其逆转作用呈剂量依赖关系。由此提示，该三种中药制剂有可能成为能逆转肿瘤细胞多药耐药性的多药耐药逆转剂。     

耐药逆转剂联合应用对肾癌细胞多药耐药性的逆转作用

目的：探讨肾癌细胞多药耐药的机理及克服耐药的方法。方法：通过肾癌细胞体外实验观察两种逆转剂单独或联合应用对多药耐药的逆转作用。结果：环孢素Ａ（ＣｓＡ）小剂量（≤１ｍｇ／Ｌ）单独应用可以逆转ＲＣＯ９２５肾癌细胞对阿霉素和长春新碱的耐药，丁硫氨酸亚矾胺（ＢＳＯ）在无细胞毒性剂量下（〈５６μＭ）单独应用可以逆转ＲＣＣ９２５细胞对阿霉素的耐药，但对长春新碱无效。２８μＭ的丁硫氨酸亚矾胺和小剂量环孢素Ａ联合应用逆转效果优于单独应用。结论：针对不同耐 药机制的逆转剂联合应用克服肾癌细胞多药耐药的有益尝试。     

中药逆转肿瘤多药耐药机制研究

多药耐药（MDR）是指肿瘤细胞对一种化疗药物产生耐药的同时,对其他结构无关、作用机制不同的抗肿瘤药物也产生交叉耐药现象。多药耐药的发生与多种因素有关,如糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白（MRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）表达增加,谷胱甘肽转移酶（GST）活性增强,DNA修复、拓朴酶活性改变等。肿瘤多药耐药过程是一个多基因、多因素和多阶段的复杂过程。化疗药联合中药制剂用于肿瘤的治疗,有助于提高临床肿瘤化疗效果,逆转肿瘤多药耐药机制。     

洛贝林逆转人乳腺癌细胞MCF-7/ADM耐药作用及其机制

目的：探讨哌啶生物碱洛贝林对人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM耐药的逆转作用及其分子机制。方法：利用MTT比色法测定不同浓度洛贝林对人乳腺癌细胞株MCF-7/ADM的阿霉素（ADM）和氟尿嘧啶（Fu）的耐药逆转指数。多功能酶标仪测定洛贝林干预对细胞内罗丹明123荧光强度以反映其对细胞多药耐药蛋白P-gp活性的影响。同时用流式细胞术检测洛贝林对MCF-7/ADM细胞内罗丹明123积聚浓度的影响,从功能学的角度观察洛贝林的耐药逆转作用及其机制。结果：洛贝林(10 μmol/L)干预下,多药耐药细胞株MCF-7/ADM对化疗药的敏感性增加,ADM对耐药细胞株的IC50由（44.81±0.43)mg/L降至（16.72±0.75）mg/L,逆转指数为2.68;Fu对耐药细胞株的IC50由（53.12±1.60）mg/L降至（38.90±1.43）mg/L,逆转指数为1.37。洛贝林对细胞的罗丹明123外排有显著的浓度依赖性抑制作用。洛贝林（20 μmol/L）的多药耐药逆转有效率为经典耐药逆转剂维拉帕米（20 μmol/L）的71.6%,但毒副作用显著降低。结论：洛贝林对乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药性具有逆转作用,其机制主要为抑制细胞多药耐药蛋白P-gp的活性     

魁蒿的细胞毒成分

魁蒿ArtemisiaprincepsPamp．的全草提取物用于治疗炎症、腹泻和许多循环失调疾病，如月经失调、血尿和痔疮。现发现它对体外培养的人肿瘤细胞系具有显著的细胞毒性。由细胞毒性定向分离程序结合SRB（磺基碱性蕊香红-B）法（是美国NCI当前所采用的最流行的药物抗癌活性初筛法），从魁蒿中分离出4种细胞毒活性成分，可在体外对抗5种培养的人肿瘤细胞系：A549、SK－OV－3、SK－MEL－2、XF498和HCT－15。干燥植物（1．2kg）用甲醇室温提取7d，浓缩提取液得到糖浆状物质（150g），将其混悬在H2O中，继之分别以CH2Cl2和EtOAc进行分…     

