氨基胍抑制糖尿病大鼠心肌间质纤维化

目的 探讨氨基胍抑制糖尿病(DM)大鼠心肌间质纤维化作用的机制.方法 雄性SD大鼠30只,随机均分正常对照组、糖尿病组和氨基胍干预组,采用链脲佐菌素(STZ)一次性腹腔注射建市糖尿病动物模型;用天狼猩红染色、实时定量-PCR、Western blot技术检测左室心肌胶原含量、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA和蛋白质表达.结果 与对照组相比,糖尿病大鼠血清糖基化终产物(AGEs)的荧光值[(7.21±2.2)vs.(2.63±0.62)]、左室心肌组织胶原含量[(16±3)%vs.(12±2)%]及CTGF mRNA和蛋白质表达水平[(0.077±0.0037)vs.(0.0102±0.0034),(0.51±0.01)ys.(0.34±0.02)]均明显升高(P<0.01),心功能明显减低;应用氨基胍干预后上述异常明显减轻.结论 氨基胍通过抑制AGEs形成及心肌组织的CTGF的表达来逆转糖尿病大鼠心肌间质纤维化并改善心脏功能.     

血管紧张素转化酶抑制剂改善糖尿病大鼠心肌间质重构的类效应研究

目的：通过4种血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）类药物对糖尿病大鼠心脏指数、心肌胶原含量及转化生长因子（TGF-β）、基质金属蛋白酶及其抑制剂（MMP-1,TIMP-1）表达的影响,籍以了解不同ACEI药物减轻糖尿病大鼠心肌间质重构有无类效应。方法：50只SD大鼠用链脲佐菌素（STZ）注射制备糖尿病模型,成功后随机分为模型组（n=9）、咪达普利组（10mg／kg,n=9）、卡托普君1组（50mg／kg,n=9）、贝那普开0组（10mg／kg,凡=9）、福辛普利组（5mg／kg,n=10）,另取10只正常鼠作为正常对照组。免疫组化法测Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、TGF-β1、TIMP-1和MMP-1蛋白的表达,RT—PCR法测TIMP-1和MMP-1 mRNA的表达。结果：模型组心脏指数和左心室指数显著高于正常对照组（P〈0．05）,Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的表达也增加,存在着心肌间质重构,TGF-β1、TIMP-1蛋白及TIM-1 mRNA表达增高,MMP-1蛋白及MMP-1 mRNA表达减少。使用ACEI药物后,各项指标均有所改善,卡托普利某些指标与其余3组之间存在统计学差异（P〈0．05）。结论：四种ACEI类药物都可通过减少TGF-β1、TIMP-1的表达而增加MMP-1的表达而改善糖尿病心肌间质的重构,具有类效应,作用效果与对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的不同影响有关。     

阿托伐他汀对动脉粥样硬化兔心肌纤维化的逆转作用及其机制研究

目的观察阿托伐他汀对动脉粥样硬化兔心肌纤维化的逆转作用并探讨其可能机制。方法将40只新西兰雄性大白兔随机分为动脉粥样硬化组(AS组)、改善饮食组(N组)、他汀干预组(S组)和正常对照组(C组)4组各10只。第一阶段:C组:喂养普通饲料;AS组+N组+S组:开始喂养高脂饲料。8周后C组(n=9)及AS组(n=9)处死大白兔用于实验,证明AS组兔动脉粥样硬化模型建立成功。第二阶段:N组:正常饮食;S组:普通饲料120g/d+阿托伐他汀钙5mg.kg-1.d-1灌胃,8周后用于实验。Masson染色观察兔心肌心肌间质胶原纤维的变化,并测定胶原容积分数(CVF)。免疫组织化学方法检测兔心肌AngⅡ、MMP-1及TIMP-1蛋白表达的水平。结果与C组相比,AS组心肌间质胶原纤维明显排列紊乱,增多增粗,呈条状或不规则网状沉积在心肌间质,部分心肌纤维断裂。AS组CVF显著高于C组,差异有统计学意义(P<0.01);与N组相比,S组CVF显著降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与C组相比,AS组AngⅡ及TIMP-1蛋白表达较高,AS组MMP-1蛋白表达显著减少,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与N组比较,S组AngⅡ、TIMP-1蛋白表达较低,MMP-1的蛋白表达较高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论动脉粥样硬化可出现心肌纤维化、RAAS系统激活、TIMP-1表达升高及MMP-1表达降低;阿托伐他汀可逆转心肌纤维化,其机制可能与抑制RAAS从而直接或间接调节MMP-1/TIMP-1的平衡有关。     

