虎杖改善阿尔茨海默病小鼠模型的学习记忆能力及作用机制研究

目的:观察虎杖醇提物、水提物对阿尔茨海默病小鼠模型学习记忆能力的影响,并初步探讨其作用机制。方法:采用侧脑室注射β^淀粉样蛋白片段1-42(Aβ1淀粉样蛋白片段1-42(Aβ1⁴2)建立AD小鼠模型,通过Morris水迷宫实验检测小鼠学习记忆能力,使用试剂盒检测小鼠脑组织总抗氧化能力、乙酰胆碱酯酶活性、丙二醛和一氧化氮含量。结果:虎杖醇提物、水提物均不同程度地改善模型小鼠的学习记忆能力,提高总抗氧化能力,以醇提物效果更好,醇提物还能抑制乙酰胆碱酯酶活性,降低丙二醛和一氧化氮含量。结论:虎杖能改善Aβ致AD小鼠模型的学习记忆能力,其作用机制可能与抗氧化、减少炎症介质的产生和调节胆碱能系统等多方面综合作用有关。     

伤科消肿止痛膏制备工艺以及有效成分含量测定

目的：优选伤科消肿止痛膏的制备工艺,测定指标成分的含量。方法：设计正交实验优选伤科消肿止痛膏醇提工艺。运用单因素考察法优选制备工艺。采用HPLC色谱法检测大黄素和虎杖苷的含量。结果：优选的醇提工艺为7倍量的70%乙醇提取3次,每次2 h。优选的制备工艺为明胶和阿拉伯胶的比例为1:4,使用3倍量伤科消肿止痛膏提取液,所得膏体黏度适中。测得大黄素的含量为4.14 μg·g-1,虎杖苷的含量为12.71 μg·g-1。结论：实验优选的工艺稳定可行,可用于伤科消肿止痛膏制备。选取的指标成分大黄素和虎杖苷含量测定结果稳定,可用于质量控制。     

灌肠方治疗肠癌有效成分测定

目的:通过LC-MS法测定抗癌中药复方(仙鹤草、败酱草、龙葵)中9种化学成分,对其水提物和醇提物中各主要成分的含量进行对比,测定灌肠方中抗肿瘤有效成分,为复方制剂有效成分测定提供初步依据。方法:色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18柱,流动相为乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱。采用内标法测定各成分的含量,选择离子监测(SIR)模式同时监测复方中的9种成分和2个内标成分;ESI源,正、负离子同时检测。利用所建立的方法对不同提取批次的水提物(3批)和醇提物(3批)进行含量测定。结果:9种化学成分的浓度和峰面积在测定浓度范围内具有良好的线性关系,除儿茶素和鞣花酸外,醇提物中各有效成分的含量均比水提物中的含量高。结论:该方法简便、专属性好、灵敏度高,适用于复方提取液的有效含量测定;复方醇提物优于水提物。复方制剂的有效成分是由单味中药的有效成分协同作用的结果。     

川芎水提物对缺氧内皮细胞的保护作用

目的:研究川芎水提物对缺氧人脐静脉内皮细胞(EAHY926)的作用影响。方法:体外培养EAHY926,采用化学诱导缺氧建立模型,用川芎水提取液干预后,测定细胞活力,并检测丙二醛含量、超氧化物歧化酶及一氧化氮的变化。结果:采用单因素方差分析,与模型组相比,川芎水提取液高剂量组、中剂量组及复方丹参组均能显著提高细胞活力(P0.05);川芎水提物中剂量组、高剂量组及复方丹参组丙二醛含量与模型组比较有显著差异(P0.01);川芎水提物高剂量组及复方丹参组一氧化氮含量显著增加(P0.01);川芎水提物中剂量组及复方丹参组超氧化物歧化酶活性显著升高(P0.05),川芎水提物高剂量组效果最好(P0.01)。结论:川芎水提物能显著拮抗缺氧对EAHY926的损伤。     

HPLC法测定复方虎杖颗粒中大黄素

复方虎杖颗粒是根据名老中医经验方研制的中药六类新药,由虎杖、黄柏、苦参3味中药组成,具有清热解毒、活血祛瘀、收湿止痒、加快伤口愈合之功效,主治各类痔疮、肛瘘等肛肠科疾病。虎杖为方中君药,主要含有大黄素等蒽醌类成分。因此本实验采用HPLC法对复方虎杖颗粒中主要药效成     

