重组人肿瘤坏死因子对白血病细胞生长抑制的研究

应用ＭＴＴ比色法研究了重组人肿瘤坏死因子（ｒｈＴＮＦα）对白血病细胞株ＨＬ６０和Ｋ５６２生长的抑制作用。实验结果表明，ｒｈＴＮＦα对白血病细胞生长的抑制作用有时相和剂量依赖关系。ｒｈＴＮＦα与ＨＬ６０和Ｋ５６２细胞分别培养１２ｈ，抑制率仅有６．２％和４．３％。当作用时间延长到２４ｈ时，抑制度分别达到５５．４％和４７．１％。ｒｈＴＮＦα的用量由０．０４μｇ／２×１０５细胞增加到５μｇ／２×１０５细胞时，对ＨＬ６０和Ｋ５６２细胞的生长抑制率也分别由１６．８％和６．４％增长到７７．１％和５９．３％。上述两种依赖关系的实验数据经单因素方差处理，有显著性差异。ｒｈＴＮＰα同抗肿瘤药Ｖｐ１６合用对白血病细胞生长的抑制有叠加作用。ｒｈＴＮＦα加入急性粒细胞白血病患者骨髓细胞培养体系后，对白血病细胞集落形成单位（ＣＦＵ－Ｌ）的生长有一定抑制作用。当ｒｈＴＮＦα为１μｇ／５×１０５白血病细胞时，对ＣＦＵ－Ｌ的抑制率可达４３．４％。     

4种细胞因子对K562／S及其耐药细胞株K562／A02积蓄柔红？…

目的 通过检测４种用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响。评价细胞因子在 病细胞多药耐药必贩应用前景方法 用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＩＮＦ）重组人粒－单集落刺因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２＝Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果 ＩＬ－１ ＩＮＦ、ＧＭ－ＣＳ     

反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株的耐药性

目的采用一段人工合成的互补于人ｍｄｒ１基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸（简称反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ，来逆转白血病细胞的多药耐药。方法ＭＴＴ法检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０，流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１／β２－ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５．７２μｇ／ｍｌ降至处理后的６．９７μｇ／ｍｌ，相对逆转效率为７３．０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加，Ｐ１７０表达阳性率从处理前的９８．６％±１．０％降至处理后的１８．３％±０．７％，ｍｄｒ１／β２－ＭＧ下降了０．５，ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。     

白头翁体外抗肿瘤实验研究

通过活细胞计数法、ＭＴＴ法、集落形成试验，研究了白头翁水提注（ＰＷＥ）和醇提液（ＰＡＥ）的体外抗肿瘤作用。结果：活细胞计数表明ＰＷＥ对７７２１、Ｈｅｌａ、ＭＫＮ－４５细胞株７２ｈＩＣ５０分别为０．８８、０．２８、０．８６ｍｇ／ｍＬ，ＰＡＥ５ｍｇ／ｍＬ对３种细胞４８ｈ生长抑制率分别为７８．７％、８９．５％、５８．９％；ＰＷＥ对３种细胞降解ＭＴＴ ＩＣ５０值分别为０．８２、０．６０、０．８１ｍｇ／ｍＬ     

反义核酸对人白血病HL—60细胞中c—myc基因表达的抑制

研究两个反义核酸（１８ｍｅｒ，２１ｍｅｒ）对人白血病ＨＬ－６０细胞中ｃ－ｍｙｃ基因表达的抑制作用。用ＨＬ－６０活细胞计数，ＲＮＡ含量的ＲＴ－ＰＣＲ测定和ｃ－ｍｙｃ基因蛋白的免疫组化染色检查，结果：两个反义核苷酸都以抑制ＨＬ－６０细胞的增殖，增殖抑制率为１１－７５％。反义核酸还抑制ｃ－ｍｙｃＲＮＡ和Ｍｙｃ蛋白的表达，而对ｃ－ｍｙｃ基因正常表达的红白血病细胞Ｋ５６２的增殖和ＰＨＡ刺激的人淋巴细胞的增殖     

重组人粒细胞集落刺激因子对K562细胞凋亡和其细胞毒药物敏感？…

目的 探讨重线人粒细胞集落刺激因子（ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２细胞凋亡和其细胞毒药物敏感性的影响。方法 采用流式细胞术和ＭＴＴ法分别测定细胞凋亡和细胞毒药物敏感性。结果 在低血清培养条件下,ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ对Ｋ５６２细胞的凋亡有抑制作用,其凋亡百分率与ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ浓度呈负线性样;ｒｈｕ Ｇ－ＣＳＦ可增加Ｋ５６２细胞对Ａｒａ－Ｃ的敏感性,而降低其对ＤＮＲ的敏感性,在Ａｒａ－Ｃ和ＤＮＲ联合     

