尾加压素Ⅱ致体外培养乳鼠心肌细胞肥大效应研究

目的 观察尾加压素Ⅱ(Urotensin Ⅱ,U Ⅱ)对心肌细胞肥大的效应.方法 以体外培养的SD乳鼠心肌细胞为实验模型,分为正常对照组,单纯U Ⅱ作用组,环胞素A(CsA)阻断组.用real-time PCR方法分析β-MHC、 CaN(钙调神经磷酸酶)mRNA表达的变化,用免疫印迹法(Western blot)研究心肌肥大过程中β-MHC、CaN蛋白表达的变化,探讨U Ⅱ对心肌细胞肥大的影响.结果 ①随着U Ⅱ浓度的增加,心肌细胞β-MHC、CaN mRNA和蛋白表达明显增加,其中10-8 、10-7 mol/L U Ⅱ组与对照组相比较差异显著(P<0.05);②用10-8 mol/L U Ⅱ处理心肌细胞12、24、48 h,随着时间增加,心肌细胞β-MHC、CaN mRNA和蛋白表达呈递增趋势,其中处理24 h组与正常对照组有显著差异(P<0.05);③预先用环胞素A 5μmol/L(cyclosporin A CsA)处理正常心肌细胞24 h,然后用10-8 mol/L U Ⅱ作用24 h,心肌细胞β-MHC、CaN mRNA和蛋白表达与正常心肌细胞经10-8 mol/L U Ⅱ单纯作用24 h差异有显著意义(P<0.05).结论 U Ⅱ能够诱导心肌细胞的肥大,环胞素A(CsA)能阻断此效应,CaN参与了U Ⅱ诱导的心肌肥大过程.     

尾加压素Ⅱ对乳鼠心肌成纤维细胞增殖的影响及细胞内信号转导机制

目的: 探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对乳鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响及其细胞内信号转导机制. 方法: 体外培养CFs,采用MTT法、流式细胞仪(FCM)法分别观察不同浓度UⅡ作用下,CFs的细胞数、细胞周期的变化;蛋白激酶C(PKC)抑制剂Chelerythrine chloride(Che),ERK1/2抑制剂PD98059和钙调神经磷酸酶(CaN)抑制剂Cyclosporin A(CsA)各自对UⅡ诱导的细胞增殖的影响. 结果: 在1×10-10,1×10-9,1×10-8 mol/L UⅡ作用下,CFs的吸光度(A490 nm)值、S期细胞百分率和增殖指数(PI)均较对照组明显增加,而G0/G1期细胞百分率均较对照组明显降低(P<0.01);在1×10-7 mol/L UⅡ作用下,上述各参数与对照组比较无显著差别(P>0.05). 1×10-6 mol/L Che 1×10-8 mol/L UⅡ组,1×10-5 mol/L PD98059 1×10-8 mol/L UⅡ组和5 mg/L CsA 1×10-8 mol/L UII组的A490 nm值均高于对照组的A490 nm值(P均<0.05);而均低于1×10-8 mol/L UⅡ组的A490 nm值(P均<0.05). 1×10-6 mol/L Che 1×10-8 mol/L UⅡ, 5 mg/L CsA 1×10-8 mol/L UⅡ组与对照组比较,S期的细胞百分率和PI均有增高,而G0/G1期细胞百分率则减低(P均<0.05), 1×10-5 mol/L PD98059 1×10-8 mol/L UⅡ组与对照组则无差别(P>0.05);而1×10-6 mol/L Che 1×10-8 mol/L UⅡ, 1×10-5 mol/L PD98059 1×10-8 mol/L UⅡ,5 mg/L CsA 1×10-8 mol/L UⅡ组与1×10-8 mol/L UⅡ组比较,S期细胞百分率和PI均减低,G0/G1期细胞百分率则增高(P均<0.01). 结论: UⅡ具有促进CFs增殖的作用;UⅡ诱导的CFs增殖作用可能是通过PKC/MAPK/CaN途径实现的.     