凤仙花水提物体外和体内的抑菌活性

目的：研究凤仙花水提物的体外、体内抑菌活性,为寻找新的抗菌药物提供药理学参考依据。方法：体外实验分为阴性对照组（A组）、青霉素对照组（B组）、链霉素对照组（C组）和凤仙花水提物的不同浓度(0.01、0.10、1.00和10.00 g/mL)组(D~G组）,浸渍法制备凤仙花水提物,沟槽法和纸片法检测凤仙花水提物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、变形杆菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌及肺炎克雷伯菌的体外抑菌活性。体内实验分为阴性对照组（A组）和凤仙花不同浓度（0.5、5.0及50.0 g/kg)组(B~D组）,以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌作为指示菌种,小鼠灌胃给予凤仙花水提物7 d后,腹腔注射金黄色葡萄球菌和大肠杆菌,通过观察小鼠死亡率衡量凤仙花水提物的体内抑菌活性。结果：体外抑菌实验,当凤仙花浓度高于1.00 g?mL-1时,凤仙花水提物对上述7种致病菌均具有抑制作用,抑菌环直径均明显大于阴性对照组（P<0.05）。体内抑菌实验,小鼠灌胃给予5.0　g?kg-1的凤仙花水提物后,具有抑制体内金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的作用,与阴性对照组小鼠死亡率（88.9%）比较,5.0 g?kg-1凤仙花水提物组小鼠死亡率（55.6%）明显下降。结论：凤仙花水提物中含有抑菌活性成分。     

复方马钱子的抗肿瘤作用探讨

目的探讨复方马钱子的抗肿瘤作用。方法采用小鼠H22肝癌皮下移植肿瘤模型,通过检测原位肿瘤、免疫器官指数及Na+、K+、Cl-、葡萄糖含量,评价复方马钱子的毒性及抗肿瘤作用。采用MTT法检测复方马钱子对淋巴细胞和HCT-116癌细胞增殖的影响。结果复方马钱子在实验剂量下,与模型对照组比较,治疗组的肿瘤生长减慢,荷瘤小鼠免疫器官指数降低,血清中K+、Cl-、葡萄糖含量显著增加,Na+浓度不受影响。体外实验表明,复方马钱子对HCT-116癌细胞有一定的抑制作用,但对淋巴细胞增殖无影响。结论复方马钱子有一定的抗肿瘤作用,可调节体内电解质、葡萄糖含量使趋于正常。     

复方灯盏头痛片提取物的活性筛选

[目的]对不同工艺制备的复方灯盏头痛片提取物进行药效学比较研究。[方法]采用小鼠水浴甩尾反应实验、醋酸致小鼠扭体实验、硝酸甘油致小鼠偏头痛模型以及利血平低5-HT化小鼠偏头痛模型,对不同提取工艺所得复方提取物进行药效学筛选。[结果]3种工艺提取物均能有效提高甩尾潜伏期,抑制小鼠的扭体反应,具有明显的镇痛作用,其中以醇提物组效果最为显著;在硝酸甘油致小鼠偏头痛实验中,醇提物高低剂量组均能明显减少小鼠挠头次数,水提物及醇水双提物只有高剂量组可明显减少小鼠挠头次数(P<0.05);利血平低5-HT化小鼠偏头痛模型实验中,3种提取物均可提高脑组织及血液中5-HT的含量,其中以醇提物提升效果最为显著。[结论]相同剂量的复方醇提物药效活性优于水提物及醇水双提物,醇提工艺为其较优提取工艺,可作进一步研究和开发。     

菌药共孵育-平皿法检测虎杖体外抑菌活性

目的探讨菌药共孵育-平皿法在虎杖提取液体外抑菌活性检测中的应用效果。方法采用菌药共孵育-平皿法检测虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌的体外最小抑菌浓度（MIC）及出现明显抑菌作用所需的共孵育时间。结果虎杖提取液对金色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌均具有不同程度的抑菌作用,其MIC分别为12.5、25.0、25.0、50.0g·L-1;出现明显抑菌作用所需的共孵育时间分别为8、8、8、12h。结论虎杖提取液在体外具有明显的抑菌作用;菌药共孵育-平皿法模拟了虎杖体内抗菌环境,具有准确、快速、可靠的优点,可作为常规抗菌药物的体外抑菌实验方法。     

参苓白术散对小鼠耐缺氧及抗运动性疲劳作用研究

目的观察参苓白术散水提物的抗疲劳、耐缺氧作用。方法采用小鼠力竭游泳实验和小鼠常压耐缺氧实验,观察连续14 d灌胃给予参苓白术散水提物对小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力的影响,并测定用药后各组小鼠负重游泳时间、耐缺氧时间、体内肝糖原贮备量、运动后血中尿素氮、血乳酸含量。结果参苓白术散水提物40.0、20.0 g/kg剂量均可显著延长小鼠常压耐缺氧时间和负重游泳时间（P〈0.05）,显著降低小鼠血中乳酸及尿素氮含量（P〈0.05）,显著增加小鼠体内肝糖原储备量（P〈0.05）。结论参苓白术散水提物能显著增强小鼠的抗疲劳和耐缺氧能力。     