4种细胞因子对K562/S及其耐药细胞株K562/A02积蓄柔红霉素的影响

目的通过检测４种常用细胞因子对白血病细胞株Ｋ５６２／Ｓ及其多药耐药细胞株Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素（ＤＮＲ）能力的影响,评价细胞因子在抗白血病细胞多药耐药性方面的应用前景。方法用流式细胞仪及荧光法检测重组人α－干扰素（ＩＦＮ－α）、白细胞介素２（ＩＬ－２）、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、重组人粒－单集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）对Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２积蓄柔红霉素能力的影响。结果ＩＬ－２、ＴＮＦ、ＧＭ－ＣＳＦ作用后Ｋ５６２／Ｓ及Ｋ５６２／Ａ０２细胞株对柔红霉素的积蓄无改变,而ＩＦＮ－α可显著提高耐药细胞系Ｋ５６２／Ａ０２细胞内ＤＮＲ浓度,在１５０ｍｉｎ时升高了４.０１倍（Ｐ＜０.０５）。结论小剂量（５００Ｕ／ｍｌ） α－干扰素作用后,多药耐药细胞株 Ｋ５６２／Ａ０２对抗肿瘤药物ＤＮＲ的积蓄作用大大提高,提示ＩＦＮ－α具有提高耐药细胞株细胞内药物浓度、恢复其药物敏感性、逆转多药耐药性的作用。     

小檗碱对K562细胞生长的抑制作用

目的 探讨小檗碱对Ｋ５６２细胞生长的抑制作用及对阿霉素（ＡＤＭ）耐药株Ｋ５６２／ＡＤＭ的影响。方法 细胞抑制率和细胞生长曲线测定采用台盼蓝排染法，克隆形成实验采用半固体培养基培养，镜下计数。结果 Ｋ５６２细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，呈作用时间和剂量依赖性，ＩＣ５０为２７．２（２４ｈ），４．６９（４８ｈ），１．２２（７２ｈ）ｍｇ／Ｌ。细胞增殖速度显著降低，２０ｍｇ／Ｌ达完全抑制。克隆原细胞存活曲     

小檗碱对K562细胞生长的抑制作用

目的探讨小檗碱对Ｋ５６２细胞生长的抑制作用及对阿霉素（ＡＤＭ）耐药株Ｋ５６２／ＡＤＭ的影响。方法细胞抑制率和细胞生长曲线测定采用台盼蓝排染法，克隆形成实验采用半固体培养基培养，镜下计数。结果Ｋ５６２细胞经小檗碱处理后生长明显受抑，呈作用时间和剂量依赖性，ＩＣ５０为２７．２（２４ｈ），４．６９（４８ｈ），１．２２（７２ｈ）ｍｇ／Ｌ。细胞增殖速度显著降低，２０ｍｇ／Ｌ达完全抑制。克隆原细胞存活曲线呈指数型，可超过２个指数杀灭。小檗碱对Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞有较强耐药性。结论小檗碱对Ｋ５６２细胞生长具有明显抑制作用，提示其可能作为抗肿瘤药。     

不饱和脂肪酸对肺癌细胞的抑制作用

不饱和脂肪酸（ＬＡ）浓度为２５μｇ／ｍｌ，对人肺腺癌细胞系（ＳＰＣ－Ａ１）细胞和二倍体人胚肺细胞系（ＨＬＦ）细胞抑制率分别为：９８．４±２．２％，１８．０±２．１％（Ｐ＜０．００１）。表现为对恶性细胞的选择性抑制作用。ＳＰＣ－Ａ１对５μｇ／ｍｌ ＬＡ无反应，１μＭ丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）对ＳＰＣ－Ａ１细胞抑制率为４３．４±２．９％而当用１μｍ ＭＭＣ处理这种对５μｇ／ｍｌ ＬＡ无反应的ＳＰＣ－Ａ１时，     

60Coγ射线对K562细胞及其耐热亚群杀伤作用的研究

目的　研究６０Ｃｏ γ射线对Ｋ５６２ 细胞及其耐热亚群的杀伤作用。方法　先诱导产生Ｋ５６２ 细胞耐热亚群,然后应用不同剂量６０Ｃｏ γ射线照射和５－ Ｆｕ 对Ｋ５６２ 细胞株及其耐热亚群的放射敏感性进行测定。结果　Ｋ５６２ 细胞耐热亚群对射线照射和５ － Ｆｕ 具有一定程度的耐受性;５ － Ｆｕ 联合不同剂量的照射有部分的相加作用。结论　Ｋ５６２ 细胞热耐受性、耐药性及放射抗性之间有一定的必然联系。提示在临床热疗工作中,必须采用合理的序贯和递降加温以设法避开或减弱肿瘤的热耐受期     