阻断肾素-血管紧张素-醛固酮系统不同环节对大鼠肝纤维化的影响

目的 探讨阻断肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAAS)不同环节对大鼠实验性肝纤维化的影响.方法 6周龄SD大鼠50只随机均分为空白对照(BC)组、模型对照(MC)组和A、B、C三个药物处理组.BC组腹壁皮下注射橄榄油;其余4组注射40％ CC14制备大鼠肝纤维化模型.次日,A组胃内灌注卡托普利60 mg/kg,B组胃内灌注氯沙坦10mg/kg,C组胃内灌注螺内酯100 mg/kg,1次/d;第8周处死,取材,HE染色和Masson染色观察肝组织病理变化,免疫组化、RT-PCR 及Western blot法检测肝组织转化生长因子β1(TGF-β1)表达.结果 A、B、C组肝纤维化程度均明显较MC组减轻(P＜0.05).MC组TGF-β1表达明显高于BC组(P＜0.05)和A、B、C组(P＜0.05),但A、B、C组三组间无明显差异.结论 阻断RAAS不同环节均可抑制肝纤维化形成,其作用可能与其降低TGF-β1表达有关.     

促红细胞生成素对糖尿病大鼠心肌纤维化及心功能的影响

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对糖尿病大鼠心肌纤维化及心功能的影响.方法 采用链脲佐菌素一次性腹腔注射成功建立糖尿病动物模型雄性SD大鼠20只,随机均分为模型对照(A)组和EPO处理(B)组;另取10只SD大鼠作为空白对照(C)组.12周后,称取心脏重量和大鼠体重,计算心体比;Western blot检测心肌组织转化生长因子β(TGF-β)表达;天狼猩红染色测心肌组织胶原含量;心脏超声检测心功能.结果 与C组比较,A组心肌组织TGF-β蛋白表达和胶原含量明显增加(P＜0.01),心体比、左室舒张末期内径(LVDd)和左室收缩末期内径(LVDs)明显增加(P＜0.05),射血分数(EF)明显下降(P＜0.01).与A组比较,B组心肌组织TGF-β蛋白表达及胶原含量均明显减少(P＜0.01),EF值增加(P＜0.05),LVD d和LVDs明显减少(P＜0.05).结论 EPO通过减少糖尿病大鼠TGF-β的表达来逆转心肌间质纤维化,改善心功能.     

多西环素对单侧输尿管结扎大鼠肾组织的影响及可能机制

目的：探讨多西环素对肾间质纤维化的影响及可能机制。方法采用单侧输尿管结扎术（ UUO ）致肾小管间质纤维化大鼠模型。将72只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、多西环素治疗组[8 mg/（ kg·d ）]。手术后7,14,21 d时分别处死各组中6只大鼠,用免疫组化方法观察大鼠肾组织中转化生长因子-β1（ TGF-β1）、基质金属蛋白酶2（ MMP-2）表达情况。行HE及Masson染色评定大鼠肾脏的病理情况。结果模型组各时间点MMP-2表达明显低于同期假手术组（ P〈0.05）,多西环素组各时间点MMP-2表达明显低于同期模型组（ P〈0.05）,多西环素组术后14 d及术后21 d低于术后7 d。模型组各时间点TGF-β1表达明显高于同期假手术组（ P〈0.05）,而多西环素组术后7 d TGF-β1表达明显低于同期模型组,多西环素组术后14 d及术后21 d高于术后7 d。结论多西环素在肾小管间质纤维化的早期对肾脏有保护作用。     

