丹红注射液的毒理学研究

目的 观察丹红（倍通）注射液的急慢性毒性，对其进行安全性评价。方法 小鼠连续7d静脉给药，测定药物的半数致死量（LD50）。大鼠连续给药90d后，处死大部动物，取血，做血常规、血液生化指标测定，取主要脏器称重进行病理学检查。余下大鼠在停药继续喂养2周后，处死进行病理组织学检查。结果 小鼠LD50为39．5ml／kg。各实验组大鼠在体质量增加、器官系数、血常规、血液生化指标上基本相似，与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。主要脏器的病理组织学检查未见明显异常。结论 急慢性毒性实验的结果表明该药安全可靠。     

生物评价技术在动物类中药质量评价中的应用进展

动物类中药在我国资源丰富，临床药用历史悠久，药用范围广阔，是中药的重要组成部分。其成分繁多，药理作用复杂，具有多成分、多途径、多靶点的作用特点。经过分类归纳，动物药的主要成分为蛋白质(酶)类、多肽类、脂类、氨基酸类、生物碱类及甾体类等，其中蛋白质等生物信息大分子物质加大了检测难度，质控标准相对落后。生物检定方法是将动物药物看做一个整体来检定其生物活性(药效、活力或毒力),可综合考虑有效成分外的杂质对检测结果可能存在的影响，因而准确性较好，较理化检定有显著优势。生物检定法分为体外检定及体内检定，体外检定又可分为离体动物器官检定法、细胞培养检定法、生化酶促反应检定法、免疫学活性检定法、DNA分子技术等。本研究对动物药生物检定相关方法进行归类综述，并分析各生物检定方法的选用与动物药主要成分、药理作用、检定目的之间的关系，进一步总结生物检定方法在动物药中应用的实例与不足之处，以期为中药动物药的质量评价提供参考和借鉴。     

外周血红细胞微核试验研究近况

近年来,微核试验(Micronucleus Test,MNT)应用得越来越广泛,但仅有小鼠骨髓嗜多染红细胞(Polychromatic erythrocytes,简称PCE)MNT发展为标准试验,得到各权威机构认可,在各种致突变检测中规定为必做的试验之一。而其它材料的MNT,则由于自身的种种限制或不足,一直处于探索和改进之中。在众多的致突变快速初筛试验中,小鼠骨髓MNT较为经济、简便和快速。但该方法仍有一些不足,如取骨髓时必须处死动物;不能对动物作长期动态观察等。人们希望MNT更简便,也不用处死动物,能象做血常规一样,只需一滴外周血即可做出结论。于是,就促使人     

尖吻蝮蛇毒无出血活性纤溶酶对大鼠的长期毒性试验

目的:研究无出血活性纤溶酶(Non-hemorrhagic fibrinolytic enzyme,NHFLE)对大鼠的长期毒性,评价其安全性.方法:健康Wistar大鼠随机分为低、中、高剂量(2.25,4.5,9.0 mg·kg-1·d-1)组及生理氯化钠注射液对照组,每组24只.尾静脉注射给药,每周给药7 d,连续给药4周,给药容积为10 mL·kg-1.停药后24 h每组处死12只动物,余下动物继续观察2周后活杀检查.观察动物一般性状、体重、饮食等,检测血液学、凝血、血液生化、脏器系数及组织病理学改变.结果:NHFLE高剂量组大鼠在4周给药期出现多动、烦躁不安、轻微腹泻以及体重增长缓慢,以上改变在停药后恢复正常,其余动物各项检查未见异常.结论:NHFLE毒性较低.     

复方雷琐辛搽剂(Ⅰ)急性毒性试验

目的为复方雷琐辛搽剂(Ⅰ)成品制剂的临床安全使用提供实验依据.方法观察大鼠完整皮肤及破损皮肤一次性涂抹最大耐受量(MLD)的复方雷琐辛搽剂(Ⅰ)所产生的毒性反应情况,从给药0时起至7 d连续观察记录动物的毒理反应,以皮肤刺激反应标准进行评分作毒理等级评价;对存活动物在观察结束时进行高位脱椎处死采血检测外周血常规和血清生化,解剖后裸眼和病理切片观察心、脑、肝、肾等主要脏器的病理变化.实验数据以Bliss法处理计算LD50.结果未测出LD50值;皮肤完好与破损组动物均产生轻度刺激反应;外周血常规和血清生化均未见明显改变;心、脑、肝、肾等重要脏器裸眼和病理切片均未见明显病理改变.结论复方雷琐辛搽剂(Ⅰ)在小于MLD40 ml·kg-1·d-1(2000 mg·kg-1·d-1)剂量下一次性涂大鼠皮肤后(该剂量相当于临床剂量的800倍),未产生明显毒副反应.     

