包载橙皮素纳米脂质体对于血管性痴呆小鼠学习记忆能力改善作用的实验研究

摘要：目的:研究包载橙皮素（HES）纳米脂质体对于血管性痴呆（VD）小鼠学习记忆能力的改善作用及其机制。方法:应用薄膜分散法结合超声水化技术制备包载HES的纳米脂质体并对其进行质量表征。随机选取60只C57BL/6清洁级小鼠,应用短暂性夹闭双侧劲总动脉法建立小鼠VD模型后,随机分成假手术组、VD模型组、HES溶液组及HES纳米脂质体组,分别给予相应形式药物干预。药物治疗结束后应用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习及记忆能力,同时HE染色观察各组小鼠海马神经元细胞排列情况;通过ELISA法及Western Blotting技术测定脑内氧化应激水平及其分子机制。结果:包载HES纳米脂质体形态圆整、分散性好,粒径均一,包封率高达（86.37±3.21）%。Morris水迷宫及HE染色结果显示,相比于假手术组,VD模型组小鼠平均逃避潜伏期显著增加（P<0.05）,平台穿越次数及停留时间显著下降（P<0.05）。相比于VD模型组,HES溶液组及HES纳米脂质体组小鼠的平均逃避潜伏期显著下降（P<0.05）,而平台穿越次数和停留时间显著增加（P<0.05）,同时HES纳米脂质体的平均逃避潜伏期、平台穿越次数及停留时间较HES溶液组有显著差异（P<0.05）。分子生物学检测结果显示,相比于模型组,HES纳米脂质体组的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）及核因子E2相关因子（Nrf2）、醌氧化还原酶1（NQO1）、血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达显著增加（P<0.05）,而丙二醛（MDA）含量显著下降（P<0.05）。结论:HES纳米脂质体可能通过激活Nrf2信号通路,抑制氧化应激损伤,从而改善VD小鼠的学习记忆能力;同时应用纳米脂质体包载药物还能显著增加药物的治疗效果,有望成为防治VD的新型治疗药物治疗形式。     

纳米脂质体包载辅酶Q10改善血管性痴呆小鼠学习记忆功能的实验研究

目的：研究新型纳米脂质体包载辅酶Q10对血管性痴呆小鼠学习记忆功能的影响及其作用机制。方法：采用薄膜分散法结合超声水合法制备包载辅酶Q10的纳米脂质体并对其进行质量表征。应用双侧颈总动脉夹闭法建立小鼠血管性痴呆（Vascular Dementia,VaD）模型,将实验小鼠随机分成假手术组、模型组、辅酶Q10溶液组及辅酶Q10纳米脂质体组并给于相应的药物治疗。药物干预结束后,应用Morris水迷宫的定位航行及空间探索实验评价各组小鼠的学习及记忆功能,同时采用Western blot结合ELISA分析小鼠海马组织核因子E-2-相关因子-2（Nuclearfactor erythroid-2-related factor-2,Nrf-2）表达及超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（Malonaldehyde,MDA）含量探讨辅酶Q10对于血管性痴呆的作用机制。结果：载药纳米脂质体形态圆整、分散性好,粒径小于100 nm,包封率高达89.43%±3.43%。Morris水迷宫实验显示,模型组小鼠的平均逃避潜伏期显著高于假手术组（P<0.05）,平台穿越次数及停留时间显著低于假手术组（P<0.05）,相比于模型组,辅酶Q10溶液组及纳米脂质体组的平均逃避潜伏期显著降低（P<0.05）,平台穿越次数及停留时间显著升高（P<0.05）,其中纳米脂质体组行为学改善更加明显,水迷宫指标较单纯溶液组相比有显著性差异（P<0.05）。Western blot及ELISA分析证实,相比于模型组,应用不同形式辅酶Q10治疗干预组小鼠海马组织Nrf-2蛋白表达及SOD含量显著升高（P<0.05）,MDA含量显著下降（P<0.05）。结论：应用纳米脂质体包载辅酶Q10能够增加药物的入脑效率,通过调控Nrf-2/ARE途径抑制VaD小鼠脑内的氧化应激损伤,改善VaD动物的学习及认知功能,有望成为治疗VaD的新型药物形式。     

