不同炮制时间和温度对苍耳子中2种酚酸含量的影响

目的测定不同炮制时间和温度下苍耳子中绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量变化,确定苍耳子炒制的最佳工艺。方法采用砂炒法,温度150~220℃,时间0.5~7 min,每一温度分别炒制浅黄、黄褐色2份炮制品,共得到16份炮制样品。采用超高液相色谱法同时测定绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸含量。色谱柱:Acquity BEH C18(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速:0.25 mL/min;柱温:30℃;检测波长:327 nm。结果炮制品中绿原酸和3,5二咖啡酰奎宁酸的含量以160℃、7 min最高,分别为2.498、2.004 mg/g。结论综合炮制品的外观和绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量测定结果,确定砂炒苍耳子以160℃、7 min较好。     

不同纯化方法对金银花提取物中咖啡酰奎宁酸类成分含量的影响

目的:考察不同纯化方法对金银花提取物中咖啡酰奎宁酸类成分的影响.方法:应用醇沉法、石硫法、石硫醇法、大孔树脂吸附法及萃取法等对金银花进行提取纯化,并采用高效液相色谱法测定其中6种咖啡酰奎宁酸类成分的含量.结果:萃取法所得金银花提取物中咖啡酰奎宁酸类成分的含量最高,总咖啡酰奎宁酸含量达83.91％.结论:萃取法是制备金银花提取物的理想方法.     

多基原藏药材“美多罗米”中质量标志物的初步预测及分析

目的基于质量标志物(Q-marker)理念,从化学成分的角度对多基原藏药材"美多罗米"的质量标志物进行预测,评价其药材品质。方法首先基于亲缘关系与生源途径、药理作用与化学成分的关系,预测美多罗米的Q-marker;其次采用UHPLC同时测定其主要活性成分,采用Acquity UHPLC HSS C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);流动相为乙腈(A)-0.3%乙酸水(B),梯度洗脱,体积流量为0.21mL/min,柱温35℃,检测波长为320nm。结果预测咖啡酸类成分(绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸)是美多罗米的主要活性物质基础之一,可作为Q-marker的主要选择。建立了美多罗米中咖啡酸类成分的含量测定方法,绿原酸、咖啡酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、4,5-二咖啡酰奎宁酸分别在9.60～480.00、10.27～513.50、10.08～504.03、9.64～482.80、3.82～380.24 mg/L线性关系良好,平均加样回收率分别为102.43%、99.78%、99.39%、103.12%、101.83%。各样品中均能检测出这5个成分,总含量在全草中均大于10%,提示这5个咖啡酸类成分可以作为美多罗米的Q-marker。结论以咖啡酸类成分作为美多罗米的Q-marker科学合理;建立的美多罗米多基原植物中咖啡酸类成分的UHPLC测定方法可用于美多罗米药材质量控制,为多基原药材合理评价提供新思路。     

款冬花炮制后咖啡酰奎宁酸类化合物含量变化研究

目的:采用高效液相色谱法测定款冬花4种咖啡酰奎宁酸类化合物(绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B与异绿原酸C)的含量,研究款冬花经过炮制后咖啡酰奎宁酸类化合物的含量变化。方法:采用HPLC-DAD法,Welch色谱柱Ultimate XB-C_(18)(4.6×250mm,5μm),流动相为0.1%甲酸(A)-甲醇(B)梯度洗脱,流速0.8mL/min,检测波长326nm,柱温25℃。结果:款冬花中4种成分在浓度范围内,线性关系良好(R~2=1);回收率均在99.90%～102.23%,RSD0.44%～2.36%。款冬花不同炮制品4种成分总含量依次为款冬花(1.57%)、蜜炙款冬花(1.20%)和甘草制款冬花(0.45%)。结论:与生品相比,蜜炙款冬花与甘草制款冬花中咖啡酰奎宁酸类化合物含量降低,其中甘草制款冬花对该类成分影响较大。     

正交试验法优选菊花炭炮制工艺研究

目的优选菊花炒炭的最佳工艺。方法通过L_9(3~4)正交试验设计法制备菊花炭样品,采用高效液相色谱法测定绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量,采用Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈为流动相A和0.1%磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱;流速为1.0 mL/min,检测波长为348 nm,柱温为30℃。并进行外观性状鉴别、水分和浸出物含量测定。以外观性状、浸出物含量和绿原酸、木犀草苷、3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸的含量综合评分,优选菊花炭的最佳炮制工艺和具体工艺参数。结果菊花的最佳炒炭工艺为:取净制菊花1 000 g,置300℃热锅内,翻炒6 min。结论通过此法优选得到的菊花炒炭的工艺稳定、技术参数明确、可行性高。     

