UHPLC-MS/MS法同时测定枳实薤白桂枝汤中10种成分

[目的] 建立超高效液相色谱-质谱联用（UHPLC-MS/MS）方法同时测定枳实薤白桂枝汤中槲皮素、芹菜素、原儿茶酸、木犀草素、紫丁香苷、阿魏酸、柚皮苷、厚朴酚、橙皮苷、新橙皮苷的含量。[方法] 采用Welchultimate XB-C18色谱柱（2.1 mm×100 mm,3 μm）,以0.1%甲酸水-乙腈为流动相,梯度洗脱,进样量为3 μL,流速为0.2 mL/min,柱温40 ℃。采用电喷雾离子源（ESI）,正负离子切换模式,多反应检测（MRM）模式。[结果] 枳实薤白桂枝汤颗粒中10种成分在各自范围内线性关系良好（r＞0.995）,精密度、稳定性及重复性实验的相对标准偏差（RSD）均小于2.86%,加样回收率均在97.68%~101.66%。[结论] 该方法简便快捷、结果准确可靠,可用于枳实薤白桂枝汤颗粒的质量控制。     

UPLC-MS/MS同时测定鱼腥草中3个马兜铃内酰胺类成分的含量

目的：建立同时测定不同产地鱼腥草中马兜铃内酰胺AⅡ、马兜铃内酰胺FⅠ和马兜铃内酰胺BⅡ3个马兜铃内酰胺类成分的超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS/MS)。方法：选用Agilent SB-C₁₈柱(50 mm×2.1 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%甲酸为流动相等度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,多反应监测模式,建立鱼腥草中3个马兜铃内酰胺类成分的UPLC-MS/MS,在方法学验证的基础上对所有样品进行检测分析。运用SPSS 26.0和SIMCA14.1进行差异性、聚类、相关性和主成分分析。结果：在考察的质量浓度范围内,3个马兜铃内酰胺类成分的线性关系良好(r≥0.999 8),加样回收率为83.77%～105.61%,RSD为1.14%～11.46%。14批鱼腥草中马兜铃内酰胺AⅡ、马兜铃内酰胺FⅠ和马兜铃内酰胺BⅡ的质量分数分别为0.757～19.538、1.418～15.971、2.893～70.131μg·g^-1。差异性分析表明,3个成分的含量与鱼腥草的产地、野生或种植无关。相关性分析表明,3个成分的...     

UPLC-ESI-MS/MS法快速测定苦碟子注射液中4种黄酮类成分的含量

目的：采用超高效液相色谱串联质谱法快速测定苦碟子注射液中木犀草素、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷4种黄酮成分的含量。方法：采用Waters ACQUITY BEH C₁₈色谱柱（2.1mm×50mm,1.7μm）,流动相为乙腈-水系统梯度洗脱,流速为0.4mL?min^-1,柱温为40℃;在ESI负离子模式下,采用多反应离子监测（MRM）扫描方式进行检测。结果：苦碟子注射液中4种成分在3min内完全分离,线性范围内呈良好的线性关系（r>0.999 5）,加样回收率分别为97.64%、97.42%、101.24%、98.63%,RSD值分别为1.45%、1.93%、2.90%、1.62%。结论：该方法简便、准确、灵敏度高,可用于苦碟子注射液中4种黄酮成分的含量测定。     

UPLC-MS/MS测定追风透骨丸中马兜铃酸类成分含量

目的 建立超高效液相色谱-质谱法（UPLC-MS/MS）同时测定追风透骨丸中马兜铃酸Ⅰ、马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ和马兜铃内酰胺Ⅰ的含量。方法 采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱（100 mm×2.1 mm,1.8 μm）;以乙腈-0.1%甲酸水溶液（含5 mmol·L^–1甲酸铵）为流动相梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^–1,用电喷雾离子源,在多反应监测模式下采用外标法测定。结果 4个成分在2~250 ng·mL^–1线性关系良好,r均大于0.999,在20 ng·mL^–1添加水平的平均回收率分别为104.2%、75.7%、112.0%、105.4%,RSD为2.8%~6.1%,方法定量限为0.002~0.100 μg·g^–1。7批样品中均未检出马兜铃酸Ⅱ、马兜铃酸Ⅲ,马兜铃酸Ⅰ检出量为0.09~0.41 μg·g^–1,马兜铃内酰胺Ⅰ检出量为0.62~1.30 μg·g^–1。结论 该方法专属性好、灵敏度高、结果准确,可为追风透骨丸中马兜铃酸的质量控制提供参考。     

