水肿型胰腺炎向坏死型胰腺炎进展中VEGF的表达及意义

目的：探讨在胰腺微循环障碍加重过程中血管内皮生长因子（VEGF）的表达及意义。方法：将大鼠随机分为假手术对照组（N组）、急性水肿型胰腺炎组（AEP组）及急性坏死型胰腺炎组（ANP组）。于建模后6、12和24h,分别采用ELISA法检测各组血清中的VEGF、TNF-α及淀粉酶（AMY）含量,免疫组织化学方法检测各组胰腺组织中VEGF蛋白的表达情况,并分析比较。结果：AEP组与ANP组胰腺组织中各时相点VEGF染色评分均明显高于N组（P〈0．05）;建模6hANP组的评分显著高于AEP组（P〈0．05）,而12和24hANP组的评分均明显低于AEP组（P〈0．05）。ANP组和AEP组血清VEGF、TNF-α与AMY含量均显著高于N组（P〈O05）;ANP组与AEP组之间差异亦有统计学意义（P〈0．05）,但AEP组建模24hVEGF含量和12hAMY含量与ANP组差异无统计学意义（P〉0．05）;血清VEGF与TNF-α（正相关（P〈O.05）。结论：VEGF作为相对独立的微循环影响因素与全身炎症反应呈正相关,但在胰腺微循环障碍持续加重期,胰腺组织及血管内皮细胞严重受损,VEGF表达减少,胰腺坏死病变难以逆转。     

CDX2和PTEN蛋白表达与胃黏膜肠上皮化生关系的临床研究

目的：探讨CDX2和PTEN蛋白表达与胃黏膜肠上皮化生（简称肠化）的关系。方法：观察肠化的胃黏膜病理形态特点，应用免疫组织化学法检测23例单纯肠化、33例不典型肠化和44例胃癌中CDX2、PTEN蛋白的表达，分析其与单纯肠化、不典型肠化及胃癌的关系。结果：CDX2蛋白在单纯肠化、不典型肠化及胃癌中的阳性率分别为82．6％、51．5％和36.4％，胃癌组织中的阳性表达率显著低于单纯肠化组织（X^2=12．9470，P〈0．05），而与不典型肠化组织比较差异无统计学意义（X^2=2．7010，P〉0．05）。PTEN蛋白在单纯肠化、不典型肠化及胃癌组织中的阳性表达率分别为86．9％、75．8％和47．7％，胃癌与单纯肠化之间差异有统计学意义（X^2=9．7885，P〈0．05）。结论：CDX2蛋白异常表达参与了胃黏膜肠化及癌变的过程，PTEN蛋白对CDX2蛋白的表达可能起到一定的调节作用；不典型肠化与胃癌的关系密切，属癌前病变范畴。将肠化分类方法应用于不典型肠化患者的初步筛选，有望提高早期胃癌的检出率。     

MMP-9和CyclinE在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义

目的：探讨和CyclinE在膀胱癌组织和正常膀胱黏膜组织中的表达,并结合ll缶床病理特征进行分析。结果：MMP一9在膀胱癌组织中的阳性表达率为70．9％,显著高于正常膀胱黏膜中的阳性表达率11．1％,差异有统计学意义（P〈0．05）。MMP一9的表达与膀胱癌患者性别和年龄无关（P〉0．05）,与膀胱癌患者肿瘤的大小、肿瘤的多少以及肿瘤的恶性程度密切相关（P〈O．05）。CyclinE在膀胱癌组织和正常膀胱黏膜中的阳性表达率分别为64．6％和16．7％,差异有统计学意义（P〈O．05）。CyclinE的表达与膀胱癌的大小、肿瘤的多少以及肿瘤的病理分级和临床分期密切相关（P〈0．05）,与膀胱癌患者的年龄和性别无关（P〉0．05）。结论：MMP一9和CyclinE在膀胱癌组织中的表达均升高,提示它们共同参与了膀胱癌的发生和发展,MMP一9和CyclinE有协同表达关系。同时检测膀胱癌组织中MMP一9和CyclinE的表达对判断预后和指导治疗有一定意义。     