HPLC法同时测定银黄颗粒中6个咖啡酰奎宁酸

目的建立HPLC法同时测定银黄颗粒中6个咖啡酰奎宁酸类。方法银黄颗粒50%甲醇提取物分析采用Kromasil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈(A)-0.4%磷酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱,柱温35℃,体积流量1.0 m L/min,检测波长327 nm。结果 3-O-咖啡酰奎宁酸、绿原酸(5-O-咖啡酰奎宁酸)、4-O-咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸和3,4-O-二咖啡酰奎宁酸进样量分别在0.012~0.236μg、0.043~0.866μg、0.013~0.253μg、0.012~0.246μg、0.012~0.248μg和0.020~0.397μg范围内与色谱峰峰面积呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为96.2%、96.8%、96.2%、104.9%、96.8%和95.9%;RSD分别为0.6%、0.5%、1.3%、0.4%、0.2%和0.3%。结论 26批银黄颗粒样品的绿原酸含有量差别不大,但其他5个咖啡酰奎宁酸含有量差异较大。建议以咖啡酰奎宁酸类成分代替绿原酸检测银黄颗粒。     

一测多评法测定山银花提取物中6种绿原酸类成分

以绿原酸为内标,测定新绿原酸、隐绿原酸、3,4-O-双咖啡酰奎宁酸、3,5-O-双咖啡酰奎宁酸和4,5-O-双咖啡酰奎宁酸的相对校正因子,建立山银花提取物中6种绿原酸类成分的一测多评定量分析方法。通过考察不同色谱仪和不同色谱柱以验证相对校正因子的耐用性,同时采用外标法对4批山银花药材及20批山银花提取物进行分析,并将其含量测定结果与一测多评法测定结果进行比较。结果表明相对校正因子的耐用性良好,4批山银花药材及20批山银花提取物一测多评法与外标法所得结果无显著差异。所建立的含量测定方法可用于同时测定山银花提取物中6种绿原酸类成分。     

苍耳子炮制前后饮片及标准汤剂的特征图谱和成分差异研究

目的：建立苍耳子与炒苍耳子饮片、标准汤剂的特征图谱和多成分定量方法,分析苍耳子炒制前后饮片与标准汤剂的质量差异。方法：采用ACQUITY UPLC HSS T3 C₁₈(150 mm×2.1 mm,1.8μm)色谱柱;流动相为乙腈-0.01 mol/L磷酸二氢钠溶液,梯度洗脱;流速为0.3 mL/min;检测波长为203、327 nm;柱温为27℃,进样量为1μL。分别建立苍耳子与炒苍耳子饮片、标准汤剂的特征图谱,通过多元统计分析筛选出代表性成分并进行定量分析。结果：苍耳子、炒苍耳子饮片特征图谱分别标定12、13个共有峰。相比于苍耳子饮片,炒苍耳子饮片特征图谱中新增了苍术苷,羧基苍术苷的峰面积平均值减少了73.51%,同时绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸和4,5-O-二咖啡酰奎宁酸的总含量平均值减少。苍耳子与炒苍耳子标准汤剂均标定了15个共有峰,相比于苍耳子标准汤剂,炒苍耳子标准汤剂特征图谱中羧基苍术苷的峰面积平均值减少了57.62%,苍术苷的峰面积平均值增加了285.80%,出膏率平均值提高了23.53%,绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸和4,5-O-二咖啡...     

基于UPLC指纹图谱和多成分定量的茵陈配方颗粒质量控制研究

目的建立茵陈配方颗粒超高效液相色谱(UPLC)指纹图谱及多成分含量测定方法,为其质量评价提供依据。方法采用AcclaimTM RSLC 120 C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,2.2μm),以乙腈-0.05%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.4 mL/min,检测波长327 nm,柱温30℃,进样量1μL,建立14批茵陈配方颗粒指纹图谱,并对指标成分进行含量测定。结果建立了茵陈配方颗粒的UPLC指纹图谱,确定了9个共有峰,指认出其中8个成分,分别为新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,4-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸和4,5-二咖啡酰奎宁酸,并进行了含量测定,各成分色谱峰分离较好,线性关系、重复性、稳定性、回收率均符合要求。结论本研究建立的UPLC指纹图谱及多成分含量测定方法简便、准确,重复性良好,可为茵陈配方颗粒的质量评价提供依据。     