尾加压素Ⅱ诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大的研究

目的 研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)能否诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。方法 心肌细胞体外培养40 h后,换无血清DMEM继续培养24 h,应用流式细胞仪和3H-亮氨酸(³H-Leu)掺入法观察不同浓度UⅡ作用24 h后对心肌细胞大小和蛋白掺入率的影响。结果 10^-7 mol/L的UⅡ能增加心肌细胞的大小(P=0.021)和³H-Leu掺入率(P=0.015)。结论 UⅡ能诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。     

尾加压素Ⅱ对新生大鼠心肌细胞肥大的影响

目的:观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对心肌细胞(MC)肥大的影响及其与钙离子的关系,为探讨高血压左室肥厚发生机制提供理论依据.方法:以培养的SD乳鼠心肌细胞为实验模型,通过测定MC表面积、蛋白含量和蛋白合成速率,以及免疫荧光观察MC内肌原纤维的变化趋势来探讨UⅡ对MC肥大的影响.结果:①随着UⅡ浓度的增加,MC表面积明显增加,呈剂量依赖性,其中10-8和10-7mol/LUⅡ组MC表面积分别为(2046.3±268.4)和(3662.2±259.2)μm2,均明显高于空白对照组的(936.2±99.8)μm2,差异有非常显著意义(P<0.01).②随着UⅡ浓度的增加,MC的蛋白含量和蛋白合成速率呈递增趋势,其中10-8和10-7mol/LUⅡ组MC蛋白含量分别为(1.60±0.37)和(1.89±0.25)ng/cell,明显高于对照组(0.83±0.16)ng/cell,差异有非常显著性意义(P<0.01).蛋白合成速率分别为(2508.33±299.81)和(2898.83±625.41)cpm/well,与对照组(1026.83±91.67)cpm/well比较,差异非常显著(P<0.01).③10-7mol/LUⅡ作用心肌细胞24h后,荧光显微镜下观察到细胞边界增大,肌原纤维发生增粗与重排.结论:UⅡ能够诱导心肌细胞的肥大,为研究高血压及其他心血管疾病引起心脏肥厚的原因提供新的理论依据.     

尾加压素Ⅱ诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大的研究

目的 研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)能否诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。方法 心肌细胞体外培养40h后，换无血清DMEM继续培养24h，应用流式细胞仪和3H-亮氨酸(^3H-Leu)掺入法观察不同浓度UⅡ作用24h后对心肌细胞大小和蛋白掺入率的影响。结果 10^-7mol／L的UⅡ心肌细胞的大小(P=0．021)和^3H-Leu掺入率(P=-0．015)。结论 UⅡ能诱导体外培养的乳鼠心肌细胞肥大。     

尾加压素Ⅱ对乳鼠肾小球系膜细胞增殖及细胞内游离钙的影响

目的 观察尾加压素Ⅱ(UⅡ)对肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和对系膜细胞内游离钙的影响,为防治糖尿病肾病系膜细胞增殖病变提供理论依据.方法 以培养的SD乳鼠肾小球系膜细胞为实验模型,用UⅡ刺激GMCs,应用四氮唑盐(MTT)比色法测定细胞增殖,用Fluo3/AM荧光标记细胞内游离钙离子,激光共聚焦显微技术动态测定GMCs内游离钙浓度变化.结果 ①在10-10～10-7 mol/L范围内,随着UⅡ作用浓度的增加,MTT光吸收值逐渐升高.②UⅡ激发GMCs内[Ca2 ];升高作用分2个时相,即瞬时峰值升高和缓慢持久升高,对峰值升高呈剂量依赖方式,在10-10～10-7 mol/L范围内引起峰值升高,且随着剂量增加,幅度增大.结论 UⅡ可以诱导GMCs的增殖,可能与细胞内钙离子浓度的升高有关,且UⅡ对GMCs内[Ca2 ];浓度影响有2个时相.提示UⅡ在糖尿病肾病系膜细胞增殖的发病学中可能发挥重要作用.     

尾加压素Ⅱ与心肌肥大及相关研究进展

尾加压素Ⅱ（UII）是一种新的血管活性肽，作为人体内最强的缩血管物质之一，已明确其特异性受体GPR-14（孤立的G蛋白耦联受体）主要分布于心血管系统和神经系统。UⅡ还是体内重要的促有丝分裂原，能够促进血管平滑肌细胞、心脏成纤维细胞等多种细胞增殖，促进心肌细胞肥大。它在高血压、冠心病、心力衰竭发病中均有相应的变化。UⅡ致心肌肥大信号转导通路目前不是十分明确，大致与钙调神经磷酸酶（CAN）通路、Ca^2＋／CaM依赖性PKC通路活化以及CaN通路与MAPK通路相互作用有关。     