复方叶下珠滴丸体外抗乙肝病毒的初步实验研究

目的观察复方叶下珠滴丸体外的抗乙肝病毒作用。方法将复方叶下珠滴丸试药稀释后,分别加入HepG2．2.15细胞培养液和HBsAg阳性人血清中,于37℃5％CO2培养箱孵育后,收取上清液,采用ELISA法及荧光定量PCR法,分析药物对细胞培养上清液和人血清培养液中HBsAg、HBeAg及HBVDNA含量的影响。结果复方叶下珠滴丸体外对HBsAg、HBeAg和HBVDNA有不同程度的抑制作用,抑制效果最好浓度为120mg／mL,时间为72h。结论实验结果证明复方叶下珠滴丸具有明显的．体外抗乙肝病毒作用。     

天花粉提取物对HepG2.2.15细胞HBsAg和HBeAg表达的影响

目的:探讨天花粉水提取物、醇提取物对HepG2.2.15细胞的增殖及培养细胞上清中HBsAg与HBeAg表达的影响。方法:用MTT方法检测HepG2.2.15细胞的存活率,以酶联免疫法(ELISA)检测HepG2.2.15细胞上清液HBsAg和HBeAg的表达量。结果:天花粉水提取物和醇提取物处理HepG2.2.15细胞后HBsAg和HBeAg的表达均呈时间依赖性和浓度依赖性抑制,但天花粉水提物的治疗指数明显优于醇提物。结论:天花粉水提物较醇提物有更好的抗HBV活性。     

复方叶下珠胶囊体外抗乙型肝炎病毒作用的研究

目的研究复方叶下珠胶囊的体外抗乙型肝炎病毒（HBV）的作用。方法将HepG2.2.15细胞分为空白对照组、阳性对照组和不同浓度的复方叶下珠胶囊组,用CCK-8检测细胞毒性,酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBsAg和HBeAg;荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测细胞内、外的乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸（HBV DNA）。结果复方叶下珠胶囊有明显的抗HBV作用,尤其当浓度为50mg/mL时,减少血清中的HB-sAg作用与拉米夫定组相当;当浓度为25 mg/mL,50mg/mL,和100mg/mL时,减少血清中HBeAg作用优于拉米夫定组;但是降低细胞内外的HBV DNA含量方面,与拉米夫定组无明显差别。结论体外试验中,复方叶下珠胶囊具有抗HBV作用。     

知母宁抗乙肝病毒作用的体内外实验研究

目的:观察知母宁的抗乙肝病毒作用。方法:观察不同浓度知母宁对体外培养的2.2.15细胞分泌HBsAg、HBeAg的抑制作用及对乙肝模型鸭DHBV-DNA的影响。结果:知母宁浓度为4mg/mL时对2.2.15细胞分泌HBeAg有明显的抑制作用;以200mg/kg治疗乙肝模型鸭10d后DHBV-DNA水平明显降低。结论:知母宁有抗乙肝病毒的作用,其机制可能与抑制HBV-DNA的复制有关。     

<Emphasis Type="Italic">In vitro</Emphasis> anti-hepatitis B virus effect of <Emphasis Type="Italic">Hypericum perforatum L</Emphasis>.

The anti-hepatitis B virus(HBV)effects and its mechanisms of the ethanol extracts of Hypericum perforatum L.(EHP)in vitro were explored.HepG2 2.2.15 cells,a stable HBV-producing cell line,were cultured as the model system to observe the anti-HBV effect.The viral antigens of cellular secretion,HBsAg and HBeAg,were determined by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA).The quantity of HBV-DNA released in the supernatant was assayed by real-time PCR.In order to understand the mechanisms of the suppression of H...     

拉米夫定等六种药物的体外抗乙型肝炎病毒作用

目的：观察拉米夫定（3TC）等6种药物对抗乙型肝炎病毒（HBV）体外药效评价及不同指标之间的关系。方法：利用乙型肝炎病毒基因转染的人肝癌细胞系2．2．15细胞,检测细胞培养上清液中的乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、乙肝病毒e抗原（HBeAg)及乙肝病毒DNA（HBV－DNA）的含量作为药物抗HBV效果的观察指标。结果：（1）6种药物在一定浓度范围内对2．2．15细胞分泌的HBsAg和HBeAg抑制作用很弱或无抑制;（2）HBV－DNA定量检测拉米夫定和2′3′－二脱氧－3－氟鸟苷（FLG）对HBV DN水平有明显抑制作用,其半数有效剂量（IC50）分别为0．31μmol/L,0．53μmol/L,阿昔洛韦（ACV）和α－干扰素（α-IFN）之IC50分别为0．33mmo/L、96．18U／ml,膦甲酸钠（PFA）和利巴韦林（RBV）最大无毒浓度无任何抑制作用。结论：抑制HBsAg与HBeAg的病毒蛋白表达活性与抑制HBV DNA活性无一致相关性,以HBV DNA指标更能反映化合物的抑制作用。     