多西环素逆转阿霉素心肌病大鼠心脏间质纤维化的实验研究

目的研究基质金属蛋白酶抑制剂多西环素对阿霉素心肌病大鼠心脏间质纤维化的逆转作用及其机制。方法60只♂Wistar大鼠分3组:①阿霉素心肌病组(ADR-DCM,n=25),阿霉素2.5mg.kg-1,尾静脉注射,每周1次,连续10wk;②阿霉素心肌病+多西环素治疗组(DOX,n=25),DOX30mg.kg-1,每天1次,灌胃治疗;③正常对照组(CON,n=10)。于实验第12wk时氯胺T法检测羟脯氨酸及胶原含量,苦味酸天狼猩红染色进行左室胶原特异染色及定量分析,计算胶原容积分数(CVF),并作HE染色观察其组织学变化,明胶酶谱法检测基质金属蛋白酶(MMPs)活性。结果DOX组较ADR-DCM组死亡率明显降低(16%vs40%,P<0.01)。与CON组相比,ADR-DCM组羟脯氨酸及胶原含量增加(P<0.01),经DOX治疗后有所减低。苦味酸天狼猩红染色显示ADR-DCM组左室胶原明显增加,胶原容积分数(CVF)明显增高(P<0.01),而DOX组则纤维化明显减轻,CVF降低(P<0.01)。病理学结果证实ADR-DCM组符合心肌病样改变,而DOX组可逆转这种改变。ADR-DCM组左室心肌MMPs明胶酶活性明显增加(P<0.01),DOX组明显降低升高的MMPs明胶酶活性(P<0.01)。结论多西环素通过抑制MMPs活性部分逆转阿霉素心肌病大鼠心脏间质纤维化。     

缬沙坦及苯那普利对5/6肾切除大鼠肾小球硬化的影响

目的 :观察并比较缬沙坦及苯那普利对 5 6肾切除大鼠肾小球硬化的改善作用 ,探讨其作用机制。方法 :选用SD雄性大鼠 30只 ,通过 5 6肾切除法制造慢性肾功能衰竭模型 ,术后 2周随机分为模型组、缬沙坦组及苯那普利组 ,并设假手术组作为对照。术后第 6周末各组大鼠进行体重、血压、血清肌酐 (Scr)及尿素氮 (BUN)的测定 ,处死大鼠 ,取出肾组织进行病理组织形态学观察 ,并采用免疫组织化学方法检测肾组织转化生长因子 β1(TGF β1)、IV型胶原、纤维连接蛋白 (FN)表达。结果 :同模型组相比 ,两治疗组收缩压下降 (P均 <0 .0 1) ,肾功能改善 ;肾小球系膜增殖程度、肾小球硬化指数 (GSI)降低 (P均 <0 .0 1) ;免疫组化染色显示 ,两治疗组肾小球转化生长因子 β1(TGF β1)、纤维连接蛋白 (FN)及IV型胶原表达均较模型组下降 (P均 <0 .0 1)。结论 :缬沙坦及苯那普利对慢性肾功能衰竭大鼠具有同等的肾脏保护作用 ;改善肾小球硬化是通过减少肾小球TGF β1表达 ,从而减少FN及IV型胶原生成来实现的。     

心肌纤维化发病机制及其防治研究进展

心肌纤维化是高血压、心肌梗死、心肌炎、动脉粥样硬化、糖尿病等多种疾病的共同病理变化,是心力衰竭、心律失常等发生发展的基础,因此,越来越受到临床重视,现就目前心肌纤维化的发病机制及其防治的研究进展进行综述。     

