尿蛋白超薄琼脂糖凝胶电泳及初步临床应用

报道尿蛋白超薄琼脂糖凝胶电泳，采用考马斯亮蓝染色，对人血清白蛋白（HSA）灵敏度为3μg／ml，对尿本─周氏蛋白灵敏度为5μg／ml．通过改进凝胶制板工艺和琼脂糖板的贮存方法，使每次可以大量制板，保存期可在三个月以上。该法具有快速、简便、不需浓缩标本、便于临床常规开展的优点。对52例临床尿标本的电泳分析表明，该法对肾脏损害程度的鉴别诊断及指导临床用药方面有主要实用价值。     

尿蛋白SDS-琼脂糖凝胶电泳方法建立及临床应用

目的　建立应用于临床的尿蛋白十二烷基硫酸钠 (SDS) 琼脂糖凝胶 (AGE)电泳方法。方法　分别对Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型 4种琼脂糖、不同的缓冲对、电压和电泳时间进行实验 ,确定最佳的分离条件 ,建立测定方法。结果　当Ⅳ型琼脂糖凝胶浓度为4 0g/L ,SDS含量为 1g/L ,在pH 7.0的AMP 咪唑 HCl缓冲体系下进行电泳 ,可以有效地将尿蛋白按分子量大小进行分离。 5 7份临床尿蛋白阳性标本电泳结果表明 ,生理性蛋白尿 2 4例 ,中、高分子蛋白尿 5例 ,小分子蛋白尿 11例和混合型蛋白尿 17例。结论　本法具有分离效果好、操作简便、灵敏度高、成本低廉等优点 ,可以将尿蛋白按分子量大小分为小分子、中分子以及混合型 ,对肾脏疾病的受损部位和损伤程度的判断具有较高的价值 ,适于基层实验室的常规开展。     

非浓缩尿蛋白电泳与其他尿蛋白检测方法的比较研究

目的 评价非浓缩尿蛋白电泳定量测定尿蛋白意义,并与免疫散射比浊法进行比较.方法 留取干化学法蛋白阳性（＋～＋＋＋＋）的41例住院患者尿液,分别用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶（SDS-AGE）非浓缩尿蛋白电泳、免疫散射比浊法测定尿蛋白,并按尿总蛋白定量及尿蛋白电泳百分比计算肾小球性蛋白、白蛋白、肾小管性蛋白量,与比浊法作相关分析.结果 41例尿非浓缩尿蛋白电泳结果阳性率为80%、免疫散射比浊法阳性率为66%,电泳法与免疫散射比浊法检测尿蛋白阳性率差异无显著性（P＞0.05）,2种方法在判断尿蛋白类型上完全符合者为63%,2种方法检测肾小管性尿蛋白、尿白蛋白、肾小球性尿蛋白的相关系数（r）分别为0.61、0.91、0.76,呈显著正相关（P＜0.001）.结论 非浓缩尿蛋白电泳与免疫散射比浊法检测尿蛋白阳性率差异无显著性,与免疫散射比浊法有显著的相关性,非浓缩尿蛋白电泳是一种具有较高检测灵敏度、能区别尿蛋白类型、反映尿蛋白全貌的方法.     

非浓缩尿蛋白电泳与其他尿蛋白检测方法的比较研究

目的评价非浓缩尿蛋白电泳定量测定尿蛋白意义,并与免疫散射比浊法进行比较。方法留取干化学法蛋白阳性(+~++++)的41例住院患者尿液,分别用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶(SDS-AGE)非浓缩尿蛋白电泳、免疫散射比浊法测定尿蛋白,并按尿总蛋白定量及尿蛋白电泳百分比计算肾小球性蛋白、白蛋白、肾小管性蛋白量,与比浊法作相关分析。结果41例尿非浓缩尿蛋白电泳结果阳性率为80%、免疫散射比浊法阳性率为66%,电泳法与免疫散射比浊法检测尿蛋白阳性率差异无显著性(P>0.05),2种方法在判断尿蛋白类型上完全符合者为63%,2种方法检测肾小管性尿蛋白、尿白蛋白、肾小球性尿蛋白的相关系数(r)分别为0.61、0.91、0.76,呈显著正相关(P<0.001)。结论非浓缩尿蛋白电泳与免疫散射比浊法检测尿蛋白阳性率差异无显著性,与免疫散射比浊法有显著的相关性,非浓缩尿蛋白电泳是一种具有较高检测灵敏度、能区别尿蛋白类型、反映尿蛋白全貌的方法。     

急性脑血管病患者SDS-AGE尿蛋白电泳测定的临床意义

目的　探讨急性脑血管病 (ACVD)患者早期肾损伤的诊断方法。方法　收集 6 1例ACVD患者治疗过程中的晨尿 ,按传统肾损害标准分为无肾损害组和有肾损害组 ,用十二烷基磺酸钠 琼脂糖凝胶 (SDS AGE)进行非浓缩尿蛋白电泳 ,分析 2组患者的尿蛋白组分。对SDS AGE诊断为肾损害的患者再进行病理活检确证。结果　ACVD患者传统的无肾损害组已有 15 .3%存在早期的肾损害。SDS AGE判断肾脏损害与肾活检结果相符。ACVD患者早期的肾损害主要是肾小管损害。结论　SDS AGE电泳操作简便快速 ,敏感性强 ,诊断符合率高 ,可作为ACVD患者治疗过程中判断早期肾损害的敏感方法。     

