大鼠问充质干细胞对肝肿瘤趋向性及其间质的影响

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)在体内对肝肿瘤微环境的趋向性以及BMSC对肝肿瘤间质的影响.方法获取大鼠BMSC,分离、培养、扩增.应用超顺磁氧化铁(SPIO)颗粒标记细胞,普鲁士蓝染色鉴定.应用walker-256细胞株肝内种植制备大鼠肝肿瘤模型.实验分为两个实验组,(1)肿瘤成块后BMSC干扰组:肝内种植walker-256细胞6～8 d后,磁共振(MR)观察肝内成瘤后,大鼠尾静脉植入磁性标记的BMSC;(2)肿瘤成块前BMSC干扰组:肝内种植walker-256细胞3 d后,MR观察肝内未成瘤的大鼠,于尾静脉植入磁性标记的BMSC;一个单纯肝内种植肿瘤细胞的对照组.实验组分别在BMSC移植前及移植后5、10及15 d行MR扫描,每次成像后处死若干大鼠,取出肝脏及肿瘤组织分别行HE染色、普鲁士蓝染色,取BMSC移植后第10天的实验组大鼠及相应对照组大鼠组织行血管内皮生长因子(VEGF)、CD31、vWF免疫组化染色.结果 BMSC普鲁士蓝染色表明BMSC的磁标记率达90％.移植后第5、10天,实验组MR扫描T<,2>WI显示肿瘤边缘出现结节状低信号,移植后第15天无明显低信号,对照组肿瘤信号无明显变化.普鲁士蓝染色显示移植后5、10及15 d肿瘤边缘及瘤内有蓝染的BMSC颗粒.移植后第10天,两个实验组的VEGF、CD31、vWF的表达均高于对照组(F=34.03,P<0.01;F=84.24,P<0.01;F=7.08,P<0.05).结论 大鼠BMSC在活体内对肝肿瘤有明显的趋向性,并在肝肿瘤内促进血管内皮的生成.     

Walker-256大鼠移植性肝癌模型探讨

目的 Walker-256细胞质肝内接种制备大鼠移植性肝癌模型.方法 取体重150～180g雄性Spraque-Dawley (SD)大鼠72只,随机分为实验组和对照组:实验组(n=60)肝内接种Walker-256细胞质;对照组(n=12)肝包膜下注射相同剂量的生理盐水,1周后观察肿瘤大小、并进行病理学检测.结果 实验组大鼠共有15只大鼠死亡,而移植瘤肝癌模型出瘤率为100% (45/45),大多数大鼠伴有肺以及腹腔转移,并且均经过病理学证实.结论 Walker-256细胞质肝内接种可以成功建立适宜临床研究的肝癌模型.     

化疗栓塞对大鼠Walker-256肝肿瘤移植模型微血管密度、VEGF和bFGF表达的影响

目的：用大鼠Walker-256肝肿瘤移植模型研究化学栓塞对肿瘤微血管密度（MVD）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）和成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响。 方法：60只大鼠肝肿瘤模型在种植后第14天随机分成3组，分别经肝动脉注入超液态碘油0.5 mL(A组）、超液态碘油0.5 mL加5-Fu 20 mg•kg^-1（B组）和生理盐水0.5 mL (对照组)。于术后第7天取肝脏标本，免疫组化法检测肿瘤组织MVD、VEGF和bFGF的表达，同时分析VEGF表达强度与MVD的相关性。结果：各组MVD 差异无显著性（P>0.05）；A组和B组瘤内VEGF阳性率和平均染色强度明显高于对照组（P<0.05, P<0.01），而A组与B组之间差异无显著性（P>0.05）。VEGF表达强度与MVD呈显著正相关（r=0.451，P<0.01）。bFGF阳性率和平均染色强度各组差异无显著性（P>0.05）。 结论:化疗药物栓塞后残存瘤组织具有丰富的血供，提高了残存肿瘤组织VEGF的表达，VEGF和MVD可能在术后肿瘤血供的重建中起重要作用。     

