酶免疫竞争一步法检测乙型肝炎病毒核心抗体的影响因素探讨

探讨乙型肝炎病毒核心抗体检测的影响因素，排除假阳性结果。实验表明：1．改进二步法可以作为一种消除一步法中假阳性结果的有效办法。2．时差操作是假阳性增高的重要原因。     

加样时差对乙型肝炎病毒e抗体测定的影响

目的 研究ELISA法对血清标本与辣根过氧化物酶(HRP)标志的抗-HBe-HRP加入间隔时间对抗-HBe检测结果的影响.方法 选择HBV标志物检测结果为阴性的标本分为A、B、C 3组:A、B两组分别选用两种不同试剂进行加样后,延长室温放置不同时间,再加入抗-HBe-HRP;C组为A、B组阴性转阳性的标本,用化学发光(CLIA)试剂重复测定,确认阴、阳性结果.结果 A组加样时差对抗-HBe测定结果影响明显,且加样时间间隔越长,标本的假阳性越高;B组加样时差对抗-HBe测定结果影响不如A组明显,但随着加样间隔时间越长,标本的假阳性也越高;C组经CLIA重复检测阴性转阳性标本,结果皆为阴性.结论 在竞争抑制法检测抗-HBe中,加样时差造成的不公平竞争可出现程度不等的假阳性,而两种试剂出现的假阳性率也有差异.     

操作时差对半自动中和抑制法时间分辨荧光免疫分析检测乙型肝炎病毒e抗体的影响

目的研究使用中和抑制法时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）检测乙型肝炎病毒e抗体（抗-HBe）过程中加入中和抗原的快、慢对检测结果的影响。方法随机选择血清样本与中和抗原一起加入（时间间隔为0）时测定结果〈1.5 NCU/mL（阴性）的样本按浓度范围分成7组,即0～0.2 NCU/mL为A组、0.201～0.4 NCU/mL为B组、0.401～0.6 NCU/mL为C组、0.601～0.8 NCU/mL为D组、0.801～1.0 NCU/mL为E组、1.001～1.2 NCU/mL为F组、1.201～1.4 NCU/mL为G组,每组20例,按加入中和抗原的间隔时间5、10、15、20、30 min分别进行操作,检测的最终结果采用多个样本比较的秩和检验及多个样本间两两比较的秩和检验进行分析。结果加入中和抗原的间隔时间超过10 min对不同浓度组的测定结果均有显著影响（P〈0.05、P〈0.01）,并随着间隔时间的增加而增高,且有假阳性结果增多的趋势。结论在用中和抑制法TRFLA手工定量检测抗-HBe时,操作时差〉10 min可造成测定结果的假性增高和假阳性,建议在加入血清样本后的10 min内加入中和抗原,以降低错误结果的发生率。     

操作时差对半自动中和抑制法时间分辨荧光免疫分析检测乙型肝炎病毒e抗体的影响

目的研究使用中和抑制法时间分辨荧光免疫分析(TRFIA)检测乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)过程中加入中和抗原的快、慢对检测结果的影响。方法随机选择血清样本与中和抗原一起加入(时间间隔为0)时测定结果<1.5 NCU/mL(阴性)的样本按浓度范围分成7组,即0～0.2 NCU/mL为A组、0.201～0.4 NCU/mL为B组、0.401～0.6 NCU/mL为C组、0.601～0.8 NCU/mL为D组、0.801～1.0 NCU/mL为E组、1.001～1.2 NCU/mL为F组、1.201～1.4 NCU/mL为G组,每组20例,按加入中和抗原的间隔时间5、10、15、20、30 min分别进行操作,检测的最终结果采用多个样本比较的秩和检验及多个样本间两两比较的秩和检验进行分析。结果加入中和抗原的间隔时间超过10 min对不同浓度组的测定结果均有显著影响(P<0.05、P<0.01),并随着间隔时间的增加而增高,且有假阳性结果增多的趋势。结论在用中和抑制法TRFLA手工定量检测抗-HBe时,操作时差>10 min可造成测定结果的假性增高和假阳性,建议在加入血清样本后的10 min内加入中和抗原,以降低错...     

