结核抗体检测对肺结核病诊断价值的探讨

自1976年Nassau等用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结核菌抗体以来，国内外均有不少报道，以适用BCG，PPD抗原诊断为多。我院自1993年应用郑州博赛研制的结核杆菌胞膜蛋白抗原诊断试剂盒，采用ELISA法检测了肺结核病人，肺部其他疾病、肿瘤病人，健康输血员的血清抗体，现将结果报告如下：     

肝癌血清自身抗体的研究进展

肿瘤相关抗原会被机体的免疫系统识别而产生相应的自身抗体,其是非常有前景的肿瘤标志物之一,有多种途径可以检测和鉴别。而肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,其预后差、致死率高。在向肝癌转变的过程中,抗肿瘤相关抗原抗体的出现甚至早于肿瘤相关抗原。目前,研究较多的抗肿瘤相关抗原抗体包括p53抗体、胰岛素样生长因子Ⅱ信使RNA结合蛋白家族抗体、抗Ku86蛋白抗体等。其中,新近发现的血清抗Ku86抗体的敏感性和特异性甚至高于甲胎蛋白,而糖调节蛋白78抗体与甲胎蛋白联合检测可以大大提高肝癌诊断的敏感性。因此,未来抗肿瘤相关抗原抗体可能成为更好地诊断肿瘤尤其是早期肿瘤的血清标志物。     

自身抗体与恶性肿瘤的相关性研究

<正>自身抗体作为肿瘤早期诊断的标志物已受到人们广泛关注。研究表明,肿瘤能诱导机体免疫反应,产生抗肿瘤相关抗原的自身抗体[1-2]。研究采用间接免疫荧光法(IIF)、免疫印迹法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法,检测鼻咽癌、原发性肝癌、肺癌等几种常见恶性肿瘤患者血清抗核抗体(ANA)、抗双链DNA     

基因工程技术制备和鉴定抗TNF-α蛋白Fab抗体

目的 利用基因工程技术制备人源性抗肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白的可溶性Fab抗体,并鉴定其抗原结合活性及特异性.方法 用固相化的TNF-α蛋白从人天然Fab噬菌体抗体库中筛选出表达抗TNF-α蛋白Fab抗体的阳性克隆,经酶切及连接反应构建可溶性表达噬菌粒并转化至大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,IPTG高效可溶性表达,SDS-PAGE及Western blot分析鉴定抗体表达情况、ELISA鉴定其抗原结合活性和特异性.结果 成功筛选并表达了人源性抗TNF-α蛋白的Fab抗体,在非还原SDS-PAGE中形成相对分子质量47 kD的条带;Western blot分析证实表达的蛋白即Fab抗体.ELISA筛选出2株抗体(TA-04,TA-13)具有良好的抗原特异性和抗原结合活性,与小牛血清白蛋白无交叉反应.结论 成功表达并鉴定了人源性抗TNF-α蛋白的可溶性Fab抗体,构建了一种基因工程抗体的有效制备途径.为基因工程抗体在肿瘤免疫治疗方面的临床应用研究奠定了基础.     

胃泌素释放肽前体双抗体夹心酶联免疫吸附法的建立及其应用

目的：胃泌素释放肽前体（ pro-gastrin releasing peptide , PGRP）作为小细胞肺癌肿瘤标志物的应用价值已成为近年来的研究热点,文中建立新型双抗体夹心酶联免疫吸附法（ enzyme-linked immune sorbent assay , ELISA ）方法检测患者血清PGRP抗原浓度。方法通过人工合成PGRP抗原决定簇对本实验室自行研制的单克隆抗体进行筛选;采用改良过碘酸钠法对筛选到的单克隆抗体进行辣根过氧化物酶标记,建立PGRP双抗体夹心酶联免疫吸附检测法;并与IBL公司PGRP试剂盒对比检测结果。结果新型ELISA检测标准抗原浓度范围为33～1．7×104 pg／mL,检测小细胞肺癌患者血清PGRP浓度灵敏度100％,特异度98．4％,IBL试剂盒检测灵敏度100％,特异度92．2％。结论新型ELISA方法可用于小细胞肺癌患者血清PGRP浓度检测。     

免疫酶标电泳技术检测结核菌特异抗体研究

近十年来研究检测结核病人血清中特异抗体的方法引起国内外重视,已报道都以酶联免疫吸附试验(ELISA)法包被不同抗原,间接检测相应抗体,其操作较复杂,检测时间均需24小时以上。本文首先在国内应用免疫酶标电泳技术(IELEP)检测血清中结核菌特异抗体,无需复杂昂贵设备,具有操作简便、快速,兼具特异性、灵敏度、稳定性优于LISA法的优点。IELEP法检测血清中结核菌特异抗体将酶标记抗原(聚合OT为抗原)和血清标本分别置于阴、阳极端,在电泳作用下直接相遇形成初级免疫复合物,经酶促反     