不同剂量rmhTNF对大鼠移植性肝癌的治疗作用

目的观察肌肉注射重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)对大鼠移植性肝肿瘤(Walker-256)生长的抑制作用。方法将24只Wistar大鼠采用移植法建立Walker-256肝癌模型,移植成功后第11d行MRI检查,测量肿瘤体积(V1),再随机分成3组,对照组肌注生理盐水0.1ml,肌注1组肌注rmhTNF 16.7万u,肌注2组肌注rmhTNF 33.3万u,均为1次/d,连续10d后停止注射。第14d再行磁共振检查以确定肿瘤体积(V2),对3组间肿瘤生长率(V2/V1)进行比较。结果与对照组比较,肌注组对大鼠Walker-256移植性肝癌的生长均有较明显的抑制作用,但无明显剂量依赖关系。结论肌肉注射rmhTNF对大鼠Walker-256移植性肝肿瘤生长具有显著的抑制作用。     

重组人血管内皮抑素联合TACE抗大鼠Walker-256细胞移植性肝癌血管生成的作用

目的 探讨重组人血管内皮抑素(rh-ES)联合肝动脉化疗栓塞术(TACE)对大鼠移植性Walker-256肝癌模型血管内皮生长因子(VEGF)表达和微血管密度(MVD)影响,评价rh-ES与TACE联合治疗对抑制大鼠移植性肝癌模型血管生成的疗效.方法 建立Wistar大鼠Walker-256肝癌模型,1周后随机分成治疗...     

多西紫杉醇在肝癌细胞裸鼠肝脏移植瘤中对P53、VEGF作用的研究

目的探讨多西紫杉醇在肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤中与血管内皮生长因子(VEGF)、肿瘤抑制蛋白(p53)表达的研究.方法建立肝癌细胞株SMMC-7721裸鼠皮下移植瘤模型,建模成功后,将20只裸鼠分成两组,多西紫杉醇组及肿瘤对照组.3周后处理裸鼠,应用免疫组化Envision法检测实验组与对照组肝癌组织中p53、VEGF表达情况.结果实验组肝癌组织中p53表达阳性率41.26%,显著低于对照组肝癌组织的p53表达阳性率87.16%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).实验组肝癌组织中VEGF表达阳性率为36.79%,显著低于对照组肝癌组织的VEGF表达阳性率68.27%,两者间差异有统计学意义(P<0.05).结论p53在诱导肝癌细胞凋亡中起到重要作用,VEGF过度表达在肝癌微血管生成过程中起重要作用,多西紫杉醇可降低p53、VEGF的表达,从而起到移植肿瘤生长及转移的作用.     

生长抑素对肝癌大鼠血管内皮生长因子的影响及病理学改变

[目的]探讨生长抑素对大鼠肝癌细胞血管内皮生长因子产生能力及生长的影响。[方法]取腹腔接种肝癌瘤株(CBRH-3)大鼠20只,随机分为实验组和对照组,实验组每只大鼠在接种肿瘤细胞24 h后,腹腔注射人工合成生长抑素类似物-奥曲肽(100μg.kg-1.d-1),连续7 d;对照组大鼠,腹腔注射生理盐水0.5 mL/d,连续7 d。第8天处死大鼠,测量肿瘤大小,免疫组织化学法检测肿瘤血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况。[结果]肿瘤平均体积实验组为1.26 cm3明显小于对照组2.57 cm3(P<0.05);与对照组相比实验组肿瘤细胞坏死明显;实验组的VEGF表达积分5分明显低于对照组的9分(P<0.05)。[结论]生长抑素对大鼠肝癌的生长具有抑制作用,这种抑制作用可能通过抑制血管生成完成。     

