UPLC-MS/MS测定人血浆中吗啡、羟考酮、哌替啶和芬太尼的浓度研究

目的 建立同时测定人血浆中吗啡、羟考酮、哌替啶及芬太尼4种治疗药物浓度的方法,并用于治疗药物的监测。方法 血浆样本经乙腈沉淀蛋白后,以氘代吗啡作为内标,应用超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定药物浓度。以Agilent Eclipse XDB-C18柱(2.1 mm ×50.0 mm, 1.7 μm)为色谱柱,甲醇-水(2.0 mmol·L^-1醋酸铵)为流动相等度洗脱,流速为0.3 mL·min^-1,电喷雾离子源,应用多重反应监测模式进行正离子扫描分析。结果 吗啡、羟考酮、哌替啶及芬太尼的血药浓度在50.0～10 000.0 ng·mL^-1内线性关系良好,日内及日间精密度均小于15.0%,提取回收率及基质效应均在85.0%～115.0%内,稳定性等符合要求。结论 该方法灵敏、快速、专属性强,可以用于吗啡、羟考酮、哌替啶及芬太尼治疗药物浓度监测及药动学等方面的研究。     

UPLC-MS/MS测定大鼠血浆中奥拉帕利的浓度及其药动学研究

目的 建立一种具有高灵敏度和高选择性测定大鼠血浆中奥拉帕利药物浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法,并研究奥拉帕利在大鼠体内的药动学特征。方法 大鼠血浆样品采用乙腈沉淀法去除蛋白,色谱柱为Acquity UPLC BEH C₁₈柱 (2.1 mm×50 mm,1.7 μm),流动相为0.1%甲酸水溶液-乙腈,梯度洗脱。质谱采用电喷雾离子源,多反应监测正离子模式,奥拉帕利定量离子对为m/z 435.19→m/z 367.1。以50 mg·kg^-1奥拉帕利经大鼠灌胃给药后于不同时间点采集血样,利用建立的方法进行检测分析,并用DAS2.0软件计算药动学参数。结果 血浆中奥拉帕利在(0.6~1 821) ng·mL^-1内线性关系良好,定量限为0.15 ng·mL^-1,日内、日间精密度RSD均小于5.5%,准确度在95.4%~99.2%内,平均提取回收率为84.2%~96.0%,基质效应在91.4%~108.8%内。结论 建立的方法灵敏度高、结果准确,可用于大鼠血浆中奥拉帕利质量浓度的测定及其药动学研究。     

左卡尼汀注射液中三甲胺分离提取及其离子色谱测定法研究

目的 建立分离提取左卡尼汀注射液中三甲胺含量的方法,及采用离子色谱法对三甲胺进行检测研究。方法 以L₉(3⁴)正交试验优化提取条件,采用0.25 mol·L^-1NaOH溶液创造碱性环境,40 ℃加热20 min,连接N₂流量为0.4 L·min^-1,用0.1 mol·L^-1甲磺酸溶液吸收气体,有效实现左卡尼汀注射液中三甲胺的分离提取;采用DionexIonPac^TM CS12A(4.0 mm×250 mm)色谱柱,DionexIonPac^TM CG12A(4.0 mm×50 mm)保护柱,以17 mmol·L^-1甲磺酸溶液为淋洗液,流速0.5 mL·min^-1,柱温30 ℃,电导检测。结果 三甲胺在0.30~48.64 μg·mL^-1内线性关系良好,相关系数为0.999 3,检出限为0.012 μg·mL^-1(S/N=3),定量限为0.3 μg·mL^-1(S/N=10),精密度良好,溶液置于室温24 h或2~8 ℃48 h内稳定。平均加样回收率在97.33~100.82%内,相对标准偏差(RSD)为1.07%(n=9)。结论 该方法能够有效提取分离左卡尼汀注射液中的三甲胺,离子色谱检测方法灵敏度高,回收率和重现性良好。     

腹膜透析相关腹膜炎患者万古霉素腹腔内药物浓度与血药浓度的相关性研究

目的 建立腹膜透析液中万古霉素浓度测定的液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)检测方法,考察腹膜透析相关性腹膜炎(PDAP)患者腹膜透析液(以下简称腹透液)和血清万古霉素浓度的相关性,以期为临床PDAP患者万古霉素腹腔给药和浓度监测提供参考。方法 采集我院18例PDAP患者万古霉素腹腔给药后(1 g,q4d~q6d)的腹透液样本,利用经方法学验证的LC-MS/MS方法测定腹透液万古霉素浓度,并通过Pearson相关性分析法进一步评价腹透液中药物浓度和血药浓度的关系。结果 建立的腹透液万古霉素LC-MS/MS测定方法在 0.1~16 μg·mL^-1内线性关系良好,专属性、准确度、精密度等均符合要求。PDAP患者腹腔给与万古霉素后24、48、72、96和120 h的质量浓度分别为(5.99±3.33)、(4.08±2.13)、(3.40±1.23),(2.58±1.56)和(2.05±1.15)μg·mL^-1;各时间点腹透液中药物浓度与血药浓度呈显著正相关关系。结论 建立的LC-MS/MS方法适用于临床腹透液样本的万古霉素检测,万古霉素血药浓度能够在一定程度上反映腹透液中药物浓度并指导临床合理用药。     