牛角角蛋白与人角质层抗原检测抗角质层抗体的比较研究(摘要)

本文以牛角角蛋白和人角质层为抗原,用生物素——亲和素酶联免疫吸附试验(BA—ELISA)检测了50名银屑病患者和32名正常人血清中抗角质层抗体(ACAS 的滴度,虽然以牛角角蛋白作抗原     

肝炎血清标志的酶联免疫检测技术探讨

<正> 酶联免疫吸附试验(ELISA)是利用免疫酶标记技术在固相载体上进行抗原或抗体的测定,由于酶催化效率高,抗原抗体反应有高度的特异性,所以普遍应用于乙型肝炎血清标志物的检测,为了更好的使酶联免疫检测技术的日益完善,现把我们在检测中遇到的技术问题进行回顾及探讨。1、ELISA的原理1·1 使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。1·2 使抗原或抗体与某种酶联结成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。     

血清前列腺特异性抗原检测的临床应用

前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）是前列腺上皮细胞合成并分泌的一种糖蛋白，自８０年代初在人血清中发现后广泛应用于前列腺癌的诊断和人群筛选等方面。我们应用酶联免疫双抗体夹心二步法检测健康人群、前列腺良、恶性疾病患者的血清ＰＳＡ含量，观察ＰＳＡ的变化特征，探讨Ｐ...     

酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清单纯疱疹病毒抗体的研究

本文对ELISA间接法检测HSV抗体作了下列研究:以两种较简易的方法,即病毒感染细胞连同维持培养基一起(方法一)或经洗涤后在PBS中(方法二)反复冻融,分别从原代兔肾、原代鸡胚、传代Vero和FL细胞制备HSV抗原,结果以方法二制取的Vero细胞病毒抗原滴度最高;原代兔肾者次之。选取16份ELISA呈不同滴度的血清作中和试验,两法结果呈正相关关系(r=0.79,P<0.005)。初步得出△A492≥0.2可作为血清抗体阳性。以ELISA检测3组年龄人群血清抗体,婴儿组抗体阳性率6.6％,儿童组80％,成人组100％。最后,比较了酶联抗人IgG及酶联SPA ELISA检测的29份血清抗体含量,两种结合物测得的结果呈正相关关系(r=0.986,P<0.0005),并提出酶联SPA在鉴别两型HSV血清中具有重要意义。     

HBsAg ELISA试剂质量抽检结果分析

血液安全主要依靠对献血者的筛选和采用酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）对血液中输血相关病毒抗体和/或抗原的检测[1]。为选择适合本血站使用的酶联免疫试剂,使用卫生部临检中心或中国药品生物制品检定所生产的临床科研血清盘对不同厂家酶联免疫试剂的各项指标进行检测,依据检测结果选择初、复检试剂。     

酶联免疫吸附试验(ELISA)在抗MGC 803单克隆抗体的筛选及检测中的应用

自Kohler及Milstein建立淋巴细胞杂交瘤技术以来,该技术已广泛地用于肿瘤抗原的研究。其中,建立一种灵敏、特异简便、快速的筛选及检测方法是应用该技术的关键之一。常用的方法中以固相放射免疫法(RIA)及酶联免疫吸附试验(ELISA)较理想。后者由于无放射污染之虑,酶联抗体可较长期地保存,应用较为方便。我们在制备抗胃癌细胞株MGC803单克隆抗体时,采用ELISA进行筛选及检测,对靶细胞的固相化,高质量酶联抗体的制备等环节进行了改进,获得较为理想的结果。     

人免疫缺陷病毒抗原血症

Kessler等报道了4例与人免疫缺陷病毒(HIV)相关的急性疾患。有趣的是在于用酶联免疫吸附剂与Western印迹法检测出HIV抗体之前,在自限性病程中已检查出HIV抗原血症。可见血循环中抗原的出现有助于确诊。其他研究者已报告,在部分急性感染个体中HIV抗原血症先于血清阳转出现。上述证据证实,血循环中的抗原包括HIV(P~(24))核心蛋     