慢性低氧对大鼠血浆尾加压素Ⅱ浓度和右心室尾加压素Ⅱ受体的影响

尾加压素Ⅱ (ｕｒｏｔｅｎｓｉｎⅡ ,ＵⅡ )最早从鱼脊髓尾部下垂体中分离出 ,1998年首次在人体克隆出 ,是新发现的强血管活性肽 ,其缩血管作用对主动脉、肺动脉比内皮素 1(ＥＴ 1)分别强 10倍与 4倍。ＵⅡ的特异性受体为Ｇ蛋白偶联受体ＧＰＲ14 ,该受体广泛存在于神经系统、心血管组织 ,专家推测ＵⅡ是调节循环系统稳定的重要因子 ,但其生理和病理意义还远不清楚 ,ＵⅡ正成为国际上研究的热点之一。为此 ,我们在不同时间 (1周、2周及 4周 )的慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压、右心室肥大的大鼠模型上 ,观察了血浆ＵⅡ含量、右心室肌浆膜和…     

尾加压素Ⅱ受体拮抗剂对急性肺损伤大鼠血浆尾加压素Ⅱ影响的对比研究

目的 用尾加压素Ⅱ受体拮抗剂((urotensin Ⅱ receptor antagonist,URA)对急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠的干预,检测其血浆尾加压素Ⅱ(urotensin Ⅱ,UⅡ)浓度的变化,从而探究URA对早期ALI的作用.方法 随机将42只SPF级Sprague Dawley(SD)大鼠分为两组,每组21只.所有大鼠均用油酸复制ALI动物模型.随机选取其中一组为ALI模型组(G1组),另一组在ALI模型的基础上加注射尾加压素Ⅱ受体拮抗剂URA)为干预组(G2组).每组分别于3、12、24h后各取7只抽血2ml.全血离心后留取血浆置于-80℃冰箱待作UⅡ测定.结果 G1组3、12、24h血浆UⅡ值分别是:105.57±9.52pg/ml、119.30±8.30pg/ml、133.33±9.65pg/ml;G2组分别是:133.65±8.89pg/ml、131.99±9.80pg/ml、114.03±9.12pg/ml,随着时间的延续,ALI大鼠血浆UⅡ进行性升高(P<0.05),而URA对ALI血浆UⅡ水平有明显影响,差异有显著统计意义(P<0.05).结论 URA可能通过抑制UⅡ的作用而对早期ALI产生保护作用.     

尾加压素II对新生大鼠心肌细胞肥大的影响

目的 :观察尾加压素Ⅱ (UⅡ )对心肌细胞 (MC)肥大的影响及其与钙离子的关系 ,为探讨高血压左室肥厚发生机制提供理论依据 .方法 :以培养的SD乳鼠心肌细胞为实验模型 ,通过测定MC表面积、蛋白含量和蛋白合成速率 ,以及免疫荧光观察MC内肌原纤维的变化趋势来探讨UⅡ对MC肥大的影响 .结果 :①随着UⅡ浓度的增加 ,MC表面积明显增加 ,呈剂量依赖性 ,其中 1 0 -8和 1 0 -7mol/LUⅡ组MC表面积分别为 (2 0 4 6 .3± 2 6 8.4 )和 (36 6 2 .2± 2 5 9.2 ) μm2 ,均明显高于空白对照组的 (936 .2± 99.8) μm2 ,差异有非常显著意义 (P <0 .0 1 ) .②随着UⅡ浓度的增加 ,MC的蛋白含量和蛋白合成速率呈递增趋势 ,其中 1 0 -8和 1 0 -7mol/LUⅡ组MC蛋白含量分别为 (1 .6 0± 0 .37)和 (1 .89± 0 .2 5 )ng/cell,明显高于对照组(0 .83± 0 .1 6 )ng/cell,差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1 ) .蛋白合成速率分别为 (2 5 0 8.33± 2 99.81 )和 (2 898.83± 6 2 5 .4 1 )cpm/well,与对照组 (1 0 2 6 .83± 91 .6 7)cpm/well比较 ,差异非常显著 (P <0 .0 1 ) .③ 1 0 -7mol/LUⅡ作用心肌细胞 2 4h后 ,荧光显微镜下观察到细胞边界增大 ,肌原纤维发生增粗与重排 .结论 :UⅡ能够诱导心肌细胞的肥大 ,为研究高血压及其他心血管     

尾加压素Ⅱ对血管的调节作用及其机制

尾加压素Ⅱ（UⅡ）是迄今发现最强的缩血管活性肽,对心血管系统具有复杂的调节作用。研究表明,UⅡ可能在血管和心肌重塑性疾病发生、发展过程中发挥重要作用。本文就UⅡ在血管功能调节及血管重塑中的作用及其机制作一综述。     