大菟丝子及其清炒品中黄酮和有机酸类成分含量的比较

目的比较大菟丝子及其清炒品炮制前后7种成分的含有量。方法采用高效液相色谱法对大菟丝子及其清炒品中新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、芦丁、异槲皮苷和3,5-二咖啡酰奎宁酸进行定量分析。结果指标性成分在测定范围内与峰面积线性关系良好(r≧0.9997);绿原酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸在大菟丝子药材中的含量较高;大菟丝子清炒品中绿原酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸的含量明显下降,咖啡酸、芦丁和异槲皮苷的含量也有所降低,新绿原酸和隐绿原酸的含量明显升高。结论该方法准确、稳定、可靠、重复性好,可为其炮制前后质量控制与深入研究提供参考。其中黄酮类成分的首次确认,可为大菟丝子作为菟丝子代用品提供依据。     

防风色原酮类对照提取物在玉屏风颗粒含量测定中的应用

目的 通过以防风色原酮类对照提取物及升麻素苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷和亥茅酚苷4种单体对照品为对照的对比研究,建立以防风色原酮类对照提取物为对照的对于含防风药味的复方制剂玉屏风颗粒的质量控制方法,考察对照提取物在制剂质量研究中应用的可行性。方法 采用CAPCELL PAK C₁₈色谱柱(4.6 mm × 150 mm,5 μm),以甲醇(A)-体积分数0.3%磷酸水溶液(B)为流动相梯度洗脱,对玉屏风颗粒进行含量测定。结果 4种指标性成分在各自的检测质量浓度范围内具有良好的线性关系(r≥ 0.999 5),精密度、重复性、准确度相对标准偏差(RSD)值均小于3%且稳定性良好。结论 综上,防风色原酮类对照提取物可以替代单体对照品用于玉屏风颗粒含量测定,且操作简便、稳定可靠,为中药质量控制模式的转变提供新的思路与方法。     

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??OBJECTIVE To establish an UFLC-QTRAP-MS/MS method for simultaneous determination of 15 kinds of amino acids and 12 kinds of nucleosides and nucleobases in different parts of Metaplexis japonica(Thunb.) Makino processed by different methods. METHODS The analysis was carried out on a Waters XBridge Amide column(2.1 mm??100 mm,3.5 ??m) with elution by mobile phase of 0.2% formic acid in acetonitrile-0.2% formic acid in water at a flow rate of 0.6 mL??min^-1. The column temperature was maintained at 30 ??. The target compounds were analyzed by positive ion multiple reaction monitoring(MRM) mode. RESULTS Twenty-seven multiple constituents showed good linearity(r??0.997 3) in the ranges of the tested concentrations. The average recoveries of the 27 components were 98.17%-100.75% with relative standard deviations of 0.90%-2.49%. CONCLUSION The established method is accurate and precise, which provides a reliable solution for selecting the parts and the optimal processing method of Metaplexis japonica(Thunb.)Makino.     

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??OBJECTIVE To develop an UPLC method for simultaneous determination of seven components in Gardenia jasminoides, ie, gardoside, shanzhiside, deacetyl asperulosidic acid methyl ester, gardenoside (RG), genipin-1-??-D-gentiobioside, chlorogenic acid, and gardenoside to evaluate the quality of Gardenia jasminoides. METHODS ACQUITY UPLC HSS T3 column was used for the UPLC analysis. The mobile phase was acetonitrile-0.05% phosphoric acid solution. Gradient elution was conducted at a flow rate of 0.2 mL??min^-1. The column temperature was maitained at 30 ?? and detection wavelength was set at 238 nm. A linear model was obtained through principal component analysis (PCA), and the scores of the principal components were used to evaluate the quality of Gardenia jasminoides Alba decoction pieces comprehensively. RESULTS The seven components could be well separated from each other with good specificity, precision,repeatability,linearity,recovery rate and stability.The 25 Gardenia jasminoides Ellis samples and two Gardenia jasminoides Ellis var.grandiflora Nakai samples conformed to the quality requirements in the chapter of gardoside, shanzhiside, deacetyl asperulosidic acid methyl ester, gardenoside(RG), genipin-1-??-D-gentiobioside, chlorogenic acid, gardenoside. As the comprehensive evaluation shown, the quality of wild Gardenia jasminoides samples from Jiangxi province was better; Gardenia jasminoides from inland provinces excelled those from coastal provinces; and Gardenia jasminoides across Jiangxi province were of stable and higher quality. CONCLUSION The method established in this study can effectively assay geniposide, gardoside, shanzhiside, deacetyl asperulosidic acid methyl ester, gardenoside and genipin gentiobioside in Gardenia jasminoides, thus it can be used for the quality control of Gardenia jasminoides.     