N-三甲基壳聚糖包覆司帕沙星纳米脂质体兔眼房水及角膜药动学研究

摘要：目的:对N-三甲基壳聚糖（TMC60）包覆司帕沙星（SL）纳米脂质体兔眼房水及角膜的药动学进行研究。方法:采用数字法将78只健康家兔随机分为3组:SL滴眼液组、SL纳米脂质体组和TMC60包覆SL纳米脂质体组,每组26只,双眼单次各给药100μl（SL滴入量为600μg）。在预设的时间点各组处死2只家兔,取房水及角膜,检测其中SL含量,DAS 2.0软件计算药动学参数,并绘制药-时曲线。结果:兔眼单次给药后,SL在房水及角膜中的药动学均符合二室模型。与SL滴眼液组相比,SL纳米脂质体组和TMC60包覆SL纳米脂质体组在房水及角膜中的达峰时间(Tmax)滞后,血药浓度时间曲线下面积(AUC0～t)明显增加（P<0.05）。与SL纳米脂质体组相比,TMC60包覆SL纳米脂质体组AUC0～t明显增加（P<0.05）。结论:TMC60包覆纳米脂质体可显著促进SL在眼部的滞留及吸收,呈现明显的缓释性及长效性。     

藏药三果汤调节Nrf2/HO-1信号通路干预高脂血症大鼠的作用机制研究

目的：基于Nrf2/HO-1信号通路探讨藏药三果汤对高脂血症大鼠保护作用及相关作用机制。方法：雄性SD大鼠48只,随机分为6组,即正常对照组、模型对照组、辛伐他汀组（3.5 mg/kg）,藏药三果汤低、中、高剂量组（0.43 g/kg、0.86 g/kg、1.72 g/kg）,每组8只。正常组给予基础饲料喂养,其余各组给予H00016高脂饲料喂养,制备高脂血症大鼠模型,造模的同时,各给药组每天一次给予相应药物灌胃,正常对照组、模型对照组给予等体积的生理盐水（1次/d）,连续灌胃6周。实验期间每周固定时间称取各组大鼠体重一次,6周后试剂盒检测血清中血脂（TC、TG、LDL与HDL）及氧化指标（MAD、SOD与GSH）的水平。Western Blot法测定肝组织中Nrf2、HO-1、Keap1、NQO1蛋白表达,采用person相关性分析分析血脂与氧化指标之间的相关性。结果：与正常对照组比较,模型对照组的体重明显增加,血清中的TC、TG、LDL、MDA含量明显升高,而血清中HDL含量明显减低,SOD、GSH活力明显减低（P<0.05或P<0.01）;与模型对照组比较,各给药组的体重减轻,血清中的TC、TG、LDL、MDA含量明显减低,血清中的HDL含量明显升高,SOD、GSH活力明显升高（P<0.05或P<0.01）。与空白对照组比较,模型对照组Keap1蛋白水平表达明显上调,Nrf2、HO-1与NQO1蛋白水平表达明显下调（P<0.05或P<0.01）,与模型对照组比较,三果汤低、高剂量肝组织中的Keap1蛋白水平表达明显下调,Nrf2、HO-1与NQO1蛋白水平表达明显上调（P<0.05或P<0.01）。相关性分析可见TG与SOD、HO-1及NQO1呈负相关,与Keap1呈正相关,TC与SOD、HO-1、GSH及Nrf2呈负相关,与Keap1及MDA呈正相关。结论：藏药三果汤可改善高脂血症大鼠体重及血脂水平,其机制可能与调节Nrf2/HO-1信号通路,改善氧化应激有关。     