牛磺酸对低氧-复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的:研究低氧-复氧对心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]I)的影响,以及牛磺酸减轻模拟心肌缺血-再灌过程中钙超载的作用. 方法: 采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立模拟心肌缺血-再灌注模型. 实验分3组:①正常对照组;②模拟缺血-再灌注组:细胞低氧30 min-复氧30 min; ③牛磺酸+缺血-再灌组:先加入终浓度为20 mmol*L-1的牛磺酸,再行低氧30 min-复氧30 min. 以Fluo-3/AM荧光指示剂负载, 应用激光共聚焦显微镜技术检测心肌细胞 [Ca2+]I变化. 结果: 对照组心肌细胞[Ca2+]I荧光强度(650±41) U和荧光光密度较低. 低氧30 min后复氧即刻,[Ca2+]I荧光强度开始增加,复氧30 min后[Ca2+]I荧光强度(2537±187) U和光密度显著增高(P<0.01 vs对照组). 而牛磺酸组细胞内荧光强度和光密度较模拟缺血-再灌组显著降低[(895±50) U vs (2537±187) U, P<0.01]. 结论: 心肌细胞低氧-复氧导致钙超载;而牛磺酸有明显减轻心肌细胞低氧-复氧时Ca2+超载的作用.     

尾加压素Ⅱ受体拮抗剂的研究进展

作为体内具有最强收缩血管能力的物质,尾加压素Ⅱ（UⅡ）及其受体（UT）组成的尾加压素系统参与多种疾病的病理生理发展过程.UⅡ/UT系统在人体内广泛分布于中枢神经系统、心血管系统、胰腺和肾脏等处.因此,UT拮抗剂被认为是治疗相关疾病的潜在靶点.该文就肽类和非肽类UⅡ受体拮抗剂的特点及其在心脑血管疾病、糖尿病、糖尿病肾病和高血压病等疾病的研究进展予以综述.     

尾加压素Ⅱ与动脉粥样硬化

尾加压素Ⅱ(UⅡ)是一种在哺乳动物体内新发现的缩血管活性肽,通过激活G蛋白耦联受体(GPR14)而发挥作用。UⅡ能够促进血管平滑肌细胞增殖、诱导心肌成纤维细胞增殖和胶原合成、刺激心肌细胞肥大、促进巨噬细胞向泡沫细胞转化。血浆或组织UⅡ水平在多种心血管疾病中明显升高,提示UⅡ在心血管系统功能障碍和重塑进程中发挥重要作用。     

尾加压素Ⅱ促进肾系膜细胞增殖的细胞内机制研究

目的:研究尾加压素Ⅱ(UⅡ)对肾系膜细胞(GMC)增殖功能的影响以及细胞内信号转导机制。方法:①采用[3H]-胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入实验研究UⅡ对GMC增殖的影响。②加入不同的细胞内信号转导阻断剂,观察UⅡ作用的信号转导通路。结果:UⅡ以浓度[(10-9～10-7)mol/L]依赖的方式促进GMC3H-TdR掺入,分别较对照组高86.9%、105.8%和134.2%(P<0.01)。UⅡ刺激3H-TdR掺入的效应能够被L-钙通道阻断剂尼卡地平、钙调素激酶(CaM-PK)阻断剂W7和蛋白激酶C(PKC)阻断剂H7所抑制,抑制率分别为42.3%、49.3%和34.1%(P<0.01)。丝裂素活化蛋白激酶阻断剂PD98059虽能轻度抑制UⅡ效应,但无统计学意义(P>0.05)。结论:UⅡ明显促进GMC增殖,该效应与胞外Ca2 内流、CaM-PK以及PKC有关,并提示UⅡ可能在肾纤维化发生和发展过程中发挥着重要作用。     

人尾加压素Ⅱ与冠心病

尽管近年来，人们对冠心病的预防、诊断和治疗有了很大的进步，但冠心病仍是人类健康的主要杀手，尤其是近年来随着我国冠心病患者口益增多，对冠心病尤其是急性冠脉综合征的预防和诊治是人们研究的热点。一些血管活性物质，如血管紧张素，内皮素，肾上腺髓质素及近几年新发现的尾加压素，糜酶及降钙素基因相关肽与冠心病的关系也受到人们更多的关注。本文将对人尾加压素Ⅱ与冠心病的研究作一综述．     