性病患者血清HCMV pp65特异性IgM表达水平

目的建立检测人HCMV pp65特异性lgM的酶联捕获技术,并分析性病患者HCMV感染状态。方法利用抗人IgM（μ链特异性）抗体包被固相载体,采用辣根过氧化物酶（HRP）标记HCMV pp65单克隆抗体或HCMV pp65抗原,建立抗体捕获HCMV pp65特异性IgM酶联免疫技术。用该法检测688例性病患者及450名健康献血员血清样本,并与HCMV-pp65抗原表达水平进行比较。结果性病患者血清HCMV pp65-IgM阳性分别为274例（39.8%,酶标抗体法）和262例（38.1%,酶标抗原法）,与正常对照组（0.89%）存在显著性差异（P〈0.05）。酶标抗体法与酶抗原法在抗体捕获HCMV pp65特异性IgM检测时无显著性差异（P〉0.05）,阳性符合率95.6%,且不受类风湿因子（RF）的影响。结论酶联捕获HCMVpp65特异性lgM法具有简便、快速、特异和敏感等特点,可诊断HCMV活动性感染。     

人血清IA-2抗体检测方法的建立及应用

目的建立糖尿病患者血清中IA-2自身抗体的检测方法。方法以原核表达的人IA-2融合蛋白作为抗原建立人血清IA-2抗体的固相酶联免疫吸附检测方法(ELISA),该方法经优化后用于糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测。结果该文所建立方法的平均批内和批间变异系数分别为6.8%和7.7%;回收率为99.2%~105%。所测定的1型和2型糖尿病患者血清中IA-2抗体的阳性率分别为49%和3.6%。结论应用原核表达的人IA-2蛋白为抗原所建立的ELISA方法简单且可靠,为糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测提供了条件。     

应用McAb ELISA双抗体法检测肺吸虫病循环抗原

酶联免疫吸附试验(ELISA)应用于肺吸虫病的诊断,国内已有报道,刘纪伯又报道了应用单克隆抗体(McAb)斑点试验检测斯氏肺吸虫循环抗原的研究;但尚未有应用McAb ELISA双抗体法检测卫氏肺吸虫病循环抗原。为此,我们应用McAb ELISA双抗体法检测了38例肺吸虫病人循环抗原,现将结果报道如下。材料和方法一、试验血清分二组第一组:卫氏肺吸虫病患者血清38份,     

人血清IA-2抗体检测方法的建立及应用

目的建立糖尿病患者血清中IA-2自身抗体的检测方法.方法以原核表达的人IA-2融合蛋白作为抗原建立人血清IA-2抗体的固相酶联免疫吸附检测方法(ELISA),该方法经优化后用于糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测.结果该文所建立方法的平均批内和批间变异系数分别为6.8%和7.7%;回收率为99.2%～105%.所测定的1型和2型糖尿病患者血清中IA-2抗体的阳性率分别为49%和3.6%.结论应用原核表达的人IA-2蛋白为抗原所建立的ELISA方法简单且可靠,为糖尿病患者血清中IA-2抗体的检测提供了条件.     

两种测定抗结核菌抗体方法的临床应用评价

笔者用进口免疫色谱层吸抗结核菌抗体测试卡对100例肺结核病人血清和80份对照血清进行测试，并与国产38KD抗原酶联免疫试剂进行比较。现将比较结果报道如下。     

糖尿病患者血清HCMV pp65特异性IgM表达水平

目的建立检测人HCMV pp65特异性IgM的酶联捕获技术,来分析糖尿病患者HCMV感染状态。方法利用抗人IgM(μ链特异性)抗体包被固相载体,采用辣根过氧化物酶(HRP)标记HCMV pp65单克隆抗体或HCMV pp65抗原,建立抗体捕获HCMV pp65特异性IgM酶联免疫技术。用该法检测727例糖尿病患者及230例健康献血员血清样本,并与HCMV-pp65抗原表达水平进行了比较。结果糖尿病患者血清HCMV pp65-IgM阳性分别为81例(11.14%,酶标抗体法)和78例(10.73%,酶标抗原法),与健康组(0.87%)相比存在统计学差异(P<0.05)。酶标抗体法与酶标抗原法在抗体捕获HCMV pp65特异性IgM检测时不存在显著性差异(P>0.05),且不受RF因子的影响。HCMV pp65-IgM与HCMV pp65蛋白表达呈现良好的相关性。结论酶联捕获HCMV pp65特异性IgM法具有简便、快速、特异和敏感等特点,可诊断HCMV活动性感染。     

严重急性呼吸综合征患者血清中SARS相关抗体的特异性研究

目的：检测严重急性呼吸综合征(SARS)患者血清中SARS相关抗体的抗原特异性。方法：采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IgG抗体，并采用抗原抗体的预孵育，吸附血清中抗原特异性抗体，检测其抗原特异性。结果：SARS患者血清与SARS患者肺组织以及非SARS患者肺组织均有相似的反应性。阳性血清与非SARS患者肺组织孵育后，其中抗SARS患者肺组织抗体被吸收，吸收率为100％。结论：本组SARS患者血清中存在抗肺组织抗体，其对SARS致病机制的意义值得进一步研究。