CyclinD1在肾细胞癌中的表达及其意义

目的探讨细胞周期蛋白D1（CyclinD1）在肾细胞癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学技术,检测60例。肾细胞癌患者中肾癌组织及癌旁肾组织中CyclinD1的表达,并对Cyclin D1的表达与临床病理参数的关系进行分析。结果CyclinD1在肾细胞癌组织中的阳性率为83．3％,而癌旁肾组织中的阳性率为6．6％,两者具有显著性差异（P〈0．05）。Cyclin D1在肾细胞癌组织中的表达在不同性别、年龄、肿瘤体积组无显著差异（P〉0．05）。结论CyclinD1可作为判断肾细胞癌分化程度的标志物。     

CyclinD1蛋白在T2-3N0M0期食管癌中的表达及其与预后的关系

目的探讨CyclinDl蛋白在T2-3N0M0期食管鳞状细胞癌（食管鳞癌）组织中的表达及其与预后的关系。方法用免疫组织化学染色方法检测227例T2-3N0M0期食管癌组织中CyclinD1蛋白的表达,应用受试者工作（receiveroperatingcharacteristic,ROC）曲线确定CyclinD1免疫组织化学高表达和低表达的分界点,分析CyclinD1表达与食管癌临床病理因素和预后之间的关系。结果CyclinD1在食管癌组织中低表达90例（39．6％）,高表达137例（60．4％）。CyclinDl蛋白的表达与性别（P=-0．298）、年龄（P=O．525）、肿瘤位置（P=0．570）、肿瘤长度（P=-0．056）、分化程度（P=0．713）和浸润深度（P=0．557）无明显相关性,但CyclinD1低表达组与cyclinD1高表达组的预后差异有统计学意义（3年生存率：51．1％VS．43．8％;5年生存率：43．3％VS．30．7％;P=-0．047）。Cox风险比例模型分析显示CyclinD1不是T2-3N0M0期食管癌独立预后因素（艘值=1．378,95％CI：0．990—1．919,P=-0．057）。结论CyclinD1过表达可能是影响T2-3N0M0期食管癌不良预后的因素。     

结直肠癌组织中GINS复合物的表达及其临床意义

目的探讨GINS复合物在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法运用实时荧光定量PCR方法检测76例结直肠癌标本中GINS复合物4个基因PSF1、PS砣、PSF3和SLD5的mRNA表达情况．并分析其与结直肠癌患者临床病理特征及预后的关系。结果结直肠癌组织中PSF1、PSF2、PSF3和SLD5mRNA的相对表达量（0．001853±0．000651、0．007757±0．004260、0．000967±0．000481、0．003248±0．001721）均明显高于正常黏膜组织（0．000352±0．000169、0．002951±0．001216、0．000472±0．000271和0．001675±0．001156）（均P〈0．01）。PSF1mRNA表达与肿瘤大小（p〈0．01）有关;PSF2mRNA表达与患者年龄（P〈O．05）和淋巴结转移（P〈0．05）有关;PSF3mRNA表达与患者临床病理特征无关（P〉0．05）;SLD5mRNA表达与患者淋巴结转移（P〈0．01）有关。PSFl、PSF2和SLD5高表达组患者的5年生存率分别为57．1％、54．3％和54．3％,均明显低于低表达组患者的77．1％、80．O％和80．0％,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。Cox回归分析结果提示,PSFlmRNA表达是影响结直肠癌患者预后的独立因素之一（P〈0．05）。结论GINS复合物在结直肠癌组织中高表达,且与患者临床病理特征有密切关系．其中PSFlmRNA表达可作为预测结直肠癌患者预后的生物学指标。     