乙型肝炎病毒在乙型肝炎病毒表面抗原阴性模式者血液中的检测情况分析

目的了解HBsAg阴性模式时乙型肝炎病毒在体内存在情况，评价其临床意义和聚合酶链反应方法检测乙型肝炎病毒的应用价值。方法以HBsAg阴性模式者为对象，采用酶联免疫吸附法检测血清乙型肝炎病毒血清标志物；生化检测血清丙氨酸转氨酶、总胆红素、总蛋白和凝血酶原活动度；用聚合酶链方法检测乙型肝炎病毒DNA。结果282例HBsAg阴性者，血液乙型肝炎病毒阳性26例（9．2％）。这26例患者中，24例丙氨酸转氨酶升高，16例总胆红素升高，11例凝血酶原活动度〈70％。结论各种乙型肝炎标志物模式时体内都可能存在乙型肝炎病毒，此时应做检测乙型肝炎病毒确证试验。聚合酶链反应方法可能是目前临床最实用的检测乙型肝炎病毒的确证实验方法。     

实验性脑缺血的神经学检查及认知功能评价

目的对实验性脑缺血后的神经学检查及认知功能的评价进行综述。方法通过查阅最新相关文献,阐述神经学检查及认知功能评价方法在脑缺血动物模型中的应用。结果实验性脑缺血研究时,进行行为学评价是1种行之有效的检测脑缺血严重程度的方法。结论实验性脑缺血的神经学检查及认知功能评价在检测脑缺血模型以及缺血后动物的恢复方面起着很重要的作用,结合其他生化检测,能更加全面地评价脑缺血模型及干预措施的疗效。     

SPECT在犬肾功能检测中的应用

目的探讨单光子发射计算机体层显像仪(SPECT)技术在药物非临床研究—实验动物肾功能检测中的应用。方法犬静脉滴注某一类新药抗生素的长期毒性试验中,以血清生化检测、尿检、病理组织学检测(包括超微结构)和SPECT方法检测动物肾脏功能受损情况,对检测的结果进行汇总和比较。结果以SPECT检测GFR,结果显示在给药6周后各给药组与对照组差异显著,而在停药4周后,中、高剂量组GFR仍较大幅度低于对照组。生化结果亦显示给药6周时高剂量组CCR较低,但低、中剂量组不明显,而在停药4周时,见低、高剂量组低于对照,中剂量组反而高于对照组。有1例低剂量组动物于给药6周时生化、尿液及光镜检查均未发现明显异常,但SPECT检查结果显示其GFR低于对照组,以电镜对该动物进行肾细胞超微结构检查,发现线粒体嵴断裂、基质变空,自生性溶酶体多,间质纤维增生等现象,支持SPECT检测的结果。结论肾脏的代偿功能很强,所以当肾小球滤过功能已经降低时,SCR水平仍可在正常范围,直至肾脏已广泛破坏,SCR的变化才显现出来,此时SCR对测定肾功能衰竭的进一步发展才比较准确。从各项检查数据看,生化方法因为要收集动物24h尿液,可能存在样品污染,因此检测灵敏度和稳定性不及SPECT;同时一些细胞功能出现早期变化时,病理组织检查往往不易发现,而SPECT检测GFR有准确、快速和灵敏的特点。     

骨质疏松动物模型的研究进展

近年常用于骨质疏松的模型动物有大鼠、小鼠、兔、犬、羊、猪等。以大鼠最为常用。用于制模的方法有年龄相关的骨丢失，去势模型，药物类模型，废用性骨质疏松模型，营养类模型等。其中以去势模型，特别是去卵巢动物模型最常用。常用的评价方法有生化指标的测量、骨密度测量、骨组织计量学观察、骨生物力学指标检测等。其中生化指标和骨组织计量学是主要的指标。     

SPF级大鼠血液学及生化指标正常值的实验室间比较

在食品、药品以及兽药或农药产品的亚急性、亚慢性以及慢性毒性试验中，大鼠是使用最为普遍的实验动物之一，而血液学常规和血生化指标是这些毒性试验中必不可少的检测项目，能够提示毒性反应的可能靶器官。现拟通过对数据库中收集到的公开发表的SPF级大鼠血液学和生化指标正常值的实验室间比较，探讨影响血液学和生化指标检测的因素。     

昆明小白鼠血细胞及生化指标的检测分析

目的检测昆明小白鼠的血细胞及生化指标,探讨其作为实验动物的可行性。方法采用血细胞分析仪及生化检测仪对40g（约100d）的昆明小白鼠,测定白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、血小板计数（PLT）、总蛋白（TP）、清蛋白（ALB）、碱性磷酸酶（ALP）、胆碱酯酶（CHE）、肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平并进行分析。结果昆明小白鼠血细胞分析及生化检测结果准确可靠。结论昆明小白鼠血液成分参考数据显示,该小白鼠可做血细胞分析及生化指标检测,成为可靠的实验动物。     

