丙型肝炎病毒结构蛋白在哺乳动物细胞中的表达

目的 获得稳定表达丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构蛋白的哺乳动物细胞系，以便对ＨＣＶ结构蛋白的性质及其基因免疫效果作进一步的研究。方法 用ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增ＨＣＶ结构基因，并将其克隆重人真核表达载体ｐｃＤＮＡ３中，用磷酸钙转染法将其转入Ｓｐ２／０细胞，对目的蛋白获得稳定表达的细胞克隆重进行免疫组化及细胞全蛋白的Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔ分析。结果 克隆重的基因片段全长约１．９ｋｂ，包括Ｃ及Ｅ２基因的全部和     

丙型肝炎病毒结构蛋白在痘苗病毒中的表达

为研究中国丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的抗原性及在细胞内的加工，将丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）５’非编码区（ＮＴＲ）和结构基因（Ｃｏｒｅ＋Ｅ１＋Ｅ２／ＮＳ１）插入痘苗病毒表达载体ｐＪＳＡ１１７５中，转染ＴＫ－１４３细胞，经纯化得到丙型肝炎（ＨＣＶ）重组痘苗病毒ｖＪＳＡ１１７５ＣＥ株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交表明，ＨＣＶ结构基因存在于痘苗病毒之中。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析发现，ｖＪＳＡ１１７５ＣＥ表达蛋白带位于９０ｋＤａ，为一多聚蛋白；此蛋白为分泌型，分泌量与细胞裂解物内量大致相同     

丙型肝炎病毒核蛋白在转基因小鼠中的表达及与Fa…

将中国人丙型肝炎病毒９ＨＣＶ）分离株的５－非编码区和结构基因（５ＵＴＲ＋Ｃ＋Ｅ１＋Ｅ２）区基因插入到ｐｃＤＮＡ３载体构成表达质粒，通过显微注射法将此质粒注射入Ｆ１代杂交鼠（Ｃ５７ＢＬ／６ＸＩＣＲ）受精卵，并植入假孕母鼠输卵管中，经筛选获得整合有目的基因的转基小鼠系。免疫组化研究表明，ＨＣＶ核壳蛋白在转基因小鼠各组织中皆有表达，多呈核型当色，心肌细胞中可见浆型。核壳蛋白在各组织中的表达水平；心〉肺〈     

丙型肝炎病毒核心蛋白基因重组质粒的构建及其在真核细胞中的表达

目的：构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白（Ｃ）基因片段的重组真核表达载体，并在肝细胞癌细胞株７７２１细胞中表达。方法：将从ｐＢＲＴＭＨＣＶ１－３０１１质粒切下的ＨＣＶＣ基因片段插入ｐｃＤＮＡ３质粒的ＣＭＶ启动子下游，构建真核表达质粒ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ，然后，采用脂质体转染技术，转染７７２１细胞进行瞬时表达，转染细胞裂解煮沸后，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达的核心抗原。结果：用限制性内切酶酶切后，片段大小与计算值相符。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实，表达抗原的Ｍｒ约为２２０００。结论：ＨＣＶＣ基因能够插入ｐｃＤＮＡ３真核表达载体，并使其在真核细胞中表达，为进一步ＨＣＶ基因疫苗的研制和探讨抗ＨＣＶ感染打下了基础。     

用聚合酶链反应技术研究重型肝炎患者乙型和丙型肝炎病毒的混合感染

采用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测了３６例重型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）的复制状况，发现较普遍存在ＨＢＶ复制，阳性率高达７８％；ＨＣＶ复制亦较活跃，为６１％。提示病毒因素仍然是引起肝衰竭的重要原因。临床资料表明，同时感染两种病毒的重肝患者（４１％）预后较差，ＨＢＶ引起的肝坏死较ＨＣＶ引起的更为严重，两者在体内复制有互相抑制作用，但合并感染可造成肝脏的持续损伤。     

丙型肝炎病毒基因分型及其与干扰素治疗应答的关系

目的为了解山西省丙型肝炎病毒的基因型和基因型对干扰素疗效的预示价值。方法用ＨＣＶ５’ＮＣ区酶切分型方法对９４例丙型肝炎病人进行基因分型，并观察其中４５例患者对干扰素α１ｂ治疗的应答。结果显示ＨＣＶⅠ组（Ⅰ、Ⅱ型）感染８０例（８５１％），ＨＣＶⅡ组（Ⅲ、Ⅳ型）感染１２例（１２８％），ＨＣＶⅠ／Ⅱ组混合感染２例（２１％）。在接受干扰素治疗的病例中，ＨＣＶⅠ组感染（３５例）的应答率为３７１％，持续应答率为１７１％，而Ⅱ组感染（１０例）的应答率为８０％，持续应答率为６０％，两组相比，有显著性差异（Ｐ＜００５，Ｐ＜００２５）。结论表明山西省以ＨＣＶⅠ组感染为主，干扰素对ＨＣＶⅡ组感染的疗效优于ＨＣＶⅠ组感染，ＨＣＶ基因型有预测干扰素疗效的意义。     