SOX2在肝细胞肝癌组织中的表达及其临床意义

目的：研究SOX2在肝细胞肝癌和癌旁肝组织的表达及其意义,探讨其表达水平与临床病理因素的联系。方法：收集42例肝细胞肝癌患者的临床资料,采用RT—PCR和Westernblot方法检测SOX2在42例肝细胞肝癌和癌旁肝组织的表达,并分析其表达水平与临床病理因素的联系。结果：PCR结果显示SOX2mRNA在肝细胞肝癌组织中的表达水平为0．7136±0．1556,明显高于癌旁肝组织（O4429±0．1215）,差异有统计学意义（f=8．8864．P〈0．001）;Westernblot结果显示,SOX2蛋白在肝细胞肝癌的表达水平为0．4638±0．1600,高于癌旁肝组织（0．3130±0．1554）,差异有统计学意义（t=3．8839,P〈0．05）;SOX2mRNA表达水平与患者的性别、年龄、血清AFP水平、肿瘤大小无明显相关性（P〉O．05）,而与临床TNM分期有明显相关性（P〈0．05）。Westernblot显示SOX2蛋白在TNMI期中的表达明显低于Ⅱ、Ⅲ期中的表达。结论：SOX2在肝细胞肝癌组织中的表达高于癌旁肝组织中的表达,其表达水平与临床TMN分期密切有关。     

胃肠道富集Krappel样因子表达与胃癌患者预后的关系

目的探讨KLF4在胃癌组织中的表达及其与胃癌患者预后的关系。方法收集上海交通大学附属第一人民医院2004＋2009年胃癌根治性手术标本264例．应用实时定量PCR和免疫组织化学染色方法检测KLF4在胃癌及癌旁组织中的表达。结果KLF4蛋白在胃癌和癌旁组织中的阳性表达率分别为43．2％（114／264）和79．2％（209／264）,差异有统计学意义（P〈0．01）。KLF4表达与浸润深度（P〈0．05）、淋巴结转移（P〈0．01）、远处转移（P〈0．05）及临床分期（P〈0．05）有关。KLF4阳性与阴性表达患者5年总体生存率分别为65．2％和41．2％．5年无瘤生存率分别为50．4％和36．2％。差异均有统计学意义（P〈0．05）。KLF4表达是胃癌患者总体生存（HR=2．89,95％CI：1．18-9．23）和无瘤生存（HR=2．14,95％CI：1．03-4．37）的独立预后因素。结论KLF4在胃癌组织中的表达显著下调：KLF4有可能成为预测胃癌患者预后的生物学标志物。     

SENP1和HER-2在胃癌组织中的表达及意义

目的：探讨胃癌组织中去类泛素化蛋白酶1（SENPl）的表达与临床病理因素的关系,及其与人表皮生长因子受体-2（HER-2）的表达间的相互关系。方法：采用免疫组织化学染色EnVision方法以兔抗人SENPl抗体和鼠抗人HER-2抗体为一抗,检测100例胃癌组织（胃癌组）和50例胃良性病变组织（对照组）中SENPl和HER-2蛋白的表达。结果：SENPl蛋白在胃癌组织中的阳性率为75％（75／100）,对照组阳性率为36％（18／50）,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;SENP1的表达与胃癌的淋巴结转移、浸润深度、肿瘤分化程度和临床分期有关（P〈O．05）。HER-2蛋白在胃癌组织中的阳性率为45％（45／100）,对照组阳性率为38％（19／50）,二者差异有统计学意义（P〈0．01）;HER-2的表达与胃癌的淋巴结转移、浸润深度和临床分期有关（P〈0．05）。SENP1蛋白和HER-2蛋白的表达呈正相关（r=O．208,P〈O05）。结论：SENP1、HER-2在胃癌组织中存在着过度表达,它们参与了胃癌的演进;SENP1调节HER-2的表达,在胃癌发生发展中发挥重要作用;SENP1、HER-2的过度表达与胃癌的发生发展有关,可能成为预测胃癌侵袭、转移及预后的重要指标。     