卡托普利对压力负荷增加大鼠心肌促纤维化细胞因子的影响

目的观察卡托普利对压力负荷增加大鼠心肌促纤维化细胞因子转化生长因子-β1(TGF-β1)和结缔组织生长因子(CT-GF)表达水平的影响。方法采用腹主动脉缩窄术制备压力负荷增加心肌纤维化模型,随机分成3组:假手术组(Sham组)、模型组(Model组)和卡托普利组(Captopril组),每组8只。术后4 w成功造模并开始给药,疗程为4 w。8 w后观察各组心脏质量指数和左心室质量指数、HE染色法观察左室心肌病理学、Masson染色法观察左心室心肌胶原形态,图像分析测量胶原容积分数(CVF)和血管周围胶原面积(PVCA),ELISA法检测心肌羟脯氨酸含量以及免疫组化法测定左室心肌TGF-β1和CTGF的表达。结果与Sham组比较,Model组大鼠心脏质量指数和左心室质量指数均明显升高(P0.01);与Model组比较,Captopril组则均显著降低(P0.01)。(2)与Sham组比较,Model组大鼠CVF、PVCA和羟脯氨酸含量均明显升高(P0.01);与Model组比较,Captopril组则均显著降低(P0.01)。(3)与Sham组比较,Model组大鼠心肌组织TGF-β1、CTGF表达均显著升高(P0.01);与Model组比较,Captopril组则均显著降低(P0.01)。结论卡托普利具有逆转心肌纤维化的作用,可能与抑制心肌组织促纤维化细胞因子TGF-β1、CTGF表达有关。     

通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的防治作用

目的探讨通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化的防治作用及机制。方法用链脲佐菌素制备大鼠糖尿病模型并给予通心络灌胃,12周后测定各组大鼠心脏重量指数,胶原容积积分,免疫组化测定心肌中转化生长因子-β1(TGF-β1)、Smad3、Smad7的蛋白表达水平,RT-PCR法检测TGF-β1、Smad3、Smad7mRNA的表达水平。结果糖尿病组大鼠心脏重量指数、胶原容积积分明显增高,TGF-β1、Smad3蛋白的表达增加,Smad7蛋白的表达减少;TGF-β1、Smad3mRNA的表达增加,Smad7mRNA的表达减少,通心络组上述指标均得到改善。结论通心络对糖尿病大鼠心肌纤维化有防治作用,其作用机制可能通过改善糖尿病大鼠心肌中TGF-β1、Smad3、Smad7的表达,从而减轻和延缓糖尿病大鼠心肌的纤维化有关。     

人组织激肽释放酶过表达对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的抑制作用

目的：探讨过表达人组织激肽释放酶对病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌纤维化的影响。方法：24只4周龄BALb/c雄性小鼠，随机分为正常对照组（Sham组）、模型组（Model组）、病毒性心肌炎+hKLK1基因载体组（EZ.hKLK1组）、病毒性心肌炎+空载体组（EZ.null组）。采用腹腔注射柯萨奇B3病毒液构建VMC模型，通过尾静脉注射高表达人组织激肽释放酶的慢病毒颗粒（pEZ-Lv105-hKLK1）。第30天，心脏超声检测心功能后，断颈处死小鼠，计算心脏体重比，心肌胶原含量以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原比值，Western blot法测定hKLK1、TGF-β₁蛋白的表达。结果：与Sham组相比，Model组心脏指数、左心室舒张末期内径（LVEDd）、左心室收缩末期内径（LVEDs）、心肌胶原含量、Ⅰ/Ⅲ胶原比值、TGF-β₁的表达均显著升高（P<0.05），左心室缩短分数（FS）和射血分数（EF）显著降低（P<0.05），提示造模成功；与Model组相比，EZ.hKLK1组KLK1的表达显著升高（P<0.05），同时心脏指数、LVEDd、LVEDs、心肌胶原含量、Ⅰ/Ⅲ胶原比值、TGF-β₁的表达均显著降低（P<0.05），FS和EF显著升高（P<0.05），而EZ.null组差异无显著性（P>0.05）。结论：KLK1可通过调节TGF-β₁的表达而发挥抑制VMC小鼠心肌纤维化的作用。     