丙型肝炎病毒与脂质系统关系的研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）的致病机制及感染肝细胞的机制并不清楚，最近的研究表明丙型肝炎病毒感染可能是利用低密度脂蛋白受体（LDLR），感染后可能影响肝细胞的脂肪代谢，造成脂肪肝，引起一系列的开门见山理变化。可能是丙型肝炎病毒致病的一个方面，目前这方面的研究刚刚开始，有待进一步深入。     

丙型肝炎病毒与脂质系统关系的研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)的致病机制及感染肝细胞的机制并不清楚,最近的研究表明丙型肝炎病毒感染可能是利用低密度脂蛋白受体(LDLR),感染后可能影响肝细胞的脂肪代谢,造成脂肪肝,引起一系列的病理变化.可能是丙型肝炎病毒致病的一个方面.目前这方面的研究刚刚开始,有待进一步深入.     

丙型肝炎病毒非结构蛋白及其抗原表达的研究进展

丙型肝炎病毒非结构蛋白在病毒基因的复制、表达及病毒颗粒的装配过程中起着重要作用，同时具有一定的抗原性与免疫原性，能诱导宿主的抗体及细胞免疫反应，提示该组蛋白不但拥有体液免疫表位，还具有细胞免疫表位，在机体抗病毒免疫中具有一定的意义。本文就近年来这一方面的研究作一简要综述。     

重型乙型肝炎患者丙型肝炎病毒的检测结果与预后探讨

影响重型肝炎病死率高的因素较多，为探讨肝炎病毒与重型肝炎患者预后之间的关系，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测了７３例重型乙型肝炎患者血清ＨＢＶＤＮＡ及ＨＣＶＲＮＡ的存在状况。血清标本取自黑龙江省鸡西市传染病医院１９９６年１月～１９９８年５月住院患者。其...     

丙型肝炎病毒核壳蛋白在转基因小鼠中的表达及与Fas抗原关系的初步研究

将中国人丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）分离株的５’－非编码区和结构基因（５ＵＴＲ＋Ｃ＋Ｅ１＋Ｅ２）区基因插入到ｐｃＤＮＡ３载体中构成表达质粒，通过显微注射法将此质粒注射入Ｆ１代杂交鼠（Ｃ５７ＢＬ／６ＸＩＣＲ）受精卵，并植入假孕母鼠输卵管中，经筛选获得整合有目的基因的转基因小鼠系。免疫组化研究表明，ＨＣＶ核壳蛋白在转基因小鼠各组织中皆有表达，多呈核型染色，心肌细胞中可见浆型。核壳蛋白在各组织中的表达水平；心＞肺＞肾＞肝，同时在转基因小鼠心、肾、肝中检出Ｆａｓ抗原的表达，其表达水平与核壳蛋白的表达呈正相关关系。提示ＨＣＶ核壳蛋白的表达可引起Ｆａｓ抗原的表达。     

杆状病毒表面展示丙型肝炎病毒结构蛋白及其对丙型肝炎病毒的检测

目的: 利用杆状病毒表面展示系统对丙型肝炎病毒(HCV)进行早期检测。方法: 利用杆状病毒表面展示(baculovirus surface display) 技术,构建展示HCV结构蛋白的重组杆状病毒vAc-Flag-HCV C-GP64、vAc-Flag-HCV E-GP64和vAc-Flag-CE-GP64。结果: (1)Western blotting 分析结果表明重组杆状病毒表达了C(HCV核心蛋白)、E(HCV包膜蛋白)和CE蛋白。(2)激光共聚焦显微镜检测结果表明,重组杆状病毒感染昆虫细胞Sf9后在昆虫细胞膜上表达了C、E和CE蛋白。(3)免疫金电子显微镜观察表明重组蛋白展示在杆状病毒囊膜上。(4)重组病毒进行浓缩纯化后,利用时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)技术对HCV样本进行检测,vAc-Flag-CE-GP64的检测阳性率可达80.2%。结论: vAc-Flag-CE-GP64可用于对HCV进行早期检测。     