芹黄素纳米脂质体改善血管性痴呆小鼠学习记忆功能的实验研究

摘要：目的:研究芹黄素纳米脂质体对于血管性痴呆小鼠学习及记忆功能的影响及其作用机制。方法:薄膜蒸发结合超声分散法制备芹黄素纳米脂质体并对其进行质量性状表征。采用夹闭双侧颈总动脉建立小鼠Va D模型,60只实验小鼠随机分为4组:假手术组、模型组、芹黄素溶液组(50μg·kg-1)及芹黄素纳米脂质体组(50μg·kg-1),每组15只,分别尾静脉给予相应形式的药物干预,连续给药4周,每周3次。采用Morris水迷宫评价各组小鼠的学习及记忆能力,HE染色考察海马组织神经元形态,Western Blot及ELISA分别检测小鼠脑组织Aβ蛋白表达及肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素1β（IL-1β）含量考察芹黄素对于Va D学习记忆影响的作用机制。结果:制备的载药纳米脂质体形态圆整,分散均匀,稳定性好,粒径为（95.7±1.3） nm,包封率高达（85.73±2.31）%。与假手术组相比,模型组小鼠第4和第5天的平均逃避潜伏期、小鼠海马组织TNF-α及IL-1β含量、Aβ表达显著升高,平台穿越次数及停留时间显著降低（P<0.05）;与模型组相比,芹黄素溶液组和芹黄素纳米脂质体组小鼠第4和第5天的平均逃避潜伏期、小鼠海马组织TNF-α及IL-1β含量、Aβ表达显著降低,平台穿越次数及停留时间显著升高（P<0.05）;且芹黄素溶液组和芹黄素纳米脂质体组间差异有统计学意义（P<0.05）。模型组小鼠海马组织出现明显的神经元固缩、排列不规则,而芹黄素纳米脂质体组小鼠海马组织神经元细胞排列整齐,形态及大小均匀,接近假手术组水平。结论:应用载药纳米脂质体包载芹黄素能够增加药物透过血脑屏障的效率,从而使芹黄素能够通过减少脑内Aβ蛋白蓄积,抑制脑内的炎症反应,发挥神经元保护作用,改善血管性痴呆小鼠模型学习及认知功能。     

人表皮活性因子柔性纳米脂质体的制备及相关性质研究

目的 制备人表皮活性因子（EGF）柔性纳米脂质体,并对其相关性质进行研究.方法 利用逆相蒸发-冷冻干燥法制备EGF柔性纳米脂质体,采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定EGF的含量,电镜观察其形态,并考察其包封率或载药量、变形性及稳定性.结果 所制备的EGF柔性纳米脂质体为多室脂质体.其平均粒径为（81.62±3.67） nm,Zeta电位为（60.12±7.58） mV;平均包封率为（37.86±4.77）％;平均载药量为（6.58±1.27）％.证实了EGF柔性纳米脂质体具有高度的变形性;冻干的EGF柔性纳米脂质体具有较高的稳定性.结论 EGF柔性纳米脂质体的制备方法可行,含量测定方法简单、可靠,稳定性和变形性高,可能成为透皮转运的有效载体.     