琼脂糖凝胶电泳法检测尿蛋白的临床意义

目的 :用电泳法检测尿蛋白组分变化 ,用于肾脏疾病的诊断与鉴别诊断。方法 :采用法国SEBIAMG 3 0 0半自动电泳分析仪对 2 17例肾脏疾病患者进行尿蛋白分析。结果 :2 17例肾脏疾病患者测得结果分别为 :肾小球性蛋白尿 69 1% ,混合性蛋白尿14 7% ,生理性蛋白尿 13 9% ,肾小管性蛋白尿 2 3 % ,均符合临床诊断的肾病综合征和肾小球等的肾脏疾病。结论 :本法操作简便、易于量化 ,无创伤性 ,灵敏度高 ,且样本可保存 ,故值得推广应用     

SDS-琼脂糖凝胶电泳分析蛋白尿来源的临床意义

目的分析尿蛋白成分来鉴别蛋白尿来源。方法应用十二烷基磺酸钠-琼脂糖凝胶进行非浓缩尿蛋白电泳分析49例蛋白尿患者的尿蛋白成分。结果在肾后性蛋白尿中往往可以检测到巨球蛋白等一类大分子蛋白,而在肾性则往往缺乏。并且以巨球蛋白作为鉴别蛋白尿的标准,其敏感性和特异性均达到95.8%。结论该方法客观性强,诊断符合率高,重复性好,简便快速,值得临床应用。     

尿蛋白电泳在肾脏疾病诊断中的应用

近年来,早期。肾损伤的诊断已被大家所关注。而蛋白尿是。肾脏疾病最常见的表现和就诊原因,而鉴定尿蛋白的性质来源是治疗各种肾脏疾病的关键。尿蛋白电泳通过分析蛋白组成成分,可明确其来源,从而有助于病因诊断和预后判断。应用十二烷基磺酸钠一琼脂糖凝胶电泳（SDS-AGE）技术进行尿蛋白的分析,评价。肾脏损伤程度,尿液无需浓缩,操作简便,结果清晰,便于保存。本文结合病理活检资料,就本院SDS-AGE法尿蛋白检测结果报道如下。     

小儿肾小球疾病尿蛋白的二维电泳分析及其应用探讨

[目的]建立和优化小儿肾脏疾病尿蛋白研究的方法系统,探讨其在临床上的应用.并比较几种小儿常见的肾小球疾病尿蛋白二维电泳图谱的差异,探求特异性生物标志蛋白.[方法]2003年1月至2004年1月间入住本院儿科系病房的肾小球疾病患儿晨尿标本91份,离心后进行二维电泳分离尿可溶性蛋白,其中原发性肾病综合征(INS,A组)25例,乙肝病毒相关肾炎(B组)16例,狼疮肾炎(LN,C组)5例,IgA肾炎和过敏炎紫癜肾炎(D组)24例,急性链球菌感染后肾小球肾炎(E组)21例.Melanie 3.0软件进行蛋白斑点检测和配比.[结果]尿蛋白二维电泳银染图谱显示各斑点间分离清晰,各组内凝胶在蛋白质斑点位置上具有较好的重复性,适合计算机图像分析.A～E组凝胶的平均蛋白质点数分别为(104±40),(46±22),(38±12),(43±24),(39±19)个,变异率分别为80.3%,58.7%,38.0%,70.4%,58.7%.A组尿蛋白二维电泳银染图谱显示80%出现α1-AGP蛋白斑点,与其他组相比差异具有显著性(P＜0.05).[结论]通过该研究建立了一套分辨率和重复性均较好的双向凝胶电泳尿蛋白分离系统.通过该方法系统分析不同临床类型肾小球疾病患者尿蛋白组分而获得的资料将有助于尿蛋白谱数据库的建立,为肾脏疾病的非侵入性诊断又提供一个新的方法.     

Analysis of Proteinuria in Health and Disease Using Sodium Dodecyl Sulphate–Acrylamide Gel Electrophoresis

Abstract. Sodium dodecyl sulphate–acrylamide gel electrophoresis (SDS-AGE) separates proteins according to their molecular weight (MW) without being influenced by their electrostatic charge. It was carried out on the urine of 17 healthy control subjects and 92 ambulatory patients with suspected or known renal impairment. The SDS-AGE patterns were classified as physiological, low MW predominance, middle MW predominance, high MW predominance, or mixed low and high MW. Patients were separately classified as having either normal kidneys or glomerular, tubular or mixed renal lesions according to the results of clinical investigation. Comparison of both classifications revealed that SDS-AGE allowed a correct diagnosis of the site of renal involvement in 83 per cent of coses. Predominantly low MW protein excretion correlated with tubular damage. Middle and high MW patterns correlated with glomerular disease, and a relationship between nephrotic syndrome with minimal glomerular changes and middle MW pattern was found in two cases, suggesting that SDS-AGE could be used to evaluate the selectivity of proteinuria. However, the estimation of selectivity by SDS-AGE should be studied in a sufficient number of cases and compared with measurements of selectivity by the protein clearance method.     