丙型肝炎病毒与肝细胞癌关系的分子生物学研究进展

丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）是１９８９年确定的肝炎病毒，流行病学研究认为与肝细胞癌的发生有关。本文对肝癌患者ＨＣｖＲＮＡ基因检测及其可能的致癌分子机制进行综述。     

甲型肝炎病毒感染引起的儿童重型肝炎

一般认为 ,甲型肝炎病毒 (ＨＡＶ)感染在发展中国家多发生在幼儿和儿童期 ,多为亚临床型 ,不易被发现 ,病死率也较低〔1 ,2〕。现将我科 1990～ 1999年收治的 9例由ＨＡＶ感染引起的儿童重型肝炎分析如下。1　一般情况1990～ 1999年共收治甲型肝炎 875例 ,其中甲、乙型肝炎病毒双重感染 78例。诊断为重型肝炎 9例 ,5例死亡 ,病死率为 5 5 6 % ,在同期甲型肝炎中病死率为 0 5 7%。其中急性重型肝炎 2例(2 2 2 % ) ,全部死亡 ,病死率为 10 0 % ;亚急性重型肝炎 7例 (77 8% ) ,3例死亡 ,病死率为 42 9% ;9例中 1例 (11 1% )重叠ＨＢＶ感染…     

丙型肝炎病毒核心及E2蛋白在转基因鼠中的表达

［英］ＰａｓｑｕｉｎｅｌｉＣ，ｅｔａｌ．Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．１９９７；２５：７１９～７２７本实验建立了能在肝内表达ＨＣＶ核蛋白的转基因小鼠动物模型，这种转基因小鼠在鼠的主要尿蛋白启动子（ＭＵＰ）的转录控制下于肝细胞浆中表达相当于自然感染患者同等水...     

丙型肝炎病毒核心蛋白在QSG7701细胞中的表达和鉴定

目的：进行丙型病毒肝炎核心蛋白真核表达载体的构建，并在人源肝细胞QSC7701中进行表达与鉴定。方法：从含有丙肝病毒全长基因的重组质粒pBRTM／HCV1—3011质粒中扩增出HCV核心（core）基因片段，构建peDNA3．1（-）／core重组真核表达质粒。然后采用阳离子多聚体将其转染人肝细胞QSG7701，用免疫组织化学SP法检测丙型肝炎病毒核心蛋白的表达，再通过Western blot印迹法进行鉴定。结果：所克隆的core片段大小正确，序列正确；成功的构建了pcDNA3．1（-）／core重组表达质粒，瞬时转染QSG7701细胞，用SP免疫组化检测到了核心蛋白的表达，Western blot印迹法显示其分子量约为21000。结论：丙型病毒肝炎核心蛋白的真核表达载体pcDNA3．1（-）／core在人肝细胞中能有效表达HCV核心蛋白，从而为进一步研究和解析核心蛋白在肝细胞癌变机制中的所起的作用提供了良好的核心蛋白表达系统，同时也为开发丙型肝炎DNA疫苗提供了前期条件。     

丙型肝炎病毒核心蛋白在HepG2细胞中的表达及其对端粒酶活性的影响

目的 建立HCV核心蛋白细胞表达模型，并探讨其对细胞端粒酶活性的影响。方法 用PCR法扩增出HCV核心基因cDNA，将其插入真核表达载体pBK-CMV的HindⅢ和BamHⅠ位点间，构建重组质粒pBK-HCVc。再将重组质粒pBK-HCVc和空载体分别导入肝癌细胞株HepG2中，G418筛选，RT－PCR、免疫组化和蛋白印迹鉴定HCV核心蛋白表达。PCR－ELISA法检测端粒酶活性。结果 构建的pBK-HCVc质粒在HepG2细胞中有稳定表达。表达HCV核心蛋白的细胞HepG2-C的端粒酶活性较转染空载体的细胞HepG2-CMV明显升高。结论 HCV核心蛋白上调了端粒酶活性，可能是HCV诱发肝细胞癌的一种途径。     

肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒检测的临床分析

肝炎患者血清抗丙型肝炎病毒检测的临床分析周建明，郭延羽，高振彬，何严平，康国英，兰志辉，王敬华（中国人民解放军２８５医院，邯郸０５６００１）为了解本地区肝炎患者中丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染情况，我们检测了１３０例肝炎患者血清抗ＨＣＶ，并结合部分资料进...