Wilms肿瘤基因反义寡苷酸对白血病细胞凋亡的影响

目的 了解Ｗｉｌｍｓ肿瘤基因（ＷＴ１）反义寡核苷酸（ＡＳＯ）对白血病细胞凋亡的作用。方法 应用ＷＴ１ＡＳＯ以及足叶乙甙（ＶＰ－１６）作用Ｋ５６２、ＨＬ－６０细胞系,然后应用流式细胞仪测定ＤＮＡ含量以确定白血病细胞的凋亡数。结果 Ｋ５６２细胞系经ＷＴ１ ＡＳＯ作用２４ｈ和６０ｈ后细胞凋亡数分别为１４．６％和２６．８％;而ＷＴ１有义寡核苷酸（ＳＯ）组分别为３．１％（２４ｈ）和３．９％（６０ｈ）;加入少     

自体LAK高效扩增法的建立及活性诱导实验

目的建立体外高效扩增自体ＬＡＫ细胞方法，并测定诱导扩增的ＬＡＫ细胞是否具有杀瘤细胞作用及表型变化。②方法取２８例不同类型的肿瘤病人外周静脉血液，经密度梯度离心获取ＬＡＫ细胞前体，以白细胞介素２（ＩＬ－２）作为诱导剂，应用独特的液相三步扩增方法扩增自体ＬＡＫ细胞。分别用间接免疫荧光（ＩＦＡ）和四甲基偶氮唑盐（ＭＴＴ）法，测定细胞表型和对肿瘤细胞的杀伤活性，并与对照组细胞进行比较。③结果以该法诱导扩增４～１２ｄ，细胞数量增加１２０倍，对Ｋ５６２和Ｒａｊｉ细胞杀伤活性最高达６１．７％和４０．１％（效∶靶＝５０∶１），与对照组细胞比较，差异有极显著性（ｔ＝４．５～４．７，Ｐ＜０．０１）。自体ＬＡＫ细胞具有成熟Ｔ细胞表型特点（ＣＤ３和ＣＤ８）。④结论此法可扩增出高数量和高效杀肿瘤细胞活性的自体ＬＡＫ细胞，并可推广临床应用     

PB230体外抗肿瘤活性的研究

目的：研究ＰＢ２３０对人胃癌细胞（ＭＧＣ８０－３）、人红白血病细胞（Ｋ５６２）和人乳腺癌细胞（ＭＣＦ－７）的生物抑制作用,探讨其抗癌作用机制,方法：采用ＭＴＴ法检测不同浓度ＰＢ２３０对体外培养的ＭＧＣ８０－３细胞系、Ｋ５６２细胞系和ＭＣＦ－７细胞系的生长抑制作用,结果：ＰＢ２３０明显抑制ＭＧＣ８０－３、Ｋ５６２和ＭＣＦ－３三种细胞系的生长,其ＩＣ５０值分别为２&;#215;１０＾－６－１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ之间,２&;#215;１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ和１&;#215;１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ,结论：ＰＢ２３０能直接抑制肿瘤细胞生长。     

低分子RNA抑制ConA与J6－1细胞膜受体结合的研究

提取Ｂｒｕｋｉｔｔ淋巴瘤（Ｎａｍａｌｖａ）细胞低分子ＲＮＡ与Ｊ６－１细胞悬液培养７２小时，掺入Ｆｒｒｃ标记的ＣｏｎＡ，于荧光显微镜下观察膜荧光细胞总数和帽状细胞数。结果显示实验组帽状细胞数明显减少并呈剂量依赖关系。提示低分子ＲＮＡ对白血病细胞增殖的抑制是通过作用于细胞膜而产生效应。     