UHPLC-Q-Orbitrap-MS/MS 法分析5 种紫金牛属植物的黄酮类成分

目的分析5 种紫金牛属药用植物（细罗伞、九管血、朱砂根、月月红和雪下红）的黄酮类成分。方法 采用超高效液相色谱（UHPLC）技术分离5 种紫金牛属植物的黄酮类成分,在高分辨质谱仪（Q-Orbitrap-MS/MS） 正、负离子模式下采集碎片离子信息,应用CD2.1 软件（Thermo Fisher）完成数据初步整理后进行数据库 （mzCloud,mzVault,ChemSpider）检索比对。结果从5 种紫金牛属植物中共鉴定出38 种黄酮类成分,细罗 伞、九管血、朱砂根、月月红和雪下红分别鉴定出37、34、29、36 和30 种黄酮类化合物,有26 种黄酮类成 分为5 种紫金牛属植物的共有成分。结论该鉴定方法精确、可靠、高效,能快速鉴定出紫金牛属植物的黄酮 类成分,为紫金牛属药用植物的药效物质基础和开发利用研究提供科学依据。     

UPLC-MS/MS法同时测定药用乳香中7种乳香酸类成分

目的:建立超高效液相色谱三重四级杆串联质谱法同时测定不同来源乳香中7种乳香酸类成分的方法,比较不同来源乳香中该类成分的含量差异。方法:采用ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm);以0.1%甲酸-水(A)-0.1%甲酸-乙腈(B)溶液为流动相,梯度洗脱,体积流量为0.5 mL/min,柱温40℃;采用电喷雾离子源,正离子检测方式,得到相应的提取离子流图,以峰面积进行定量。结果:乳香中α-乳香酸、β-乳香酸、3-乙酰基-α-乳香酸、3-乙酰基-β-乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸和3-酮基-11α-羟基-β-乳香酸具有良好的线性关系,相关系数r均大于0.998 5,平均加样回收率为96.8%～102.0%,RSD均3.5%。结论:该方法操作简便、准确、重复性好,为乳香中乳香酸类成分的深入研究及其质量控制提供了参考依据。     

UPLC-MS/MS法同时测定参术散中的4种成分

目的建立超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)同时测定参术散中4种成分(绿原酸、甘草苷、党参炔苷和甘草酸铵)的含量。方法采用UPLC-MS/MS法,通过正负离子多反应监测(MRM)模式进行含量测定。色谱条件:采用Shim-pack XR-ODSⅢ(2.0 mm×75 mm,1.6μm)色谱柱,流动相选择0.1%甲酸5 mmol/L乙酸铵水溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱,流速0.30 m L/min,柱温40℃。结果在上述色谱条件下,4种成分在各自的线性范围内呈现良好的线性关系(r≥0.999 1),其精密度、稳定性、重复性考察的RSD均小于3%,符合分析要求;平均回收率98.93%～100.07%,RSD<3%。3批样品中4个化学成分的含量测定结果:绿原酸11.30～33.90μg/g;甘草苷18.10～23.60μg/g;党参炔苷102.00～199.00μg/g;甘草酸铵43.40～66.90μg/g。结论本研究所建立UPLC-MS/MS定量分析方法可同时测定参术散中4种成分(绿原酸、甘草苷、党参炔苷和甘草酸铵),快速准确、灵敏度高,为参术散的质量控制提供参考依据...     