超声靶向微泡破裂内皮祖细胞移植干预大鼠慢性移植物血管病的实验研究

目的探讨超声靶向微泡破裂(UTMD)内皮祖细胞(EPCs)移植干预大鼠慢性移植物血管病(CAV)的效果。方法实验于2016年1月—2017年3月在四川大学实验室进行。选取成年雄性SD大鼠40只,随机分为4组:同种移植对照组(n=10),供、受体均为SD大鼠,无特殊处理;异种移植组(n=10):SD大鼠接受Lewis大鼠腹主动脉移植,尾部静脉注射生理盐水1 ml;EPCs组(n=10):实行异种移植,并于尾部静脉注射EPCs悬液1 ml;UTMD+EPCs组(n=10):实行异种移植,行体外UTMD处理后再经尾部注射EPCs悬液1ml。移植60 d后取出移植血管,观察其组织病理学变化,测量内膜厚度,分别应用免疫组织化学法及Western blot法测定各组移植动脉增殖细胞核抗原(PCNA)、血管内皮生长因子(VEGF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平。结果同种移植对照组移植血管形态正常;异种移植组血管内膜明显较同种移植组明显增厚,呈移植物血管病表现;EPCs组与UTMD+EPCs组血管内膜厚度较异种移植组减少,而UTMD+EPCs组血管内膜厚度较EPCs组减少(P均<0.05),与异种移植组相比,EPCs组与UTMD+EPCs组PCNA、VEGF TNF-α表达水平明显下降(P均<0.05),且UTMD+EPCs组PCNA、VEGF TNF-α表达水平低于EPCs组(t=7.114、6.230、2.196,P均<0.05)结论超声靶向微泡破裂可提高EPCs治疗CAV的效果,能更好地降低异体移植动脉PCNA、VEGF、TNF-α表达,可修复受损内膜,抑制CAV发生。     

娜仁满都拉-11对鼠种植性胃肿瘤细胞P16表达的影响

目的:研究蒙药娜仁满都拉-11对大鼠种植性胃肿瘤细胞P16表达的影响;从细胞分子水平探讨该药的抗肿瘤作用机制。方法:建立Walker-256种植性胃肿瘤大鼠模型。再将肿瘤鼠随机分为3组:娜仁满都拉-11治疗组(每日670 mg/kg)、阴性对照组(生理盐水组)、阳性对照组(5-Fu组)。给药(灌胃)2周后取出瘤组织,测其抑瘤率;免疫组化方法检测种植瘤P16的表达。结果:①成功建立Walker-256移植性胃肿瘤大鼠模型;②与阴性对照组比较,治疗组P16表达上调(P<0.05)。结论:娜仁满都拉-11对大鼠Walker-256种植性胃肿瘤具有一定的抑制作用,通过上调P16,阻断瘤细胞由Gl期向S期过渡,从而抑制肿瘤细胞生长,可能是娜仁满都拉-11抗瘤作用机制之一。     

大鼠种植性肝癌组织端粒酶活性的变化

目的:检测大鼠种植性肝癌模型中各种不同组织的端粒酶活性水平,并探讨端粒酶在恶性肿瘤生长过程中的作用.方法:建模成功后第4、6、8天应用TRAP-ELISA法对18例Walker-256荷瘤大鼠的肿瘤组织及其对应的癌旁组织和正常肝组织的端粒酶活性进行检测.结果:建模后第4、6、8天18例肿瘤组织中端粒酶活性依次为(0.767±0.117)、(0.768±0.118)、(0.774±0.111),癌旁组织端粒酶活性依次为(0.389±0.263)、(0.492±0.253)、(0.584±0.239),正常肝组织端粒酶活性依次为(0.231±0.022)、(0.229±0.022)、(0.233±0.021).各时间点肿瘤组织中端粒酶活性均明显高于癌旁组织及正常肝组织(P<0.05);不同生长时间肿瘤组织中的端粒酶活性无显著差异;随着肿瘤的生长,癌旁组织的端粒酶活性显著增高(第4天与第8天组间比较,P<0.05).结论:荷瘤大鼠Walker-256瘤组织中端粒酶活性明显高于正常肝组织与癌旁组织,端粒酶活性水平是灵敏的恶性肿瘤标记物,癌旁组织中端粒酶的活化可能是促进肿瘤生长的一个重要因素.     