瞿麦汤调控Nrf2/ARE信号通路对肾草酸钙结石大鼠氧化应激损伤作用机制研究

目的 研究敦煌医方瞿麦汤对肾草酸钙结石模型鼠核因子E2相关因子2（nuclear factor erythroid-2 related factor 2,Nrf2）/抗氧化反应原件（antioxidant response element,ARE）信号通路的影响,探讨其机制。方法 60只SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、肾石通颗粒（5 g·kg^-1）组和敦煌医方瞿麦汤高、中、低剂量（20,10,5 g·kg^-1）组。除空白对照组外,其余各组大鼠采用1%乙二醇+2%氯化铵的溶液联合灌胃法制备大鼠肾草酸钙结石模型,同时给予相应药物,连续28 d。末次给药结束后,检测各组大鼠的体质量、肾指数,检测大鼠血清中SOD活性、MDA含量、T-AOC含量,HE染色法观察各组大鼠肾组织的病理形态学变化,RT-PCR法检测肾组织Nrf2 mRNA和NQO1 mRNA的表达,免疫组化法检测肾组织Nrf2和ARE的蛋白表达。结果 与空白对照组比较,模型组大鼠肾指数和MDA的含量均增加（P<0.05）,其体质量、SOD活性、T-AOC含量、Nrf2的基因表达和蛋白表达均下降,NQO1的基因表达下降（P<0.05）,ARE的蛋白表达下降（P<0.05）;与模型组比较,敦煌医方瞿麦汤各剂量组肾指数下降（P<0.05）,其体质量升高（P<0.05）;敦煌医方瞿麦汤中、高剂量组MDA含量下降（P<0.05）,Nrf2 mRNA和NQO1 mRNA的表达均升高（P<0.05）,Nrf2和ARE的蛋白表达均升高（P<0.05）;高剂量组T-AOC含量升高（P<0.05）。结论 肾草酸钙结石模型鼠存在氧化应激损伤,敦煌医方瞿麦汤可通过上调Nrf2/ARE信号通路相关因子表达抑制肾结石的形成来发挥治疗作用。     

黄柏提取物对大鼠心肌损伤的保护作用

摘 要 目的：探讨黄柏水提物和醇提物对垂体后叶素和盐酸异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤的保护作用及其可能的作用机制。方法: 将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、复方丹参片组、黄柏水提组、黄柏醇提组,建立垂体后叶素和盐酸异丙肾上腺素大鼠心肌损伤模型,检测血清中肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH） 活性、心肌组织超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量。 结果: 与正常对照组比较,垂体后叶素建立的大鼠心肌损伤模型组血清LDH活性、CK活性和心肌组织MDA含量明显升高,心肌组织SOD活性明显降低（P<0.01）;盐酸异丙肾上腺素建立的大鼠心肌损伤模型组心肌组织MDA含量明显升高,心肌组织SOD活性明显降低（P<0.01）。与垂体后叶素建立的大鼠心肌损伤模型组相比较,各给药组血清LDH活性、CK活性和心肌组织MDA含量明显降低,心肌组织SOD活性明显升高,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）;与盐酸异丙肾上腺素建立的大鼠心肌损伤模型组相比较,各给药组心肌组织中MDA含量明显降低,SOD活性明显升高,差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论:黄柏提取液对垂体后叶素和盐酸异丙肾上腺素引起的大鼠心肌损伤有一定保护作用。     

二氢杨梅素对异丙肾上腺素诱导小鼠心肌纤维化的影响及机制研究

目的：初探二氢杨梅素（DMY）对异丙肾上腺素（ISO）诱导的小鼠心肌纤维化的作用及机制。方法：将C57BL/6小鼠随机分成正常对照组、模型组、DMY高、低剂量组、阳性对照药美托洛尔组。模型组小鼠背部皮下注射ISO,首次剂量为5 mg·kg-1·d-1,之后以2.5 mg·kg-1·d-1维持至30天,诱导心肌纤维化模型。给药组造模同时给与药物灌胃治疗。30天后,小鼠处死取心脏;检测血清中LDH、CK、TNF-α、IL-6含量;心室肌组织行Masson染色;检测心肌组织羟脯氨酸、丙二醛（MDA）含量、抗氧化物酶SOD和GSH-Px活性。检测心肌组织中TNF-α和IL-6 mRNA表达,Ⅰ、Ⅲ型胶原、α-SMA、Nrf2、p65-NF-κB及TGF-β1信号通路蛋白表达。结果：与正常组相比,模型组小鼠血清LDH和CK含量、心重指数均显著增加,心肌出现明显纤维化,心肌组织中羟脯氨酸含量显著增加;Ⅰ、Ⅲ型胶原和α-SMA蛋白表达显著增高。与模型组相比,DMY能减轻心肌损伤及纤维化程度。同时,DMY降低心肌组织中TGF-β1、p-Smad2、p-Smad3的蛋白表达,减少心肌中MDA含量,增强抗氧化物酶SOD和GSH-Px活性,增加Nrf2的入核。此外,DMY减少TNF-α、IL-6在血清中含量和在心肌中mRNA表达,减少p65-NF-κB入核。结论：本研究表明,二氢杨梅素能显著减轻ISO诱导的小鼠心肌纤维化,其机制可能与其干预TGF-β1信号通路、抗氧化及抗炎作用有关。     