小儿水杨酸苯酚搽剂的毒理学研究

目的:为小儿水杨酸苯酚搽剂成品制剂的临床安全使用提供实验依据.方法:观察大鼠完整皮肤及破损皮肤一次性涂抹最大耐受量(MTD)的小儿水杨酸苯酚搽剂所产生的毒性反应情况,从给药0时起至7 d连续观察记录动物的急性毒性和45 d连续的长期毒性反应,以皮肤刺激反应标准进行评分作毒理等级评价;对存活动物在观察结束时进行高位脱椎处死采血检测外周血常规和血清生化,解剖后裸眼和病理切片观察心、脑、肝、肾等主要脏器的病理变化.实验数据以Bliss法处理计算LD50.结果:未测出LD50值;皮肤完好与破损组动物均产生轻度刺激反应;外周血常规和血清生化均未见明显改变;心、脑、肝、肾等重要脏器裸眼和病理切片均未见明显病理改变.结论:小儿水杨酸苯酚搽剂在小于MTD 2 000 mg/(kg·d)[40 mL/(kg·d)]剂量下一次性涂大鼠皮肤后(该剂量相当于临床剂量的800倍)以及1 000、500、200 mg/(kg·d)剂量的长期毒性试验,均未产生明显毒副反应.     

中小型血站ALT检测方法的分析

目的探讨中小型血站在仪器和方法及成本的选择上检测血清丙氨酸氨基转移酶的最佳方法。方法对几种血清丙氨酸氨基转移酶定值样本、临界可疑样本(40-45U/L)进行酶标仪(370C条件下微板速率法与丙酮酸氧化酶法)、全自动生化仪、半自动生化仪的结果进行比较。结果全自动生化仪法的准确度和精密度最佳,但成本也最高。全自动生化仪与半自动生化仪之间准确度无显著性差异(P>0.05),精密度存在显著性差异(P<0.05),成本居第二。全自动生化分析仪与酶标仪之间存在显著性差异(P<0.05),精密度存在极显著性差异(P<0.01),成本居第三。酶标仪法中微板速率法与微板丙酮酸氧化酶法之间准确度、精密度无显著性差异(P>0.05)。对临界样本检测的可靠性依次为全自动生化仪、半自动生化仪、酶标仪。结论中小型血站对献血者血液ALT的检测最佳方法是使用全自动生化仪,但成本较高,中小型血站在考虑成本的同时,可使用微板速率法[5]或微板丙酮酸氧化酶法,利用全自动加样仪,结合微板、酶标仪以及局域网络实行检测数据自动传送,联合使用半自动生化仪(用于临界样本的复检)的方法,在节省成本的同时,能保证血液的检测质量及节省样本检测的时间[2]。     

一种近似LD_(50)的测试方法

<正> LD_(50)(半数致死量)是反映药物(或毒物)毒力的定量指标,计算方法甚多。有计算精确、重复性强的经典Bliss法,Fisher、Finney发展的加权机率单位法、顾氏简化法、孙氏点斜法等。除序贯法外,做LD_(50)实验均需消耗较多的动物,在美国每年被废弃处死的动物大约有12～20万头.一些学者先后改良了传统的LD_(50)计算,也有用计算机模拟法,但终究代替不了动物实验。因此,我们在Mo-linengo理论基础上建立了省时、省动物简化的计算方法,采用8～10只动物进行实验,成功地测得受试药的LD_(50)近似值。方法介绍如下:     

中小型血站ALT检测方法探讨

目的探讨中小型血站在仪器、方法、成本等方面合理选择丙氨酸氨基转移酶ALT的检测方法。方法将血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)的定值样本和可疑样本分别用全自动生化仪,半自动生化仪、酶标仪方法进行测定,酶标仪方法选用丙酮酸氧化酶法,比较三种检测方法在准确度、精敏度、成本方面的差异。结果定制样本:三种检测方法中,全自动生化仪的精确度、精敏度最高,成本也最高,半自动生化仪的准确度、精敏度、成本居中,丙酮酸氧化酶法酶标仪的准确度、精敏度和成本最低。将全自动生化仪的检测结果与半自动生化仪的结果进行比较,结果无明显统计学差异(P>0.05)。将全自动生化仪的结果与丙酮酸氧化酶法酶标仪的结果进行比较,有显著统计学差异(P<0.05)。结论检测ALT的最好方法是全自动生化仪,但是由于全自动生化仪成本较高,而半自动生化仪的检测结果与全自动生化仪之间无明显统计学差异,所以中小型血站可采用丙酮酸氧化酶法酶标仪进行初步测定,半自动生化仪复检,应用酶动力学法进行ALT的自动定量检测,确保检测结果的准确性,同时降低成本。     