溶菌酶纯度测定方法的建立

目的 建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定溶菌酶的纯度。方法 使用Agilent ZORBAX 300SB C₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以三氟乙酸-水-乙腈(2∶700∶300)为流动相A,以三氟乙酸-水-乙腈(2∶200∶800)为流动相B,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为280 nm,进样量为20 μL。并采用QE Plus质谱仪对其中单个最大杂质进行了相对分子质量测定。结果 建立的PR HPLC方法能够有效分离溶菌酶中主要杂质,主峰与各杂质峰均能较好分离,方法专属性强、溶菌酶在0.004～0.5 mg·mL^-1的内线性良好(r=1.000 0);定量限为0.08 μg,检出限为0.04 μg;精密度、重复性、20 h样品稳定性实验的相对标准偏差(RSD)值均小于0.5%;11批样品纯度测定结果为89%～94%;各样品中单个最大杂质峰中所含物质是相对分子质量不等的混合物。结论 建立的RP-HPLC方法可以用于溶菌酶纯度的检测。     

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??OBJECTIVE To develop a suitable HPLC method combined with component preparation to analyze the related substances and effective contents in bacitracin.METHODS The separation was performed on Agilent HPLC system with a Diamonsil Plus C₁₈ column (4.6 mm??250 mm, 5 ??m) using 50 mmol??L^-1 ammonium formate (pH adjusted to 4.0 with formic acid) as mobile phase A and acetonitrile as mobile phase B at a flow rate of 1 mL??min^-1 under gradient elution. The detection wavelength was set at 254 nm. The HPLC method was carried out by adjusting the pH of ammonium formate solution, the ratio of mobile phase and the solvent. Furthermore, the specificity, linearity, precision, repeatability, stability and durability were studied. The known components like bacitracin A, B1/B2/B3, C1/C2/C3 and F were collected by preparative HPLC according to the HPLC method for bacitracin in USP 40. They were positioned in ammonium formate-acetonitrile HPLC system.RESULTS The established HPLC method was verified to be suitable for analyzing the related substances and effective contents in bacitracin. Baseline separation between the known components and adjacent impurities was achieved, especially the B1/B2. The elution positions of the known component were clearly defined. The contents of the known components in different batches of bacitracin were compared. More detailed sample information was provided in this research.CONCLUSION The HPLC method can simultaneously analyze the related substances and effective contents in bacitracin, and is suitable for the quality control of the product.     

当归建中汤物质基准特征图谱和多指标成分测定研究

目的 建立15批当归建中汤特征图谱及多指标成分含量测定方法,为当归建中汤经典名方的质量控制评价提供参考。方法 色谱柱为Waters Symmetry C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以乙腈(B)-0.1%磷酸溶液(A)为流动相,梯度洗脱;流速:1 mL·min^-1;检测波长为230 nm;柱温35 ℃;进样量为5 μL,建立15批当归建中汤物质基准特征图谱,并使用HPLC测定5种指标成分含量。结果 对15批当归建中汤物质基准进行研究,其特征图谱相似度处于0.886~0.996之间,标定了15个共有峰,指认出芍药内酯苷、芍药苷、阿魏酸、甘草苷、肉桂酸、甘草酸6个色谱峰。经方法学考察,5种成分在一定浓度范围内呈良好的线性关系;精密度、稳定性、重复性均符合要求;阿魏酸、肉桂酸、甘草苷、甘草酸、芍药苷的平均加样回收率分别为99.74%、100.28%、100.56%、98.44%、102.25%。以含量测定均值上下浮动30%规定出各指标成分的含量范围,均未出现离散数据(平均值的70%～130%以外)。结论 建立的经典名方当归建中汤特征图谱及5个成分的含量测定方法简便、稳定、准确可靠,可用于当归建中汤物质基准的质量控制。     