不同转移倾向肿瘤亚株细胞内的微核观察

为了探讨恶性肿瘤转移与微核现象间的关系,本实验首次运用微核试验(MT)检测了小鼠腹水型肝癌(N_(22))及其肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))、淋巴结转移倾向亚株(N_(22)SL_(10))。小鼠子宫颈癌(U_(14))及其肺转移倾向亚株(U_(14)AP_(11))瘤细胞内的微核。比较了经活体筛选的上述亚株与未经筛选的原瘤株的微核细胞率(MNF)、总微核率,结果上述两项指标H_(22)SP_(10)及H_(22)SL_(10)均显著高于H_(22)(P值分别为<0.002、<0.005;<0.005、<0.001);U_(14)AP_(11)也显著高于U_(14)(P分别为<0.001、<0.001),而H_(22)SL_(10)与H_(22)SP_(10)(P>0.05、>0.05)。它表明在异质性N_(22)及U_(14)细胞群体中具有器官倾向性转移的细胞染色体畸变较重,可能为肿瘤演进的结果。     

双胸蚯蚓溶栓酶对沙鼠缺血额叶皮质超微结构及离子的影响

采用结扎沙土鼠双颈总动脉20分钟后恢复血流制做脑缺血再灌注模型。应用透射电镜对额叶皮质超微结构进行观察,并采用电镜能谱技术对神经元随机检测Na~十Ca~卄等离子含量。结果表明,缺血的对照组神经元Na~十明显增高达16.43,而缺血后腹腔注入双胸蚯蚓溶栓酶的实验组显著下降为13.02,接近正常组的11.47;Ca~卄正常组为1.03,对照组增高达3.81,而实验组下降为2.44。同时实验组超微结构的损伤性改变明显轻于对照组。     

大豆皂甙和人参茎叶皂甙对糖尿病大鼠血SOD和LPO的影响

本实验取雄性Wistar大鼠,分四组,即正常组,糖尿病组(DM组),人参茎叶皂甙(GS)+DM组(简称GS组),大豆皂甙(SS)+DM组(简称SS组)。观察其血糖、SOD、LPO的变化,结果,DM组血糖明显升高,GS组和SS组,血糖明显下降。DM组SOD含量明显减少,GS和SS使DM大鼠的SOD含量明显增加。DM组LPO含量增高,而GS组和SS组的LPO含量均明显降低。提示了GS和SS能通过自身调节增加DM大鼠SOD的含量,降低LPO,清除自由基,减轻了自由基的损伤作用,对DM大鼠有一定的防治作用。     

高效液相 (HPLC) 荧光法同时测定人血浆中4种硫醇物的浓度

 目的  建立同时测定人血浆中半胱氨酸(cysteine,Cys)、同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine,CysGly)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)等4种硫醇物的高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)。方法  血浆经磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)稀释后,用三(2-羧乙基)膦盐酸盐［tris-(2-carboxyethyl)-phosphine hydrochloride,TCEP］还原,用三氯乙酸(trichloroacetic acid,TCA)溶液进行蛋白沉淀,再用7-氟苯呋咱-4-硫酸铵盐(7-fluorobenzofurazan-4-sulfonic acid ammonium salt,SBD-F)进行衍生化反应,荧光检测器检测。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (250 mm×4.6 mm,5 μm),柱温29 ℃;流动相为甲醇:0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH=4.5,3.5∶96.5,V/V),流速为0.8 mL/min,等度洗脱。激发波长385 nm,发射波长515 nm。采用外标法定量。结果  Cys、Hcy、CysGly和GSH的线性范围分别为50~800 μmol/L、4~64 μmol/L、10~160 μmol/L和2.5~40 μmol/L。Cys、Hcy、CysGly和GSH的最低检测浓度分别为2.5 μmol/L、1.0 μmol/L、1.0 μmol/L和1.0 μmol/L。各组分日内、日间精密度RSD均<12 %。平均回收率为95.01 %~116.17 %。结论  该方法具有检测时间短、灵敏性高、精密度和准确度好的特点,适用于临床人血浆中硫醇物浓度的常规检测。     

高效液相色谱法检测人血浆中咖啡因及其3种去甲基代谢产物

以８－氯茶碱作为内标，利用高效液相色谱同时测定人血浆中咖啡及其３种去甲基代谢产物－－副黄嘌呤、可可碱和茶碱的方法。这４种物质可以在一个固定相柱子上被同时分离；流动相为甲；０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钠（３０：７０）（Ｖ／Ｖ）；流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ；紫外检测器，波长２７４ｎｍ。实验表明这４种物质的最小检出量均在７５ｎｇ／ｍｌ，并具有较好的线性、重复性及较高回收率。     