骨髓间充质干细胞在兔肿瘤组织中的分布与分化

目的 探讨骨髓间充质干细胞（MSC）进入肿瘤组织后在肿瘤组织中的分布及其在肿瘤局部微环境诱导下能否分化为肌纤维母细胞。方法 24只新西兰兔随机分为实验组与对照组,每只动物抽取骨髓培养成功MSC后,移植vx-2瘤块制作膀胱vx-2肿瘤动物模型。两组动物移植肿瘤1周后,实验组培养的F2代自体MSC经DAPI标记后回输生成的膀胱肿瘤内,对照组则输入DMEM培养基。两组动物移植vx-2瘤块后第1、2、3、4周均行B超检查1次,记录每只动物肿瘤最大径,计算每组肿瘤最大径平均值。第3周两组各处死1只肿瘤直径最接近各组平均值的动物,第4周处死所有动物。另有1只动物按照实验组的处理方法回输自体MSC1周后处死,观察MSC在肿瘤中的分布。免疫荧光切片追踪回输的自体MSC在肿瘤组织中的分布及其转分化情况。α-SMA、波形蛋白双重标记免疫荧光染色鉴定MSC在肿瘤组织中是否转分化为肌纤维母细胞。结果移植肿瘤后第1周两组B超检查均未发现肿瘤生成;第2周对照组肿瘤最大径平均为（0．70±0．14）cm,实验组为（0．78±0．14）cm,但两组相比较差异无统计学意义（t=1．308,P=0．204）。第3、4周实验组肿瘤的生长速度逐渐增快,两组肿瘤最大径平均值的差异逐渐增大,且两组相比较,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。MSC回输肿瘤组织后第1周均匀分布于肿瘤组织内,第3周多分布于肿瘤间质内。双重标记免疫荧光染色显示,MSC回输入肿瘤组织第3周后α-SMA、波形蛋白表达显著增高,表明MSC在肿瘤组织中已分化为肌纤维母细胞。结论 MSC进入肿瘤组织后开始均匀分布于肿瘤组织内,之后分布于肿瘤间质内,并且可以促进肿瘤的生长,在肿瘤局部微环境的诱导下可以分化为肌纤维母细胞。     

骨髓间充质干细胞治疗大鼠糖尿病肾病初探

目的 探索骨髓间充质干细胞(MSCs)经体外扩增培养后移植入糖尿病肾病大鼠体内能否改善或者治疗糖尿病肾病.方法 SD大鼠60 mg/kg STZ一次性腹腔注射,糖尿病成模后4周,成功制备糖尿病肾病大鼠被随机分为:糖尿病肾病对照组(n=12)和干细胞移植组(n=12),另选6只正常大鼠作为对照组.MSCs经体外培养、鉴定、BrdU标记后,心脏注射到干细胞移植组大鼠体内(2×106 MSCs/200 μL),一周后再次注射等量干细胞.于末次注射后1、2、8周测定大鼠血糖、体质量、24 h尿总蛋白、肌酐清除率、肾脏肥大指数,观察大鼠肾脏病理变化和标记干细胞体内作用情况.结果 MSCs体外扩增培养后表达间充质细胞的表型抗原,能多向分化为成骨、成脂细胞.在体内能趋化到受损肾脏,但在干细胞定植部位未发现增殖细胞.干细胞移植组和糖尿病肾病对照组在各观察时点血糖、尿总蛋白、肌酐清除率、肾脏肥大指数均明显高于正常对照组(P<0.05), 体质量均低于正常对照组(P<0.01).干细胞治疗后1周移植组较糖尿病肾病对照组血糖降低[(26.7±2.8) vs (29.9±1.6) mmol/L,P<0.05].在第2、8周,移植组较糖尿病肾病对照组24 h尿总蛋白降低,但差异无统计学意义.干细胞移植组肌酐清除率低于糖尿病肾病对照组,在治疗后2周两组差异有统计学意义[(8.6±1.9) vs (17.1±1.6) mL/min,P<0.05].在第2周干细胞移植组的肾脏肥大指数较糖尿病肾病对照组减少(5.5±0.1 vs 6.2±0.3, P<0.05),但高于正常对照组(3.2±0.2).结论 发现MSCs经体外培养标记后在体内能趋化到糖尿病肾病大鼠肾脏,可以暂时改善糖尿病肾病.     