自体外周血造血干细胞移植对弥漫性大B细胞淋巴瘤患者PD-1、B7-H1表达及T细胞亚群的影响

目的研究自体外周血造血干细胞移植（auto-PBSCT）对弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）患者程序性死亡因子-1（PD-1）及其配体B7同系物1（B7-H1）表达及T细胞亚群的影响。方法选择浙江大学医学院附属第-医院血液科和温州市中心医院血液科2009年7月至2012年6月接受auto-PBSCT的27例DLBCL患者作为观察组,选择25例同期参加体检的健康人群作为对照组。流式细胞仪检测两组PD-1、B7-H1表达,并分析各组T细胞亚群。结果观察组移植后3个月PD-1阳性表达率低于初次诊断时[（4．6±1．0）％和（12．5±2．1）％],差异具有统计学意义（t=4．47,P〈0．05）。观察组两次检测结果均高于对照组,差异具有统计学意义（t=22．70和25．11,P均〈0．05）。观察组移植后3个月B7-H1阳性表达率低于初次诊断时[（5．7±1．4）％和（16．3±1．7）％],差异具有统计学意义（t=6．78,P〈0．05）。观察组两次B7-H1检测结果均高于对照组（t=25．15和38．06,P均〈0．05）。观察组移植后3个月CD3±T细胞百分比高于初次诊断时[（57±7）％和（44±4）％],差异具有统计学意义（t=6．29,P〈0．05）。观察组两次CD3±T细胞百分比检测结果均低于对照组（t=5．69和7．36,P均〈0．05）。观察组移植后3个月CD4＋T细胞百分比低于初次诊断时[（11±4）％和（29±3）％],差异具有统计学意义（t=5．47,P〈0．05）。观察组两次CD4＋T细胞百分比检测结果均低于对照组,差异具有统计学意义（t=4．61和7．11,P均〈0．05）。观察组移植后3个月CD8±T细胞百分比高于初次诊断时[（32．5±2．7）％和（16．4±3．2）％],差异具有统计学意义（t=9．73,P〈0．05）。与对照组相比,观察组初次诊断后CD8±T细胞百分比较低,而移植后3个月较高（t=10．62和14．71,P均〈0．05）。观察组初次诊断后CD4＋／CD8±比值高于移植后3个月（1．8±0．4和0．4±0．1）,差异具有统计学意义（t=8．57,P〈0．05）。移植后3个月CD4＋／CD8±比值明显低于对照组,差异具有统计学意义（t=11．73,P〈0．05）。结论DLBCL患者存在细胞免疫功能紊乱,auto-PBSCT可以影响DLBCL患者的PD-1、B7-H1表达及T细胞亚群百分比,在-定程度上纠正细胞免疫功能。     

二甲双胍对胃癌细胞株增生及CyclinD1表达的影响

目的观察二甲双胍在体外对人胃癌细胞株SGC-7901生长的作用,并初步探讨其作用机制。方法体外培养胃癌SGC-7901细胞,MTT法测二甲双胍在不同浓度和不同作用时间对胃癌细胞增生的影响;Westernblot法检测二甲双胍对胃癌细胞CyclinD1表达的影响。结果MTT法结果显示：用不同浓度（50mmol／L、100mmol／L）的二甲双胍处理胃癌细胞SGC-7901在24h、48h、72h后,50mmol／L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率分别为32．93％、48．64％和61．40％,100mmol／L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率分别为35．34％、75．4J4％和88．30％,不同浓度的二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率与对照组相比具有显著性差异（P〈0．05）,100mmol／L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制与50mmol／L二甲双胍对于胃癌细胞生长抑制率相比具有显著性差异（P〈0．05）二甲双胍呈时间、浓度依赖性抑制胃癌细胞的增生。胃癌细胞高表达CyclinD1,Westernblot检测表明二甲双胍能显著降低CyclinD1蛋白的表达,且呈一定时间、剂量依赖性。结论二甲双胍可以下调胃癌细胞株SGC-7901CyclinD1的表达,抑制胃癌细胞的增生。     