甲状旁腺素对心肌细胞钙离子移动的影响

目的:研究甲状旁腺素(PTH)对心肌细胞钙离子移动的影响及其机制。方法:培养的新生大鼠心肌细胞以荧光指示剂Fluo-3/AM负载,通过激光共聚焦显微镜(LSCM)动态观察不同浓度PTH_(1-34)对培养心肌细胞钙移动的作用,以及细胞外钙和钙拮抗剂的影响。结果:在细胞外Ca~(2+)为2.50mmol/L时,PTH_(1-34)在0.00、0.01、0.10和1.00μmol/L浓度下的刺激可使心肌细胞静息钙荧光强度(FI)分别从48.78±6.70、47.78±6.14、45.58±6.11、51.10±9.33,增高至48.82±6.31(P>0.05)、54.63±3.60(P<0.05)、63.82±9.21(P<0.01)、78.66±10.04(P0.05);如应用10.00μmol/L硝苯地平预处理,则FI从47.42±8.80上升到54.12±5.13(P>0.05)。结论:甲状旁腺素显著增加静息心肌细胞[Ca~(2+)]_i,并呈浓度依赖性,电压依赖性钙通道开放引起的细胞外钙内流为其重要机制之一。     

尾加压素Ⅱ与肺心病的研究进展

肺心病是呼吸系统的常见疾病,虽然近年来它的发病机制和治疗研究已取得了很大进展,但是发病率和病死率仍较高。体液因子与肺心病发病的相关性研究已逐渐深入,最近发现尾加压素Ⅱ与肺心病的发生、发展及预后可能密切相关。尾加压素Ⅱ拮抗剂的研究也许可揭示肺心病患者的发病机制,为肺心病的治疗提供新的方向。现就尾加压素Ⅱ与肺心病关系的研究进展简要综述。     

血浆尾加压素Ⅱ在老年高血压合并心肌肥厚患者中的作用机制的临床研究

目的探讨血浆尾加压素Ⅱ（urotensinll,UⅡ）在老年高血压病以及合并心肌肥厚患者中的作用机制。方法选取2009年1月-2010年1月来我院就诊的老年高血压患者67例作为观察组（年龄均〉60岁）,其中单纯性高血压患者32例,高血压合并心肌肥厚患者35例。同时选取我院34例进行健康体检者作为对照组,应用放射免疫分析法测定各组血浆UⅡ含量,并作相关性分析。结果①67例老年高血压组的UⅡ含量平均为（8.02±2.59）pg/mL,34例正常对照组的UⅡ含量平均为（6.75±1.25）pg/mL,两组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。②不同分级的高血压患者血浆UⅡ的含量明显高于正常对照组（P〈0.05）,且随着高血压分级的升高,高血压患者血浆UⅡ的含量也明显增加,3级高血压患者血浆UⅡ的含量明显高于1、2级高血压组血浆UⅡ的含量（P〈0.05）。③单纯高血压组、高血压合并心肌肥厚组的血浆UⅡ含量均明显高于正常对照组（P〈0.05）。且高血压合并心肌肥厚组的UⅡ水平明显高于单纯高血压组（P〈0.05）。单纯高血压组、高血压合并心肌肥厚组的左心室重量指数（LVMI）均明显高于正常对照组（P〈0.01）。且高血压合并心肌肥厚组的LVMI水平明显高于单纯高血压组（P〈0.01）。④老年高血压组心脏室间隔厚度（IVST）为（12.45±0.79）mm,左室后壁厚度（LPWD）为（12.67±0.29）mm,二者分别与UⅡ呈正相关（r分别为0.762,0.891,P〈0.05）。结论 UII可能在老年高血压病心肌肥厚的发病机制中具有重要作用,但其作用机制及其意义有待深入研究。     

毛细支气管炎患儿血浆尾加压素Ⅱ的变化

目的 观察毛细支气管炎患儿治疗前后血浆尾加压素Ⅱ(UⅡ)的变化.方法 毛细支气管炎组30例,健康对照组30例,放射免疫法检测两组患儿血浆尾加压素Ⅱ含量及毛细支气管炎组治愈后复测血浆UⅡ含量.结果 毛细支气管炎组与健康对照组比较,血浆UⅡ含量显著升高(P＜0.05),毛细支气管炎组治疗后血浆UⅡ含量显著下降(P＜0.05).结论 UⅡ参与毛细支气管炎的病理生理过程,动态检测UⅡ含量有助于判断毛细支气管炎的病情及预后.