HBVPreS2反义寡核苷酸对HepG 2.2.15细胞系HLA-I类抗原表达及生物活性的影响

目的 :观察针对乙型肝炎病毒 (HBV)PreS2 基因特异性反义寡核苷酸 (asON)对转基因细胞HepG2 .2 .15表面的人类白细胞I类抗原 (HLA I)基因表达的影响。方法 :设计合成互补于HBVPreS2 翻译起始区的反义寡核苷酸即序列I ,并设非互补序列作对照即序列II ,免疫细胞化学染色观察asON对HepG2 .2 .15表面表达的HLA I类抗原的影响 ,用ELISA法动态检测细胞上清液中HBsAg和HBeAg的变化 ,放射免疫测定法检测asON对宿主细胞自身分泌蛋白 血清铁蛋白的影响。结果 :HepG2 .2 .15细胞表面HLA I类抗原表达降低 ,用药组和对照组相比有统计学意义 (P <0 .0 5 )。asON能够抑制HBV表达HBsAg和HBeAg ,对HBsAg和HBeAg的抑制率分别为 6 6 %和 91% ,而序列II对HBsAg和HBeAg的抑制率均为 11%。asON对宿主细胞自身分泌蛋白无影响 ,即对宿主细胞无毒性作用。结论 :asON以序列特异性方式抑制HBV基因表达而对宿主细胞无毒性作用 ,HLA I类抗原表达降低 ,这对减轻过度炎症反应 ,阻止慢性肝炎至重症肝炎的发生具有重要意义     

利用纳米和RNA干扰技术抑制HBV-DNA 在HepG2 2.2.15细胞中的复制和表达

目的：通过RNA干扰和纳米技术抑制HBV-DNA在体外的复制和HBV核心抗原的表达。方法：制备靶向HBV核心抗原（HBcAg）的纳米小干扰RNA（siRNA）,利用U6启动子质粒转染入HepG2 2.2.15细胞;RT-PCR和Western印迹检测转染细胞HBV核心抗原在mRNA和蛋白水平的表达情况;real-time PCR 检测上清液HBV-DNA,放射免疫法检测细胞HBV表面抗原（HBsAg）、e抗原（HBeAg）、核心抗原（HBcAg）。结果：成功构建了含磁性纳米的siRNA质粒;多种方法检测均显示转染后的细胞HBV核心抗原表达明显下降;其表面抗原、e抗原和HBV-DNA值均较对照组降低。结论：RNA干扰联合纳米技术可明显下调HBV核心抗原的表达,抑制HBV-DNA复制。     

紫丁香叶提取物对HepG2.2.15细胞中HBeAg及HBsAg表达的影响

目的 :观察紫丁香叶提取物对 Hep G2 .2 .1 5细胞分泌 HBe Ag和 HBs Ag的影响。方法 :采用酶联免疫吸附法 ( ELISA)检测培养上清中 HBe Ag和 HBs Ag表达的变化并以抑制率来表示。结果 :紫丁香叶提取物对 HBe Ag和 HBs Ag的分泌具有抑制作用 ,该作用呈现剂量依赖性和时间依赖性。结论 :紫丁香叶提取物对 HBe Ag和 HBs Ag分泌的抑制作用提示其在体外具有抗乙型肝炎病毒的作用     

黄芪提取物对乙型肝炎病毒抗原表达的抑制作用

目的探讨黄芪提取物对乙型肝炎病毒（HBV）病毒抗原表达的抑制作用。方法用MTT法测定黄芪提取液在不同浓度下对HepG2．2．15细胞的细胞毒性,ELISA法检测黄芪提取物对HepG2．2．15细胞分泌HBsAg、HBeAg颗粒的影响。结果黄芪提取物对HepG2．2．15细胞4d和8d的半数毒性浓度（TC50）分别为88．914μg／ml和85．209μg／ml（P〉0．05）,对HBeAg4d和8d的治疗指数（TI）分别为1．018和1．342（P〉0．05）,对HBsAg4d和8d的治疗指数分别为0．065和0．089（P〉0．05）。结论黄芪提取物抑制HepG2．2．15细胞分泌HBeAg的作用为低效有毒,黄芪提取物对HBsAg抗原分泌无明显抑制作用。