人转铁蛋白-阿霉素结合物对耐阿霉素K562细胞的体外杀伤作用

目的 探讨阿霉素（ＡＤＭ）与人转铁蛋白（Ｔｆ）结合物对耐阿霉素Ｋ５６２细胞株的体外杀伤作用。方法 采用葡聚糖（ＤＥＸ）Ｔ－１０作为中介体、联接Ｔｆ与ＡＤＭ制备结合物Ｔｆ－ＡＤＭ,用ＭＴＴ法比较结合物对耐ＡＤＭ及ＡＤＭ敏感的Ｋ５６２细胞的体外杀伤作用强度。结果 结合物对耐ＡＤＭ的Ｋ５６２细胞株７２ｈ培养、ＭＴＴ法测定结合物对耐ＡＤＭ的Ｋ５６２细胞ＩＣ５０为４．９μｍｏｌ,游离ＡＤＭ的ＩＣ５０〉１７．２４μｍｏｌ,Ｔｆ对这两种细胞都没有体外杀伤作用。结论 结合物Ｔｆ－ＡＤＭ可提高ＡＤＭ对耐ＡＤＭ的Ｋ５６２细胞株的杀伤作用,此作用与Ｔｆ无明显关系。     

低分子RNA抑制ConA与J6－1细胞膜受体结合的研究

提取Ｂｒｕｋｉｔｔ淋巴瘤（Ｎａｍａｌｖａ）细胞低分子ＲＮＡ与Ｊ６－１细胞悬液培养７２小时，掺入Ｆｒｒｃ标记的ＣｏｎＡ，于荧光显微镜下观察膜荧光细胞总数和帽状细胞数。结果显示实验组帽状细胞数明显减少并呈剂量依赖关系。提示低分子ＲＮＡ对白血病细胞增殖的抑制是通过作用于细胞膜而产生效应。     

5—氟尿嘧啶及其与甲酰四氢叶酸合并用药对7402肝癌细胞…

为了探讨５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）和５－Ｆｕ合并酰四氢叶酸（ＦＨ４）用药对７４０２肝癌细胞Ｎ－ｒａｓ癌基因表达的影响，采用了异硫氰酸胍法从加有５－Ｆｕ和５－Ｆｕ与ＦＨ４合用的７４０２肝癌细胞中分别提取７４０２肝癌细胞ＲＮＡ进行斑点杂交。结果显示：单独使用５－Ｆｕ，杂交斑点明显变小。５－Ｆｕ杂交斑点明显变小。５－Ｆｕ与ＦＨ４合并使用，杂交斑点完全消失。表明５－Ｆｕ抑制７４０２肝癌细胞Ｎｒａｓ癌基因的表     

安替可胶囊抗肿瘤作用的机理

目的：探讨安替可（Ａｎｔｉｋｅ）胶囊抗肿瘤的作用机理．方法：采用移植瘤模型、常规体液和细胞免疫测定、细胞毒结晶紫染色、比色及同位素参入等方法，观察Ａｎｔｉｋｅ及其组分蟾皮（ＳＴ）和当归（ＡＳＤ）的抗肿瘤作用、诱导ＴＮＦ、ＮＫＣ、ＩＬ－２活性、血中过氧化氢酶（ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和组织中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及脾和瘤细胞中３Ｈ－ＵＲ参入ｃｐｍ等指标．结果：①Ａｎｔｉｋｅ，ＳＴ和ＡＳＤ及５－Ｆｕ对Ｈ２２移植瘤的瘤重抑制率分别为４５．０５％，４３．９５％，２７．７９％，５５．７９％（Ｐ＜０．０１）；②Ａｎｔｉｋｅ和ＡＳＤ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ分别为２５９．０±４０．８和２１４．８±４３．５Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率为７３．３９％，６７．４７％（Ｐ＜０．０１），显著增强ＩＬ－２活性（Ｐ＜０．０１），提高ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ和移植瘤中ＳＯＤ含量（Ｐ＜０．０１），显著降低瘤细胞ｃｐｍ（Ｐ＜０．０１）；③ＳＴ诱导ＭΦ释放ＴＮＦ为１７７．１±４２．９Ｕ·μｌ－１（Ｐ＜０．０１），ＮＫＣ杀伤率６７．７４％（Ｐ＜０．０１），增强ＩＬ－２活性；但对荷瘤小鼠血中ＣＡＴ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＳＯＤ     

MDR1反义RNA表达质粒的构建及其在多药耐药细胞抗药机理研究中的应用

ＭＤＲ１反义ＲＮＡ表达质粒的构建及其在多药耐药细胞抗药机理研究中的应用曹江，胡汛，潘锵荣，郑树Ｋ５６２／Ｄｏｘ为一典型的多药耐药（ＭＤＲ）细胞株［１］，常规培养于含阿霉素（Ｄｏｘ）０．１μｇ／ｍｌ的培养液内。我们将高表达反义ＭＤＲｌ－ＲＮＡ（核糖核酸...