朱砂莲中马兜铃酸类成分的UPLC-QTOF-MS/MS定性与定量分析

目的:建立朱砂莲块根中马兜铃酸类成分的定性与定量测定方法.方法:采用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱法(UPLC-QTOF-MS/MS)对朱砂莲块根进行定性与定量分析,检测条件ACQUITY UPLC-BEH C18色谱柱(2.1 mm× 100 mm,1.7 μm),以0.1％甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动...     

黄花夹竹桃中强心苷类成分的UPLC-QTOF/MS快速鉴定

目的:应用超高效液相色谱-高分辨质谱联用方法(UPLC-QTOF/MS)对黄花夹竹桃枝中的强心苷类成分进行速鉴定,为含有黄花夹竹桃的复杂混合样品的快速分析提供了一种有效的方法。方法:黄花夹竹桃枝经甲醇冷浸提取,大孔吸附树脂层析,将黄花夹竹桃中总强心苷类成分富集到95%乙醇洗脱部位,通过超高效液相色谱将各种强心苷类成分较好分离,根据高分辨质谱得到各成分的分子量,推测出其中6个主要成分的可能结构。结果:试验通过UPLC-QTOF/MS方法鉴定出黄花夹竹桃中主含的6种强心苷类成分,分别为黄花夹竹桃黄夹苷B、黄夹次苷D、黄花夹竹桃次苷甲、黄夹臭蚁醛苷、黄花夹竹桃次苷乙以及单乙酰次苷乙。结论:该实验方法简便快捷,结果准确可靠,可做为黄花夹竹桃中强心苷类化合物的快速鉴别分析方法。     

UPLC-MS/MS测定康艾注射液中5种主要成分含量

 目的 建立同时测定康艾注射液中黄芪甲苷、人参皂苷R_g1、R_e、R_f、R_b1含量的超高效液相-串联四级杆质谱方法。方法 多反应监测模式测定,以Waters ACQUITY UPLC BEH C₁₈进行分离,乙腈-20 mmol·L-1醋酸铵溶液梯度洗脱,流速：0.4 mL·min-1。离子化模式：ESI+。结果 黄芪甲苷线性范围在5.0～500.0 μg·L-1之间,人参皂苷R_e和R_g1线性范围在0.2～20.0 mg·L-1之间,人参皂苷R_f和R_b1线性范围在10.0～1 000.0 μg·L-1之间,r分别在0.991 5~0.995 2之间,检出浓度分别在1.57~67.4 μg·L-1之间,回收率分别在95.6%～107.0%之间。结论 该方法快速、准确、灵敏,可作为康艾注射中5种主要成分同时测定的方法。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中齐墩果酸的含量及其药动学研究

目的建立大鼠血浆中齐墩果酸的LC-MS/MS测定法,并应用于灌胃白花蛇舌草提取物齐墩果酸在大鼠体内的药动学研究。方法取大鼠血浆100μL,加入10μL内标甘草次酸(5μg·mL-1),依次用乙酸乙酯800μL提取两次,上清液用氮气流吹干,100μL流动相复溶,高速离心10 min,取上清液5μL进行LC-MS/MS测定。色谱条件:Agilent 1200高效液相色谱系统,色谱柱Phenomenex Gemini 110A C18色谱柱(50 mm×2.0mm,5μm);流动相:乙腈-0.01%甲酸水梯度洗脱;柱温为40℃;流速为0.3 mL·min-1。质谱:API4000负离子MRM模式,齐墩果酸和甘草次酸的选择检测离子质荷比分别为m/z 455.3→455.3,m/z 469.4→425.3。结果齐墩果酸血浆浓度线性范围0.5～250 ng·mL-1,线性关系良好(r=0.9979),最低检测限(LOQ)为0.1 ng·mL-1,提取回收率为62.76%～65.38%,日内精密度RSD为3.55%～7.45%,日间精密度RSD为2.34%～7.60%,稳定性均符合方法学测定要求,血浆无内源性基质干扰。结论该法简便,灵敏,重复性好,可应用于测定血浆中齐墩果酸的含量并应用于灌胃白花蛇舌草提取物大鼠体内齐墩果酸的药物动力学研究。     

薄层扫描法测定关木通及其制剂中马兜铃酸A的含量

目的测定关木通及其制剂中马兜铃酸A的含量.方法薄层扫描反射锯齿法,λ=323nm,狭缝0.4×0.4nm,Sx=3.结果回收率99.86%,RSD 2.04%.结论本法适用于多种含关木通的中成药制剂中马兜铃酸A的含量测定.     