芒柄花素对妊娠期糖尿病大鼠氧化应激损伤的影响

目的 探究芒柄花素调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/血红素单加氧酶-1(HO-1)/磷酸酰胺腺嘌呤二核苷酸醌氧化还原酶-1(NQO1)信号通路对妊娠糖尿病（GDM）大鼠氧化应激损伤的影响。方法 取SD孕鼠于其腹腔内注射链脲佐菌素诱导建立GDM模型，随机分为模型组、芒柄花素低剂量（50 mg/kg）组、芒柄花素高剂量（100 mg/kg）组、ML385(Nrf2抑制剂，20 mg/kg)组、芒柄花素高剂量+ML385组，每组9只，另取9只正常妊娠大鼠设为对照组。以芒柄花素和ML385分组处理后，检测各组大鼠体质量、血清空腹血糖（FSG）、总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）水平，胚胎存活率、胎鼠体质量、胎盘整体形态及超微结构，血清及胎盘组织丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）和总抗氧化能力（TAC），胎盘组织Nrf2/HO-1/NQO1通路蛋白表达水平。结果 与对照组比较，模型组大鼠胎盘超微结构发生损伤，胚胎存活率下降，血清及胎盘组织GSH、SOD、TAC水平降低，胎盘组织Nrf2、HO-1、NQO1蛋白表达降低，大鼠体质量、FSG、TG、TC、胎鼠体质量升高...     

黄芪多糖保护去卵巢大鼠成骨细胞功能活性的机制研究

目的　探讨黄芪多糖对去卵巢大鼠成骨细胞功能活性和核因子E2相关因子（Nrf2）/血红素氧合酶-1（HO-1）/醌氧化还原酶1（NQO1）通路的影响。方法　双侧卵巢切除法构建骨质疏松大鼠模型并分为模型组、雌二醇（0.1 mg/kg）组、黄芪多糖组（20 mg/kg）、黄芪多糖（20 mg/kg）+全反式维甲酸（ARTA,7 mg/kg）组,另选健康大鼠作为假手术组（生理盐水灌胃）,每组15只,干预8周。采用X线小动物骨密度仪检测大鼠胫骨骨密度、骨矿量,三点弯曲法测定生物力学性质;分离各组大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）并诱导成骨细胞分化,MTT法检测成骨细胞活性,Bradford法检测碱性磷酸酶（ALP）活性,邻甲酚酞络合酮法测定钙沉积量,酶联免疫吸附试验检测骨成型蛋白2（BMP2）、骨钙素（BGP）、骨保护素（OPG）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）水平,Western blot检测Nrf2、HO-1和NQO1表达。结果　与假手术组相比,模型组骨密度、骨矿量、最大载量、断裂能、成骨细胞活性、ALP活性、钙沉积量和BMP2、BGP、OPG、SOD、Nrf2、HO-1、NQO1水平降低,MDA水平升高（P＜0.05）;与模型组比较,雌二醇组、黄芪多糖组大鼠骨密度、骨矿量、最大载量、断裂能、成骨细胞活性、ALP活性、钙沉积量及BMP2、BGP、OPG、SOD、Nrf2、HO-1、NQO1水平均升高,MDA水平降低（P＜0.05）,而与黄芪多糖组比较,黄芪多糖+ARTA组大鼠上述指标变化趋势相反（P＜0.05）。结论　黄芪多糖可改善去卵巢大鼠成骨细胞功能,机制可能与激活Nrf2/HO-1/NQO1通路有关。     