特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用

目的探讨特异性NF-κB抑制剂对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的治疗作用及其可能机制。方法应用特异性NF-κB抑制剂PDTC治疗单侧输尿管梗阻大鼠模型,常规HE、PASM染色观察肾间质病理变化,电泳迁移率变动分析法检测肾组织中NF-κB的活性,免疫组化法检测TGF-β1、MCP-1的表达,并采用图像分析系统进行半定量分析。结果治疗组较模型组大鼠梗阻侧肾脏病理变化明显减轻,肾皮质NF-κB活性及小管间质TGF-β1、MCP-1表达明显降低(P<0·01)。结论特异性NF-κB抑制剂通过抑制NF-κB激活并进一步减少下游炎症和致纤维化细胞因子的表达以达到治疗肾间质纤维化的作用。     

虫草菌丝对实验性肝纤维化的防治作用及其机制研究

目的 :探讨虫草菌丝对实验性慢性肝炎纤维化形成的抑制作用及其可能的作用机制。方法 :以CCl4 及乙醇诱导大鼠肝纤维化模型 ,自造模 10d后给予虫草菌丝悬浊液灌胃 ,同时设立正常对照组和模型对照组。于造模 9wk后处死全部大鼠 ,取血及肝组织标本。使用HE染色法观察肝组织形态学变化和肝纤维化病理学分级 ,生化及放免法测定血清ALT ,AST ,透明质酸 (HA) ,板层素 (LN)含量 ,使用免疫组化法及原位杂交法观察α 平滑肌动蛋白(α SMA) ,转化生长因子 β1(TGFβ1) ,血小板衍生生长因子 (PDGF) ,Ⅰ型和Ⅲ型胶原的蛋白或mRNA表达情况。结果 :与模型组相比 ,虫草组大鼠血清HA ,LN ,AST ,ALT含量均显著下降 (2 0 2±s 79vs316± 94 ;5 0± 3vs 6 0± 10 ;86± 34vs 2 2 4± 179;14 7± 6 0vs 2 73± 130 ;P <0 .0 5 )。肝组织表达α SMA ,TGFβ1,TGFβ1mRNA ,Ⅰ型胶原mRNA ,PDGF均显著减少 (0 .2± 0 .14vs 1.7± 1.4 ;1.7±0 .5vs 3.2± 1.2 ;1.1± 0 .8vs 2 .6± 1.4 ;0 .9±0 .4vs 1.9± 0 .7,P <0 .0 5 )。Ⅲ型胶原mRNA表达呈下调趋势 (0 .4± 0 .3vs 1.0± 0 .7,P =0 .0 6 95 )。而PDGFmRNA的表达下调则不明显 (0 .4± 0 .3vs 0 .7± 0 .5 ,P >0 .0 5 )。结论 :虫草菌丝能够抑制慢性肝炎纤维化的形成 ,延缓其     

Beneficial effects of pioglitazone against cardiovascular injury are enhanced by combination with aliskiren in a rat model of diabetic nephropathy

Objectives Aliskiren is the first in a new class of orally active direct renin inhibitors, approved for the treatment of hypertension. However, the efficacy of aliskiren in diabetic cardiovascular complications remains to be defined. This study aimed to test the hypothesis that aliskiren may enhance the beneficial effects of pioglitazone against cardiovascular injury associated with diabetic nephropathy. Methods Diabetic nephropathy was induced in rats by unilateral nephrectomy followed by streptozotocin injection. Diabetic nephropathic rats were orally given vehicle, pioglitazone, aliskiren, or combined pioglitazone and aliskiren for four weeks to compare their effects on cardiovascular injury, particularly myocardial fibrosis. Key findings Pioglitazone treatment significantly attenuated cardiac lipid peroxidation, oxidative injury and myocardial fibrosis in diabetic nephropathic rats. This was associated with up‐regulation of transforming growth factor‐β1 and matrix metalloproteinase‐2 genes, along with down‐regulation of tissue inhibitor of metalloproteinase‐2 gene in cardiac tissue. The combination of aliskiren with pioglitazone exerted greater beneficial effect than monotherapy with either drug, on all the aforementioned parameters. Conclusions Our findings suggested that aliskiren enhanced the protective effects of pioglitazone against myocardial fibrosis, in experimental diabetic nephropathy. Thus, the combination of aliskiren and pioglitazone may be a potential therapeutic strategy for cardiovascular injury associated with diabetic nephropathy.     