狼毒大戟化学成分及其生物活性研究

目的 研究狼毒大戟(Euphorbia fischeriana Steud)根部的抗肿瘤化学成分。方法 运用硅胶柱、ODS、Sephadex LH-20柱色谱以及制备HPLC等多种方法对狼毒大戟根部的体积分数95%乙醇提取物进行分离纯化,并利用HR-ESI-MS、NMR等波谱技术对分离得到的化合物进行结构鉴定。运用CCK-8检测法测定分离得到的化合物对人肝癌细胞Hep-G2、人乳腺癌细胞MCF-7和人肺癌细胞A549的细胞毒活性。结果 从狼毒大戟中共分离得到12个化合物,分别鉴定为7-oxocallitrisic acid(1)、ent-12-hydroxy-12[R]-abieta-8(14),13(15)-dien-16,12-olide(2)、13β-hydroxy-7-oxoabiet-8(14)-en-19,6β-olide(3)、decandrol A(4)、daphneaine B(5)、二氢红花菜豆酸(6)、phenethyl-6-O-α-L-arabinofuranosyl-β-D-glucoside(7)、2-(4-hydroxyphenyl)ethyl-O-α-L-arabinofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside(8)、γ-pyrone-2-O-β-D-(6-galloyl)-glucopyranoside(9)、6-hydroxy-2-methoxy-4-O-α-L-arabinofurano-syl(1→6)-β-D-glucopyranoside(10)、(2,3-trans,4E)-2,3-methano-4-decen-1-ol)(11)和3, 4′-O-dimethylellagic acid(12)。结论 化合物1,4,5,7～9和11为首次从大戟属植物中分离得到,化合物1,2,4～9,11和12为首次从狼毒大戟中分离得到。化合物2对人肝癌细胞Hep-G2表现出较好的细胞毒活性,其半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC₅₀)值为32.81 μmol·L^-1,提示该类二萜化合物可能与狼毒大戟的抗肿瘤活性相关。     

延边产朝药材肾炎草的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立朝药材肾炎草的HPLC-UV指纹图谱。方法 采用SunFire^TM C₁₈ (4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱;以乙腈(B)-0.4%冰醋酸溶液(A)梯度洗脱,检测波长253 nm,柱温40 ℃,进样量10 μL,流速1.0 mL · min^-1,采用对照品指认进行成分分析。结果 建立了朝药材肾炎草的HPLC-UV特征指纹图谱共有模式,标定了21个共有峰,指认了其中3个黄酮碳苷成分。10批次药材的相似度结果均大于0.95,相似程度高。结论 该方法简便,精密度、重复性和稳定性很好,特征性和专属性强,可为肾炎草药材整体质量控制提供有效手段。     

长叶纽子果根化学成分的研究

目的 研究长叶纽子果根(Ardisia virens Kurz var. annamensis Pitard.)的化学成分。方法 长叶纽子果根体积分数70%乙醇提取物采用硅胶柱、Sephadex LH-20、ODS、制备液相进行分离纯化,根据波谱信息鉴定所得化合物的结构。结果 在长叶纽子果根中分离得到10个化合物,分别鉴定为11-O-咖啡酸岩白菜素(1)、11-O-(3',4'-二甲基没食子酰基)岩白菜素(2)、11-O-乙酰岩白菜素(3)、岩白菜素-11-O-α-D-半乳吡喃糖苷(4)、百两金皂苷B(5)、朱砂根皂苷D(6)、朱砂根皂苷G(7)、(+)-丁香树脂酚(8)、丁香酸(9)、十八碳癸二烯酸-2,3-二羟丙基酯(10)。结论 化合物1~10为首次从该植物中分离得到。     

超高效液相色谱串联质谱法测定缬沙坦制剂中的2个亚硝胺类遗传毒性杂质

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法,同时测定缬沙坦胶囊和分散片中N-亚硝基二甲胺(NDMA)和N-亚硝基二乙胺(NDEA)2个亚硝胺类遗传毒性杂质的残留量。方法 采用安捷伦Zorbax Eclipse Plus C₁₈色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.8 μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1。质谱采用大气压化学电离(APCI)离子源,多反应监测(MRM)正离子检测模式进行定量分析。结果 NDMA和NDEA线性范围、灵敏度、精密度、准确度、专属性均满足分析要求。经检验,102批缬沙坦胶囊和52批缬沙坦分散片中,NDMA和NDEA含量均不超过定量限浓度,均符合规定。结论 本方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、专属性好,适用于缬沙坦胶囊和分散片中NDMA和NDEA的限度检查和定量检测。