检测乙型肝炎表面抗原的一步法试剂的钩状效应分析

目前,我国检测HBsAg绝大多数采用ELISA中的双抗体夹心双位点一步法。用该方法检测HBsAg,当标本中的HBsAg浓度过高时,会因钩状效应(HOOK)现象出现假阴性而造成漏检,严重威胁着人民的健康。HBeAg和HB-cAb两项阳性时,大多数HBsAg都为阳性,HBsAg阴性者也可能存在漏检问题。所以笔者将HBeAg和HBcAb两项阳性的血清标本进行不同比例稀释后,再用一步法和二步法分别进行检测和比较,以探讨一步法试剂的HOOK在HBsAg检测的漏检情况和二步法的临床实用价值。     

不同染色法对流式细胞术中DNA含量检测的影响

流式细胞术是目前对细胞进行定性和定量分析最有效的手段之一。本文从染色方法和染色样品存放时间在使用流式细胞术中对染色结果的影响进行了比较,旨在寻求一种简便、灵敏且重复性好的染色方法。流式细胞仪分析结果显示一步法具备了以上优点,并用经不同浓度三尖杉酯碱（ＨＴ）处理的ＨＬ－６０细胞进行了验证。     

一步法和二步法检测乙型肝炎病毒表面抗原的比较

目的探讨一步法检测高浓度表面抗原的漏检现象。方法对一步法检测乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)阴性乙型肝炎病毒e抗原和乙型肝炎病毒核心抗体阳性的标本进行倍比稀释后分别进行一步法和二步法检测。结果一步法检测的620份阴性血样中,二步法检测在原倍至1∶512时均有8份为阳性,而一步法检测在不同稀释浓度检测结果不同,高浓度时阴性率较低,在稀释度1∶128至1∶512的阳性率最高。结论一步法检测高浓度HBsAg存在漏检现象,而二步法检测可减少HBsAg漏检率。     

ELISA一步法和二步法检测乙肝HBsAg的结果比较

依据《中华人民共和国药典》2010年版三部规定反应时间的设置:检测过程中加入检测样本后反应时间应不低于60min,加入酶结合物后反应时间应不低于30min,加入显色液后显色时间应不低于30min[1]。江西省萍乡市人民医院检验科乙型肝炎病     

ELISA一步法和二步法检测乙肝HBsAg的结果比较

依据《中华人民共和国药典》2010年版三部规定反应时间的设置：检测过程中加入检测样本后反应时间应不低于60min,加入酶结合物后反应时间应不低于30min,加入显色液后显色时间应不低于30min[1]。     

Murex HBsAg检测及其与国产试剂的比较

乙型肝炎病毒是无偿献血者中最常见的输血传播疾病。我国《血站管理办法》规定对献血者血液乙型肝炎病毒检测的质量标准是“乙肝表面抗原(HBsAg)酶联免疫吸附法(ELISA):阴性”。ELISA具有高灵敏度、试剂稳定、低危险、低污染、可自动化等优点,为各国规定的用于献血者检测的标准方法。其中我站使用的美国雅培制药有限公司生产的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂(Murex HBsAg)是大多数血站HB-sAg复检的选用试剂。而现在的Murex HBsAg,在操作步骤上有所改进,把原先的一步法改为二步法,使灵敏度提高可达0.1ng/ml。现将与国产试剂(一步法)和原先Murex HBsAg(一步法)相比较结果报道如下。     

两种试剂检测乙型肝炎病毒e抗体结果比较

目的 探讨两种酶联免疫吸附试验(ELISA)一步法试剂对乙型肝炎病毒e抗体(抗-HBe)检测结果的影响.方法 用上海科华及北京金豪公司生产的试剂盒测定患者样本.样本加入反应孔后分别于0、15、30 min和60 min后加入酶标志物(金豪抗-HBe还要同步加HBeAg中和试剂),余下步骤均按说明书严格操作.另将金豪试剂改变加样顺序以人为构成不同形式的不公平竞争以探讨其影响.结果 科华试剂由于预先包被了HBeAg,加样时间长的标本吸光度A值降低.金豪试剂无明显影响.改变加样顺序后得到的吸光度A值也证实了不公平竞争的影响.结论 竞争法检测抗-HBe时应在样本加入后同步加入HBeAg中和试剂及酶联试剂,以尽可能减少加样时差对结果的影响.     