高效液相色谱-质谱联用技术测定儿童血浆中厄他培南的浓度并考察溶血效应

目的 建立基于高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS/MS)测定儿童血浆中厄他培南浓度的方法并考察溶血效应。方法 样品经沉淀蛋白法进行前处理,以美罗培南为内标,采用Hypersil GOLD^TM柱(2.1 mm×50 mm,3 μm)分离;以0.1%甲酸-水和0.1%甲酸-乙腈为流动相,梯度洗脱;质谱检测采用电喷雾离子源正离子扫描方式,多反应监测(MRM)模式;模拟不同程度(0.5%、2%、5%)的溶血样品进行溶血效应考察。结果 厄他培南的血药浓度在0.1～50 μg·mL^-1内呈良好的线性关系(r＞0.998 0),方法学验证均符合要求,溶血效应符合标准。结论 本方法快速、准确、灵敏、稳定、专属性强,且不受溶血程度为5%以下的溶血效应影响,可应用于厄他培南儿童药动学研究及治疗药物监测。     

溶菌酶纯度测定方法的建立

目的 建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定溶菌酶的纯度。方法 使用Agilent ZORBAX 300SB C₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm);以三氟乙酸-水-乙腈(2∶700∶300)为流动相A,以三氟乙酸-水-乙腈(2∶200∶800)为流动相B,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1,检测波长为280 nm,进样量为20 μL。并采用QE Plus质谱仪对其中单个最大杂质进行了相对分子质量测定。结果 建立的PR HPLC方法能够有效分离溶菌酶中主要杂质,主峰与各杂质峰均能较好分离,方法专属性强、溶菌酶在0.004～0.5 mg·mL^-1的内线性良好(r=1.000 0);定量限为0.08 μg,检出限为0.04 μg;精密度、重复性、20 h样品稳定性实验的相对标准偏差(RSD)值均小于0.5%;11批样品纯度测定结果为89%～94%;各样品中单个最大杂质峰中所含物质是相对分子质量不等的混合物。结论 建立的RP-HPLC方法可以用于溶菌酶纯度的检测。     

HPLC法同时测定人血浆中利奈唑胺及其代谢物PNU-142300和PNU-142586的血药浓度

目的 建立高效液相色谱法同时测定人血浆中利奈唑胺及其主要代谢物PNU-142300和PNU-142586浓度,用于危重症患者血药浓度监测。方法 以氯霉素为内标,酸化乙腈(含体积分数0.1%甲酸)为蛋白沉淀剂,双溶剂流动相为A乙腈、B枸橼酸(0.1 mol·L^-1)-磷酸氢二钠(0.2 mol·L^-1)缓冲溶液(pH 3.0),色谱柱为Diamonsil C₁₈柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),流速0.5 mL·min^-1,梯度洗脱,检测波长254 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果 利奈唑胺在0.5～40μg·mL^-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 9),定量下限为0.5μg·mL^-1,检测限为0.1μg·mL^-1;PNU-142300和PNU-142586在0.5～20μg·mL^-1的浓度范围内线性关系良好(r=0.999 8和r=0.999 6),定量下限为0.5μg·mL^-...     

延边产朝药材肾炎草的高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立朝药材肾炎草的HPLC-UV指纹图谱。方法 采用SunFire^TM C₁₈ (4.6 mm×250 mm, 5 μm)色谱柱;以乙腈(B)-0.4%冰醋酸溶液(A)梯度洗脱,检测波长253 nm,柱温40 ℃,进样量10 μL,流速1.0 mL · min^-1,采用对照品指认进行成分分析。结果 建立了朝药材肾炎草的HPLC-UV特征指纹图谱共有模式,标定了21个共有峰,指认了其中3个黄酮碳苷成分。10批次药材的相似度结果均大于0.95,相似程度高。结论 该方法简便,精密度、重复性和稳定性很好,特征性和专属性强,可为肾炎草药材整体质量控制提供有效手段。     