PTEN和AKT2及CD147在胃癌组织中的表达及意义

目的：检测PTEN、AKT2和CD147在胃癌组织中的表达,并探讨其相互关系。方法：应用免疫组织化学方法检测65例胃癌及癌旁组织中PTEN、AKT2和CD147的表达情况。结果：PTEN蛋白在胃癌中表达的阳性率（58.46%）明显低于相应正常组织（100%）（P〈0.01）,其表达水平与组织分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0.05）。AKT2蛋白在胃癌组织中表达的阳性率（67.69%）明显高于相应正常组织（26.15%）（P〈0.01）,其表达与淋巴结转移有关（P〈0.01）,与浸润深度、分化程度和TNM分期无关（P〉0.05）。CD147蛋白在胃癌组织中表达的阳性率（86.15%）明显高于相应正常组织（16.92%）（P〈0.01）,其表达水平与浸润深度、淋巴结转移及TNM分期有关（P〈0.05）,与分化程度无关（P〉0.05）。胃癌组织中PTEN和AKT2、PTEN和CD147蛋白表达之间呈明显负相关（P〈0.01）。结论：PTEN的低表达或失表达,可能与AKT2、CD147的异常激活有一定联系,从而对胃癌的发生、发展起重要作用。     

COX-2和MMP-7的表达与胃癌组织生物学行为的关系

目的：探讨癌组织中环氧合酶（COX）-2和基质金属蛋白酶（MMP）-7的表达与胃癌组织生物学行为的关系。方法：选取55例进展期胃癌手术的切除标本,以免疫组织化学SP法检测病灶中COX-2和MMP-7的表达情况。分析COX-2和MMP-7的表达与临床病理因素的关系。结果：COX-2和MMP-7的阳性表达率分别为63.6%和72.7%。COX-2的阳性表达率与肿瘤大体类型、分化程度、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0.05）;MMP-7的阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关（P〈0.001）,而与肿瘤大体类型和分化程度无关（P〉0.05）。胃癌组织中COX-2和MMP-7的表达呈等级正相关（P〈0.001）。结论：COX-2和MMP-7与胃癌组织的生物学行为密切相关,其高表达是胃癌组织高侵袭能力和预后不良的标志之一。COX-2和MMP-7可作为反映胃癌组织侵袭转移及判断预后的生物学指标。     

转录因子FOXO4与胃癌及Hp感染关系的临床研究

目的:探讨FOXO4在胃癌发生过程中的表达、临床意义及其与幽门螺杆菌(Hp)感染的关系。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测16例正常胃黏膜、26例慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、36例异型增生胃黏膜及60例胃腺癌组织中FOXO4的表达,并检测患者Hp感染状况。结果:FOXO4在正常胃黏膜、慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生、异型增生胃黏膜及胃腺癌组织中的阳性率分别为100%、84.6%、69.4%和40.0%,胃腺癌组阳性率显著低于正常对照组(P<0.01)。FOXO4的阳性率在高、中分化和低分化型胃腺癌组织中呈现递减趋势,且其表达和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。慢性萎缩性胃炎伴肠上皮化生及胃腺癌组织中FOXO4表达与Hp感染之间均无明显相关性(P均>0.05)。癌前病变组织中FOXO4表达与Hp感染率之间呈明显正相关(P<0.01)。结论:在胃黏膜癌变过程中,FOXO4的表达和作用逐渐下调;在癌前病变组织中FOXO4表达和Hp感染密切相关。     

NGF、MMP-9在胃腺癌组织中的表达及其相关性的研究

目的:探讨神经生长因子(NGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在胃腺癌组织中的表达及其相关性,并分析其与临床病理因素之间的关系。方法:采用免疫组织化学(EnVisionTM)法检测NGF、MMP-9在胃腺癌组织及癌旁组织中的表达。结果:NGF在癌旁组织、胃腺癌组织中的阳性表达率分别为6.66%、51.25%,两组之间差异有统计学意义(P<0.01);MMP-9在癌旁组织、胃腺癌组织中的阳性表达率为3.33%、55.00%,两组之间差异亦有统计学意义(P<0.01)。NGF的阳性表达率与患者年龄、肿瘤直径、组织学分级及浸润深度无关(P>0.05),而与淋巴结转移及神经浸润有关(P<0.01);MMP-9的阳性表达率与患者年龄、肿瘤直径、组织学分级无关(P>0.05),而与淋巴结转移、神经浸润及浸润深度有关(P<0.05)。NGF、MMP-9在胃腺癌组织中的表达呈正相关性(r=0.62,P<0.01)。结论:NGF、MMP-9在胃腺癌组织中均过表达,可能共同影响肿瘤神经浸润和淋巴结转移。     