芹菜素降低柔红霉素对小鼠心脏毒性的研究

目的研究芹菜素降低柔红霉素的心脏毒性作用及其可能的机制。方法将小鼠分为正常组、模型组及芹菜素100、200 mg·kg-1组。预先ig给药8 d后,除正常组外,其余小鼠ip给予柔红霉素30 mg·kg-1。在给药2 d后,测定小鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和谷草转氨酶(AST)的活性,心肌中总超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽-S-转移酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及心肌中丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽的含量。结果与模型组小鼠相比,芹菜素处理组的小鼠血清LDH、CK、AST活性下降,而心肌组织中的GR和GSH-Px活性增加,尤以200 mg·kg-1组的作用更为明显。芹菜素也可使心肌组织中的MDA含量下降。结论芹菜素可减轻柔红霉素的心脏毒性,可能与增加心肌中GSH-Px、GR的活性而发挥的抗氧化作用有关。     

咪达唑仑对低氧/复氧诱导的HK-2细胞凋亡及Nrf2/HO-1通路的影响

摘要：目的:探讨咪达唑仑对低氧/复氧诱导HK-2细胞凋亡的作用,及对核因子E2相关因子2（Nrf2）/血红素加氧酶-1（HO-1）通路的影响。方法:HK-2细胞分为正常对照组、低氧/复氧组、不同浓度(2,4,8μmol·L-1)咪达唑仑组,CCK-8法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,试剂盒检测细胞活性氧簇（ROS）和丙二醛（MDA）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性,蛋白质免疫印迹技术（WB）检测HK-2细胞Nrf2和HO-1表达水平。结果:相较于正常对照组,低氧/复氧组细胞活性及SOD活性明显降低（P<0.05）,细胞凋亡率、ROS和MDA含量明显升高（P<0.05）。相较于低氧/复氧组,咪达唑仑各浓度组细胞活性、SOD活性及Nrf2和HO-1表达明显升高（P<0.05）,细胞凋亡率、ROS和MDA含量明显降低（P<0.05）,且呈剂量依赖性。结论:咪达唑仑可促进Nrf2/HO-1信号通路,提高细胞抗氧化能力,抑制低氧/复氧诱导的HK-2细胞凋亡。     

睡莲酚对小鼠酒精性肝损伤的保护作用

目的 研究睡莲花中标识性成分睡莲酚对急性酒精性肝损伤(ALI)的保护作用。方法 72只雄性昆明种小鼠随机分为：正常组、模型组、阳性药联苯双酯组(DDB)、睡莲酚低、中、高剂量组(25、50、100 mg·kg^-1),每组12只。根据分组给药,每天灌胃给药1次,每次给药2 h后,除正常组外,其余各组小鼠灌胃给予52°白酒(13 mL·kg^-1),连续7 d。16 h后取血并收集肝组织,HE染色观察小鼠肝脏病理情况,检测小鼠血清ALT、AST、TG和TC含量,测定小鼠肝组织MDA、GSH、SOD、TNF-α、IL-6、IL-1β及TG水平,RT-PCR检测Keap1、Nrf2、NQO1的mRNA表达水平。结果 与正常组相比,模型组血清AST、ALT活性、肝组织MDA、TG、TC水平增高(P<0.01),GSH和SOD活性显著降低(P<0.01)、TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著增加(P<0.01),Nrf2 mRNA、NQO1 mRNA表达降低(P<0.01),肝组织出现明显的空泡和细胞坏死。与模型组相比,睡莲酚给...     