SDS-AGE尿蛋白电泳与原发性IgA肾病病理的相关分析

探讨十二烷基硫酸钠-琼脂糖凝胶电泳(SDS-AGE)法尿蛋白电泳检测在原发性IgA肾病(IgAN)的预后和随访中的应用价值。方法：对经肾病理确诊为原发性IgAN患125例行SDS-AGE尿蛋白电泳，结合临床实验室检查及肾病理分型观察分析。结果：IgAN肾病理Hass分型示Ⅰ型15例，Ⅱ型28例，Ⅲ型52例，Ⅳ型20例，Ⅴ型10例。血清IgA水平各组间差异无显性，除HassⅣ型24h尿蛋白高于各组外，余组无差异。血清肌酐(SCr)I-V型呈逐渐升高。尿蛋白电泳检测2例阴性，余均伴不同程度中、高分子性蛋白尿。混合性蛋白尿检出率在HassⅡ-Ⅴ型中呈升高趋势。中、高分子量蛋白条带和低分子量蛋白条带光密度值（D)分别在Ⅱ～Ⅴ型和Ⅲ～Ⅴ型中上升。讨论：IgAN中混合性蛋白尿检出率随病理肾损伤加重而增加，与SCr变化规律相似。中高分子蛋白排泄和低分子蛋白排泄也随之而逐渐增多，提示尿蛋白电泳可用于原发性IgAN的长期、动态随访，并有助于评估肾病预后。     

尿微量蛋白测定对过敏性紫癜早期肾损伤的诊断价值探讨

【目的】探讨尿微量蛋白检测对过敏性紫癜肾损害的早期诊断价值。【方法】采用免疫散射比浊法分别检测50例单纯性过敏性紫癜（HSP）患儿、54例紫癜性肾炎（HSPN）患儿和32例正常儿童（对照组）尿中微量白蛋白（m-ALB）、免疫球蛋白G（IgG）、β2-微球蛋白（β2-MG）含量,并同期检测尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）等指标。【结果】HSP组、HSPN组的尿系列蛋白含量与正常对照组比较明显升高,且差异均有统计学意义（P〈0．01）,HSP组与HSPN组比较差异亦有统计学意义（P〈0．01）,而三组BUN、Cr比较无统计学意义（P〉0．05）。【结论】尿微量蛋白在过敏性紫癜肾功能早期受损时升高,可作为早期诊断肾功能损害的敏感指标。     

心肌线粒体双向凝胶电泳技术分析

目的：建立并优化心肌线粒体蛋白质组研究的双向凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis，2-DE）技术。方法：分离200g雄性SD大鼠心肌线粒体，抽提心肌线粒体的全蛋白，以固相pH梯度、等电聚焦为第一向和垂直SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳为第二向行双向凝胶电泳，对样品制备、上样量、电泳参数、不同固定方式等相关技术进行优化。凝胶行硝酸银染色，扫描仪获取凝胶图像并用PDQuest软件进行分析。结果：45％乙醇和5％乙酸的固定液对蛋白质固定效果最好；构建了心肌线粒体高分辨率和重复性的双向凝胶电泳图谱。结论：建立了SD大鼠心肌线粒体蛋白质组的双向凝胶电泳分析技术。     

全自动毛细管电泳法和琼脂糖凝胶法检测一例多发性骨髓瘤患者血清蛋白结果变化

目的 证明全自动毛细管电泳法比琼脂糖凝胶法更灵敏快捷。方法 分别用毛细管电泳法和琼脂糖凝胶法分析一例多发性骨髓瘤（MM）患者治疗前后血清蛋白。结果 毛细管电泳法治疗前、后，β-球蛋白为41．6％和19，7％；琼脂糖凝胶法治疗前、后，p球蛋白为29.6％和13．3％。结论 全自动毛细管电泳法比琼脂糖凝胶法更灵敏，是血清蛋白电泳有效方法。     

点穴配合常规康复治疗脑卒中偏瘫疗效观察

目的观察点穴配合常规康复治疗脑卒中偏瘫患者运动障碍的疗效。方法58例脑卒中偏瘫患者随机分为治疗组30与对照组28例；治疗组采用常规康复及点穴治疗；对照组仅接受常规康复治疗，分别于治疗前和治疗后12周采用Fugl-Meyer量表（FMA）评定患者的肢体运动功能，采用改良巴氏指数（MBI）评定日常生活活动能力（ADL）。结果治疗前两组患者的上下肢FMA积分无显著性差异（P〉0．05）；治疗后，治疗组患者的FMA积分较治疗前改善（P〈0．05），且明显优于对照组（P〈0．01），MBI评分高于对照组（P〈0．05）。结论点穴配合常规康复治疗可促进脑卒中患者运动功能的恢复，且效果优于常规康复治疗。