关木通所含马兜铃酸对大鼠肾小管凋亡及Caspase-3表达的影响

目的研究关木通所含马兜铃酸(AA)对肾小管上皮凋亡及凋亡信号蛋白Caspase-3表达的影响。方法将雄性Wistar大鼠46只随机分为关木通组与对照组。关木通组按AA20mg·kg-·1d-1灌胃关木通浸膏,对照组灌胃饮用水。于用药第4、8、12周分批处死动物,取肾组织行HE、PAS、Masson染色,肾脏病理分析肾小管间质损伤程度,TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡,免疫组化检测PCNA、Caspase-3表达。结果关木通组出现急性小管间质损害,随着用药时间延长,肾小管间质损害程度加重;TUNEL染色显示第4～8周时凋亡指数升高,第12周时凋亡指数下降;PCNA主要表达于损伤的肾小管,其增殖指数在第4周和第8周时显著升高,但第12周时下降;Caspases-3表达水平在8周前显著增高,主要表达在损伤小管及浸润的炎细胞,第12周时表达水平下降。对照组肾小管偶见凋亡细胞,增殖指数维持在一定水平,Caspases-3有少许表达。结论关木通所含马兜铃酸可引起肾小管损害,早期主要为肾小管损伤、凋亡,并伴随Caspase-3表达水平升高,后期则以小管坏死、萎缩和间质纤维化为特点,Caspase-3表达略下降,且肾小管再生修复能力下降。     

LC-MS/MS同时测定人血清中5种抗精神类药物和9种抗抑郁药物的浓度

 目的 建立LC-MS/MS测定人血清中氯氮平、氟哌啶醇、洛沙平、利培酮、泰必利、西酞普兰、氟伏沙明、米安色林、米氮平、吗氯贝胺、帕罗西汀、瑞波西汀、曲唑酮、文拉法辛血药浓度的方法 。 方法 血清经乙腈直接沉淀,采用伐地那非作为内标进行测定。色谱柱：Xbridge^TM Phenyl (2.1 mm×150 mm,5 μm,Waters公司,流动相：0.02%甲酸水溶液-0.02%甲酸乙腈溶液（60∶40,等度洗脱;流速0.3 mL· min^-1;进样体积3 μL;电喷雾离子化,正离子MRM扫描。结果 氯氮平、西酞普兰、氟伏沙明、米安色林、米氮平、吗氯贝胺、瑞波西汀、曲唑酮、文拉法辛线性范围均为10~1 000 ng· L^-1（r>0.996,定量下限均为10 ng· L^-1;氟哌啶醇、利培酮、泰必利线性范围均为1~100 ng· L^-1（r>0.997,定量下限均为1 ng· L^-1;洛沙平、帕罗西汀线性范围均为5~500 ng· L^-1（r>0.998,定量下限均为5 ng· L^-1;平均提取回收率均>87%,批内、批间精密度RSD均<15%。结论 本方法 灵敏度高、专一性好、操作简单,适用于5种抗精神类药物和9种抗抑郁药物的研究。     

含马兜铃酸类中药材中马兜铃总酸的含量

目的：建立马兜铃总酸的含量测定方法，并测定不同地区市售青术香及其它八种含马兜铃酸类中药中马兜铃总酸的含量，用于指导临床安全、合理用药。方法：用紫外分光光度法分析，检测波长为390nm。结果：马兜铃酸A在0．047。0．235mg范围内（r=0．9992）有良好的线性关系；平均加样回收率为98．16％，RSD=2．04％。不同地区市售青木香中马兜铃总酸含量在0．145％～0．567％范围内，其中以河北安国含量最高（0．567％），重庆含量最低（0．145％）；八种含马兜铃酸类中药材中马兜铃总酸含量在0．178％～0．717％范围内，其中以关木通含量最高（0．717％），华细辛含量最低（0．178％）。结论：本方法简便、准确，可用来测定其它含有马兜铃酸类中药材及中成药中马兜铃总酸的含量。     

UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS对紫花地丁中化学成分的快速表征

目的:采用超高效液相色谱-电喷雾飞行时间串联质谱法(UHPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS)对紫花地丁水提取物的主要化学成分进行分析鉴定。方法:采用Welch C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),以0.1%甲酸水(A)-乙腈(B)为流动相梯度洗脱,流速0.35 m L·min~(-1),质谱采用电喷雾(ESI)离子源,在正负离子模式下采集数据,运行时间为30 min。结果:通过二级高分辨质谱分析结合对照品数据及相关文献,共鉴定32个化合物,包含香豆素、黄酮及有机酸类成分。结论:该研究利用UHPLC的高效分离能力和MS的高灵敏度检测优势,建立的分析方法,为控制紫花地丁药材质量、临床疗效及阐释其作用机制提供了科学依据。     

UPLC-MS/MS同时测定双黄连片中5种有效成分的含量

目的:建立同时测定双黄连片中5种有效成分含量的UPLC-MS/MS分析方法。方法:采用BEHC₁₈色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速0.4 mL·min^-1,采用电喷雾电离源(ESI),多反应离子监测(MRM) 扫描方式。结果:10种被测物呈良好的线性关系(r>0.999);精密度、重复性和稳定性良好;加样回收率在96.00%~104.67%,RSD均<3%。结论:所建立的方法准确、快捷,重复性好,可用于双黄连片中绿原酸、连翘苷、连翘酯苷A、木樨草苷、芦丁5种有效成分的含量的同时测定。     

LC-MS/MS法同时测定犬血浆中丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸和迷迭香酸及其在丹参提取物的药代动力学研究应用

目的:建立同时检测Beagle犬血浆中丹酚酸A、丹酚酸B、紫草酸和迷迭香酸的分析方法,并应用混合有机溶剂萃取法提取含药血浆中的成分。方法:采用C18反相柱,流动相为甲醇乙腈等比混合液-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,质谱采用多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。结果:定量分析的离子对(m/z)为:493.2/295.1(丹酚酸A),717.2/519.1(丹酚酸B),537.2/493.2(紫草酸)和359.2/161.0(迷迭香酸)。测定血浆中这4种成分的线性范围均为0.3125～200μg.L-1,定量下限为0.3125μg.L-1,该方法的精密度、准确度和稳定性均符合要求。结论:该法选择性强、灵敏度高、操作简便,可用于血浆中这4种酚酸类成分的药代动力学研究。     

液相色谱-串联质谱联用测定人血浆中伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬和苯海拉明的浓度

 目的建立同时测定人血浆中伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的液相色谱-串联质谱方法。方法血浆中加入内标酚妥拉明后,进行固相萃取,以甲醇-0.5%甲酸水溶液(55∶45)为流动相,经C₁₈柱分离后;采用三重四极杆串联质谱,电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z 166.4→m/z 115.2(伪麻黄碱),m/z258.2→m/z157.1(O-去甲基右美沙芬),m/z256.2→m/z167.2(苯海拉明),m/z282.2→m/z212.2(内标,酚妥拉明)。结果线性范围为伪麻黄碱1.0～200μg·L^-1(r=0.9993),O-去甲基右美沙芬为0.05～10μg·L^-1(r=0.9991),苯海拉明为1.0～200μg·L^-1(r=0.9988);提取回收率为伪麻黄碱在67.4%～73.4%之间,O-去甲基右美沙芬在74.6%～75.7%之间,苯海拉明在81.9%～83.9%之间,日内、日间RSD均小于6.2%,伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的最低定量浓度分别为1.0,1.0和0.05μg·L^-1。结论该方法专属性强、灵敏度高、准确,适用于伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬、苯海拉明的临床药动学研究。