环孢素脂质微粒经小鼠皮肤给药的渗透机理研究

目的　研究普通纳米脂质体、柔性纳米脂质体及胆酸钠-磷脂混合胶团对环孢素经小鼠皮肤给药的渗透机理。方法　将含药载体非封闭性应用于离体或在体小鼠皮肤,测定了皮肤、接收介质和血液中环孢素含量。结果 离体条件下,应用柔性纳米脂质体和混和胶团后均能在接收液中检测到药物,但普通脂质体却不能。在体条件下,应用柔性纳米脂质体后8 h血药浓度到达峰值,而应用普通脂质体和混合胶团后在血中几乎未检测到药物。结论 柔性纳米脂质体在皮肤水合压力下发生变形,携药透过皮肤;普通脂质体主要与皮肤发生融合产生蓄积作用;混合胶团在水溶液状态下发挥其渗透促进作用。     

缬沙坦对扩张型心肌病大鼠心肌预保护作用的实验研究

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1)拮抗剂缬沙坦对多柔比星诱导的扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌的预保护作用,并探讨其可能机制。方法 60只SD大鼠随机分为正常对照组20只(生理盐水腹腔内注射),DCM组20只(多柔比星每周2 mg/kg腹腔内注射)和缬沙坦预处理组20只(多柔比星每周2 mg/kg腹腔内注射)。缬沙坦预处理组在造模的同时给予缬沙坦30 mg.kg-1.d-1灌胃,而正常对照组和DCM组则给予同体积的生理盐水灌胃。8周后行心脏超声和血流动力学检测,取各组大鼠心肌组织行苏木素-伊红(HE)染色和VG染色,测定心肌胶原含量(CVF),并测定心肌组织中肌浆网钙泵(SERCA2a)、钙释放通道(RyR2)、受磷蛋白(PLB)和钠钙交换蛋白(NCX1)的蛋白表达水平。结果与正常组相比,DCM组心功能明显下降(P<0.05),CVF含量明显增多(P<0.01),SERCA2a、RyR2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),PLB、NCX1蛋白表达水平显著升高(P<0.05),和DCM组相比,缬沙坦预处理组心功能明显改善(P<0.05),CVF含量明显下降(P<0.05),SERCA2a、RyR2蛋白水平增高(P均<0.05),NCX1、PLB蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论预防性给予缬沙坦能减轻多柔比星对钙调蛋白的下调作用和致心力衰竭作用,对防止扩张型心肌病的发生、发展有重要意义。     

槲皮素对肝细胞氧化应激损伤的保护作用

摘要： 目的 探讨槲皮素对氧化应激 Chang liver 细胞损伤的保护作用及其作用的分子机制。方法 培养 Chang liver 细胞, 将细胞随机分为正常对照组、 H2O2组及槲皮素低、 中、 高剂量组。MTT 法检测肝细胞的存活率; 流式 细胞术检测细胞凋亡率。2′,7′-二氯荧光素乙二酯(DCFH-DA)细胞内活性氧 （ROS） 荧光染色后, 荧光显微镜观察照 相及流式细胞仪检测细胞内活性氧水平。试剂盒测定细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、 过氧化氢酶（CAT）、 谷胱甘肽 过氧化物酶 （GSH-Px） 活性及细胞中丙二醛 （MDA） 的含量。采用 Western blot 法检测 Nrf2 蛋白的表达。结果 H2O2 组较正常对照组细胞存活率、 SOD、 GSH-Px、 CAT 活性降低 (P < 0.05), 凋亡率、 平均荧光强度（MFI）及 MDA 升高 (P < 0.05)。不同剂量槲皮素组细胞存活率及细胞内 SOD、 GSH-Px、 CAT 活性高于 H2O2组(P < 0.05), MDA、 凋亡率、 MFI 水平低于 H2O2组(P < 0.05)。槲皮素低、 中及高剂量组 Nrf2 蛋白均高于 H2O2组(P < 0.05)。结论 槲皮素对氧化 应激肝细胞损伤具有保护作用, 其机制可能与激活 Nrf2-ARE 通路, 进而增强下游抗氧化基因的表达有关。     