酶免疫竞争一步法检测抗乙型肝炎病毒核心抗体的影响因素探讨

乙型肝炎病毒 (ＨＢＶ)ｅ抗体 (抗 ＨＢｅ)是观察乙型肝炎大三阳疗效和传染性强弱的指标之一。以往我们使用酶免疫竞争 (ＥＩＡ)二步法检测抗 ＨＢｅ[1] ,反应时间相对较长。而近几年普遍使用ＥＩＡ一步法检测抗 ＨＢｅ ,操作简便 ,反应时间仅需 30ｍｉｎ ,但易出现ＨＢＶｅ抗原 (ＨＢｅＡｇ)、抗 ＨＢｅ同时阳性或同时阴性 ,对此我们进行了研究。一、材料和方法1.标本来源 :12 7份本院ＨＢＶ表面抗原 (ＨＢｓＡｇ)阳性病人血清。其中 72份ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ同时阳性 ;35份ＨＢｅＡｇ和抗 ＨＢｅ同时阴性 ;2 0份ＨＢｅＡｇ阴性 ,抗 …     

两种方法检测乙型肝炎病毒e抗体的比较分析

目的比较微粒子酶免疫分析法（MEIA）和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测乙型肝炎病毒e抗体（抗-HBe）结果的一致性。方法选取144例ELISA检测结果为单独抗-HBe阳性的标本,用MEIA法进行平行测定。结果 ELISA检测结果的OD值在0-0.3之间及阴性对照标本,两种方法符合率为100%;OD值〉0.6时,符合率〈50%;当OD值〉0.9时,符合率为0。结论 ELISA法检测单独抗-HBe阳性且OD值〉0.3时,应对该标本重复测定或用其他检测方法重新检测,以免出现假阳性。     

抗-HIV(1/2)ELISA一步法检测时应注意钩状效应

目的　认识抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA一步法试剂盒在检测某些高滴度HIV抗体强阳性标本时可能存在的钩状效应。方法　用 5种不同厂家的抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA试剂盒 (包括一步法和二步法 )检测 4 32 5 6份血标本 ,将检测出来 4份高滴度HIV抗体强阳性标本用蛋白印迹法确认结果 ,同时将 4份强阳性标本稀释 10 0倍后用 5种不同厂家的抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA试剂盒重复检测。结果　某些厂家抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA一步法试剂盒在测定原倍和稀释后高滴度HIV抗体强阳性标本时其结果OD值存在着显著性差异。结论　在使用抗 HIV(1/ 2 )双抗原夹心ELISA一步法试剂盒进行检测时应注意因严重钩状效应而影响结果正确的可能性。提示应选择高灵敏和高特异性试剂 ,确保血液质量安全     

ELISA一步法和二步法检测HBsAg结果的对比分析

目的 验证酶联免疫吸附试验(ELISA)乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)二步法诊断试剂灵敏度及评价HBsAg二步法诊断试剂的质量.方法 分别采用ELISA一步法及二步法两种方法检测体检人群2 154例和不同浓度质控血清,结果 不一致样本进行化学发光法定量检测.结果 一步法检测HBsAg阴性1 978例,阳性176例,阳性率为8.17%;二步法检测HBsAg阴性1 953例,阳性201例,阳性率为9.33%.ELISA一步法检测的1 978例HBsAg阴性样本中,有25例二步法检测为阳性.一步法检出率较低,仅为二步法的87.56%,而漏检率为1.16%.一步法最低检测浓度为1 IU/mL,二步法为(0.1～0.2) IU/mL.结论 一步法与二步法HBsAg试剂灵敏度差异有统计学意义(P<0.01),二者检出率具有统计学意义(P<0.05).     

ELISA一步法和二步法检测HBsAg结果的对比分析

乙型肝炎病毒(HBV)传播途径广,传染性强,发病率高,我国在世界上属于乙型肝炎病毒感染的高度流行区.HBV表面抗原(HBsAg)在HBV感染检测中一直为最重要的标志物,是乙肝的早期诊断指标之一.因此,准确地检测HBsAg对于HBV感染的临床诊断和治疗有着重要的意义.为验证ELISA法检测试剂盒的质量与性能,笔者通过对2154例江西省丰城市中医院体检者血清及质控血清同时用两种方法进行HBsAg检测并对结果进行对比分析,现分析报道如下.     

酶免疫一步法检测乙型肝炎表面抗原影响因素探讨

乙型肝炎（下称乙肝）是一种严重危害人类健康的世界性传染病。我国是乙肝高发区，乙肝表面抗原（HBsAg）携带者高达10％～15％。HBsAg在乙肝病毒（HBV）感染的检测中一直是最为重要的标志物，是乙肝的早期诊断指标之一。因此，准确地检测HBsAg对于HBV感染的临床诊断、治疗以及避免医患纠纷的发生有着重要意义。目前国内最常用的HB—sAg测定方法为酶联免疫吸附试验（ELISA）中的双抗体夹心双位点一步法，该法简单、方便、快速，灵敏度较高，特异性较好。