P-gp、GST-π、TOPO-Ⅱ及LRP在胃癌组织中的表达及其对预后的影响

目的：探讨P糖蛋白（P-gp）、谷胱甘肽转移酶π（GST-π）、DNA拓扑异构酶Ⅱ（TOPO-Ⅱ）及肺耐药蛋白（LRP）在胃癌组织中的表达及对预后评价的意义。方法：应用免疫组织化学方法（PV-6000法）检测P-gp、GST-π、TOPO-Ⅱ、LRP在60例胃癌组织和10例正常胃黏膜中的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系。将P-gp、GST-π、TOPO-Ⅱ和LRP按各自表达情况分为阳性组和阴性组,比较术后复发率、复发时间及5年存活率。将P-gp阳性、GST-π阳性、LRP阳性和TOPO-Ⅱ阴性作为4个可能与胃癌预后不良相关的危险因素进行考察,并将患者分为高危耐药组（2~4个危险因素）和低危耐药组（0~1个危险因素）,比较2组患者术后复发情况及存活率。结果：P-gp、GST-π、TOPO-Ⅱ、LRP在胃癌组织中的表达阳性率分别为53.3%（32/60）,73.3%（44/60）,83.3%（50/60）,38.3%（23/60）。它们在胃癌组织中的表达与患者的肿瘤大小、临床分期、局部浸润深度均无关（P〉0.05）,而与肿瘤的淋巴结转移及组织学类型有关（P〈0.05）。4种蛋白各自表达的阳性组与阴性组比较,术后复发率、复发时间及5年存活率的差异均无统计学意义（P〉0.05）。高危耐药组与低危耐药组比较,复发率差异无统计学意义（P〉0.05）,但复发时间早于低危耐药组,差异有统计学意义（P〈0.05）,2组患者术后5年存活率为44.0%和57.1%,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：P-gp、GST-π、TOPO-Ⅱ及LRP是胃癌多药耐药产生的基础,联合检测对胃癌的预后判断有重要参考价值。     

肿瘤干细胞表面标记物CD44在胃癌中的表达及其意义

目的探讨肿瘤干细胞表面标记物CD44在胃癌中的表达及其意义。方法收集福建医科大学附属协和医院胃外科2006年12月至2007年12月间行根治性手术切除并经病理确诊的156例胃腺癌组织标本及对应的癌旁正常组织标本,采用免疫组织化学方法检测CD44家族成员CD44s、CD44v5和CD44v6蛋白的表达情况,并分析其与胃癌患者临床病理特征及预后的关系。结果CD44s在胃癌和癌旁组织中的表达率为50．0％（78／156）和40.3％（63／156）,差异无统计学意义（P〉0．05）。CD44v5和CD44v6在胃癌中的表达率分别为49．3％（77／156）和63．4％（99／156）,明显高于癌旁组织中的7．6％（12／156）和0（均P〈0．05）。3种蛋白在胃癌组织中的表达两两之间无明显相关性（均P〉0．05）。在胃癌组织中,CD44s的表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移和TNM分期相关：CD44v5的表达仅与胃癌浸润深度相关;CD44v6的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和Lauren分型相关。CD44s、CD44v5及CD44v6表达阳性组和阴性组的5年生存率分别为35．8％和52．5％（P〈0．05）、38．9％和49．3％（P〉0．05）及26．2％和75．4％（P（0．05）,仅CD44v6表达是胃癌的独立预后因素（RR=I．931,95％CI：1．183—3．152）。结论CD44参与胃癌浸润和淋巴结转移过程,CD44可能成为胃癌预后预测指标之一。