xy9902抗大鼠心肌重构作用的实验研究

目的研究新型选择性雌激素受体调节剂(SERMs)xy9902对大鼠心肌重构的干预作用,并初步探讨其机制。方法腹主动脉缩窄复制压力负荷增高致大鼠心肌重构动物模型,术后2周存活动物分为模型组(AAC)、卡托普利组(Cap)及xy9902组(xy9902),另设假手术组(Sham)。Mal-lory三色染色观察心肌组织胶原纤维含量的变化。黄嘌呤氧化酶法测定心肌组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA含量。结果与Sham组比较,AAC组心脏指数HMI及LVMI增加,心肌细胞排列紊乱、增粗,细胞间隙明显增宽,可见大量异常胶原纤维堆积,CVF增大,然而Cap组和xy9902组明显好转。AAC组心肌SOD活性下降,MDA含量增加,Cap组和xy9902组与AAC组比较,SOD活性增加,MDA含量下降(P<0.01)。相关分析结果表明CVF与SOD/MDA比值呈负相关(P<0.01)。结论 xy9902对心肌重构有防治作用,其对体内氧化应激平衡的正向调控可能是抗心肌重构的分子机制之一。     

花旗松素对SGC-7901胃癌细胞生长、运动、氧化应激和p38MAPK信号通路的影响

目的:探讨花旗松素对胃癌SGC-7901细胞生长、运动、氧化应激和p38MAPK信号通路的影响。方法:采用CCK-8法检测花旗松素对SGC-7901细胞的存活率并计算IC50值,选择无显著毒性的花旗松素浓度(0、25、50、100μM)进行后续实验,将细胞分为4组:对照组、花旗松素25μM组、花旗松素50μM组和花旗松素100μM组。5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(Ed U)染色检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡率; Transwell检测细胞侵袭;显微镜观察上皮间质转化(EMT)形态学变化;免疫印迹法(Western blot)检测血管内皮生长因子(VEGF)、波形蛋白(Vimentin)、神经钙黏蛋白(E-cadherin)、上皮钙黏蛋白(N-cadherin)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)的表达水平;化学比色法检测氧化应激相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)]水平。结果:SGC-7901细胞的存活率以花旗松素浓度依赖的方式降低,花旗松素浓度超过50μM时,SGC-7901细胞的存活率显著降低(P <0.05...     

红芪多糖对糖尿病心肌病db/db小鼠核因子2相关因子2信号通路的影响北大核心CSCD

目的研究红芪多糖(HPS)对db/db小鼠糖尿病心肌病(DCM)心肌组织中抗氧化应激的作用。方法按随机数表法将db/db小鼠分为5组(每组12只):模型组、对照组和高、中、低3个剂量实验组。正常组为同月龄同背景非转基因db/m小鼠(12只)。于7周龄对小鼠灌胃给药,1次/天,连续灌胃8周。高、中、低3个剂量实验组分别给予HPS 200,100,50 mg·kg^(-1)灌胃(质量浓度为20 mg·m L^(-1));对照组灌胃4 mg·kg^(-1)罗格列酮70μg·m L^(-1);模型组和正常组灌胃等量0.9%Na Cl 0.2 m L·d^(-1)。连续干预8周。用生化法检测心肌组织中丙二醛(MDA)含量;用蛋白印迹法和反转录聚合酶链式反应检测小鼠心肌组织核因子2相关因子2(Nrf2)、Kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)及还原性辅酶/醌氧化还原酶(NQO1)蛋白和mRNA的表达。结果给药8周后,正常组、模型组和中、高2个剂量实验组的Nrf2蛋白表达分别为1.33±0.07,0.19±0.06,0.66±0.06,1.12±0.06;模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);中、高2个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组的MDA含量分别为(4.74±0.36),(7.20±0.49),(7.08±0.57),(6.62±0.67),(5.80±0.52)nmol·mg^(-1),模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);高、中2个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。mRNA表达与其相应的蛋白表达趋势一致。结论 HPS可能通过调控Keap1-Nrf 2信号通路改善db/db小鼠DCM心肌损伤。