骨髓间充质干细胞移植抗大鼠肝纤维化的作用及机制

目的：探讨骨髓间充质干细胞（ MSCs ）移植对大鼠肝纤维化模型的作用与机制。方法分离大鼠MSCs培养传代至第4代。采用大鼠腹腔注射四氯化碳制造肝纤维模型。将造模成功SD大鼠60只,随机分为3组,每组20只：（1）对照组：鼠尾静脉注射等量的生理盐水;（2） MSCs 组：鼠尾静脉注射MSCs 悬液;（3）诱导组：鼠尾静脉注射经肝细胞生长因子（HGF）诱导14 d后的MSCs悬液。于移植后第1周、2周、3周、4周分别处死大鼠5只,检测大鼠血清透明质酸（ HA）、层黏蛋白（ LN）、Ⅳ型胶原水平;光镜下观察肝组织纤维化程度;分别用PCR法及Western检测大鼠肝脏Col-Ⅰ、RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA基因及其蛋白质表达水平。结果（1）诱导组与MSCs组的纤维化程度评分随着时间延长逐渐下降,且在第4周诱导组评分明显低于MSCs组（ P＜0．05）。（2）移植3周后各组血清HA、LN、Ⅳ型胶原含量均显著下降,4周时诱导组和MSCs组各指标含量明显低于对照组,并且诱导组低于MSCs组（ P＜0．05）。（3） MSCs移植后诱导组、MSCs组大鼠肝脏组织Col-Ⅰ、RhoA、Cdc42、Rac1 mRNA和蛋白表达均随时间延长而下降,移植4周时诱导组各项指标明显低于MSCs组和对照组（ P＜0．05）。结论 MSCs移植可抑制肝纤维化大鼠肝组织中HA、LN、Ⅳ型胶原的分泌,并可下调肝纤维化大鼠肝组织Rho信号通路相关因子RhoA,Cdc42,Rac1 mRNA及蛋白表达。 HGF诱导MSCs后抗大鼠肝纤维化作用显著增强。     

Distribution and differentiation of mesenchymal stem cells in tumor tissue

Background Tumor has an ability to become enriched in mesenchymal stem cells （MSCs） and of guiding MSCs to migrate to tumor tissue. But there are lack of relevant reports on the distribution and differentiation of MSCs in tumor tissue and the effect on tumor growth after MSCs engrafted in tumor tissue. In this study, we observed the distribution of bone marrow MSCs in tumor tissue and the possibility of MSCs differentiating into myofibroblast under the induction of local tumor microenvironment.
Methods Twenty-four New Zealand rabbits were randomly classified into the control group and the test group. MSCs were isolated and cultured for each animal, vx-2 tumor tissue was transplanted under the bladder mucosa of each animal One week after the transplantation, the self F2 passage MSCs marked by 4＇,6-diamidino-2-phenylindole were transplanted into tumor tissue in the test group while only Dulbecco＇s modified Eagle＇s medium-low glucose was infused into the control group. Ultrasonography was performed for each animal 1, 2, 3 and 4 week（s） after the vx-2 tumor mass was transplanted. The maximum bladder tumor diameter of each animal was recorded and the mean value of each group was calculated. One animal from each group was sacrificed in the third week and the remaining animals in the fourth week to observe the tumor development. Another animal treated the same as the test group was sacrificed to observe the distribution of MSCs in tumor tissue one week after self MSCs transplantation. Immunofluorescence was used to trace MSCs in tumor tissue. The double labeling immunofluorescence for α-smooth muscle actin （α-SMA） and vimentin was performed to identify whether the MSCs can differentiate into myofibroblast.
Results The ultrasonography showed no tumor mass one week after the vx-2 tumor mass transplantation. The mean maximum tumor diameter of the control group and test group was （0.70±0.14） cm and （0.78±0.14） cm, respectively, and there was no significant difference （t=1.308, P=0.204）. The tumor growth rate of the test group increased gradually in the third and fourth weeks, and the difference of the mean maximum tumor diameter between the two groups also increased gradually and was statistically significant （P 〈0.05）. MSCs distributed uniformly in tumor tissue one week after transplantation while most were distributed in the tumor stroma three weeks after transplantation. The double labeling immunofluorescence showed that the expression of α-SMA as well as Vimentin increased significantly three weeks after mesenchymal stem cells engrafted into tumor, indicating that MSCs had differentiated into myofibroblasts under the induction of the tumor microenvironment.
Conclusion MSCs can accelerate the tumor development and can differentiate into myofibroblast under the induction of tumor microenvironment.     