超高效液相色谱-电化学检测法测定女贞子中的3种成分

目的 建立超高效液相色谱-电化学检测法同时测定女贞子中羟基酪醇、红景天苷和酪醇3种成分的方法。方法 取女贞子药材粉末0.1 g经20 mL甲醇超声提取30 min,提取液再经0.22 μm滤膜过滤后上样进行色谱分离。以 ACQUITY UPLC HSS T3 柱(2.1 mm×100 mm,1.8 μm)为固定相,25 mmol·L^-1乙酸铵溶液(pH 3.6)-甲醇=88∶12(V/V)为流动相。电化学检测器检测,库伦检测池第一通道电压为350 mV,第二通道为550 mV。结果 羟基酪醇、红景天苷和酪醇的质量浓度在0.1~10、1~50和0.1~8 mg·L^-1内与其峰面积呈线性关系(r²>0.999 0),平均加标回收率分别为101.52%、102.15%和101.92%,相对标准偏差分别为3.64%、3.87%和4.54%。结论 使用超高效液相色谱-电化学检测法测定3种成分不仅灵敏度高,而且分析时间大大缩短,适合于女贞子中3种苯乙醇类化合物的测定。     

钩藤多指标含量测定及化学计量学分析

目的 建立同时测定钩藤中绿原酸、异钩藤碱、钩藤碱、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱、喜果苷含量的方法,基于化学计量学分析,评价钩藤的质量。方法 采用高效液相色谱(HPLC),KinetexC₁₈色谱柱(4.6 mm×100 mm,2.6 μm),以乙腈(A)-0.1%磷酸水(含0.5 g·L^-11-丁基-3-甲基咪唑氯盐)(B)为流动相,梯度洗脱,流速:0.8 mL·min^-1;检测波长327 nm(绿原酸)、246 nm(异钩藤碱、钩藤碱、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱和喜果苷);柱温:35 ℃;进样量:10 μL。结果 绿原酸、异钩藤碱、钩藤碱、去氢毛钩藤碱、毛钩藤碱和喜果苷分离良好,平均回收率分别为99.74%、103.25%、98.35%、99.45%、104.16%、97.98%。11批钩藤上述成分的含量测定结果分别为0.128 7～0.432 0、0.007 1～0.022 1、0.008 1～0.023 7、0.009 8～0.047 1、0.005 7～0.022 8、0.008 9～0.034 9 mg·g^-1。化学计量学分析表明不同产地的钩藤质量存在一定差异。结论 建立的钩藤多指标含量测定方法简单、准确,可为钩藤药材质量综合评价提供新的参考方法。     

拉考沙胺在癫痫患儿中的临床疗效和血药浓度研究

目的 研究癫痫患儿使用拉考沙胺(lacosamide,LCM)的临床疗效、血药浓度和安全性,为临床合理用药提供参考.方法 采用超高效液相色谱法测定148例口服LCM的癫痫患儿的稳态血清谷浓度,观察其临床疗效和不良反应,并运用Logistic回归和受试者操作特征曲线分析癫痫患儿血药浓度与临床疗效的相关性.结果 LCM治疗...     

超高效液相色谱串联质谱法测定缬沙坦制剂中的2个亚硝胺类遗传毒性杂质

目的 建立超高效液相色谱串联质谱法,同时测定缬沙坦胶囊和分散片中N-亚硝基二甲胺(NDMA)和N-亚硝基二乙胺(NDEA)2个亚硝胺类遗传毒性杂质的残留量。方法 采用安捷伦Zorbax Eclipse Plus C₁₈色谱柱(3.0 mm×150 mm,1.8 μm),以0.1%甲酸水溶液为流动相A,甲醇为流动相B,进行梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1。质谱采用大气压化学电离(APCI)离子源,多反应监测(MRM)正离子检测模式进行定量分析。结果 NDMA和NDEA线性范围、灵敏度、精密度、准确度、专属性均满足分析要求。经检验,102批缬沙坦胶囊和52批缬沙坦分散片中,NDMA和NDEA含量均不超过定量限浓度,均符合规定。结论 本方法操作简便、快速、准确、灵敏度高、专属性好,适用于缬沙坦胶囊和分散片中NDMA和NDEA的限度检查和定量检测。     