5种生物碱胃癌多药耐药逆转剂的筛选及机制研究

目的 研究骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱对肿瘤细胞多药耐药性（MDR）的逆转作用及机制。方法 以胃癌亲本细胞系SGC-7901和MDR细胞系SGC-7901/VCR为细胞模型,采用MTT法检测上述5种生物碱的细胞毒活性及对MDR的逆转效果;用流式细胞仪检测MDR逆转效果最好的贝母素乙对肿瘤细胞内阿霉素（ADR）蓄积的影响;Western blotting法检测P-糖蛋白（P-gp）的表达;Hoechst荧光染色和细胞免疫荧光法检测贝母素乙诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡情况。结果 骆驼蓬碱、去氢骆驼蓬碱、贝母素甲、贝母素乙和氧化苦参碱均能不同程度地抑制SGC-7901和SGC-7901/VCR细胞的增殖,在非毒剂量下贝母素乙能够显著提高SGC-7901/VCR细胞对ADR的敏感性及细胞内ADR的浓度,降低P-gp表达。贝母素乙联合5-氟尿嘧啶（5-FU）给药可诱导SGC-7901/VCR细胞凋亡,凋亡细胞cleaved caspase-3呈高表达。结论 贝母素乙具有作为胃癌MDR逆转剂的潜力,其逆转耐药的机制可能与下调P-gp表达和诱导细胞凋亡有关。     

不同转移倾向小鼠肝癌瘤株与冰切组织体外作用的实验研究

本实验利用小鼠腹水型肝癌(H_(22))的肺转移倾向亚株(H_(22)SP_(10))与淋巴结转移倾向亚株(H_(22)SL_(10))和小鼠的心、肺、肝、肾、淋巴结冰切组织于体外混合培养,观察了不同转移能力的肿瘤细胞与正常组织间的相互作用。于混合培养24、48h后,计数冰切组织上粘附的肿瘤细胞,肝、肾、淋巴结上粘附的H_(22)细胞多于其它脏器。H_(22)SP_(10)主要粘附于肝、肾、肺,而H_(22)SL_(10)则主要粘附于淋巴结,几乎不粘附于肺组织。混合培养后的生长曲线表明加入的正常组织对三种瘤细胞生长具有不同作用,加入的五种组织对H_(22)生长均有促进作用,加入心、肝、肾组织使H_(22)SP_(10)细胞于培养48h之前呈递增趋势,而加入肺、淋巴结组织使H_(22)SP_(10)细胞生长数低于对照组,加入心脏组织96h后H_(22)SL_(10)细胞数开始高于对照组,而加入其它组织均使H_(22)SL_(10)细胞数低于对照组。该结果表明在活体中呈器官倾向性转移的瘤细胞在体外具有与相应组织特异性粘附的能力,而且这些细胞与不同宿主组织间存在不同相互作用。     

反相高压液相色谱与荧光分光光度计朕机检测儿茶酚胺类物质

本文就高效液相与荧光分光光度计联机检测多巴胺、去甲肾上腺素、肾上腺素的方法加以论述。     

孕周与母儿血甲状腺激素含量的关系

目的：观察不同孕周与母儿血甲状腺激素的关系。方法：应用放射免疫分析法对67例中、晚期妊娠要求引产患者，10例早产及78例孕足月自然分娩患者进行了母血及胎儿脐静脉、脐动脉血中TSH、T3、T4的测定。结果：TSH值在母血及胎儿血中随着孕周的增加而增加．T3值在胎儿血中与母血中比较，显示低T3血症，T4值接近正常母体水平。结论：测定母血中的甲状腺激素，可动态观察不同孕周甲状腺激素变化，可及时发现胎儿低甲血症。     

胰岛素降糖反应延迟机理的初步探讨

本文对10例IDDM病人皮下注射胰岛素后作了7.5小时动态观察,测定了BG、FI、G、F和GH。基础BG高者,胰岛素最大降糖作用延迟,降糖过程中,GH的升糖效应最敏感,G和F升高与血糖回升时间相一致,在BG高者,呈延迟反应。这种延迟反应可能是由于血糖高,使到达刺激后二种升糖激素分泌阈值所需的时间延长有关。