骨髓基质细胞移植对兔心肌羟脯氨酸和基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的:评价骨髓基质细胞移植对组织羟脯氨酸(Hyp)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,探讨细胞移植对心肌梗死后心室重塑机制。方法:分离培养兔骨髓基质细胞(MSC);30只日本大耳白兔制作心肌梗死模型,随机分为MSC组、安体舒通组和对照组。2周后MSC组沿梗死周边区域注射MSC悬液(3×109/100μL),安体舒通组服用安体舒通20mg,对照组注射DMEM培养基100μL。TTC染色计算梗死面积,心脏超声评价心功能,碱水解法测定血浆和心肌组织中Hyp含量,ELISA法检测MMP-9表达。结果:与对照组、安体舒通组相比,MSC组心肌梗死面积减少(P<0.05)、心功能提高(P<0.05);血浆、心肌组织羟脯氨酸含量下降(P<0.05)、MMP-9表达增多(P<0.05)。结论:骨髓基质细胞移植可抑制组织羟脯氨酸合成,促进基质金属蛋白酶表达,增加心肌胶原降解,抑制心肌局部间质纤维化。     

骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后心脏功能及损伤血管再狭窄的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(MSC)移植改善心肌梗死后心功能的变化,及其治疗的安全性.方法 建立兔右侧颈动脉粥样硬化狭窄和心肌梗死早期再灌注模型并行右侧颈动脉球囊损伤,建模后分为MSC移植组和对照组,经耳缘静脉注射MSC或等体积的磷酸盐缓冲液.移植后1周观察MSC的归巢;2周时免疫组织化学染色检测血管和心肌组织中血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的表达;移植后4周颈动脉造影检测血管狭窄程度,HE染色测定新生内膜面积及血管狭窄率,并同步测定心脏功能和心肌梗死面积、计数梗死心肌周围毛细血管密度.以及移植后对球囊损伤血管再狭窄产生的影响.结果 细胞移植后1周在梗死的心肌组织和损伤血管内膜均有4′,6-联脒-2-苯基吲哚二盐酸盐(DAPI)标记的MSC归巢.移植后2周MSC移植组的损伤血管内膜见CD31连续性表达,而对照组无表达.与对照组比较(50.5±3.6)%,MSC移植组血管组织增殖细胞核抗原的表达明显降低[(23.4±2.8)%,P＜0.05].4周时损伤血管的新生内膜面积(0.092±0.009比0.189±0.007,P＜0.05)及血管再狭窄率在MSC移植组[(41.7±3.7)%]明显小于对照组[(61.3±1.6)%,P＜0.05].与对照组比较,4周时MSC移植组的心功能有所改善,心肌梗死面积缩小[(21.7±2.2)%比(34.3±1.8)%,P＜0.05],梗死心肌周围新生毛细血管密度明显增加[(33.6±2.0)%比(20.8±2.6)%,P＜0.05].结论 MSC移植在改善梗死心脏功能的同时,对促进损伤血管的再内皮化和减轻新生内膜的增殖可能产生有益作用,从而有助于减轻损伤血管的再狭窄.