闹羊花素Ⅲ体外经皮渗透特性研究

目的 研究闹羊花素Ⅲ(rhodojaponin Ⅲ,RJ-Ⅲ)的体外经皮渗透特性。方法 利用摇瓶法、皮肤孵育法、Franz扩散池法和胶带剥离法,分别考察RJ-Ⅲ的油水分配系数、RJ-Ⅲ在皮肤中的稳定性、体外经皮渗透参数和不同层次离体皮肤中的储留量。结果 RJ-Ⅲ的油水分配系数为(0.98±0.02);RJ-Ⅲ在皮肤匀浆液中孵化24 h,RSD值为3.98%;离体透皮实验表明在小鼠皮肤、大鼠的活性表皮与皮肤上,RJ-Ⅲ的稳态透皮速率分别是(5.05±0.28) (3.62±0.30)(1.04±0.10) μg·cm^-2·h^-1,经皮渗透系数分别为7.3×10^-3、5.2×10^-3、1.4×10^-3 cm·h^-1;皮肤储留实验表明,与角质层和活性表皮相比,RJ-Ⅲ更多的存在于接收室。结论 RJ-Ⅲ具有良好的经皮稳定性和适宜的经皮渗透特性,为RJ-Ⅲ经皮给药制剂的开发提供理论基础和实验依据。     

替考拉宁治疗药物监测横断面调查对比研究

目的 探讨开展替考拉宁治疗药物监测(therapeutic drug monitoring,TDM)的必要性以及中日友好医院在该方面两次调查结果对比,探索临床合理使用替考拉宁的进展情况。方法 采用横断面调查的方法,收集2020年1月1日至2020年12月31日间中日友好医院73例接受替考拉宁治疗药物监测的住院患者的临床资料,对111例次血药浓度监测数据进行统计分析,并与2018年调查结果进行对比研究。结果 替考拉宁血药谷浓度中位数为17.31(12.04,29.59)mg·L^-1(2020年)vs (7.77±4.31) mg·L^-1(2018年);血药谷浓度＞10 mg·L^-1的89例(80.18%)(2020年)vs 11例(27.50%)(2018年);血药谷浓度＞20 mg·L^-1的46例(41.44%)(2020年)vs 1例(2.50%)(2018年);95.71%(2020年)vs 53.01%(2018年)的患者给予了负荷剂量(P＜0.000 1),采用方案最多的是600 mg q12 h(57.14%)(2020年)vs 400 mg q12 h(63.92%)(2018年),维持剂量采用最多的是600 mg qd(28.77%)(2020年)vs 400 mg qd(32.24%)(2018年);2020年血药谷浓度在正常范围(10~20 mg·L^-1)内的患者在使用替考拉宁后,平均白细胞计数、中性粒细胞百分比及降钙素原(procalcitonin,PCT)水平较使用前显著下降;总体治疗有效率93.15%(2020年)vs 50.82%(2018年)显著改善(P＜0.000 1)。结论 与2018年调查对比研究可得,替考拉宁平均用药剂量大幅增加,更接近于欧美国家的剂量,血药浓度监测例数大幅增长,谷浓度阈值达标率大大提升,更佳的平均血药谷浓度使得临床疗效得以提升。     

聚(2-乙基-2-噁唑啉)-胆固醇碳酸甲酯修饰的多西紫杉醇pH-敏感胶束的构建与性质考察

目的 利用聚(2-乙基-2-噁唑啉)-胆固醇碳酸甲酯[poly(2-ethyl-2-oxazoline)-cholesteryl methyl carbonate,PEOz-CHMC,简称PC]构建多西紫杉醇(docetaxel,DOC)纳米胶束,并对其进行性质考察。方法 利用芘荧光探针法测定PC的临界胶束浓度。利用薄膜分散法制备DOC-PC胶束(DOC-PC micelles,DOC-M),对DOC-M的粒径、形态、包封率等进行表征。采用透析法考察DOC-M的药物释放,并模拟肿瘤微环境考察DOC-M的稳定性和pH敏感性。通过MTT法评价DOC-M对体外HeLa细胞的抑制作用。利用流式细胞仪定量观察胶束对HeLa细胞的摄取情况。结果 PC的临界胶束质量浓度为9.26 μg·mL^-1(4.63×10^-6mol·L^-1)。DOC-M的粒径小于130 nm,外观呈类球形,分布均匀,Zeta电位为(-7.32±0.98)mV。X-射线粉末衍射(XRD)和红外光谱(IR)结果表明,DOC被成功包封于胶束中,DOC-M的包封率为(80.55±2.44)%。体外药物释放和胎牛血清稳定性结果实验表明,DOC-M的pH敏感性和稳定性良好。细胞抑制实验结果表明,在微酸条件下DOC-M的细胞抑制作用更强。细胞摄取实验分析,DOC-M具有较低的毒性,显著地促进药物的细胞摄取。结论 DOC-M表现出良好的稳定性和pH敏感性,以及较低毒性和较好的载药能力,有望成为药物递送的良好载体。