海洛因对人体食物摄入量及营养状况的影响

本文对１８４例海洛因成瘾者做了饮食生活习惯调查，并分别于戒毒治疗前和治疗后期采用５ｄ连续称重法做了膳食调查及体检和血、尿生化指标检测。结果表明：成瘾者在滥用毒品期间除了各种食物营养素和热能摄入量显著低于非滥用期外，体检情况及血尿生化指标变化较大。戒毒治疗后期血清蛋白含量、血红蛋白含量及体重均有明显增加，机体营养状况大为改善．调查中亦证实海洛因滥用可影响睡眠习惯及性功能．     

科玛嘉显色培养基检测深部念珠菌感染538例分析

目的 对科玛嘉念珠菌显色培养基在深部念珠菌标本检测中应用的评价。方法 对直接镜检阳性的538例患者的便、痰、尿标本，采用科玛嘉显色培养25℃ 48—72h，根据培养基表面菌落不同的颜色，鉴定念珠菌的种类。结果 538例深部标本，白念珠菌266株，热带念珠菌105株，光滑念珠菌77株，克柔氏念珠菌59株。结论 科玛嘉念珠菌显色培养基优于常规沙氏生化法，且快速、简便、准确地分离鉴定各种念珠菌，可做为检测深部念珠菌的首选方法。     

大鼠实验性牙周病模型的建立及组织学评价

目的通过钢丝结扎法建立大鼠实验性牙周病模型,并进行组织学评价。方法将18只雄性SD大鼠随机分为3组,在每只大鼠右侧下颌第一磨牙牙颈部结扎钢丝。第1、2、4周处死动物,确定实验动物牙周病发生的时间并进行组织学评价。结果结扎钢丝1周即出现牙龈炎,4周出现牙周炎,成功建立了大鼠牙周病模型。结论SD大鼠实验性牙周病模型与人牙周病在形态及组织学上变化基本一致,可作为牙周病防治的研究模型。     

硫化氢对肥胖小鼠肝脂质蓄积的影响

目的探讨硫化氢对肥胖小鼠肝脏脂质蓄积的影响。方法 C57BL/6J小鼠,随机分为对照组、模型组、硫化氢干预组。对照组喂普通饲料,模型组和硫化氢干预组喂高脂饲料。从第13周开始,硫化氢干预组注射硫氢化钠,剂量为50μmol·kg-1·d-1,模型组注射等量生理盐水,16周末处死动物。肝脏组织匀浆,取上清,做生化检测,测量各组小鼠肝组织中甘油三酯、胆固醇含量;肝脏石蜡切片做H&E染色观察肝组织一般形态;冷冻切片,油红染色观察肝组织脂质蓄积情况;肝脏新鲜冰冻组织提取RNA,PCR检测小鼠肝脏中CPT-1、FAS的基因表达情况,并用ELISA法检测CPT-1、FAS的活性。结果模型组、硫化氢干预组小鼠体重明显高于对照组。与模型组相比,硫化氢干预组小鼠体重减轻;肝组织内甘油三酯、胆固醇含量明显下降;肝组织病理变化程度减轻,脂质蓄积减少;肝脏CPT-1表达及活性增高,FAS表达及活性降低。结论硫化氢可以降低肥胖小鼠肝组织脂肪含量,减轻肝脂肪变性程度,其机制可能与肝组织CPT-1表达增加、FAS表达下降有关。     

重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白对大鼠的长期毒性研究

目的研究重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白（TNFR-Fc）对大鼠的长期毒性。方法将120只大鼠随机分4组，各30只：TNFR-Fc低剂量组（5 mg·kg^-1）、中剂量组（15 mg·kg^-1）和高剂量组（45 mg·kg^-1）和溶媒对照组（溶媒2.0 mL·kg^-1）。每只大鼠每100 g体重给药的容量 0.2 mL。途径：sc，给药期：180 d。每周给药2次。给药90，180 d和停药后30 d，分别观察一般临床体征，检测11项血液指标、10项血液生化指标和24项器官或组织病理检查，测定抗体和抗体中和能力。 结果一般体征和血液学及临床生化指标在实验组与对照组之间未见明显改变。实验组自第4周开始有大鼠产生抗体，第8周所有用药大鼠均产生抗体，各剂量组均未产生中和抗体。病理组织学检查发现给药各组动物的肝、肾有轻重不等的瘀血和轻度细胞水肿；可能为受试大鼠自身感染性病变或动物处死及组织处理过程产生的人为性损害。肺脏病变有灶性或片块分布的肺泡腔内出血，是由于动物处死挣扎所致。结论各剂量组大鼠均未出现明显的由药物导致的生理生化改变和病理损害，也未发现明显的毒性反应，各组大鼠抗体均无中和TNFR-Fc活性能力，大鼠皮下注射TNFR-Fc的安全剂量为45 mg·kg^-1。