Abstract：

Objective Although earlier studies have shown that the transplantation of mesenchymal stem cells (MSCs) might improve cardiac functions after myocardial infraction, its role on vascular restenosis after percutaneous coronary intervention (PCI) remains controversial.The aim of this study was to investigate the effects of MSCs on the restenosis of injured artery following balloon angioplasty in a rabbit model with both myocardial infarction reperfusion and atherosclerotic stenosis cardotid artery by balloon injury.Methods After the animal model was established for myocardial infraction reperfusion and atherosclerotic stenosis cardotid artery by balloon injury, the rabbits received an intravenous transplantation of MSCs.And an equal volume of phosphate buffered solution was administered for the control group.The animal vascular tissue and myocardium tissue were excised at different time points post-transplantation and used to detect the homing of MSCs and the expressions of playlet-endothelial cell adhesion molecule-1 (CD31) and proliferating cell nuclear antigen (PCNA) by immunohistochemical staining.Four weeks later, vascular restenosis was analyzed by angiography of bilateral carotid arteries and the vascular tissues were used for histological studies.Results At one week post-transplantation, the 4', 6-diamidino-2-phenylindole (DAPI)-labeled MSCs could be detected in myocardial infarction and injured intima.And the intimal expression of CD31 was observed at 2 weeks in the MSCs transplantation group.Yet the expression of PCNA was significantly lower in the MSCs transplantation group than that in the control group (50.5% ± 3.6% vs 23.4% ±2.8%, P ＜0.05).At 4 week post-transplantation, the neointimal area of injured vessels and the vascular restenosis were significantly lower in the MSCs transplantation group than those in the control group (0.092±0.009 vs0.189 ±0.007, P＜0.05;41.7 ±3.7 vs 61.3 ±1.6, P＜0.05).Furthermore the MSCs transplantation group demonstrated improved cardiac functions, reduced myocardial infarct size (21.7% ±2.2% vs 34.3% ± 1.8%, P ＜ 0.05) and significantly increased capillary density around infarction foci (33.6% ±2.1% vs 20.8% ±2.6%, P ＜0.05 ) versus the control group.Conclusion The transplantation of MSCs plays significant roles in cardiac repairing in terms of improved cardiac functions, accelerated repair of injured vessels, suppression of neointimal hyperplasia and reduced restenosis of injured vessels.     

比较不同方式移植的人间充质干细胞在大鼠失神经支配的骨骼肌的分布及对坐骨神经损伤的影响

目的:探讨干细胞治疗神经肌肉疾病的更为可能而有效的给药途径及对坐骨神经损伤后修复的影响.方法:体外分离培养人间充质干细胞,经鉴定标记后备用.将54只SD大鼠随机分为肌肉注射干细胞组(肌注组)、静脉注射干细胞组(静脉组)和肌肉注射生理盐水组(对照组),每组18只.所有大鼠均建立坐骨神经损伤模型,3天之后,将106个干细胞通过肌肉注射和静脉注射分别移植到损伤大鼠模型中,于移植后3、7、14、21、28、60 d,观察坐骨神经功能指数、电生理指标和肌肉病理结果.结果:三组大鼠在观察期间均呈不同程度的失神经和神经再生现象.肌注组的腓肠肌肌电图自发电位减少,且动作电位出现的时间早于静脉组和对照组.移植后14 d开始,肌注组大鼠的传导速度明显快于静脉组和对照组[分别为(32.27±7.42) m/s,(22.92±7.34) m/s和(17.67±5.52) m/s; F=5.661,P=0.042],60 d时,三组的传导速度差异无统计学意义(P＞0.05),而波幅改变肌注组为(12.50±2.06) mV,静脉组为(1.50±0.20) mV,对照组为(10.13±4.04) mV,差异仍有统计学意义(F=6.347, P=0.033).肌注组至少在3周内均可见干细胞的存活,其在光镜下呈幼稚状态,大部分在肌细胞周边,少数散在肌细胞内.静脉组在腓肠肌中未见标记细胞.60 d时肌注组腓肠肌的萎缩程度比静脉组和对照组轻,三组肌纤维直径的差异有统计学意义(F=4.537,P=0.021).结论:肌肉注射人间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤和腓肠肌失神经萎缩具有促修复作用;肌肉注射是比较有效的一个给药途径.     