miR-152调控糖尿病心肌病心肌成纤维细胞增殖的作用

目的探究miR-152调控糖尿病心肌病心肌成纤维细胞(CFs)增殖的作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病大鼠模型,应用高糖(33.3 mmol·L-1)诱导CFs增殖模型。多聚甲醛固定心肌组织后,行HE和Masson染色;Western blot检测心肌组织和CFs中α-SMA、CollagenⅠ的蛋白表达;qPCR检测心肌组织和CFs中miR-152的表达;MTT检测miR-152对细胞增殖活性的影响。结果HE和Masson染色显示,糖尿病组大鼠心肌胶原含量明显增多,细胞排列紊乱;在高糖模型中,α-SMA和CollagenⅠ表达增加,而miR-152表达降低;乳鼠CFs转染miR-152模拟物后,α-SMA和CollagenⅠ表达降低,同时CFs增殖活性减弱。结论miR-152可能在糖尿病心肌病CFs增殖中起重要作用,提示其可能改善糖尿病心肌病。     

柚皮苷对糖尿病大鼠心肌纤维化及STAT3磷酸化水平的影响

目的 观察柚皮苷对糖尿病大鼠心肌纤维化及信号传导与转录激活因子3（STAT3）磷酸化水平的影响。方法 健康雄性SD大鼠ip链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病模型,将模型成功大鼠随机分为模型组和柚皮苷低、中、高（25、50、100 mg/kg）剂量组,另设正常大鼠为对照组,每天ig给药1次,连续给药8周,对照组和模型组给予等体积生理盐水。8周后检测大鼠空腹血糖;计算心脏指数;采用Masson染色观察心肌纤维化程度;实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测大鼠心肌组织I型胶原（Collagen I）和纤连蛋白（FN）mRNA表达;免疫组化法检测大鼠心肌组织Collagen I和FN蛋白表达;蛋白免疫印迹法（Western blotting）检测大鼠心肌组织STAT3及其磷酸化STAT3（p-STAT3）的表达水平。结果 与对照组比较,模型组大鼠空腹血糖、心脏指数、心肌纤维化程度以及Collagen I、FN和p-STAT3表达均明显升高（P < 0.05、0.01）;与模型组比较,柚皮苷高、中剂量组心脏指数、心肌纤维化程度以及Collagen I、FN和p-STAT3表达均明显下降（P < 0.05、0.01）。结论 柚皮苷通过下调糖尿病大鼠心肌组织STAT3通路,减少心肌间质中Collagen I和FN合成及沉积,从而改善糖尿病心肌病大鼠心肌纤维化。     

塞来昔布减轻糖尿病大鼠心肌细胞纤维化的实验研究

目的 探讨塞来昔布对糖尿病心肌病大鼠心肌细胞纤维化的影响.方法 将Wistar大鼠30只随机分为对照组（A组）、糖尿病心肌病组（B组）和糖尿病心肌病塞来昔布治疗组（C组）各10只.取大鼠心肌组织,经常规石蜡切片、染色后测定胶原纤维面的密度值;采用RT-PCR法测定TGF-β1 mRNA表达情况.结果与A组相比,B组大鼠心肌组织的胶原纤维密度值、TGF-β1 mRNA表达明显升高（P〈0.05）.C组大鼠的胶原纤维、TGF-β1 mRNA表达明显低于A组和B组（均P〈0.05）.结论塞来昔布可能通过抑制TGF-β1减轻糖尿病大鼠心肌纤维化.