靶向抑制 DNMT1对人脑胶质瘤细胞增殖的影响

目的：应用靶向 DNA 甲基转移酶1（DNMT1）基因的小干扰 RNA（siRNA）重组质粒来转染体外培养的人脑胶质瘤细胞,观察其对胶质瘤细胞增殖活性的影响。方法实验组予以 siRNA-DNMT1序列进行转染,对照组仅予以 siRNA-阴性对照序列。应用 qRT-PCR 分析 DNMT1基因表达变化, Western blot 法分析 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达变化,MTT 法检测细胞增殖生长能力,细胞克隆法分析细胞增殖克隆形成能力。结果与对照组比较,qRT-PCR 结果表明实验组 DNMT1 mRNA 表达明显减少（ P <0.01）;Western blot 法表明实验组 DNMT1、PCNA 和 Cyclin D1蛋白表达水平明显降低（P <0.01）;MTT 法检测表明实验组中活细胞数明显低于对照组（P <0.05）;细胞克隆法表明实验组细胞的增殖克隆形成能力明显低于对照组（ P <0.01）。结论靶向 DNMT1基因的 siRNA 重组质粒可减少人脑胶质瘤细胞内 DNMT1基因的表达,从而抑制胶质瘤细胞的增殖。     

脐带间充质干细胞对C57BL/6小鼠Lewis肺癌生长及转移的影响

目的 利用Lewis肺癌动物模型,探讨脐带来源的MSC对恶性肿瘤生长及其转移的影响。方法 将16只C57BL/6小鼠分别建立Lewis肺癌模型,随机分为对照组（NS组）和MSC组,每组8只,MSC组分别于接瘤后第7、12、17天时,尾静脉注射给予脐带MSC（1×106/只）,在第21天时处死全部荷瘤小鼠,观察瘤体生长情况及肺转移情况。结果 NS组和MSC榈钠骄鲋胤直鹞?.5875±1.04g、 4.155±1.13g,两组相比没有显著性差异（P>0.05）。NS组和MSC组的平均肺转移数分别为3.75±1.39个、1.13±1.13个,抑制转移率为70.0%,两组相比具有显著性差异（P<0.001）。结论 脐带来源的MSC对C57BL/6小鼠Lewis肺癌本身的生长无影响,但能够明显抑制肿瘤的转移。     

Role of connective tissue growth factor in experimental radiation nephropathy in rats

Background Connective tissue growth factor （CTGF） is a potent fibrogenic cytokine which has been associated with progressive glomerulosclerosis and tubulointerstitial fibrosis. We investigated the role of CTGF on the progression of a rat model of radiation nephropathy. Methods The model of radiation nephropathy in rats was established as follows： control group （n=12）, underwent only laparotomy; irradiated group （n=-20）, underwent a laparotomy, then the rats were subjected to a single dose 25 Gy X-ray to the kidneys. The rats were followed up one, three, six and nine months after renal exposure to radiation. Results Renal dysfunction was noted early in irradiated rats. Histological analysis showed focal glomerular sclerotic lesions at an early stage after irradiation. Radiation-induced glomerular and tubulointerstitial injuries were particularly severe the sixth month after irradiation as compared to the control group （P 〈0.01）. By immunohistochemistry, increased expression of CTGF was noted in the irradiated kidneys, which began to increase from the first month after irradiation, and remained significantly higher at the sixth and ninth month after irradiation （P 〈0.01）. Upon Western blot analysis CTGF protein expression showed an increase in the radiation treated kidneys compared with the control rats. The expression of CTGF closely correlated with the progression of radiation nephropathy. The expression of α-smooth muscle actin, vimentin, type Ⅲ collagen and type Ⅳ collagen was also high in the irradiated kidney as compared to control rat kidneys （P 〈0.05）, and was most severe at the sixth and ninth month after irradiation （P 〈0.01）. By double immunostaining, CTGF expressing cells were found to be α-SMA-positive myofibroblasts and vimentin-positive tubular epithelial cells. Glomerular expression of CTGF closely correlated with the glomerular expression of a-SMA （r=0.628, P 〈0.01）, vimentin （r=0.462, P 〈0.05） and accumulation of type IV collagen （r=0.584,